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細菌、細胞藥敏檢驗方法及藥敏檢驗裝置的制作方法

文檔序號:572454閱讀:688來源:國知局
專利名稱:細菌、細胞藥敏檢驗方法及藥敏檢驗裝置的制作方法
技術領域
本發明涉及一種細菌、細胞藥敏檢驗方法及藥敏檢驗裝置。
背景技術
藥敏檢驗是對細菌或細胞耐藥性進行檢測的重要試驗。現有的藥敏檢驗方法,其 用的培養基一般分為液體培養基和固體培養基兩種,其檢驗方法一般有紙片檢驗法和濃度 檢驗法,紙片檢驗法采用的是固體培養基,濃度檢驗法采用的是液體培養基。紙片檢驗法是 通過觀察由于貼在固體培養基表面上藥物紙片形成的藥物抑菌圈來確定結核桿菌對藥物 的敏感性;濃度檢驗法是通過觀察檢測不同藥物和不同藥物濃度試驗容器中細菌或細胞的 生長情況來確定細菌或細胞對藥物的敏感性。不管是紙片檢驗法還是濃度檢驗法,其整個 藥敏檢驗過程一般可分為濃集細菌或細胞、增殖或分離培養和藥敏檢驗三個階段。例如利 用現有的技術對結核桿菌進行藥敏試驗,一般有紙片檢驗法和濃度檢驗法,其整個檢驗過 程一般都可以分為濃集結核桿菌、增殖或分離培養和藥敏檢驗三個階段。現有的紙片檢驗 法,濃集結核桿菌階段的步驟為①用吸管吸取患者提供的標本置于試驗容器中;②向試 驗容器中加入消化液,對標本粘液進行消化,使標本中粘液和雜質中包裹的細菌充分暴露; ③離心分離,倒掉上清液,獲得結核桿菌標本。在獲得結核桿菌標本后再進行增殖或分離培 養培養。增殖或分離培養培養階段的步驟為④取已經濃集的結核桿菌標本少部分制成濃 菌液;⑤將濃菌液接種于固體培養基例如羅氏培養基上進行增殖或分離培養培養,一般需 在37°C培養箱中培養1月左右,把單個細菌培養成細菌菌落;在獲得細菌菌落后再進入藥 敏檢驗階段。藥敏檢驗階段的步驟為⑥取少量的細菌菌落,一般是取1——3個細菌菌落, 將其溶解分散成濃菌液;⑦將濃菌液接種于固體培養基例如瓊脂培養基表面上;⑧在固體 培養基表面上貼上藥物紙片;⑨放入37°C培養箱中培養1個月左右,觀察藥物抑菌圈,確定 結核桿菌對藥物的敏感性。現有的紙片檢驗法的優點是操作方便、設備簡單,投資小;但其 存在以下缺點(1)整個檢驗所需的時間太長。增殖或分離培養培養階段需要1個月左右, 藥敏檢驗階段大約需要1個月左右,整個檢驗過程大約需要2個月左右。如果在藥敏檢驗 得到結果后再使用藥物治療,就會嚴重影響治療時機。而臨床上在沒有藥敏檢驗的情況下 使用藥物治療往往會造結核桿菌耐藥的嚴重后果。(2)不安全。整個檢驗需要兩次人工接 種,由于結核桿菌具有傳染性,這樣對操作人員形成安全隱患,對環境形成污染隱患。現有的濃度檢驗法,有兩種方法,一種濃度檢驗法是在增殖培養階段采用固體培 養基,其濃集結核桿菌和增殖或分離培養培養二個階段的步驟與現有的紙片檢驗法相同, 但藥敏檢驗階段的步驟與現有的紙片檢驗法不同,具體為從固體培養基上取增殖或分離 培養培養獲得的細菌菌落,一般是取1或數個細菌菌落,一一將其溶解分散成菌懸液一一 將菌懸液倒入按不同的藥物和不同的濃度配制成的多個試驗容器中,制成對比試驗標本 ――觀察檢測試驗容器中細菌生長情況,確定結核桿菌對藥物的敏感性。這種檢驗方法的 優點是設備簡單,投資小;但其存在以下缺點(1)所需的時間長。增殖或分離培養培養階 段的方法和步驟與現有的紙片檢驗法的方法和步驟相同,因此,僅增殖或分離培養培養階段所需的時間就需要1個月左右;(2)操作麻煩、不安全且容易造成錯誤的檢驗結果。由于 需要配制多個試驗容器,配制過程很麻煩且不安全,對操作人員形成安全隱患,對環境形成 污染隱患;在配制多個試驗容器過程中比較容易被其他細菌污染,這樣就可能造成錯誤的 檢驗結果。