專利名稱：一種氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法
技術領域：
本發明涉及農藥分析領域，具體地說涉及一種氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法。
背景技術：
氰烯菌酯屬于氰基丙烯酸酯類，化學名稱為2-氰基-3-氨基丙烯酸乙酯，實驗式 C12H12N2O2，是一種結構新穎，作用方式獨特的新型殺菌劑。氰烯菌酯作為一種新型農藥，可以被廣泛用于多種田間病害，對于已經產生抗性水平的病菌有良好抑菌效果。氰烯菌酯對鐮刀屬病菌引起的病害防效突出，在赤霉病、枯萎病和惡苗病的防治上效果非常好，目前無任何抗性產生，對被病菌侵染的作物具有保護和治療的功效，且使用后不影響作物的正常生長，高效、微毒、低殘留，可大幅改善農產品品質，因此具有極高的推廣價值和市場前景。

發明內容
發明目的本發明的目的是提供一種氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法和應用， 用于實現對氰烯菌酯或含有氰烯菌酯的農藥進行更安全、快速、準確、穩定的定量分析。技術方案為實現上述目的，本發明的氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法，包括如下步驟(1)將氰烯菌酯用有機溶劑溶解并定容；(2)以步驟(1)的有機溶劑和水作為流動相，流速為lml/min，色譜柱為Cw柱，柱箱溫度25°C，檢測波長為280 300nm，進樣體積10 μ 1，采用紫外線檢測器進行定量分析。本發明經過實際測試，用反相高效液相色譜法對氰烯菌酯的含量進行分析，通過對氰烯菌酯進行紫外掃描，得到紫外吸收曲線，在檢測波長為^Onm附近有較好的吸收，雜質影響最小，流動相無吸收。所述步驟(1)中的氰烯菌酯包括氰烯菌酯標準樣品以及需要進行監測分析的含有氰烯菌酯的農藥，經過溶解、定容后，分別得到氰烯菌酯的標樣溶液和試樣溶液。氰烯菌酯原藥為白色固體粉末，所述步驟(1)中的有機溶劑包括甲醇或乙腈或二者的組合。本發明利用上述有機溶劑和水作為高效液相色譜的流動相。所述步驟( 中有機溶劑和水的體積比為2 3 4 1。作為本發明的優化方案，所述步驟( 中有機溶劑和水的體積比為3 2。當高效液相色譜儀運行至穩定后，先注入數針標準溶液，當相鄰兩針的有效成分峰面積的相對偏差< 1.5%時，按照標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣分析，用外標法計算含量，以質量百分比計算氰烯菌酯的含量。計算公式如下X1 = ^2Xm1 X P)/^1Xm2) ；(1)rr標準溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；r2-試樣溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；
Hi1-標樣的質量，g;m2-試樣的質量，g。P-標樣中氰烯菌酯的質量百分含量，％。本發明采用高效液相色譜法對氰烯菌酯農藥進行定量分析，對氰烯菌酯農藥的劑型并無嚴格要求。所述的氰烯菌酯農藥可以是水分散粒劑、可濕性粉劑、水乳劑、懸浮劑、乳油、種子處理劑的任意一種。有益效果本發明的一種氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法對氰烯菌酯農藥的液相色譜檢測方法進行了探索和歸納，得到了以290nm為檢測波長的最優方案，該方法對氰烯菌酯類農藥的檢測非常方便、精確，對該類農藥產品的生產和質量檢測具有重要意義。


圖1是氰烯菌酯的紫外吸收曲線；圖2是98%氰烯菌酯標樣的液相色譜圖；圖3是氰烯菌酯懸浮劑的液相色譜圖；圖4是氰烯菌酯進樣量和峰面積的線性關系。
具體實施例方式實施例1本發明的氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法的分析步驟如下稱取0. 12g(精確至0.0002g)98%的氰烯菌酯標準樣品，于IOOmL容量瓶中，用甲醇溶解，定容；稱取含有0. 12g (精確至0. 0002g)氰烯菌酯的懸浮劑作為試樣，于IOOmL容
量瓶中，用甲醇溶解，定容。高效液相色譜儀為Agilent 1200系列，具有可變波長的紫外線檢測器，色譜柱選用安捷倫公司生產的C18不銹鋼柱(150mmX4. 6mm)。流動相為甲醇+水=60+40ml (V/V)， 流量為lml/min ；柱溫為25°C，進樣體積為10μ 1。通過對氰烯菌酯進行紫外掃描，得到氰烯菌酯的紫外吸收曲線(如圖1所示)，在280 300nm波長附近的吸收較好，雜質響應小， 流動相無吸收，其中以290nm為最優，因此檢測波長為^Onm。當高效液相色譜儀運行穩定后，先注入數針標準溶液，當相鄰兩針的有效成分峰面積的相對偏差< 1. 5%時，按照標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣分析，得到標樣、試樣的液相色譜圖如圖2、圖3所示，可見保留時間在3. OlOmin的色譜峰，即為氰烯菌酯色譜峰。根據公式(r2XHi1XP)/^ Xm2)計算氰烯菌酯試樣中氰烯菌酯的含量。式中，Γι_標準溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；r2-試樣溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；Hi1-標樣的質量，g;m2-試樣的質量，g。P-標樣中氰烯菌酯的質量百分含量，％。實施例2本發明的氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法的分析步驟如下
