專利名稱：抗過敏劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗過敏劑。
背景技術(shù)：
近幾年，由食物、日本柳杉等的特定的花粉、屋塵、化學(xué)物質(zhì)等激發(fā)的鼻炎、結(jié)膜炎、支氣管哮喘、特應(yīng)性皮炎等過敏癥狀已成為社會問題。尤其，伴隨住宅的高密封化，因施工時的甲醛、甲苯等的揮發(fā)性有機(jī)化合物的使用、寵物的室內(nèi)飼養(yǎng)以及冷氣暖氣的連續(xù)使用等而螨、其尸體、粉、霉、花粉、寵物的毛等屋塵和揮發(fā)性有機(jī)化合物等化學(xué)物質(zhì)等將長期間存在于室內(nèi)，引起過敏癥狀已成為問題。通常，關(guān)于減輕過敏癥狀方面更多是依賴于抗組胺、類固醇等的藥劑，在費(fèi)用、副作用等方面患者所承受的負(fù)擔(dān)大，因此期待通過較簡便地攝取安全性高的食品來源物而能減輕過敏癥狀。例如，在柿子葉提取物中，確認(rèn)到被動皮膚過敏(PCA)反應(yīng)和特應(yīng)性皮炎模型中的有效性(專利文獻(xiàn)1)。并且，微生物中也有確認(rèn)了這樣的有效性的例子，但是該微生物為基因重組大腸桿菌，需要充分驗(yàn)證安全性(專利文獻(xiàn)2)。仍然需要能減輕過敏癥狀的食品和安全性高的天然微生物等的探索。另一方面，丙酸桿菌(Propionibacterium) > ILit^M (Lactococcus)乳酸菌、明串珠菌屬(Leuconostoc)乳酸菌一直以來被使用于飲料食品的制造中，且已報道它們的培養(yǎng)液中含有1，4_ 二羥基-2-萘甲酸(DHNA)(專利文獻(xiàn)3，非專利文獻(xiàn)1)。專利文獻(xiàn)1 日本特開2000-139406號公報專利文獻(xiàn)2 日本特開2002-1M976號公報小冊子專利文獻(xiàn)3 國際公開2003/016544號非專利文獻(xiàn) 1 :K. Fruichi et al. , Applied and Environmental Microbiology, May 2007，p.3137-3143.

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供安全性高的抗過敏劑。本發(fā)明人等對能降低過敏癥狀的物質(zhì)進(jìn)行研討的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)丙酸桿菌發(fā)酵物具有減輕由螨來源抗原引起的特異反應(yīng)性皮炎及被動皮膚過敏(PCA)反應(yīng)的作用，該發(fā)酵物作為抗過敏劑有用。因此，本發(fā)明提供一種以丙酸桿菌發(fā)酵物作為有效成分的抗過敏劑。另外，本發(fā)明提供丙酸桿菌發(fā)酵物在制造抗過敏劑中的應(yīng)用。另外，本發(fā)明提供一種過敏癥狀的預(yù)防、改善方法，給藥或攝取有效量的丙酸桿菌發(fā)酵物。本發(fā)明由于是來自一直以來使用于食品制造中的天然微生物的發(fā)酵物，所以作為安全性高的抗過敏劑有用。而且，因使用微生物，能夠大量生產(chǎn)該發(fā)酵物。


圖1表示蒸餾水給藥組[蒸餾水]、丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組[丙酸桿菌發(fā)酵物]、 培養(yǎng)基(未發(fā)酵物)給藥組[培養(yǎng)基]、以及皮炎未激發(fā)組[未激發(fā)]的、試驗(yàn)期間中的皮炎癥狀記分(score)的變化(以平均士標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。"P < 0. OlZP < 0. 05,Dunnett的多重比較，與蒸餾水給藥組的比較)。圖2表示蒸餾水給藥組[蒸餾水]、丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組[丙酸桿菌發(fā)酵物]、 培養(yǎng)基(未發(fā)酵物)給藥組[培養(yǎng)基]以及皮炎未激發(fā)組[未激發(fā)]的、14天、21天和觀天的血清中總IgE濃度(以平均士標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。乍< 0. 05，Dunnett的多重比較，與蒸餾水給藥組的比較)。圖3表示蒸餾水給藥組[蒸餾水]、丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組[丙酸桿菌發(fā)酵物]、 培養(yǎng)基(未發(fā)酵物)給藥組[培養(yǎng)基]及皮炎未激發(fā)組[未激發(fā)]的、14天、21天和觀天的SAA濃度(以平均士標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。乍< 0. 05，Dunnett的多重比較，與蒸餾水給藥組的比較)。圖4表示蒸餾水給藥組的PCA反應(yīng)激發(fā)部位[蒸餾水]、丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組的PCA反應(yīng)激發(fā)部位[丙酸桿菌發(fā)酵物]、培養(yǎng)基給藥組的PCA反應(yīng)激發(fā)部位[培養(yǎng)基]、 富馬酸酮替芬給藥組的PCA反應(yīng)激發(fā)部位[富馬酸酮替芬]、以及各組的PCA反應(yīng)未激發(fā)部位[PCA(-)]的伊凡斯藍(lán)(Evans blue)漏出量。(以平均士標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。呷< 0. 01， Dunnett的多重比較，與蒸餾水給藥組的PCA反應(yīng)激發(fā)部位[蒸餾水]比較。)圖5表示試驗(yàn)食物A 酸性飲料(安慰劑)、試驗(yàn)食物B 含有丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的酸性飲料(活性物1)、C 含有丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的酸奶飲料(活性物幻的角質(zhì)層水分量(AU)(以平均士 標(biāo)準(zhǔn)差表示。*P < 0. 05 (paired t-test)，#P < 0· 05 (基于 iTukey-Kramer 法的3組間的多重比較鑒定))。