另一種濃度檢驗法是在增殖或分離培養培養階段采用液體培養基。這種檢驗方 法一般采用專用儀器檢驗,例如BD公司推出的BACTEC 9000MB及BACTEC MGIT 960全自 動快速分枝桿菌培養鑒定藥敏系統,其優點是操作簡單,檢驗過程時間短,平均檢出時間為 14.4天,最快10天左右。但其存在的主要缺點是儀器設備的價位高,投資大;使用成本高, 一是儀器設備的使用成本高,二是需要多個對比試驗標本,試劑的成本較高,其費用較大, 一般醫院難以承受,難以推廣普及。對體外細胞進行藥敏試驗的方法較多,常用的方法有MTT比色法、放射線同位素 摻入法等,但其都存在操作麻煩、容易造成錯誤的檢驗結果等缺點。原因是需要配制不同藥 物和不同濃度的多個試驗容器,并且要向每個試驗容器中加細胞懸液,配制和加細胞懸液 的過程很麻煩,在配制多個試驗容器過程中比較容易被污染,這樣就可能造成錯誤的檢驗結果。從上面詳細分析結核桿菌藥敏檢驗中可以看出,現有的細菌、細胞藥敏檢驗方法 尤其是結核桿菌檢驗方法存在以下缺點(1)整個檢驗過程所需的時間長。(2)操作麻煩。 (3)不安全。(4)容易出現誤檢。(5)投資大,難以推廣普及。

發明內容
本發明的目的是提供一種檢驗過程時間短的細菌、細胞藥敏檢驗方法及藥敏檢驗 裝置;另一個目的是投資少、使用成本低;再一個目的是使用安全方便。為實現上述目的,本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法,包括(1)從患者提供的標本中濃集待檢細菌標本或細胞標本;(2)向待檢細菌標本或細胞標本中加入培養液,制作成液態檢驗標本,所述的培養 液包括有營養物質、膠體原料;(3)液態檢驗標本中加入可與膠體原料反應形成凝膠狀的助凝劑,制成凝膠檢驗 標本;(4)在凝膠檢驗標本的表面上貼藥物紙片;(5)將其放入培養箱中培養;(6)觀測藥物抑菌圈,確定對藥物的敏感性。上述細菌、細胞藥敏檢驗方法,所述培養液包括有細菌細胞生長指示劑。上述細菌、細胞藥敏檢驗方法,將液態檢驗標本放入培養箱中增殖培養2-4天。上述細菌、細胞藥敏檢驗方法,所述培養液中包括有抑菌劑。上述細菌、細胞藥敏檢驗方法,所述培養液中的營養物質、膠體原料之間的配比 為每100ml營養物質中加膠體原料0. 8g—2g ;每100ml營養物質配助凝劑0. lg—0. 2g。上述細菌、細胞藥敏檢驗方法,所述培養液中的營養物質、膠體原料、細菌細胞生 長指示劑之間的配比為每100ml營養物質中加膠體原料0. 8g—2g ;加細菌細胞生長指示 劑2mg-—20mg ;每100ml營養物質配助凝劑0. lg0. 2g。上述細菌、細胞藥敏檢驗方法,所述培養液中的營養物質、膠體原料、細菌細胞生
5長指示劑、抑菌劑之間的配比為每100ml營養物質中加膠體原料0. 8g—2g ;加細菌細胞 生長指示劑2mg—20mg ;加抑菌劑適量;每100ml營養物質配助凝劑0. lg—0. 2g。上述細菌、細胞藥敏檢驗方法,其培養液按一次使用的數量分裝并密封保存。上述細菌、細胞藥敏檢驗方法的藥敏檢驗裝置,包括有周壁和底部封閉、上端敞開 結構形式的盒體,在盒體內腔中放置有助凝劑。上述藥敏檢驗裝置,在盒體內腔的底部設有助凝層,助凝層由緩釋體和附著在緩 釋體中的助凝劑組成。述的藥敏檢驗裝置,在盒體內腔的底部設有助凝層,助凝層為由粘合劑與助凝劑 混合后涂在盒體底部的結構形式。上述藥敏檢驗裝置,在盒體的底部設有標尺。上述藥敏檢驗裝置,在盒體的敞開端設有與其配套的盒蓋。