專利名稱：一種嗜酸乳桿菌的規(guī)模化培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，屬于農(nóng)業(yè)種植肥料的領(lǐng)域，尤其是微生物制劑培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
嗜酸乳桿菌是乳酸菌家族中重要的一員，屬于乳桿菌屬的革蘭氏陽(yáng)性桿菌，廣泛存在于動(dòng)物的腸道中。嗜酸乳桿菌能分泌抗生物素類物質(zhì)(嗜酸乳菌素(acidolin)、嗜酸桿菌素(acidophilin)、乳酸菌素(Iaetocidon)),對(duì)腸道致病菌產(chǎn)生拮抗作用，具有調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、維護(hù)腸道健康和提高機(jī)體免疫力等功能，被認(rèn)為是最理想的替代抗生素的益生菌。此外，嗜酸乳桿菌具有極強(qiáng)的耐酸、耐鹽和耐膽汁能力，能在其它乳酸菌不能生長(zhǎng)的酸性、高鹽環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖，可以利用葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖進(jìn)行同型發(fā)酵，除產(chǎn)生DL型乳酸外，發(fā)酵代謝物中還包括細(xì)菌素、維生素、小肽等，能提高鈣、磷、鐵的利用率，促進(jìn)鐵和維生素D的吸收，減少膽固醇的吸收，具有增強(qiáng)消化吸收、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)的功效。嗜酸乳桿菌有復(fù)雜的營(yíng)養(yǎng)要求，比較難培養(yǎng)。目前國(guó)內(nèi)外所報(bào)道的嗜酸乳桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基主要為牛奶加葡萄糖、蛋白胨、酵母浸膏等或完全由葡萄糖、蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸出物再加上其他物質(zhì)組成，保持厭氧狀態(tài)培養(yǎng)。用普通的培養(yǎng)基，如只用牛奶加葡萄糖或蔗糖，培養(yǎng)效果較差，菌數(shù)較少；而蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸出物等原材料較昂貴，用這種方法生產(chǎn)嗜酸乳桿菌成本一般比較高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的，是為了克服傳統(tǒng)嗜酸乳桿菌培養(yǎng)方法存在的發(fā)酵規(guī)模小、成本高的缺點(diǎn)，提供一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法。本發(fā)明的目的主要通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，其特征在于包括如下步驟I)備好菌種，該菌種由黑曲霉孢子和嗜酸乳桿菌組成，黑曲霉孢子、嗜酸乳桿菌的重量比例為8 9I;將黑曲霉孢子和嗜酸乳桿菌分別存放；2)備好培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基由米糠、豆柏、NaCl和麩皮組成，各物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為米糠30 35 %、豆柏15 20%、NaCl 0. 8 I %和麩皮44 54. 2%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻；3)固體發(fā)酵，將培養(yǎng)基倒入固體發(fā)酵罐中，按培養(yǎng)基0. 5 1%。重量比例接入黑曲霉孢子，按培養(yǎng)基60% 70%重量比例加入水，相對(duì)濕度保持在50% 60%，不間斷供入過濾空氣，每小時(shí)換氣量為發(fā)酵罐體積的50% 60% ;發(fā)酵24小時(shí)后，按培養(yǎng)基1%重量比例接入嗜酸乳桿菌，保持相對(duì)濕度與供氣量不變，再培養(yǎng)48小時(shí)；4)產(chǎn)品分裝，將培養(yǎng)物從發(fā)酵罐中移出，通過50°C流化床干燥處理10小時(shí)，再粉碎后分裝得到成品。
本發(fā)明的目的還可以通過采取如下技術(shù)方案達(dá)到實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的一種技術(shù)改進(jìn)方案是步驟I)中，黑曲霉孢子的較佳含量可以為I X 1010個(gè)/克、嗜酸乳桿菌的較佳含量可以為I X 109個(gè)/克。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的一種技術(shù)改進(jìn)方案是步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量可以為米糠32%、豆柏17%、NaCl 0. 9%和麩皮50. 1%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的一種技術(shù)改進(jìn)方案是步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量可以為米糠30%、豆柏20%、NaCl 0. 8%和麩皮49. 