稱取0. 12g(精確至0.0002g)98%的氰烯菌酯標準樣品，于IOOmL容量瓶中，用甲醇溶解，定容；稱取含有0. 12g(精確至0. 0002g)氰烯菌酯的可濕性粉劑作為試樣，于 IOOmL容量瓶中，用甲醇溶解，定容。高效液相色譜儀為Agilent 1200系列，具有可變波長的紫外線檢測器，色譜柱選用安捷倫公司生產的C18不銹鋼柱(150mmX4. 6mm)。流動相為甲醇+水=40+60ml (V/V)， 流量為lml/min ；柱溫為25°C，進樣體積為10 μ 1，檢測波長為290nm。當高效液相色譜儀運行至穩定后，先注入數針標準溶液，當相鄰兩針的有效成分峰面積的相對偏差< 1. 5%時，按照標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣分析，根據公式(r2XHi1XP)/^Xm2)計算氰烯菌酯試樣中氰烯菌酯的含量。式中，Γι_標準溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；r2-試樣溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；Hi1-標樣的質量，g;m2-試樣的質量，g。P-標樣中氰烯菌酯的質量百分含量，％。實施例3本發明的氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法的分析步驟如下稱取0. 12g(精確至0.0002g)98%的氰烯菌酯標準樣品，于IOOmL容量瓶中，用甲醇溶解，定容；稱取含有0. 12g (精確至0. 0002g)氰烯菌酯的水乳劑作為試樣，于IOOmL容
量瓶中，用甲醇溶解，定容。高效液相色譜儀為Agilent 1200系列，具有可變波長的紫外線檢測器，色譜柱選用安捷倫公司生產的C18不銹鋼柱(150mmX4. 6mm)。流動相為甲醇+水=80+20ml (V/V)， 流量為lml/min ；柱溫為25°C，進樣體積為10 μ 1，檢測波長為290nm。當高效液相色譜儀運行至穩定后，先注入數針標準溶液，當相鄰兩針的有效成分峰面積的相對偏差< 1. 5%時，按照標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣分析，根據公式(r2XHi1XP)/^Xm2)計算氰烯菌酯試樣中氰烯菌酯的含量。式中，Γι_標準溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；r2-試樣溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；
Hi1-標樣的質量，g;m2-試樣的質量，g。P-標樣中氰烯菌酯的質量百分含量，％。實施例4本發明的氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法的分析步驟如下稱取0. 12g(精確至0.0002g)98%的氰烯菌酯標準樣品，于IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解，定容；稱取含有0. 12g(精確至0. 0002g)氰烯菌酯的水分散粒劑作為試樣，于 IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解，定容。高效液相色譜儀為Agilent 1200系列，具有可變波長的紫外線檢測器，色譜柱選用安捷倫公司生產的C18不銹鋼柱(150mmX4. 6mm)。流動相為乙腈+水=60+40ml (V/V)， 流量為lml/min ；柱溫為25°C，進樣體積為10 μ 1，檢測波長為290nm。當高效液相色譜儀運行至穩定后，先注入數針標準溶液，當相鄰兩針的有效成分峰面積的相對偏差< 1. 5%時，按照標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣分析，根據公式(r2XHi1XP)/^Xm2)計算氰烯菌酯試樣中氰烯菌酯的含量。式中，Γι_標準溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；r2-試樣溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；Hi1-標樣的質量，g;m2-試樣的質量，g。P-標樣中氰烯菌酯的質量百分含量，％。實施例5本發明的氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法的分析步驟如下稱取0. 12g(精確至0.0002g)98%的氰烯菌酯標準樣品，于IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解，定容；稱取含有0. 12g (精確至0. 0002g)氰烯菌酯的乳油作為試樣，于IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解，定容。高效液相色譜儀為Agilent 1200系列，具有可變波長的紫外線檢測器，色譜柱選用安捷倫公司生產的C18不銹鋼柱(150mmX4. 6mm)。流動相為乙腈+水=40+60ml (V/V)， 流量為lml/min ；柱溫為25°C，進樣體積為10 μ 1，檢測波長為290nm。當高效液相色譜儀運行至穩定后，先注入數針標準溶液，當相鄰兩針的有效成分峰面積的相對偏差< 1. 5%時，按照標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣分析，根據公式(r2XHi1XP)/^Xm2)計算氰烯菌酯試樣中氰烯菌酯的含量。式中，Γι_標準溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；r2-試樣溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；Hi1-標樣的質量，g;m2-試樣的質量，g。P-標樣中氰烯菌酯的質量百分含量，％。實施例6本發明的氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法的分析步驟如下稱取0. 12g(精確至0.0002g)98%的氰烯菌酯標準樣品，于IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解，定容；稱取含有0. 12g (精確至0. 0002g)氰烯菌酯的浸種劑作為試樣，于IOOmL容