本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法,其培養液中的營養物質包括有營養組份和緩沖 劑,作用是為細菌或細胞生長提供營養和控制培養液的PH值。對不同的細菌或細胞,可以 選用不同的營養物質配方。例如,結核桿菌可以選用7H9配方,普通細菌或真菌可以選用 營養肉湯配方,腫瘤細胞可以選用細胞培養基配方。培養液中的膠體原料的作用是在培 養液中加入助凝劑前,膠體原料溶解在其中,使培養液呈液態,在培養液中加入助凝劑后, 膠體原料與助凝劑反應,使培養液在一定時間內形成穩定的凝膠,可以選用0. 5-1. 5%海 藻酸鈉或者0. 5-2. 0%果膠、0. 5-1. 5%卡拉膠等。培養液中的細菌細胞生長指示劑的作 用是細菌或細胞在生長繁殖過程中會分解MTT形成藍色點狀色團,從而在短時間內每一 個細菌或細胞形成一個藍色的肉眼可見的顆粒狀點,可以根據肉眼或低倍顯微鏡準確觀 察點的性質和數量來確定細胞或細菌的生長狀況,可以選用3- (4,5- 二甲基噻唑-2) -2, 5-二苯基四氮唑溴鹽(其商品名為噻唑藍,英文名3- (4, 5-Dimethylthiazol-2-yl) -2, 5-diphenyltetrazolium bromide)。在培養液中加抑菌劑主要用于結核分枝桿菌藥敏試 驗,其作用是抑制抗酸桿菌以外的其它雜菌生長。本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法使用的助凝劑,其作用是助凝劑與培養液中的膠 體原料反應,使培養液在一定時間內形成穩定的凝膠。可以選用鈣離子或鎂離子,硼砂,枸 櫞酸鉀等。由于本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法,其藥敏檢驗裝置包括有周壁和底部封閉、上 端敞開結構形式的盒體,在盒體中放置有助凝劑,在培養液中加入有膠體原料,液態檢驗標 本是利用培養液制成的,因此,在液態檢驗標本中有膠體原料,液態檢驗標本在倒入藥敏檢 驗裝置內以前是呈液態的,在倒入藥敏檢驗裝置后,檢驗標本中的膠體原料與藥敏檢驗裝 置中的助凝劑反應,可以在常溫下快速形成穩定的凝膠狀,形成凝膠檢驗標本,這樣,藥物 紙片可以貼在凝膠檢驗標本的表面上,因此,可以用藥物紙片檢驗細菌或細胞對藥物的敏 感性。本發明與現有的細菌、細胞藥敏檢驗方法相比,整個檢驗過程時間短的原因是① 充分利用了患者提供的標本中的待檢細菌或細胞。患者提供的標本中的細菌或細胞絕大部 分被濃集用于制作檢驗標本,而檢驗標本又全部被用于做藥敏試驗,因此,患者提供的標本 中的待檢細菌或細胞得到了充分的利用。②可以省略掉增殖或分離培養培養階段或減少 增殖或分離培養培養時間。對一般的細菌或細胞進行藥敏檢驗,同時做6個藥物紙片試驗就能滿足要求,因此,藥敏檢驗裝置內腔的面積可以設計為同時做6個藥物紙片的藥敏試 驗。由于藥敏檢驗是對細菌或細胞的耐藥性進行檢測,在進行藥敏檢驗以前,對患者都進行 了確定診斷。對已經確診的一般患者而言,由于本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法充分利用了 其提供的標本中的細菌或細胞,這樣在進行藥敏試驗時,藥敏檢驗裝置內腔中單位面積的 細菌或細胞數量較大,足以滿足藥敏試驗對細菌或細胞的數量要求,不再需要通過增殖培 養增加細菌或細胞數量。對在確定診斷時確認患者提供的標本含待檢細菌量較少,則應該 將制作成的液態檢驗標本置于培養箱中進行增殖培養,之后再將液態檢驗標本倒入藥敏檢 驗裝置中進行藥敏試驗。由于本發明的增殖培養是在液態培養基中進行,相對而言,細菌在 液態培養基中的增殖速度比在固體培養基上的增殖速度快,再加上充分利用了患者提供的 標本中的待檢細,使增殖培養前的初始數量較大,因此,增殖培養的時間很短。