圖6表示試驗(yàn)食物A 酸性飲料(安慰劑)、試驗(yàn)食物B 含有丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的酸性飲料(活性物1)、C 含有丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的酸奶飲料(活性物2、的肌理記分 (以平均士 標(biāo)準(zhǔn)差表示。*P < 0. 05 (paired t-test)，#P < 0· 05 (基于 Tukey-Kramer 法的3組間的多重比較檢驗(yàn)))。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明所使用的丙酸桿菌有丙酸桿菌屬(Propionibacterium) >Propionicimonas 菌屬、丙酸產(chǎn)生菌屬(Propioniferax)、Propionimicrobium 菌屬、Propionivibrio 菌屬等，沒有特別限制，但優(yōu)選丙酸桿菌屬的菌。丙酸桿菌屬的菌例如可舉出費(fèi)氏丙酸桿菌(P. freudenreichii 或 Propionibacterium freudenreichii)、特氏丙酸桿菌 (P. thoenii 或 Propionibacterium thoenii)、產(chǎn)丙酸丙酸桿菌(P. acidipropionici 或 Propionibacterium acidipropionici)、詹氏丙酸桿菌(P. jensenii 或Propionibacterium jensenii)等的奶酪用丙酸桿菌；卵白丙酸桿菌(P. avidum)、痤瘡丙酸桿菌(P. acnes)、嗜淋巴丙酸桿菌(P. Iymphophilum)，顆粒丙酸桿菌(P. granulosam)、阿拉伯糖丙酸桿菌(P. arabinosum)、環(huán)乙燒丙酸桿菌(P. cyclohexanicum)、無害丙酸桿菌 (Propionibacterium irmocuum)、中 |、司丙酸桿菌(Propionibacterium intermediu)、戊 H 丙酸!f 菌(Propionibacterium pentosaceum) > 貝氏丙酸 If 菌(Propionibacterium peterssonii)、丙酸丙酸桿菌(Propionibacterium propionicum)、玉米丙酸桿菌 (Propionibacterium zeae)等，優(yōu)選奶酪用丙酸桿菌。其中更優(yōu)選費(fèi)氏丙酸桿菌，特優(yōu)選費(fèi)氏丙酸桿菌(Propionibacterium freudenreichii) ET-3 株(2001 年 8 月 9 日保藏于獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專利生物保藏中心(日本國茨城県ι<W市東1丁目1番地 1中央第6 (郵政編碼305-8566))，保藏編號為FERM BP-8115。用于識別的標(biāo)記為ET-3，基于布達(dá)佩斯條約的保藏移交日為2002年7月11日)。本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物的制造過程中的培養(yǎng)工序所使用的培養(yǎng)基的營養(yǎng)源為， 只要能用于丙酸桿菌的培養(yǎng)即可(例如，專利文獻(xiàn)3及非專利文獻(xiàn)1)，能使用乳制品、酵母提取物、大豆提取物、胰酶解酪蛋白等的蛋白胨、以及大量含有這些的食品。或者還可以使用它們的酶處理物。其中優(yōu)選含有乳制品的蛋白質(zhì)分解酶處理物的培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基更優(yōu)選以該蛋白質(zhì)分解酶處理物作為主要成分，該蛋白質(zhì)分解酶分解物的含量在液體培養(yǎng)基中更優(yōu)選0. 1 40質(zhì)量％，進(jìn)一步優(yōu)選1 20質(zhì)量％。作為上述蛋白質(zhì)分解酶分解物所用的乳制品可舉出鮮奶、濃縮奶、全脂乳粉、脫脂乳，脫脂乳粉、乳蛋白(MPC(milk protein concentrate))、酪蛋白、乳清、濃縮乳清、濃縮乳清蛋白(WPC)、分離乳清蛋白(WPI)以及乳清粉等，這些可以單獨(dú)或2種以上使用。其中，優(yōu)選脫脂乳、脫脂乳粉、乳清濃縮物、乳清粉、乳蛋白。這些可以使用市售的產(chǎn)品。該乳制品的使用量在液體培養(yǎng)基中優(yōu)選0. 1 40質(zhì)量％，更優(yōu)選1 20質(zhì)量％。另外，上述蛋白質(zhì)分解酶可以采用市售產(chǎn)品，但優(yōu)選蛋白酶，其中優(yōu)選中性蛋白酶，該蛋白質(zhì)分解酶除了蛋白酶以外還可以含有肽酶。所使用的蛋白酶或肽酶不被特別限定，例如，食品等級的蛋白酶包括內(nèi)切型蛋白酶、外切型蛋白酶、外切型肽酶/內(nèi)切型蛋白酶復(fù)合酶、蛋白酶/肽酶復(fù)合酶。內(nèi)切型蛋白酶例如可舉出凝乳酶(EC 3.4.23.4， Maxiren, modified yeast Kluyveromyces lactis ^ !, GIST-BROCADES N. V.)
白酶(Alcalase)R(Bacillus licheniformis 來源，Novo Nordisk 公司)、益瑞蛋白酶 (esperase) (B. Ientus jfeiJI, Novo Nordisk ^W])、巾個生胃白8| (Neutrase)R(B. subtilis 來源，Novo Nordisk公司)、復(fù)合蛋白酶(Protamex)(細(xì)菌來源，Novo Nordisk公司)、 PTN6.0S (豬胰臟胰蛋白酶，Novo Nordisk公司)等，作為外切型肽酶/內(nèi)切型蛋白酶復(fù)合醇例如可舉出風(fēng)味蛋白醇(Flavourzyme)(米曲霄(Aspergillus oryzae)來源，Novo Nordisk公司)等。另外，作為內(nèi)切型蛋白酶例如可舉出胰蛋白酶(CAS No. 9002-07-7， EC 3. 4. 21. 4，牛胰臟來源，Product No. T8802, SIGMA)、胃蛋白酶(CAS No. 9001-75-6， EC 3.4.4. 1，豬胃粘膜來源，SIGMA)、糜蛋白酶(Chymotrypsin) (Novo Nordisk 公司， BEHRINGER公司)、蛋白酶N “Amano”G(枯草桿菌(Bacillus subtilis)來源；天野酶公司)、Bioplase (枯草桿菌來源；Nagase Biochemicals 公司)、PapainW_40 (天野酶公司)， 作為外切型蛋白酶可舉出胰羧肽酶、小腸黏膜紋狀緣的氨肽酶等。