2%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的一種技術(shù)改進(jìn)方案是步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量可以為米糠35%、豆柏15%、NaCl 1%和麩皮49%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻；實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的一種技術(shù)改進(jìn)方案是步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量可以為米糠30%、豆柏15%、NaCl 0. 8%和麩皮54. 2%,將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的一種技術(shù)改進(jìn)方案是步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量可以為米糠30%、豆柏15%、NaCl 0. 8%和麩皮54. 2%,將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。本發(fā)明具有如下有益效果I、本發(fā)明由于采取了經(jīng)申請(qǐng)人反復(fù)試驗(yàn)及驗(yàn)證的特定配比的組方，因此，可以較為理想的規(guī)模化培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)了工業(yè)化固體發(fā)酵，實(shí)現(xiàn)低成本、規(guī)?；囵B(yǎng)，具有成本低、生產(chǎn)效率高的有益效果，可以大大滿足市場(chǎng)需求。2、采用本發(fā)明所述方法培養(yǎng)出來的產(chǎn)品，可以用作畜禽動(dòng)物飼料添加劑，具有提高動(dòng)物采食量、調(diào)理腸道、預(yù)防腹瀉、加快生長(zhǎng)等功效。
具體實(shí)施例方式具體實(shí)施例I本實(shí)施例I所述嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，包括如下步驟I)備好菌種，該菌種由黑曲霉孢子和嗜酸乳桿菌組成，黑曲霉孢子、嗜酸乳桿菌的重量比例為8 9I;將黑曲霉孢子和嗜酸乳桿菌分別存放；2)備好培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基由米糠、豆柏、NaCl和麩皮組成，各物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為米糠32%、豆柏17%、NaCl 0. 9%和麩皮50. 1%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻；3)固體發(fā)酵，將培養(yǎng)基倒入固體發(fā)酵罐中，按培養(yǎng)基0. 5 1%。重量比例接入黑曲霉孢子，按培養(yǎng)基60% 70%重量比例加入水，相對(duì)濕度保持在50% 60%，不間斷供入過濾空氣，每小時(shí)換氣量為發(fā)酵罐體積的50% 60% ;發(fā)酵24小時(shí)后，按培養(yǎng)基1%重量比例接入嗜酸乳桿菌，保持相對(duì)濕度與供氣量不變，再培養(yǎng)48小時(shí)；4)產(chǎn)品分裝，將培養(yǎng)物從發(fā)酵罐中移出，通過50°C流化床干燥處理10小時(shí)，再粉碎后分裝得到成品。
本實(shí)施例中，步驟I)中，黑曲霉孢子的較佳含量可以為1X1010個(gè)/克、嗜酸乳桿菌的較佳含量可以為I X 109個(gè)/克。本實(shí)施例的應(yīng)用效果對(duì)20公斤仔豬應(yīng)用結(jié)果表明，在飼料中添加2%。本產(chǎn)品，連續(xù)使用I個(gè)月，與對(duì)照組相比，生長(zhǎng)速度提高12. 7%，飼料系數(shù)下降7. 9%，腹瀉發(fā)生率下降61. 3%。具體實(shí)施例2:
本實(shí)施例2的特點(diǎn)是步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量可以為米糠30%、豆柏20%、NaCl 0. 8%和麩皮49. 2%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。其余方法步驟同具體實(shí)施例I。具體實(shí)施例3 本實(shí)施例3的特點(diǎn)是步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量可以為米糠35%、豆柏15%、NaCl I %和麩皮49%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。其余方法步驟同具體實(shí)施例I。具體實(shí)施例4 本實(shí)施例4的特點(diǎn)是步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量可以為米糠30%、豆柏15%、NaCl 0.8%和麩皮54. 2%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。其余方法步驟同具體實(shí)施例I。具體實(shí)施例5 本實(shí)施例5的特點(diǎn)是步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量可以為米糠30%、豆柏15%、NaCl 0.8%和麩皮54. 2%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。其余方法步驟同具體實(shí)施例I。