例如對結核 桿菌,按照中國疾病預防中心編寫的,由中國協和醫科大學出版社2004年7月1日出版的 《中國結核病防治規劃痰涂片鏡檢質量保證手冊》中規定的,采用萋-尼氏染色法,如果鏡 檢結果為抗酸桿菌陽性(4+) ^ 10條/每視野,可以不進行增殖培養而直接進入到藥敏檢 驗階段,這樣,本發明就省略掉了增殖培養階段,因此,節省了整個試驗時間;如果鏡檢結果 為抗酸桿菌陽性(3+) :1_9條/每視野及以下,則應該進行增殖培養,由于在液態培養基中 增殖速度快,加上初紿菌量大,相對現有的增殖培養所需的時間而言,所需的時間短,因而 節約了整個試驗的時間;③藥敏檢驗階段時間短。由于起始數量大,比較容易形成藥物抑菌 圈,與現有的紙片檢驗法相比所需的時間短,因而節約了整個試驗的時間。再加上細菌細胞 生長指示劑的顯示作用,能更好地顯示細菌或細胞的繁殖生長情況和藥物抑菌圈,更便于 觀察檢測,可以進一步減少試驗時間。經發明人反復試驗證明,利用本發明細菌、細胞藥敏 檢驗方法進行結核桿菌藥敏試驗,可以省略增殖培養階段,即使需要增殖培養,也只需2-4 天,藥敏檢驗階段只需5-7天,增整個檢驗過程不到14天。綜上所述,本發明實現了檢驗過 程時間短的目的。本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法投資少、使用成本低的原因是實施本發明所需的 設備與現有的紙片檢驗法基本相同,只需配套離心裝置、藥敏檢驗裝置等。上述的離心裝 置、藥敏檢驗裝置等制造簡單,生產成本低,因此,整套設備的投資少;實施本發明需要配套 使用一次性試驗容器以及包括營養物質、緩沖劑、膠體原料、指示劑等試劑,這些一次性試 驗容器和試劑的成本低且使用的數量少,加上本發明儀器設備的投資少使用成本低,進一 步減少了本發明的使用成本。因此,本發明能有效地實現投資少、使用成本低的目的。本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法使用安全方便的原因是本發明濃集待檢標本、結 果伴讀均可以在一次性密閉容器內進行,不會污染其他器材,操作完成后進行統一消毒處 理,并且整個檢驗過程手工操作的程序很少且簡單,因此,能最大程度的減少了細菌對工作 人員和環境的影響,大大提高了試驗的生物安全性。本發明由于將一次使用的培養液灌裝 在密封瓶中,使用時,只需打開密封瓶,將培養液與濃集的細菌或細胞混均,之后將其倒入 藥敏檢驗裝置中即可,操作簡單方便,因此,本發明能有效地實現使用安全方便的目的。


下面結合附圖和實施例對本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法及藥敏檢驗裝置作進一 步說明。
圖1所示為本發明中的藥敏檢驗裝置的主視圖剖視示意圖。圖2為圖1所示的仰視圖示意圖。1、盒體,2、助凝層,3、盒蓋,4、標尺。
具體實施例方式如圖所示,盒體(1)為周壁和底部封閉、上端敞開的結構形式,在盒體(1)內設有 助凝層(2),助凝層(2)由緩釋體和附著在緩釋體中的助凝劑組成,在盒體(1)的底部設有 標尺(4),在盒體(1)的敞開端配套有盒蓋(3)。本發明的藥敏檢驗裝置,其助凝層(2)中的緩釋體可以是緩釋膜,當將培養液倒 入盒體(1)中后,該緩釋膜可以溶解于培養液中,助凝劑附著在緩釋體中;也可以采用糖與 助凝劑混合,利用噴涂的方法在盒體(1)中形成助凝層。