并且，作為蛋白酶/肽酶復(fù)合酶例如可使用蛋白酶A“AmanVG(米曲霉來源；天野酶公司)、鮮味強(qiáng)化酶(Umamizyme) G(肽酶及蛋白酶，米曲霉來源；天野酶公司)。酶的來源并不限定于上述的記載，可來源于動物、植物、微生物的任一種，優(yōu)選米曲霉來源酶。這些酶并不意味著限定于商品名、來源、 制造廠家等。在本發(fā)明的實(shí)施中，酶可以是1種或組合2種以上。作為優(yōu)選例可舉出蛋白酶A “Aman0”G(米曲霉來源；天野酶公司)，但并不被該例所限定。另外，組合使用上述的酶時，各自的酶反應(yīng)可以是同時進(jìn)行，也可以分別進(jìn)行。該酶的使用量只要使用能將乳制品中的蛋白質(zhì)分解的量即可，優(yōu)選相對于乳制品100質(zhì)量份，為0. 01 10質(zhì)量份，更優(yōu)選為 0. 1 10質(zhì)量份。上述乳制品的蛋白質(zhì)分解酶處理物的制造方法為，向乳制品添加蛋白質(zhì)分解酶， 進(jìn)行加溫處理，分解乳制品中的蛋白質(zhì)。酶解開始時的PH、酶解時間、酶反應(yīng)溫度無特別限定，只要能得到本發(fā)明產(chǎn)品即可加溫溫度為只要是蛋白質(zhì)分解酶活化的溫度即可，優(yōu)選20 60°C，更優(yōu)選40 600C，進(jìn)一步優(yōu)選為40 50°C。加溫時間無特別限定，優(yōu)選1 10小時，更優(yōu)選3 8小時。對于此時的pH(25°C )沒有特別限定，優(yōu)選2 8，更優(yōu)選5 8。作為調(diào)整pH的緩沖劑可舉出碳酸、醋酸、檸檬酸、富馬酸、蘋果酸、乳酸、葡萄糖酸、酒石酸等的有機(jī)酸鹽， 磷酸、鹽酸、硫酸等的無機(jī)鹽，氫氧化鈉等氫氧化物，氨或氨水等。這些可以單獨(dú)使用或組合 2種以上使用。作為上述乳制品的蛋白質(zhì)分解酶分解物的制造方法，下面舉一個例子。將脫脂乳粉以成為3 6% (w/w)以及乳蛋白3 6% (w/w)的濃度用水進(jìn)行溶解或懸浮而調(diào)制溶液，相對于乳制品100質(zhì)量份，向該溶液添加0. 25 5質(zhì)量份的蛋白酶， 調(diào)制混合液。在40 50°C、5 7小時、pH6 8的條件下對該混合溶液進(jìn)行乳制品的蛋白質(zhì)的分解，可獲得乳制品的蛋白酶處理物(蛋白質(zhì)分解酶分解物)。另外，將乳清粉(10w/w% )及蛋白酶Amano A"Amano"G(0.、天野酶公司) 溶解于水，在47°C (pH6. 6)下進(jìn)行2小時的酶分解，其后，通過85°C下加熱10分鐘而使酶失活，可獲得乳制品的蛋白質(zhì)分解酶分解物。但并不局限于該例。本發(fā)明所使用的培養(yǎng)基中，除了上述乳制品的蛋白質(zhì)分解酶處理物以外，還可以適當(dāng)添加胰酶解酪蛋白、植物蛋白胨、酵母提取物、糖類等的任意成分，其中優(yōu)選至少添加酵母提取物，該酵母的使用量為，相對于乳制品100質(zhì)量份，優(yōu)選0. 1 10質(zhì)量份，更優(yōu)選 0. 5 10質(zhì)量份。作為糖類可使用乳糖或其乳糖酶處理物、葡萄糖、果糖、蔗糖、或者糖廢液，其中優(yōu)選乳糖。可以含有乳清礦物質(zhì)等的礦物質(zhì)類等。作為這些任意成分可以使用市售產(chǎn)品，或者還可以使用大量含有它們的食品。作為本發(fā)明所使用的培養(yǎng)基的例子，可舉出將培養(yǎng)基量的3% (w/w)的脫脂乳粉 (明治乳業(yè))、3.4% (w/w)的Milk Protein Concent 大鼠 e (MPC =Murray Goulburn)、0· 25% (w/w)的蛋白酶(蛋白酶A“Amano”G，天野酶公司)溶解于適量的離子交換水中，對脫脂乳粉及MPC中的蛋白質(zhì)進(jìn)行47°C、6小時的酶分解，分解后添加0.5% (w/w)的啤酒酵母提取物(P2G，朝日食品與健康株式會社)，調(diào)整為pH6. 8 6. 9之后，進(jìn)行121°C、15分鐘的殺菌而獲取的培養(yǎng)基。其中，酶分解時的PH是用碳酸鉀溶液調(diào)整為6. 6 7. 0。另外，還可以舉出將乳清粉(10w/w% )及蛋白酶Amano A "Amano"G(0. 07w/w%, 天野酶公司)溶解于水，進(jìn)行47°C (pH6. 6)、2小時的酶分解，其后，通過進(jìn)行85°C、10分鐘的加熱使酶失活，然后添加啤酒酵母提取物(0. 10w/w%、朝日食品與健康株式會社)和硫酸銨(0.27w/w%)，pH調(diào)整為6.7后，進(jìn)行1211、7分鐘的殺菌而獲取的培養(yǎng)基。但是并不局限于該例。本發(fā)明中，以后將以鮮奶、濃縮奶、全乳粉、脫脂乳、脫脂乳粉、乳蛋白(MPC(milk protein concentrate))、酪蛋白、濃縮乳清及乳清粉等來源于乳蛋白的物質(zhì)作為營養(yǎng)源使用的丙酸桿菌發(fā)酵物稱為丙酸桿菌乳蛋白質(zhì)發(fā)酵物。并且，以后將以乳清、WPC或WPI等乳清來源的物質(zhì)作為營養(yǎng)源的丙酸桿菌發(fā)酵物稱為丙酸桿菌乳清發(fā)酵物。作為本發(fā)明的培養(yǎng)方法可使用公知的各種需氧或厭氧性培養(yǎng)方法，但是，從大量生產(chǎn)的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選利用液體培養(yǎng)基的需氧或厭氧培養(yǎng)法。并且，從提高丙酸桿菌發(fā)酵物的生產(chǎn)效率的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選通過厭氧條件下進(jìn)行的預(yù)培養(yǎng)先增加丙酸桿菌的菌體數(shù)之后，進(jìn)行厭氧或需氧條件下的主培養(yǎng)(main culture)0從丙酸桿菌為厭氧性的觀點(diǎn)出發(fā)，優(yōu)選使用厭氧性培養(yǎng)法，更優(yōu)選為使用厭氧培養(yǎng)法之后繼續(xù)采用需氧培養(yǎng)法。在厭氧培養(yǎng)法中，培養(yǎng)過程的培養(yǎng)溫度優(yōu)選為20 40°C，更優(yōu)選30 40°C。并且，此時的培養(yǎng)基PH優(yōu)選中性 微酸性，具體為優(yōu)選調(diào)整成5. 0 8. 0，更優(yōu)選為6. 0 7. 0，進(jìn)一步優(yōu)選為6. 2 6. 8。