專利名稱：一種酵母培養物在促進酸奶生產中的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及生物技術領域，尤其涉及ー種酵母培養物在促進酸奶生產中的應用。
背景技術：
酸奶生產所需的基本發酵時間長達16小吋，對于生產商來說，這是ー項耗時但必須的エ序。DMV International公司開發出一系列發酵增強劑，能大幅度地縮短酸奶發酵時間達50%。對于益生菌酸奶，它能増加益生菌總數及貯存時的存活率，明顯地減少了菌種的接種量，在為生產商節省成本的同時，更改進了ー產品的細滑質感。鑒于生產益生菌酸奶發酵劑中的菌種對其生長條件和營養素有特殊的要求，而這系列發酵增強劑以乳蛋白為原料，是專為益生菌提供所需營養素的基質。酵母培養物(yeast culture, YC)是指由酵母菌在特定エ藝條件下經充分發酵后所形成的微生態制品，主要包括酵母細胞代謝產物、經發酵后變異的培養基以及少量已無活性的酵母細胞。作為ー種生物活性添加剤，酵母培養物營養豐富、成分復雜，含有維生素、氨基酸、消化酶、有機酸、多糖以及未知的生長因子等。據相關報道，酵母培養物可有效改善動物胃腸道菌群，促進乳酸菌、纖維素菌等有益菌繁殖。故酵母培養物存在成為酸奶發酵增強劑的可能性。

發明內容
本發明的ー個目的是提供ー種酵母培養物的用途。本發明提供了ー種酵母培養物在制備促進酸奶生產的產品中的應用；所述酵母培養物是按照包括如下步驟的方法制備得到的將釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) CGMCC No. 2. 1882進行液體發酵后，收集發酵液，除去所述發酵液中的所述釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No. 2. 1882細胞得到的無菌液體，即得到所述酵母培養物。上述應用中，所述液體發酵在如下條件下進行20°C -50°C靜置培養30小時-60小吋。上述應用中，所述除去所述發酵液中的所述釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae) CGMCC No. 2. 1882細胞得到的無菌液體為將所述發酵液離心收集上清液，再將所述上清液過濾，收集濾液即為所述酵母培養物；所述離心為4000rpm離心5min,所述離心半徑為13. 5cm ；所述過濾采用截留分子量為O. 22 μ m的細菌過濾器。上述應用中，所述液體發酵所使用的發酵培養基由溶質I和溶劑組成，所述溶劑為水，所述溶質I由如下I)-3)的物質組成I)碳源，如下A)_C)中的任ー種A)葡萄糖和蔗糖；B)葡萄糖和糖蜜；
C)葡萄糖、蔗糖和糖蜜中的任一種；2)氮源，所述氮源為如下D) -F)中的任ー種D)酵母膏、蛋白胨和硫酸銨；E)酵母膏、蛋白胨和硫酸銨中的任兩種；F)酵母膏、蛋白胨和硫酸銨中的任ー種；3)無機鹽，所述無機鹽為 KH2PO4' MgSO4 · 7H20、MnSO4 · H2O, CaCl2, CuSO4 · 5H20、ZnSO4 · 7H20 和 FeSO4 · 4H20 ；所述碳源在所述發酵培養基中的總濃度為20_200g/L ； 在IL所述發酵培養基中，所述20_200g碳源具體為如下1)_7)I) IO-IOOg 葡萄糖和 IO-IOOg 蔗糖；2 ) 2O-2OOg 葡萄糖；3) IO-IOOg 葡萄糖和 IO-IOOg 糖蜜；4)20_200g 蔗糖；5)20_200g 糖蜜。所述氮源在所述發酵培養基中的總濃度為5_300g/L ；在IL所述發酵培養基中，所述5_300g氮源具體為如下1)_7)l)2g_100g 酵母膏、2g_100g 蛋白胨和 Ig-IOOg 硫酸銨；2) 2. 5-150g 酵母膏和 2. 5_150g 蛋白胨；3) 2. 5g-150g 酵母膏和 2. 5g_150g 硫酸銨；4) 2. 5g-150g 蛋白胨和 2. 5g_150g 硫酸銨；5)5g_300g 酵母膏；6) 5g_300g 蛋白胨；7)5g_300g 硫酸銨。所述無機鹽中的各組分在所述發酵培養基中的濃度分別為=KH2PO4O. lg/L-10g/L、MgS04.7H20 O. lg/L—10g/L,MnSO4 ·Η20 O. lg/L—4g/L、CaCl2 0. lg/L—4g/L、CuS04 ·5Η200. lg/L-4g/L、ZnSO4 · 7H20 0. lg/L_4g/L、FeSO4· 4H20 0.lg/L_4g/L ；所述發酵培養基的pH值為4· 0—6. 5ο上述應用中，所述液體發酵按照包括如下步驟的方法進行將所述釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) CGMCC No. 2. 1882接種于種子培養基中，20_50°C、100-200轉/分鐘振蕩培養18-40小吋，獲得種子液；再將所述種子液按照(1-30) 100的體積比接種于所述發酵培養基中按照所述液體發酵的條件進行發酵。上述應用中，所述種子培養基由溶質2和溶劑組成，所述溶劑為水，所述溶質2為葡萄糖、酵母粉、蛋白胨和MnSO4 · H2O,在所述種子培養基中各溶質的濃度分別為葡萄糖10g/L-40g/L、酵母粉 5g/L-40g/L、蛋白胨 10g/L_40g/L、MnSO4 · H2OO. lg/L_4g/L。 上述應用中，所述促進酸奶生產體現在縮短酸奶生產時間。本發明的另ー個目的是提供一種生產酸奶的方法。本發明提供的方法，包括如下步驟將嗜熱鏈球菌(Strep tococcusthermophilus) CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillus delbrueckiisubsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482和上述應用中的所述酵母培養物接種到牛奶中，發酵至凝固，即得到酸奶。上述嗜熱鏈球菌(Streptococcusthermophilus) CGMCC I. 2471 和德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 的集落形成單位數目比為I : I。上述牛奶購自北京郊區奶牛場，符合GB/T6914-1986 (生鮮牛乳收購標準)。按GB2476-1999《酸牛乳》進行處理。上述方法中，在所述接種前還包括如下步驟將所述牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C -45°C的步驟；在所述發酵至凝固后，還包括將凝固得到的產物置于4°C進行后熟的步驟。 上述方法中，所述發酵的溫度為42°C ；所述酵母培養物均按照(O. 1-10) 100的體積比接種于所述牛奶中。上述酵母培養物在促進酸奶生產的中的應用也是本發明保護的范圍；或上述釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CGMCC No. 2. 1882在制備促進酸奶生產的產品中的應用也是本發明保護的范圍；或上述釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CGMCC No. 2. 1882在促進酸奶生產的中的應用也是本發明保護的范圍。本發明的第三個目的是提供ー種用于發酵培養的培養基I。本發明提供的培養基1，由上述應用中的所述溶質I和所述溶劑組成。本發明的第四個目的是提供ー種用于發酵培養的培養基2。本發明提供的培養基2，由上述應用中所述溶質2和所述溶劑組成。本發明的實驗證明，本發明在使用嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471 和德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus) CGMCC I. 1482生產酸奶的過程中加入一定量酵母培養物，以pH值、乳清析出和組織形態為檢測指標，具體具有如下優點1、應用本發明將酵母培養物應用于酸奶生產中，可獲得顯著減少發酵劑用量、縮短發酵時間同時使酸奶更加細滑的發酵增強劑；2、應用本發明生產發酵增強劑，為進一歩探討酸奶中各種乳酸菌數量比例的關系打下了基礎，為控制和快速提升酵母培養物的品質提供了有益參考。