權(quán)利要求
1.一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，其特征在于 1)備好菌種，該菌種由黑曲霉孢子和嗜酸乳桿菌組成，黑曲霉孢子、嗜酸乳桿菌的重量比例為8 9 I ;將黑曲霉孢子和嗜酸乳桿菌分別存放； 2)備好培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基由米糠、豆柏、NaCl和麩皮組成，各物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為米糠30 35 %、豆柏15 20%、NaCl 0. 8 I %和麩皮44 54. 2%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻； 3)固體發(fā)酵，將培養(yǎng)基倒入固體發(fā)酵罐中，按培養(yǎng)基0.5 1%。重量比例接入黑曲霉孢子，按培養(yǎng)基60 % 70 %重量比例加入水，相對(duì)濕度保持在50 % 60 %，不間斷供入過濾空氣，每小時(shí)換氣量為發(fā)酵罐體積的50% 60% ;發(fā)酵24小時(shí)后，按培養(yǎng)基I %重量比例接入嗜酸乳桿菌，保持相對(duì)濕度與供氣量不變，再培養(yǎng)48小時(shí)； 4)產(chǎn)品分裝，將培養(yǎng)物從發(fā)酵罐中移出，通過50°C流化床干燥處理10小時(shí)，再粉碎后分裝得到成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，其特征在于步驟I)中，黑曲霉孢子的較佳含量為I X 1010個(gè)/克、嗜酸乳桿菌的較佳含量為1X109個(gè)/克。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，其特征在于步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為米糠32%、豆柏17%, NaCl 0. 9 %和麩皮50. I %，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，其特征在于步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為米糠30%、豆柏20 %、NaCl 0. 8 %和麩皮49. 2 %，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。
5.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，其特征在于步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為米糠35%、豆柏15%, NaCl I %和麩皮49 %，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。
6.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，其特征在于步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為米糠30%、豆柏15%, NaCl 0. 8%和麩皮54. 2%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。
7.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，其特征在于步驟2)所述的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為米糠30%、豆柏15%, NaCl 0. 8%和麩皮54. 2%，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種嗜酸乳桿菌的規(guī)?；囵B(yǎng)方法，其特征在于1)備好菌種，該菌種由黑曲霉孢子和嗜酸乳桿菌組成，黑曲霉孢子、嗜酸乳桿菌的重量比為8～9∶1；2)備好培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基由米糠、豆粕、NaCl和麩皮組成，各物質(zhì)組份在培養(yǎng)基中的質(zhì)量百分含量為米糠30～35％、豆粕15～20％、NaCl 0.8～1％和麩皮44～54.2％，將各物質(zhì)組份混和后攪拌均勻；3)固體發(fā)酵，將培養(yǎng)基倒入固體發(fā)酵罐中，按培養(yǎng)基0.5～1‰重量比例接入黑曲霉孢子，按比例加入水，不間斷供入過濾空氣，發(fā)酵24小時(shí)后，按培養(yǎng)基1％重量比例接入嗜酸乳桿菌，保持相對(duì)濕度與供氣量不變，再培養(yǎng)48小時(shí)。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了工業(yè)化固體發(fā)酵，實(shí)現(xiàn)低成本、規(guī)?；囵B(yǎng)，具有成本低、生產(chǎn)效率高的有益效果。
文檔編號(hào)C12N1/20GK102618470SQ201210093090
公開日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月31日
發(fā)明者孫建新, 張金燕, 徐中文 申請(qǐng)人:廣東綠百多生物科技有限公司