專利名稱：一種乙酰甲喹人工抗原及其制備的抗體的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種乙酰甲喹人工抗原及其制備的抗體。
背景技術：
喹噁啉類化合物是一類分子中均有喹噁啉-1，4- 二氧化物母核結構人工合成的抗菌藥，主要成員有喹乙醇(olaquindox, OLA)、卡巴氧(cabadox, CBX)、乙酰甲喹(mequindox,MEQ)和喹烯酮(quinocetone,QCT)等。由于能夠抑制多種革蘭 氏陽性菌和陰性菌，并且對畜、禽、魚類等具有明顯的促生長作用，喹噁啉類化合物被廣泛作為飼料添加劑應用。隨著研究的深入，發現喹噁啉類化合物有明顯的毒副作用，卡巴氧具有遺傳毒性和致癌嫌疑，喹乙醇有強的蓄積毒性和致突變性，因此國際上有關喹噁啉類化合物的最高殘留限量也有著非常嚴格的規定，我國出臺了相應法規來規范化喹噁啉類化合物的使用。我國禁止將卡巴氧作為飼料添加劑，喹乙醇只能用于仔豬的藥物飼料添加劑、嚴禁用于養禽生產。另外，國內外學者的研究及生產實踐表明乙酰甲喹毒性偏大、也不適于用作禽藥物飼料添加劑，喹烯酮雖然防病做生長效果好、無毒副作用，但是一種基因毒劑和生殖誘變齊U，有致突變、致畸和致癌性。目前，對于飼料中喹噁啉類化合物殘留的檢測方法研究較少。因此建立一個靈敏、快速、操作簡單，適合大量樣本篩查的喹噁啉類化合物檢測方法是具有重要的經濟意義和社會意義。

發明內容
本發明的目的是提供一種乙酰甲喹人工抗原及其制備的抗體。本發明提供了一種化合物，即式(I)所示化合物。式(I)所示化合物為將乙酰甲喹進行結構改造得到的化合物，既最大程度保留了乙酰甲喹的特征結構，又具有可以與載體蛋白發生偶聯的活性基團。本發明還保護式(I)所示化合物的制備方法，包括如下步驟將乙酰甲喹和羧甲基羥胺反應，獲得所述化合物。所述反應具體可在無水丙酮與N，N_ 二甲基甲酰胺的混合溶劑(無水丙酮與N，N-二甲基甲酰胺的體積比具體可為I : I)中進行。所述乙酰甲喹和所述羧甲基羥胺的摩爾比具體可為I : 1.5。本發明還保護一種乙酰甲喹人工抗原，為將式(I)所示化合物與載體蛋白偶聯得到的偶聯物。所述載體蛋白為牛血清白蛋白或卵清白蛋白。式(I)所示化合物與載體蛋白的偶聯比具體可為(8-10) I。所述偶聯比指的是摩爾比。式(I)所示化合物與所述載體蛋白具體可通過活性酯法偶聯。所述乙酰甲喹人工抗原如式(II)所示。所述乙酰甲喹人工抗原可以作為免疫原也可以作為包被原。將所述乙酰甲喹人工抗原免疫動物，可獲得高特異性的單克隆抗體和多克隆抗體，方法簡便、易行。將所述乙酰甲喹人工抗原包被酶標板，也可以用于喹噁啉類化合物抗血清的檢測。包被原與免疫原結構上的差異可以進一步提高檢測的靈敏度和特異性。
權利要求
1.式⑴所示化合物；
2.權利要求I所述化合物的制備方法，包括如下步驟將乙酰甲喹和羧甲基羥胺反應，獲得所述化合物。
3.權利要求I所述化合物與載體蛋白的偶聯物。
4.如權利要求3所述的偶聯物，其特征在于所述載體蛋白為牛血清白蛋白或卵清白蛋白。
5.權利要求3或4所述偶聯物在制備喹噁啉類化合物特異性抗體中的應用。
6.如權利要求5所述的應用，其特征在于所述抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。
7.以權利要求3或4所述偶聯物為免疫原制備得到的單克隆抗體。
8.抗乙酰甲喹單克隆抗體雜交瘤細胞1A10，它的保藏編號為CGMCCNo. 5780。
9.權利要求8所述雜交瘤細胞分泌的單克隆抗體。
10.權利要求3或4所述偶聯物，或，權利要求7或9所述單克隆抗體在檢測喹噁啉類化合物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種乙酰甲喹人工抗原及其制備的抗體。本發明提供了一種化合物，即式(I)所示化合物。式(I)所示化合物為將乙酰甲喹進行結構改造得到的化合物，既最大程度保留了乙酰甲喹的特征結構，又具有可以與載體蛋白發生偶聯的活性基團。本發明還保護一種乙酰甲喹人工抗原，為將式(I)所示化合物與載體蛋白歐聯得到的偶聯物。將所述乙酰甲喹人工抗原免疫動物，可獲得高特異性的單克隆抗體和多克隆抗體，方法簡便、易行。所述人工抗原可用于檢測喹噁啉類化合物。所述抗體可用于檢測喹噁啉類化合物。式(I)
文檔編號C12R1/91GK102617493SQ20121004221
公開日2012年8月1日 申請日期2012年2月22日 優先權日2012年2月22日
發明者丁雙陽, 史為民, 吳聰明, 夏曦, 張素霞, 江海洋, 沈建忠, 王戰輝 申請人:中國農業大學