該培養(yǎng)的時間優(yōu)選為1 12天，更優(yōu)選為5 12天。在需氧培養(yǎng)法中，培養(yǎng)過程的培養(yǎng)溫度優(yōu)選為20 40°C，更優(yōu)選為30 40°C。并且，此時的培養(yǎng)基PH優(yōu)選為中性 微酸性，具體為優(yōu)選調(diào)整成5. 0 8. 0，更優(yōu)選為6. 0 7. 0，進(jìn)一步優(yōu)選為6. 2 6. 8。該培養(yǎng)的時間優(yōu)選為1 10天，更優(yōu)選為3 7天。作為本發(fā)明的有效成分的丙酸桿菌發(fā)酵物，是使用上述培養(yǎng)基通過上述培養(yǎng)方法培養(yǎng)丙酸桿菌而獲得的，包含丙酸桿菌和培養(yǎng)物兩者。可以直接使用所得的丙酸桿菌發(fā)酵物，也可以適當(dāng)進(jìn)行濃縮、稀釋、干燥等。此時，可通過添加抗氧化劑而防止所生成的DHNA變成2_氨基_3_羧基_1，4_萘酉昆(2_amino_3_carboxy_l，4-naphthoquinone (ACNQ))。在此，作為抗氧化劑可使用抗壞血酸或其鹽，抗壞血酸酯，異抗壞血酸等，特別優(yōu)選抗壞血酸或其鹽。作為該鹽可舉出鈉、鉀等的堿金屬鹽；鈣、鎂等的堿土金屬鹽；氨鹽等。抗氧化劑的含量優(yōu)選在丙酸桿菌發(fā)酵物中為0. 001 10質(zhì)量％，更優(yōu)選0. 01 5質(zhì)量％，特別優(yōu)選0. 04 3質(zhì)量％。另外，該發(fā)酵物中的丙酸桿菌，可以是活菌、死菌或其粉碎物的任一個。此時，在該發(fā)酵物ImL中，優(yōu)選含有1 9 X IOltlCfu的丙酸桿菌，更優(yōu)選含有2 6X 101(lCfu。或者，在該發(fā)酵物ImL中，以干燥質(zhì)量換算，優(yōu)選含有50 500mg的丙酸桿菌， 更優(yōu)選含有100 300mg。下面，舉例本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物制造法的一個例子。將經(jīng)預(yù)培養(yǎng)的含丙酸桿菌培養(yǎng)液接種到培養(yǎng)液(1 3L)之后，進(jìn)行主培養(yǎng)。在30 40°C的培養(yǎng)中，以0. 1 lL/min向培養(yǎng)液通氮?dú)猓瑪嚢杷俣?0 200rpm 下進(jìn)行了 140 160小時的厭氧培養(yǎng)。此時，也可以在丙酸桿菌接種后培養(yǎng)1 2天之后， 以0. 5 20mL/h連續(xù)添加作為任意培養(yǎng)基組分的糖類。并且，優(yōu)選繼上述厭氧培養(yǎng)進(jìn)行需氧培養(yǎng)，此時，將氮?dú)鈸Q成氧氣同樣通氣，進(jìn)行110 130小時的需氧培養(yǎng)。如此培養(yǎng)丙酸桿菌得到丙酸桿菌的培養(yǎng)液，并向該培養(yǎng)液中添加抗氧化劑，就可以作為丙酸桿菌發(fā)酵物使用。另外，作為本發(fā)明有效成分的丙酸桿菌發(fā)酵物，也可以通過如國際公開第 03/016544號小冊子等中記載的公知制造法來制造。本說明書中，“丙酸桿菌發(fā)酵物”包括， 通過丙酸桿菌的發(fā)酵而得的培養(yǎng)物自身、向培養(yǎng)物添加了抗氧化劑而得的物質(zhì)、以及它們的處理物，例如，將培養(yǎng)物進(jìn)行過濾或除菌而得的培養(yǎng)濾液、培養(yǎng)上清液、對該培養(yǎng)濾液等通過蒸發(fā)器等進(jìn)行濃縮而得的濃縮物、糊化物、稀釋物或(凍結(jié))干燥物。并且，為了去除丙酸桿菌發(fā)酵物的雜質(zhì)或濃縮有效成分，可對如上所得的丙酸桿菌發(fā)酵物，用活性炭、離子交換樹脂等吸附層析等進(jìn)行純化。還可以將丙酸桿菌發(fā)酵物制成用溶劑稀釋的可溶部分或不溶部分。作為溶劑可使用水、通常用的溶劑，例如將醇類、烴類、 有機(jī)酸、有機(jī)堿、無機(jī)酸、無機(jī)堿、超臨界流體等單獨(dú)或多種組合使用。本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物，如后述試驗(yàn)例1所示，可以減輕因螨、化學(xué)物質(zhì)引起的過敏癥狀等，所以可作為抑制鼻炎、結(jié)膜炎、支氣管哮喘或特應(yīng)性皮炎的抗過敏劑使用。特應(yīng)性皮炎是免疫介導(dǎo)的皮膚炎癥，指伴隨慢性瘙癢的皮膚表層性炎癥。特應(yīng)性皮炎有IgE 介導(dǎo)型(外因型)還有無IgE介導(dǎo)型(內(nèi)因型)。作為特應(yīng)性皮炎的環(huán)境因素有食物(牛奶、蛋、小麥、花生、魚等)、空氣中的變應(yīng)原(螨、霉、頭皮屑等)等。另外，特應(yīng)性皮炎的發(fā)病也提示有遺傳因素(福島雅典總監(jiān)修，>>々7 二第18版日語版、日經(jīng)BP社發(fā)行，pp. 999(2006)) ο另外，如后述試驗(yàn)例3所示，本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物，提高角質(zhì)層水分量、肌理記分，所以作為干燥皮膚狀態(tài)的改善劑，即作為皮膚粗糙預(yù)防、改善劑也有用。并且，作為特應(yīng)性皮炎的治療方法之一，有對干燥的皮膚進(jìn)行保濕，改善皮膚狀態(tài)的方法，所以該皮膚粗糙預(yù)防、改善劑也對特應(yīng)性皮炎的治療有用，因而也可作為抗過敏劑使用。在此，所謂“皮膚粗糙”是指角質(zhì)層水分量減少而皮膚表面干燥的情況、肌理變粗糙的情況。并且，本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物也可作為各種制劑使用，也可以在抗過敏劑、皮膚粗糙預(yù)防、改善劑等的制造中使用。該抗過敏劑等可以通過飲料食品或醫(yī)藥品的任一形態(tài)利用。例如，通過作為醫(yī)藥直接給藥，或者作為特定保健用食品等的特用食品、營養(yǎng)功能食品、補(bǔ)給品直接經(jīng)口攝取， 或添加于各種食品(牛奶、發(fā)酵奶、酸奶、奶酪、面包、餅干、薄脆餅干、比薩餅外殼、配制乳粉、流質(zhì)食品、病人用食品、營養(yǎng)食品、冷凍食品、加工食品及其他的市售食品及其他)將其攝取從而進(jìn)行利用。也可以通過管飼營養(yǎng)、腸內(nèi)營養(yǎng)等其他方式攝取。含有本發(fā)明丙酸桿菌發(fā)酵物的食品，可以使用水、蛋白質(zhì)、糖類、脂質(zhì)、維生素類、 礦物質(zhì)類、有機(jī)酸、有機(jī)堿、果汁、調(diào)味料類等作為主要成分。