具體實施例方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。下述實施例的接種量的百分比均為體積百分含量。下述實施例中所用牛奶購自北京郊區奶牛場，符合GB/T6914-1986(生鮮牛乳收購標準)。按GB 2476-1999《酸牛乳》進行處理。下述實施例中所用的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)均為如下釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae CGMCC 2.1882)。下述實施例中酸奶制備中加入的嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471 和德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus) CGMCC I. 1482的集落形成單位數目比均為I I。
實施例I、酵母培養物及其制備方法與應用—、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取IOg葡萄糖(食品級)、5g酵母粉(食品級)、40g蛋白胨(食品級)和4g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min,備用。發酵培養基(pH4.0):稱取IOg葡萄糖(食品級)、IOg蔗糖(食品級)、2g酵母膏(食品級)、2g蛋白胨(食品級)、lg硫酸銨(食品級)、10g KH2PO4 (食品級)、IOgMgSO4WH2O (食品WAg MnSO4 .H2O (食品級)、4g CaCl2 (食品級)、4g CuSO4 ·5Η20 (食品級)、4g ZnSO4 ·7Η20(食品級)和4g FeSO4 · 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌 15min,備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，28°C、150rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養24h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將2ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為1%)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的終濃度為lX105cfu/ml ;將發酵初始體系20°C靜置發酵60h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑為13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(O. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 O. 1% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. 5h, pH值是4. 75，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例2、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取40g葡萄糖(食品級)、40g酵母粉(食品級)、10g蛋白胨(食品級)和0. Ig MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解后定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH5.5):稱取IOOg葡萄糖(食品級)、IOOg蔗糖(食品級)、IOOg酵母膏(食品級)、100g蛋白胨(食品級)、100g硫酸銨(食品級)、0. Ig KH2PO4 (食品級)、0. IgMgSO4 · 7H20 (食品級)、0· Ig MnSO4 · H2O (食品級)、0· Ig CaCl2 (食品級)、0· Ig CuSO4 · 5Η20(食品級)、0. Ig ZnSO4 ·7Η20 (食品級)和O. Ig FeSO4MH2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至 IL ;121°C、0. IMpa 高溫滅菌 15min,備用。2、種子液的獲得 將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，20°C、IOOrpm (擺振幅度25mm)振蕩培養18h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將60ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為30%)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為3 X 106cfu/ml ;將發酵初始體系50°C靜置發酵30h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(O. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 10% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. Oh, pH值是4. 62，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是6. Oh, pH值4. 95，乳清稍有析出，組織形態良好，稍有氣泡。實施例3、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6.5)稱取50g葡萄糖(食品級)、50g蔗糖(食品級)、50g酵母膏(食品級)、50g蛋白胨(食品級)、50g硫酸銨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、IgMgSO4WH2O (食品WAg MnSO4 .H2O (食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 ·5Η20 (食品級)、lg ZnSO4 ·7Η20(食品級)和Ig FeSO4 · 4Η20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min,備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。
4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(O. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5· 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. 2h, pH值是4. 71，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. 5h, pH值4. 90，乳清稍有析出，組織形態良好，稍有氣泡。實施例4、酵母培養物及其制備方法與應用·一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(PH6.5)稱取20g葡萄糖(食品級)、2.5g酵母膏(食品級)、2.5g蛋白胨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品級)、lg MnSO4 ·H2O (食品級)、lg CaCl2(食品級)、lg CuSO4AH2O (食品級)、lg ZnSO4 ·7Η20 (食品級)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. 4h, pH值是4. 79，無乳清析出，組織形態良好。
