專利名稱：一種黃麻鏈霉菌nf0919菌株、用途及其活性發酵液的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種微生物及用途，更具體地說涉及一種黃麻鏈霉菌NF0919菌株、 用途及其活性發酵液的制備方法，屬于生物農藥技術領域，
背景技術：
由植物病原真菌立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)引起的水稻紋枯病(Rice sheath blight)、禾谷絲核菌(Rhizoctoniacerealis)引起的小麥紋枯病(Wheatsheathblight)和水稻 綠核菌(Ustilaginoideaoryzae)引起的水稻稻曲病(Ricefalsesmut)是當前為害水稻的主要 病害。上述三類病害常年可造成10% 30%的產量損失，高發年份減產80%，甚至絕 收。目前，該類病害的防治主要依賴化學藥劑，但隨著環保以及病菌抗藥性問題的日益 突出，化學防治受到嚴峻的挑戰。當前隨著高產、矮稈、多蘗水稻和小麥良種以及拋秧 和直播稻等水稻輕型栽培技術的推廣，使水稻和小麥紋枯病和水稻稻曲病的為害逐年加 重。近年來，隨著人們對食品安全的要求越來越高，生物防治在農業生產中也越來越被 重視。利用頡頏微生物防治該類病害呈現良好的發展前景，目前已發現了大量對該類病 害有頡頏作用的微生物。研制與開發防治水稻、小麥紋枯病和稻曲病的微生物及其代謝 產物，主要是從細菌、真菌和植物中獲得。目前報道用于防治該類病害的細菌屬(種)主 要有(1)吸水鏈霉菌井岡變種(Streptomyceshygroscopicus var.Jingganggensis Yen) ； (2)鏈 霉菌 702 (Streptomyces sp.702) ； (3)金色鏈霉菌(Streptomyces aureochromogenes) ； (4)鏈 霉菌(Streptomyces kitasazwaensis) ； (5)吸水鏈霉菌北京變禾中(Streptomyces hygrospinosus var.beijingensis) ； (6)賭質芽孢桿菌(Bacillus cerens) ； (7)芽孢桿菌 B—916 (Bacillus subtilis B-916) ； (8)金色假單胞菌(Pseudomonasaureofaciens) ； (9)熒光假單胞細菌 (Pseudomonasfluorescens) ； (10)多粘芽孢桿菌(Bacillus polymyxaVLB 16) ； (11)鏈霉菌 (Streptomyces sp.PM5) ； (I2)銅綠假單胞 ZJl999 (Pseudomonasaeraginosa ZJl"9) ； (13) 黃單胞菌屬(Xanthomonas sp.) ； (14)海洋細菌 PY-sw-1。另外目前用于該類病害的生防真菌主要有以下種類(1)綠色木霉TvMN7菌 株(Trichoderma viride TvMN7) ； (2)長枝木霉 T8 (Trichoderma longibrachiatum T8) ； (3) 哈茨木霉 TC3 (Trichoderma harzianum TC3) ； (4)哈茨木霉 NF9 (Trichoderma harzianum NF9) ； (5)青霉屬(Penicillium sp) ； (6)禾長蠕孢菌 HGE 菌株(Helminthosporium gramineumRabenhf.sp.echinochloaeHGE)。用于該類病害的生物制劑主要有(1)井岡霉 素(有效霉素)；(2)三木脂素；(3)芽孢桿菌泡騰劑；(4)抗菌肽(Purothionin) ； (5)多 抗(氧)霉素；(6)抗霉素A ； (7)抗霉素120 (農抗120)。大多數菌株或制劑只能防冶 一種病害，而利用頡頏放線細菌同時防治水稻稻曲病和水稻、小麥紋枯病和其它多種病 害的在現有技術中沒有提及和公開。

發明內容
本發明解決現有技術存在的不足，提供一株新分離的鏈霉菌菌株黃麻鏈霉菌 NF0919菌株(Streptomyces corchorasii)，該菌株可用于防治小麥紋枯病、水稻稻曲病和水
稻紋枯病和其它多種植物病害。同時本發明還提供用該黃麻鏈霉菌菌株NF0919制備的活性發酵液的方法，工藝簡單。本發明是通過以下技術方案實現的本發明的黃麻鏈霉菌菌株NF0919 (拉丁文學名為Streptomyces corchorasii)，已 于2010年7月8日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏號為 CGMCC No.3968。本發明的菌種具有如下特征(1)NF0919菌株的形態及生理生化特征(見表1)表1、NF0919菌株形態及理化特征
權利要求
1.一種黃麻鏈霉菌菌株NF0919 (Streptomyces corchorasii)，該菌種已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏號為CGMCCNo.3968。
2.根據權利要求1所述的黃麻鏈霉菌菌株NF0919，其特征在于該菌株的16SrRNA基 因序列為TCGACAGCTCCCTCCCACAAGGGGTTGGGCCACCGGCTTCGGGTGTTACCAACT TTCGTGACGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCAGCAATG CTGATCTGCGATTACTAGCAACTCCGACTTCATGGGGTCGAGTTGCAGACCCCAATCC GAACTGAGACCGGCTTTTTGAGATTCGCTCCACCTCACGGTATCGCAGCTCATTGTAC CGGCCATTGTAGCACGTGTGCAGCCCAAGACATAAGGGGCATGATGACTTGACGTCG TCCCCACCTTCCTCCGAGTTGACCCCGGCGGTCTCCTGTGAGTCCCCATCACCCCGAA GGGCATGCTGGCAACACAGGACAAGGGTGGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACAT CTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCACCACCTGTACACCGACCACAAGGGGGA CCCTGTCTCCAGGGTTTTCCGGTGTATGTCAAGCCTTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCG TCGAATTAAGCCACATGCTCCGCTGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTT TAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGGGAACTTAATGCGTTAGCTGCGGCACCGA CGACGTGGAATGTCGCCAACACCTAGTTCCCACCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGG TATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTAATGGCCCAGAG ATCCGCCTTCGCCACCGGTGTTCCTCCTGATATCTGCGCATTTCACCGCTACACCAGG AATTCCGATCTCCCCTACCACACTCTAGCTAGCCCGTATCGAATGCAGACCCGGGGTT AAGCCCCGGGCTTTCACACCCGACGTGACAAGCCGCCTACGAGCTCTTTACGCCCAA TAATTCCGGACAACGCTTGCGCCCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGC CGGCGCTTCTTCTGCAGGTACCGTCACTTTCGCTTCTTCCCTGCTGAAAGAGGTTTAC AACCCGAAGGCCGTCATCCCTCACGCGGCGTCGCTGCATCAGGCTTTCGCCCATTGT GCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGT GGCCGGTCGCCCTCTCAGGCCGGCTACCCGTCGTCGCCTTGGTGAGCCGTTACCTCA CCAACAAGCTGATAGGCCGCGGGCTCATCCTTCACCGCCGGAGCTTTCAACCCTCAC AGATGCCTGCGAGAGTGGTATCCGGTATTAGACCCCGTTTCCAGGGCTTGTCCCAGAG TGAAGGGCAGATTGCCCACGTGTTACTCACCCGTTCGCCACTAATCCCCACCGAAGTG GTTCATCGTTCGACTGCA。
3.權利要求1所述的黃麻鏈霉菌菌株NF0919在防治水稻稻曲病和防治水稻、小麥紋 枯病方面的應用。
4.一種用權利要求1所述的黃麻鏈霉菌菌株NF0919制備的活性發酵液。
5.一種制備權利要求4所述的活性發酵液的方法，其特征在于包括以下步驟(A)菌株的活化與一級種子培養液的培養將保存的NF0919菌株的斜面在高氏一號培養基上活化，30°C培養10d，挑取Icm2大 小的菌塊接種于50mL —級種子培養液中，置于170rpm搖床上30°C振蕩培養44 48h， 其中所述的50mL—級種子培養液的成分為可溶性淀粉3%，葡萄糖2%，酵母粉1%， 蛋白胨1%，NaCl 0.5%, K2HPO4 0.2%,可溶性淀粉、葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、NaCl 和K2HPO4含量的單位比例為W/V ；(B)二級種子培養液的培養將步驟(A)所得一級種子培養液按5%的接種量接入50mL 二級種子培養液中， 170rpm、30°C搖床上培養48_52h，其中所述的5%的單位比例為V/V ；所述的50mL二級 種子培養液的成分馬鈴薯淀粉8.5%，棉籽蛋白2.2%，CaCO3 0.1%, K2HPO4 0.05%, MgSO4 0.05%,淀粉酶0.01%，馬鈴薯淀粉、棉籽蛋白、CaC03、K2HPO4^ MgSO4和淀粉酶含量的單位比例為w/ν ；(C)發酵培養液的培養將步驟(B)所得二級種子培養液按5%的接種量接種于裝有160L發酵培養液的 容積為200L的發酵罐中，其中所述的5%的單位比例為V/V，設置發酵參數為溶 氧100%，消泡劑1.6L，攪拌速度為360rpm，發酵溫度為36°C，發酵時間為72h，pH 6.8 7.2，所述的發酵培養液的成分為馬鈴薯淀粉8.5%，棉籽蛋白2.6%，K2HPO4 0.05%, NaCl 0.2%, MgS040.05%, CaCO3 0.1%, pH7.2-7.4,馬鈴薯淀粉、棉籽蛋白、 K2HPO4^ NaCL MgSO4和CaCO3含量的單位比例為W/V ；(D)NF0919活性發酵液的制備把步驟(C)所得發酵液在IOOOOrpm離心5min得上清液，上清液中添加潤濕劑和 防腐劑即得菌株NF0919的活性發酵液，其中潤濕劑和防腐劑含量的單位比例均為W/V。
6.根據權利要求5所述的制備活性發酵液的方法，其特征在于步驟(C)中所述的消泡 劑為XP-100F系列發酵用有機硅消泡劑。
7.根據權利要求5所述的制備活性發酵液的方法，其特征在于步驟(D)中所述的潤濕 劑為木質素磺酸鈉；所述的防腐劑為苯鉀酸鈉。
全文摘要
本發明公開了一種黃麻鏈霉菌菌株NF0919(Streptomyces corchorusii)，該菌種已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏號為CGMCC No.3968。該菌株可用于防治小麥紋枯病、水稻稻曲病和水稻紋枯病和其它多種植物病害。
文檔編號C12R1/465GK102010835SQ20101023688
公開日2011年4月13日 申請日期2010年7月27日 優先權日2010年7月27日
發明者莊義慶, 楊敬輝, 陳宏州 申請人:江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所