下面給出本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法及藥敏檢驗裝置用于結核桿菌藥敏試驗 的實施例對采用萋-尼氏染色法進行確定診斷,鏡檢結果為抗酸桿菌陽性(4+) 10條/ 每視野的進行藥敏試驗1、將患者晨痰標本留取5ml用4%氫氧化鈉消化;2、置于離心機中,4500轉10分鐘離心分離,將標本中結核桿菌充分沉淀;3、去掉上清液;4、用20ml培養液將沉淀物洗脫制成液體菌懸液形式的液態檢驗標本;5、將液態檢驗標本均勻倒在藥敏檢驗裝置的盒體中,培養液中的膠體原料與盒體 中的助凝劑反應,在3小時內凝固成穩定的凝膠,形成凝膠檢驗標本;6、在凝膠檢驗標本表面設定的位置貼上欲測藥物紙片;7、蓋上盒蓋,將其置于37°C培養箱中培養5-7天,結核桿菌在生長繁殖過程中會 分解MTT形成藍色點狀色團,如果藥物對結核桿菌有抑制作用則貼有藥物紙片的凝膠檢驗 標本周圍不能形成藍色團,因而形成抑菌圈;8、根據抑菌圈大小判斷藥物對細菌的作用效果。本實施例中的20ml培養液采用的配方為營養物質為7H9配方20ml、細菌細 胞生長指示劑為3-(4,5_ 二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽0. 4mg、膠體原料為 0. 5-1. 5%海藻酸鈉0. 17g、抑制劑為0. 4mg孔雀綠;本實施例中的助凝劑為鈣離子0. 02g。本實施例中的20ml培養液采用的配方還可以是營養物質為7H9配方20ml、細 菌細胞生長指示劑為3-(4,5_ 二甲基噻唑-2)-2,5- 二苯基四氮唑溴鹽0. 5mg、膠體原料 為0. 5-1. 5%海藻酸鈉0. 3g、抑制劑為0. 4mg孔雀綠0. 8ml ;本實施例中的助凝劑為鈣離子 0. 03g。本實施例中的30ml培養液采用的配方還可以是營養物質為7H9配方20ml、細菌 細胞生長指示劑為3-(4,5- 二甲基噻唑-2)-2,5- 二苯基四氮唑溴鹽4mg、膠體原料0. 4g、 抑制劑為0. 4mg孔雀綠。本實施例中的助凝劑為鈣離子0. 04g。對采用萋-尼氏染色法進行確定診斷,鏡檢結果為抗酸桿菌陽性(3+) :1—9條/ 每視野及以下的進行藥敏試驗1、將患者晨痰標本留取5ml用4%氫氧化鈉消化;
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2、置于離心機中,4500轉10分鐘離心分離,將標本中結核桿菌充分沉淀;3、去掉上清液;4、用20ml培養液將沉淀物洗脫制成液體菌懸液形式的液態檢驗標本;5、將液態檢驗標本置于37°C培養箱中增菌培養2-4天,觀察到液態檢驗標本呈現 淡藍色改變;6、將增菌后的液態檢驗標本均勻倒在藥敏檢驗裝置的盒體中,培養液中的膠體原 料與盒體中的助凝劑反應,在3小時內凝固成穩定的凝膠,形成凝膠檢驗標本;7、在凝膠檢驗標本表面設定的位置貼上欲測藥物紙片;8、蓋上盒蓋,將其置于37°C培養箱中培養5-7天,結核桿菌在生長繁殖過程中會 分解MTT形成藍色點狀色團,如果藥物對結核分枝桿菌有抑制作用,則結核分枝桿菌不能 正常繁殖,在貼有藥物紙片的凝膠檢驗標本周圍不能形成藍色團,因而形成抑菌圈;9、根據抑菌圈大小判斷藥物對細菌的作用效果。本實施例中的20ml培養液采用的配方還可以是營養物質為7H9配方20ml、細 菌細胞生長指示劑為3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽0. 5mg、膠體原料為 0. 5-1. 5%海藻酸鈉0. 3g、抑制劑為0. 4mg孔雀綠。本實施例中的助凝劑為鈣離子0. 03g。