作為蛋白質(zhì)例如可舉出全脂乳粉、脫脂乳粉、部分脫脂乳分、酪蛋白、乳清粉、乳清蛋白、乳清蛋白濃縮物、乳清蛋白分離物、α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、乳鐵蛋白、大豆蛋白、雞蛋蛋白、肉蛋白等的動植物性蛋白質(zhì)、它們的分解物；黃油、乳清礦物質(zhì)、奶油、乳清、非蛋白氮、唾液酸、磷脂、乳糖等的各種乳來源成分等。也可以包含酪蛋白磷酸肽、精氨酸、賴氨酸等的肽、氨基酸。作為糖類，例如糖類、加工淀粉(除了糊精以外、可溶性淀粉、英國淀粉(Britishstarch)、氧化淀粉、淀粉酯、淀粉醚等)、食物纖維等。作為脂質(zhì)例如可舉出豬油、魚油等，它們的分離油、加氫油、酯交換油等的動物性油脂；棕櫚油、紅花油、玉米油、菜籽油、椰子油、 它們的分離油、加氫油、酯交換油等的植物性油脂等。作為維生素類例如可舉出維生素A、胡蘿卜素類、維生素B族、維生素C、維生素D 族、維生素E、維生素K族、維生素P、維生素Q、尼亞新(niacin)、尼克酸、泛酸、生物素、肌醇、膽堿、葉酸等。作為礦物質(zhì)類例如可舉出鈣、鉀、鎂、鈉、銅、鐵、錳、鋅、硒等。作為有機(jī)酸例如可舉出蘋果酸、檸檬酸、乳酸、酒石酸、異抗壞血酸等。這些成分可以組合2種以上使用，也可以使用合成品及/或大量含有它們的食品。作為食品的形態(tài)，固體和液體均可。也可以是凝膠狀。另外，使用本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物作為醫(yī)藥品時，能以各種形態(tài)給藥。例如可舉出通過片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、糖漿等的經(jīng)口給藥，也可以加工成注射劑、液劑等的制劑，通過經(jīng)管、經(jīng)腸等其他的給藥方式給藥。這些各種制劑可通過一般方法，主劑中采用賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、矯味·矯臭劑、助溶劑、懸浮劑、成膜劑等的通常可使用的已知輔料進(jìn)行制劑化。進(jìn)而可以添加適量的維生素、礦物質(zhì)、有機(jī)酸、糖類、氨基酸、肽類等。使用該丙酸桿菌發(fā)酵物時，將丙酸桿菌發(fā)酵物換算成干燥質(zhì)量，優(yōu)選人體重的每 Ikg的1天的攝取量為10 500mg，更優(yōu)選為50 200mg。另外，換算成菌體數(shù)，優(yōu)選人體重的每Ikg的1天的攝取量為IO8 IO12Cfu,更優(yōu)選為IO9 10"CfU。另外，也可以與以前已知的具有抗過敏作用或預(yù)防、改善皮膚粗糙作用的醫(yī)藥品、食品并用。實(shí)施例制造例1 丙酸桿菌發(fā)酵物的制造方法1.材料< 菌株 >費(fèi)氏丙酸桿菌ET-3株(FERM BP-8115株)〈預(yù)培養(yǎng)用培養(yǎng)基〉將培養(yǎng)基量的10% (w/w)的乳清粉(明治乳業(yè))和0. 07% (w/w)的蛋白酶(蛋白酶A "Amano“G 米曲霉來源天野酶公司)溶解于適量的離子交換水，對乳清粉中的蛋白質(zhì)進(jìn)行47°C、3小時的酶分解，分解后添加0.1% (w/w)的酵母提取物(P2G:朝日食物與健康株式會社)，PH調(diào)整為6. 8 6. 9之后，進(jìn)行了 121°C、15分鐘的殺菌。其中，酶分解時的PH是用碳酸鉀溶液調(diào)整為6. 6 7. 0。<主培養(yǎng)用培養(yǎng)基>將培養(yǎng)基量的3% (w/w)的脫脂乳粉(明治乳業(yè))>3.4% (w/w)的Milk Protein Concent 大鼠 e (MPC =Murray Goulburn)和 0. 25 % 的蛋白酶(蛋白酶 A "Amano ” G)，溶解于適量的離子交換水，對脫脂乳粉及MPC的蛋白質(zhì)進(jìn)行47°C、6小時的酶分解，分解后添加 0.5%的酵母提取物( 26)，？!1調(diào)整為6.8 6.9之后，進(jìn)行了 121°C、15分鐘的殺菌。其中，酶分解時的pH為6. 6 7. 0，用碳酸鉀溶液調(diào)整。2.制造法<預(yù)培養(yǎng)>向預(yù)培養(yǎng)用培養(yǎng)基IOOmL接種ET-3株凍結(jié)菌(_80°C保存)lmL，實(shí)施37°C、48小時的厭氧下的靜置培養(yǎng)，以該培養(yǎng)液作為主培養(yǎng)的起子(starter)。
〈主培養(yǎng)〉向主培養(yǎng)用培養(yǎng)基2000mL接種20mL的預(yù)培養(yǎng)液，開始主培養(yǎng)。將培養(yǎng)溫度調(diào)整為33°C，pH用碳酸鉀水溶液調(diào)整為6. 5。通氣是以0. 4L/min通氮，攪拌速度為150rpm。從培養(yǎng)開始72小時后，以0. 90mL/h，經(jīng)192小時流入添加1. 5M的乳糖溶液(已進(jìn)行121°C、 15分鐘的殺菌)，流入添加結(jié)束后將通氣從氮換成氧，改為需氧培養(yǎng)，將需氧培養(yǎng)繼續(xù)120 小時結(jié)束培養(yǎng)，得到含有丙酸桿菌的培養(yǎng)液。培養(yǎng)結(jié)束后，為了防止因丙酸桿菌生成的DHNA變成ACNQ，向培養(yǎng)液每IOOOmL當(dāng)中添加抗壞血酸鈉5g，以使抗壞血酸共存于發(fā)酵物中，得到丙酸桿菌發(fā)酵物。上述發(fā)酵物的制造法是根據(jù)古市等的方法(Furuichi et al,Enhancement of 1， 4-dihydroxy-2-naphthoic acid production by Propionibacterium freudenreichii ET-3 fed-batch culture. Appl Environ Microbiol. 2007 ；73 (10) :3137-43.)進(jìn)行的。在上述操作之后，丙酸桿菌發(fā)酵物0. 5mL中所含的丙酸桿菌為2. 43X 101(lCfu。上述操作之后，通過下述HPLC分析，作為培養(yǎng)液所含物質(zhì)確定了 1，4_ 二羥基-2-萘甲酸(l，4-dihydroxy-2-naphthoic acid (DHNA)),培養(yǎng)液每 IL 中為 0. 34mM(68mg/L)，幾乎未發(fā)現(xiàn) 2-氨基-3-羧基-1，4-萘醌(2-amino-3_carboxy-l， 4-naphthoquinone (ACNQ))。