量瓶中，用乙腈溶解，定容。高效液相色譜儀為Agilent 1200系列，具有可變波長的紫外線檢測器，色譜柱選用安捷倫公司生產的C18不銹鋼柱(150mmX4. 6mm)。流動相為乙腈+水=80+20ml (V/V)， 流量為lml/min ；柱溫為25°C，進樣體積為10 μ 1，檢測波長為290nm。當高效液相色譜儀運行至穩定后，先注入數針標準溶液，當相鄰兩針的有效成分峰面積的相對偏差< 1. 5%時，按照標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣分析，根據公式(r2XHi1XP)/^Xm2)計算氰烯菌酯試樣中氰烯菌酯的含量。式中，Γι_標準溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；r2-試樣溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；Hi1-標樣的質量，g;m2-試樣的質量，g。P-標樣中氰烯菌酯的質量百分含量，％。
實施例7本發明的氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法的分析步驟如下稱取0. 12g(精確至0.0002g)98%的氰烯菌酯標準樣品，于IOOmL容量瓶中，用甲醇溶解，定容；稱取含有0. 12g(精確至0. 0002g)氰烯菌酯的種衣劑作為試樣，于IOOmL容
量瓶中，用甲醇溶解，定容。高效液相色譜儀為Agilent 1200系列，具有可變波長的紫外線檢測器，色譜柱選用安捷倫公司生產的Cw不銹鋼柱(150mmX4.6mm)。流動相為甲醇+乙腈+水= 40ml+20ml+40ml，流量為lml/min ；柱溫為25°C，進樣體積為10 μ 1，檢測波長為290nm。當高效液相色譜儀運行至穩定后，先注入數針標準溶液，當相鄰兩針的有效成分峰面積的相對偏差< 1. 5%時，按照標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣分析，根據公式(r2XHi1XP)/^Xm2)計算氰烯菌酯試樣中氰烯菌酯的含量。式中，Γι_標準溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；r2-試樣溶液中氰烯菌酯峰面積的平均值；Hi1-標樣的質量，g;m2-試樣的質量，g。P-標樣中氰烯菌酯的質量百分含量，％。實施例8稱取氰烯菌酯標樣0. 3g(精確至0. 0002g)置于IOOml容量瓶中，用甲醇溶解，定容。用移液管依次準確移取5ml、10ml、15ml、20ml、25ml于100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。按實施例1中的色譜條件進行測定。以氰烯菌酯進樣量為橫坐標，相應的峰面積為縱坐標作圖，得到氰烯菌酯線性方程為Y = 2042. 3X+6，相關系數R為0. 9997，如圖4 所示。在實施例1中的色譜操作條件下，對實施例1中的待測樣品進行6次重復測定，結果為25. 4，25. 7，25. 4，25. 6,25. 3, 25. 8，平均含量為25. 53，標準偏差為0. 019，變異系數為 0. 077%，可見該方法測定的精密度很高。再稱取一定量的樣品準確加入不同量的氰烯菌酯標樣測定其含量，計算平均回收率(回收率=實測值/配置值χ 100% )為100.4%，說明該方法的準確度良好。以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。
權利要求
1.氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法，其特征在于包括如下步驟(1)將氰烯菌酯用有機溶劑溶解并定容；(2)以步驟(1)的有機溶劑和水作為流動相，流速為lml/min，色譜柱為C18柱，柱溫為 25°C，檢測波長為^(T300nm，進樣體積10 μ 1，采用可變波長紫外檢測器進行定量分析。
2.根據權利要求1所述的一種氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法，其特征在于所述步驟(1)中的有機溶劑包括甲醇或乙腈或二者的組合。
3.根據權利要求1所述的一種氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法，其特征在于所述步驟(2)中有機溶劑和水的體積比為2:3 4:1。
4.根據權利要求3所述的一種氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法，其特征在于所述步驟(2)中有機溶劑和水的體積比為3:2。
全文摘要
本發明公開了一種氰烯菌酯的高效液相色譜分析方法，屬于農藥分析領域。該方法將氰烯菌酯用有機溶劑溶解并定容，以有機溶劑和水作為流動相，流速為1ml/min，色譜柱為C18柱，柱溫為25℃，檢測波長為280~300nm，進樣體積10μl，采用可變波長紫外檢測器進行定量分析。本發明對氰烯菌酯農藥的液相色譜檢測方法進行了探索和歸納，得到了以290nm為檢測波長的最優方案，該方法對氰烯菌酯類農藥的檢測非常方便、精確，對該類農藥產品的生產和質量檢測具有重要意義。
文檔編號G01N30/89GK102435704SQ20111039326
公開日2012年5月2日 申請日期2011年12月1日 優先權日2011年12月1日
發明者吉沐祥, 吳祥, 莊桂花, 束兆林, 王莉莉, 繆康, 費子華, 趙來成, 陳源 申請人:江蘇省綠盾植保農藥實驗有限公司