下面給出本發明細菌、細胞藥敏檢驗方法及藥敏檢驗裝置用于普通細菌或真菌藥 敏試驗的實施例1、將分離培養后的目標菌落用20ml培養液制成液體菌懸液形式的液態檢驗標 本;2、將液態檢驗標本均勻倒在藥敏檢驗裝置的盒體中,培養液中的膠體原料與盒體 中的助凝劑反應,在3小時內凝固成穩定的凝膠,形成凝膠檢驗標本;3、在凝膠檢驗標本表面設定的位置貼上欲測藥物紙片;4、蓋上盒蓋,將其置于37°C培養箱中培養12_24h,普通細菌或真菌在生長繁殖過 程中會分解MTT形成藍色點狀色團,如果藥物對細菌有抑制作用,則細菌不能正常繁殖,在 貼有藥物紙片的凝膠檢驗標本周圍不能形成色團,因而形成抑菌圈;5、根據抑菌圈大小判斷藥物對細菌作用效果。本實施例中的20ml培養液采用的配方為營養物質為營養肉湯配方20ml、細 菌細胞生長指示劑為3-(4,5- 二甲基噻唑_2)_2,5- 二苯基四氮唑溴鹽4mg、膠體原料為 0. 5-1. 5%海藻酸鈉0. 4g ;本實施例中的助凝劑為鈣離子0. 04g。下面給出本細菌、細胞藥敏檢驗方法及藥敏檢驗裝置用于腫瘤細胞藥敏試驗的實 施例1、將已經確診的腫瘤患者手術切除物細胞進行分離和培養,待一定數量后置專用 容器中進行保存備用。2、取1ml含腫瘤細胞的上述溶液加入20ml含有本發明的培養液中,混勻,制成細 胞懸液形式的液態檢驗標本;3、將液態檢驗標本均勻倒在藥敏檢驗裝置的盒體中,培養液中的膠體原料與盒體 中放置的助凝劑結合,在3小時內凝固成穩定的凝膠,形成凝膠檢驗標本;4、在凝膠檢驗標本表面設定的位置貼上欲測藥物紙片;5、蓋上盒蓋,將其置于37°C培養箱中培養2-7天,腫瘤細胞在生長繁殖過程中會分解MTT形成藍色點狀色團,如果藥物對腫瘤細胞有抑制作用,則細胞不能正常繁殖,在貼 有藥物紙片的凝膠檢驗標本周圍不能形成色團,因而形成抑菌圈;6、根據抑菌圈大小判斷藥物對腫瘤細胞作用效果。本實施例中的20ml培養液采用的配方為營養物質為細胞培養基配方20ml、細 菌細胞生長指示劑為3-(4,5_ 二甲基噻唑-2)-2,5- 二苯基四氮唑溴鹽5mg、膠體原料為 0. 5-1. 5%海藻酸鈉0. 4mg。本實施例中的助凝劑為鈣離子0. 04mg。
權利要求
一種細菌、細胞藥敏檢驗方法,包括(1)從患者提供的標本中濃集待檢細菌標本或細胞標本;其特征是(2)向待檢細菌標本或細胞標本中加入培養液,制作成液態檢驗標本,所述的培養液包括有營養物質、膠體原料;(3)液態檢驗標本中加入可與膠體原料反應形成凝膠狀的助凝劑,制成凝膠檢驗標本;(4)在凝膠檢驗標本的表面上貼藥物紙片;(5)將其放入培養箱中培養;(6)觀測藥物抑菌圈,確定對藥物的敏感性。
2.根據權利要求1所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是所述培養液包括有細菌 細胞生長指示劑。
3.根據權利要求1所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是將液態檢驗標本放入培 養箱中增殖培養2-4天。
4.根據權利要求2所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是將液態檢驗標本放入培 養箱中增殖培養2-4天。
5.根據權利要求1或2或3或4所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是所述培養 液中包括有抑菌劑。
6.根據權利要求1所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是所述培養液中的營養物 質、膠體原料之間的配比為每IOOml營養物質中加膠體原料0. Sg—2g ;每IOOml營養物 質配助凝劑0. Ig-—0. 2g。