<HPLC 分析 >柱Capcell pak C18 SG120、填充劑粒徑5 μ m、內(nèi)徑4. 6謹(jǐn)、長度250謹(jǐn)(資生堂公司)流動相乙腈甲醇水醋酸=250 100 900 0. 6 (用5 %氨水調(diào)整為 ρΗ5· 6)流速lmL/min注入量10μ L檢測器UV270nm<HPLC樣品的調(diào)制法>培養(yǎng)液ImL中分別添加2. 5mL的丙酮和乙酸乙酯混合后，以2000xg進(jìn)行5分鐘的離心分離，將其上清液用膜過濾器過濾。試驗(yàn)例1 特應(yīng)性皮炎的抑制試驗(yàn)(特應(yīng)性皮炎的動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?(1)概要購買4周齡的NC/Nga雌小鼠(日本SLC公司)，分成以下4組。即，群分成皮炎激發(fā)組(蒸餾水給藥組(n = 7)[蒸餾水]、作為比較例的液體培養(yǎng)基(以下，也稱為培養(yǎng)基)給藥組(n = 7)[培養(yǎng)基]和丙酸桿菌發(fā)酵物(液體)給藥組(n = 7)[丙酸桿菌發(fā)酵物])、以及皮炎未激發(fā)組(n = 7)[未激發(fā)]之后，將各種試料在試驗(yàn)期間中(7天到27天) 連日經(jīng)經(jīng)口給藥(1日0.5mL/小鼠)。在各種試料中，丙酸桿菌發(fā)酵物是用上述制造例1中所得物(含有68mg/L的 DHNA、以及4. 86 X 101(lCfu/ml的丙酸桿菌)，液體培養(yǎng)基使用上述制造例1中制造的未接種丙酸桿菌的、已進(jìn)行殺菌的主培養(yǎng)用培養(yǎng)基。從經(jīng)口給藥開始后第7天(dayO)起，通過后述方法對皮炎激發(fā)組激發(fā)皮炎，癥狀的變化進(jìn)行記分化。并且，皮炎激發(fā)開始后的14、21、觀天(14、21、觀天)采血清，通過ELISA法測定了血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A :SAA)和IgE濃度。SAA濃度是用 Bio Source公司的ELISA kit測定的。測定遵從所附使用說明書。IgE濃度的測定是用 Pharmingen公司制的抗體，部分改變Wiarmingen公司推薦的規(guī)程測定的。(2)螨破碎物溶液的制作將屋塵螨的螨體(Mite-Dp，LSL公司制)用無水醚脫脂后，添加蒸餾水進(jìn)行了超聲波破碎。接著離心分離水溶性部分，凍干后，用蒸餾水調(diào)制成蛋白質(zhì)濃度4. 5mg/ml (BSA換算，以BioRAD公司的DC protein assay測定)后使用。(3)皮炎的激發(fā)對海野等的方法(海野哲史等，r ^ ￥- 50 :1152-1162,2001)進(jìn)行了改變。將皮炎激發(fā)部位(頭部、耳廓部及頸部)用理發(fā)推剪剃毛后，用對全小鼠的皮炎激發(fā)部位涂布 20次的4% SDS水溶液(涂布量大約相當(dāng)于60 μ L)。SDS水溶液干燥后，分別向皮炎未激發(fā)組涂布蒸餾水，向皮炎激發(fā)組涂布螨破碎物溶液，同樣進(jìn)行20次。通過1日1套每天反復(fù)上述操作而激發(fā)皮炎。G) IgE 的測定向96孔板以2 μ g/mL添加一抗用抗IgE抗體(Pharmingen公司制)，37°C下靜置1小時。以0. 05 %的Tween20/PBS(PBS-Tween)清洗后，添加1 % BSA/PBS,室溫下靜置30分鐘。PBS-Tween清洗后，添加血清樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用IgE(Pharmingen公司制)，室溫下靜置30分鐘。PBS-Tween清洗后，以0. 5 μ g/mL添加二抗用的生物素-抗 IgE抗體(Pharmingen公司制)，室溫下靜置1小時。用PBS-Tween清洗后，添加鏈霉親和素-HRP (Pharmingen公司制)，室溫下靜置30分鐘。用PBS-Tween清洗后，添加 TMB+Substrate Chromogen(DAK0公司制)，開始顯色反應(yīng)。顯色反應(yīng)后，添加IN硫酸，用酶標(biāo)儀測定在450nm的吸光度，計算了血清中的IgE濃度。(5)結(jié)果圖1中表示皮炎癥狀記分的變化。記分化是對于1)形成乾皮·痂皮，幻皮膚發(fā)紅·出血，幻組織脫落·擦傷，4)浮腫，幻搔癢動作的5項，以0(無癥狀)、1(輕度)、2(中間度)、3(重度)四等級進(jìn)行評價，算出各小鼠的各記分的總和。其結(jié)果，關(guān)于癥狀記分，在丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組中，與蒸餾水給藥組相比顯著地變?yōu)榈椭?圖1)。另一方面，在培養(yǎng)基給藥組中雖然也變?yōu)榈椭担c丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組相比仍為高值。關(guān)于血清中的總IgE，發(fā)現(xiàn)在14天上，與蒸餾水給藥組相比，丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組中的IgE濃度顯著低(圖幻。另一方面，與蒸餾水給藥組相比，培養(yǎng)基給藥組中也較低， 但未能確定顯著差異。關(guān)于SAA，發(fā)現(xiàn)在14天上，與蒸餾水給藥組相比，丙酸桿菌發(fā)酵物(上述制造例1 的制取物)給藥組中顯著低(圖幻。另一方面，在培養(yǎng)基給藥組中雖然低于蒸餾水給藥組， 但未能確定顯著差異。反之，在21天上，丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組中雖然低于蒸餾水給藥組， 但未能確定顯著差異，而在培養(yǎng)基給藥組中顯著低于蒸餾水給藥組。在觀天上，丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組和培養(yǎng)基給藥組的兩者均比蒸餾水給藥組顯著低。由上可知，本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物，對特應(yīng)性皮炎的發(fā)病抑制效果高。試驗(yàn)例2 被動皮膚過敏反應(yīng)(passive cutaneous anaphylaxis :PCA反應(yīng))的抑制試驗(yàn)(急性過敏反應(yīng)的動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?
(1)概要將7周齡、雄性SD大鼠預(yù)備飼養(yǎng)后，以體重沒有差別的方式分成以下4組。例數(shù)為7或8。1組蒸餾水給藥組，2組丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組，3組培養(yǎng)基給藥組，4組富馬酸酮替芬(PCA反應(yīng)的抑制試劑，和光純藥公司制)給藥組。各大鼠的背部用理發(fā)推剪剃毛后，在此設(shè)置了 PCA反應(yīng)激發(fā)部位和PCA反應(yīng)未激發(fā)部位。分別在上述PCA反應(yīng)激發(fā)部位經(jīng)皮內(nèi)給藥抗DNP-IgE抗體液(25ng/Site，ICN公司制)，在上述PCA反應(yīng)未激發(fā)部位經(jīng)皮內(nèi)給藥生理食鹽水。各組所使用的各種試樣，與試驗(yàn)例1相同。IgE抗體或生理食鹽水給藥M小時后，為各組靜脈給藥作為抗原的結(jié)合了 DNP的 BSA(DNP-BSA 2,4-dinitrophenylated Bovine Serum Albumin) (lmg/大鼠，LSL 公司制) 和埃文斯藍(lán)(5mg/大鼠，和光純藥公司制)，激發(fā)PCA反應(yīng)。丙酸桿菌發(fā)酵物、培養(yǎng)基或蒸餾水分別在PCA反應(yīng)激發(fā)前的1、3、5小時經(jīng)口給藥10mL/kg(以固態(tài)成分換算1. 7g/kg)， 另外，富馬酸酮替芬是在PCA反應(yīng)激發(fā)前的1小時經(jīng)口給藥10mg/kg(3、5小時前給藥蒸餾水)。PCA反應(yīng)激發(fā)30分鐘后從大鼠取背部皮膚，用IN氫氧化鉀處理后，以丙酮和0. 6N磷酸混液萃取埃文斯藍(lán)，從620nm的吸光度計算向皮膚漏出的埃文斯藍(lán)的量。(2)結(jié)果圖4表示埃文斯藍(lán)的漏出量。可知與蒸餾水給藥組的PCA反應(yīng)激發(fā)部位[蒸餾水] 相比，丙酸桿菌發(fā)酵物給藥組的PCA反應(yīng)激發(fā)部位[丙酸桿菌發(fā)酵物]中顯著降低(圖4)。 另一方面，在培養(yǎng)基給藥組的PCA反應(yīng)激發(fā)部位[培養(yǎng)基]中雖然也降低，但未能確定顯著差異。由上可知本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物，對PCA反應(yīng)的抑制此效果高。制造例2 丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的制造方法1.材料〈菌株〉費(fèi)氏丙酸桿菌ET-3株(FERM BP-8115株)<預(yù)培養(yǎng)用培養(yǎng)基及主培養(yǎng)用培養(yǎng)基>與制造例1的 < 預(yù)培養(yǎng)用培養(yǎng)基 > 的制作方法同樣，調(diào)制了預(yù)培養(yǎng)用培養(yǎng)基和主培養(yǎng)用培養(yǎng)基。2.制造方法〈預(yù)培養(yǎng)〉向預(yù)培養(yǎng)用培養(yǎng)基IOOmL接種ET-3株凍結(jié)菌(_80°C保存)lmL，實(shí)施37°C、48小時的厭氧下的靜置培養(yǎng)，以該培養(yǎng)液作為主培養(yǎng)的起子。〈主培養(yǎng)〉向主培養(yǎng)用培養(yǎng)基接種2%預(yù)培養(yǎng)液，開始主培養(yǎng)。在氮?dú)猸h(huán)境培養(yǎng)溫度33 37°C下，繼續(xù)培養(yǎng)66 96小時，得到含丙酸桿菌的培養(yǎng)液(丙酸桿菌乳清發(fā)酵物)。在試驗(yàn)例3的試驗(yàn)食物調(diào)制中，作為丙酸桿菌乳清發(fā)酵物使用該培養(yǎng)液本身。試驗(yàn)例3 以干燥皮膚的人為對象的臨床試驗(yàn)(1)試驗(yàn)的概要〈試驗(yàn)對象〉
具有干燥皮膚的20 39歲女性作為被試驗(yàn)者，實(shí)施了雙盲安慰劑對照試驗(yàn)。試驗(yàn)開始前，根據(jù)醫(yī)生觀察作出的皮膚狀況(干燥、脫屑、丘疹、粉刺、膿皰)，無偏差地將被試驗(yàn)者分組為3組。并且，本試驗(yàn)是遵守赫爾辛基宣言(2000年，愛丁堡大會修改)，基于倫理學(xué)原則實(shí)施的。〈試驗(yàn)食物〉設(shè)置了以下的3種類(試驗(yàn)食物A C)。使用了上述制造例2中所得的丙酸桿菌乳清發(fā)酵物。試驗(yàn)食物A 酸性飲料(安慰劑)[η = 30]水中添加了各種成分(果膠、乳酸、酸奶香精、維生素C、阿斯巴甜)而得到的物質(zhì)。不含乳成分及乳酸菌。試驗(yàn)食物B 含丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的酸性飲料(活性物1) [η = 28]向上述酸性飲料添加上述丙酸桿菌乳清發(fā)酵物1 ν/ν %而得到的物質(zhì)。不含非來源于丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的乳成分及乳酸菌。試驗(yàn)食物C 含有丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的酸奶飲料(活性物2) [η = 28]將市售的酸奶設(shè)為60ν/ν%，添加水、與添加于上述酸性飲料(安慰劑)相同濃度的各種成分、蔗糖及1^八％的上述丙酸桿菌乳清發(fā)酵物而得到的物質(zhì)。其中，試驗(yàn)食物B和試驗(yàn)食物C的120ml中包含的DHNA含量為13. 2 μ g。<試驗(yàn)食物的攝取時間及攝取方法>開始攝取試驗(yàn)食物的天 4周后為止的試驗(yàn)食物攝取期間，經(jīng)口攝取1天120ml 的試驗(yàn)食物。試驗(yàn)食物攝取期間，禁止了含試驗(yàn)食物以外的乳酸菌的食品(酸奶、發(fā)酵奶等)以及含低聚糖的食品的攝取、開始攝取新的補(bǔ)給品、開始新的美容目的治療藥的攝取與外用藥的使用、以及美容目的手術(shù)(化學(xué)換膚等)。(3)檢查項目在試驗(yàn)食物的攝取開始日的試驗(yàn)食物攝取前、和試驗(yàn)食物攝取開始4周后，實(shí)施了以下的檢查。