7.根據權利要求2或3或4所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是所述培養 液中的營養物質、膠體原料、細菌細胞生長指示劑之間的配比為每IOOml營養物質中加 膠體原料0. Sg—2g ;加細菌細胞生長指示劑2mg—20mg ;每IOOml營養物質配助凝劑 0. Ig---0. 2g。
8.根據權利要求5所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是所述培養液中的營養物 質、膠體原料、細菌細胞生長指示劑、抑菌劑之間的配比為每IOOml營養物質中加膠體原 料0. Sg—2g ;加細菌細胞生長指示劑2mg—20mg ;加抑菌劑適量;每IOOml營養物質配助 凝劑 0. Ig-—0. 2g。
9.根據權利要求1或2或3或4或6所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是培養 液按一次使用的數量分裝并密封保存。
10.根據權利要求5所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是培養液按一次使用的 數量分裝并密封保存。
11.根據權利要求7所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是培養液按一次使用的 數量分裝并密封保存。
12.根據權利要求8所述的細菌、細胞藥敏檢驗方法,其特征是培養液按一次使用的 數量分裝并密封保存。
13.一種用于權利要求1所述細菌、細胞藥敏檢驗方法的藥敏檢驗裝置,其特征是包 括有周壁和底部封閉、上端敞開結構形式的盒體(1),在盒體(1)內腔中放置有助凝劑。
14.根據權利要求13所述的藥敏檢驗裝置,其特征是在盒體(1)內腔的底部設有助 凝層(2),助凝層(2)由緩釋體和附著在緩釋體中的助凝劑組成。
15.根據權利要求13所述的藥敏檢驗裝置,其特征是在盒體(1)內腔的底部設有助 凝層(2),助凝層(2)為由粘合劑與助凝劑混合后涂在盒體(1)底部的結構形式。
16.根據權利要求13或14或15所述的藥敏檢驗裝置,其特征是在盒體(1)的底部 設有標尺⑷。
17.根據權利要求13或14或15所述的藥敏檢驗裝置,其特征是在盒體(1)的敞開 端設有與其配套的盒蓋(3)。
18.根據權利要求16所述的藥敏檢驗裝置,其特征是在盒體(1)的敞開端設有與其 配套的盒蓋(3)。
全文摘要
本發明公開了一種細菌、細胞藥敏檢驗方法及藥敏檢驗裝置,其檢驗方法為向濃集的細菌標本或細胞標本中加入培養液,制作成液態檢驗標本,再加入助凝劑,使液態檢驗標本凝固成凝膠狀,形成凝膠檢驗標本,在凝膠檢驗標本的表面上貼藥物紙片,將其放入37℃的培養箱中培養,觀測藥物抑菌圈,確定對藥物的敏感性;其藥敏檢驗裝置為用透明材料制成的盒,助助凝劑預置在藥敏檢驗裝置,其特征是培養液中包括有膠體原料,在加入助凝劑前呈液態,加入助凝劑后在常溫下在一定時間內形成穩定的凝膠,因此本發明充分吸收了細菌或細胞在液態培養中繁殖速度快,藥物紙片試驗簡單方便的優點,檢驗過程時間短、投資少、使用成本低且使用安全方便。
文檔編號C12R1/00GK101851663SQ20091004300
公開日2010年10月6日 申請日期2009年4月1日 優先權日2009年4月1日
發明者彭鈞 申請人:湖南省天騎醫學新技術有限公司
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