角質(zhì)層水分量使用水分計 Corneometer CM825 (Courage+Khazaka electronic GmbH(德國)公司制)，對被試驗(yàn)者臉皮膚的角質(zhì)層水分量，以靜電容量值各測定2次，算出了平均值。肌理采用皮膚圖像分析儀(RoboSkin Analyzer) RSA-100 (Inforward 公司制)， 對被試驗(yàn)者臉皮膚紋理進(jìn)行記分化。在本發(fā)明中，將該記分值稱為肌理記分，肌理記分越高表示皮膚紋理越整齊的狀態(tài)。并且，關(guān)于試驗(yàn)食物的攝取前后的測定值，對組內(nèi)的配對檢驗(yàn)(paired t_test)、 和試驗(yàn)食物的攝取前后的測定值的變化量，通過3組間的多重比較檢驗(yàn)(Tukey-Kramei^i) 進(jìn)行了顯著差別鑒定。(4)結(jié)果結(jié)果如圖5及圖6所示。角質(zhì)層水分量、肌理記分的測定值均未能在試驗(yàn)食物A 酸性飲料(安慰劑)的攝取前后中確定顯著差別。與此相對，在試驗(yàn)食物B:含丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的酸性飲料(活性物1)、C 含丙酸桿菌乳清發(fā)酵物的酸奶飲料(活性物2)的攝取后，觀察到了顯著的角質(zhì)層水分量、肌理記分的測定值的上升。并且，關(guān)于試驗(yàn)食物的攝取前后的測定值的變化量，無論角質(zhì)層水分量還是肌理記分，試驗(yàn)食物B、試驗(yàn)食物C的攝取組均顯著大于試驗(yàn)食物A攝取組。 由以上的結(jié)果可知，本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物具有改善干燥皮膚的狀態(tài)的效果。 并且，可知與本發(fā)明的丙酸桿菌發(fā)酵物并用酸奶也能得到同樣的效果。
權(quán)利要求
1.一種皮膚粗糙預(yù)防、改善劑。其特征在于，以丙酸桿菌發(fā)酵物為有效成分。
2.如權(quán)利要求1所述的皮膚粗糙預(yù)防、改善劑，其中，所述發(fā)酵物是使用含乳制品的蛋白質(zhì)分解酶處理物的培養(yǎng)基而培養(yǎng)了丙酸桿菌的培養(yǎng)液。
3.如權(quán)利要求2所述的皮膚粗糙預(yù)防、改善劑，其中，乳制品選自脫脂乳粉、乳清粉以及乳蛋白中的一種以上。
4.如權(quán)利要求1所述的皮膚粗糙預(yù)防、改善劑，其中，皮膚粗糙是角質(zhì)層水分量減少而皮膚表面干燥的情況或者肌理變粗糙的情況。
5.如權(quán)利要求1所述的皮膚粗糙預(yù)防、改善劑，其中，對象者是干燥皮膚的人。
6.如權(quán)利要求1所述的皮膚粗糙預(yù)防、改善劑，其中，是增加角質(zhì)層水分量或者改善肌理的物質(zhì)。
7.如權(quán)利要求1所述的皮膚粗糙預(yù)防、改善劑，其中，丙酸桿菌是奶酪用丙酸桿菌。
8.如權(quán)利要求7所述的皮膚粗糙預(yù)防、改善劑，其中，奶酪用丙酸桿菌選自費(fèi)氏丙酸桿菌、特氏丙酸桿菌、產(chǎn)丙酸丙酸桿菌。
9.如權(quán)利要求8所述的皮膚粗糙預(yù)防、改善劑，其中，奶酪用丙酸桿菌是費(fèi)氏丙酸桿菌。
10.如權(quán)利要求1所述的皮膚粗糙預(yù)防、改善劑，其特征在于，所述皮膚粗糙預(yù)防、改善劑為經(jīng)口給藥用或經(jīng)口攝取用。
11.丙酸桿菌發(fā)酵物在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用。
12.如權(quán)利要求11所述的在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用，其中，所述發(fā)酵物是使用含乳制品的蛋白質(zhì)分解酶處理物的培養(yǎng)基而培養(yǎng)了丙酸桿菌的培養(yǎng)液。
13.如權(quán)利要求12所述的在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用，其中，乳制品是選自脫脂乳粉、乳清粉以及乳蛋白中的一種以上。
14.如權(quán)利要求11所述的在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用，其中，皮膚粗糙是角質(zhì)層水分量減少而皮膚表面干燥的情況或者肌理變粗糙的情況。
15.如權(quán)利要求11所述的在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用，其中，對象者是干燥皮膚的人。
16.如權(quán)利要求11所述的在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用，其中，增加角質(zhì)層水分量或者改善肌理。
17.如權(quán)利要求11所述的在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用，其中，丙酸桿菌是奶酪用丙酸桿菌。
18.如權(quán)利要求17所述的在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用，其中，奶酪用丙酸桿菌選自費(fèi)氏丙酸桿菌、特氏丙酸桿菌、產(chǎn)丙酸丙酸桿菌。
19.如權(quán)利要求18所述的在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用，其中，奶酪用丙酸桿菌是費(fèi)氏丙酸桿菌。
20.如權(quán)利要求11所述的在制造皮膚粗糙預(yù)防、改善劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述皮膚粗糙預(yù)防、改善劑為經(jīng)口給藥用或經(jīng)口攝取。
全文摘要
提供一種抗過敏劑。抗過敏劑以丙酸桿菌發(fā)酵物為有效成分。
文檔編號C12R1/01GK102488716SQ20111040233
公開日2012年6月13日 申請日期2009年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月29日
發(fā)明者伊藤裕之, 古市圭介, 折居直樹, 池上秀二, 狩野宏 申請人:株式會社明治