對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例5、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6. 5)稱取50g葡萄糖(食品級)、50g酵母膏(食品級)、50g蛋白胨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品級)、lg MnSO4 ·H2O (食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4AH2O (食品級)、lg ZnSO4 ·7Η20 (食品級)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(O. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5· 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. 5h, pH值是4. 37，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為對照組的凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例6、酵母培養物及其制備方法與應用—、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6.5):稱取200g葡萄糖(食品級)、150g酵母膏(食品級)、150g蛋白胨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgS04*7H20 (食品級)、lg MnSO4 · H2O (食品級)、lgCaCl2 (食品級)、lg CuSO4 ·5Η20 (食品級)、lg ZnSO4 · 7H20 (食品級)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得 將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(O. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. 5h, pH值是4. 39，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例7、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6.5)稱取50g葡萄糖(食品級)、50g糖蜜(食品級)、2.5g酵母膏(食品級)、2. 5g 硫酸銨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品級)、lg MnSO4 · H2O(食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 ·5Η20 (食品級)、lg ZnSO4 · 7H20 (食品級)和 IgFeSO4 · 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得
將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(O. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5· 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. 8h, pH值是4. 34，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例8、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6.5)稱取20g蔗糖(食品級)、50g酵母膏(食品級)、50g硫酸銨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgSO4WH2O (食品級)、lg MnSO4 -H2O (食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 · 5H20 (食品級)、lg ZnSO4 · 7H20 (食品級)和 IgFeSO4 · 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. 7h, pH值是4. 55，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母、培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例9、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6.5)稱取50g蔗糖(食品級)、150g酵母膏(食品級)、150g硫酸銨 (食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品級)、lg MnSO4 ·H2O (食品級)、lg CaCl2(食品級)、lg CuSO4AH2O (食品級)、lg ZnSO4 ·7Η20 (食品級)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(O. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5· 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. Oh, pH值是4. 36，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例10、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6. 5)稱取200g蔗糖(食品級)、2. 5g蛋白胨(食品級)、2. 5g硫酸銨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgSO4 ·7Η20 (食品級)、lg MnSO4 ·H2O (食品級)、lg CaCl2(食品級)、lg CuSO4AH2O (食品級)、lg ZnSO4 ·7Η20 (食品級)和 Ig FeSO4 ·4Η20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。
4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(O. 22 μ m)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。ニ、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. 6h, pH值是4. 61，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例11、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 · H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6.5)稱取IOg葡萄糖(食品級)、10g糖蜜(食品級)、50g蛋白胨(食品級)、50g 硫酸銨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgS04*7H20 (食品級)、lg MnSO4 · H2O(食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 ·5Η20 (食品級)、lg ZnSO4 · 7H20 (食品級)和 IgFeSO4 · 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。二、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii subsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. 4h, pH值是4. 40，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例12、酵母培養物及其制備方法與應用 一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6. 5)稱取IOOg葡萄糖(食品級)、100g糖蜜(食品級)、150g蛋白胨(食品級)、150g 硫酸銨(食品級)、lg KH2P04(食品級)、lg MgSO4 WH2CK食品級)、Ig MnSO4 -H2O(食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 5H20 (食品級)、IgZnSO4 7H20 (食品級)和 IgFeSO4 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。二、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. 2h, pH值是4. 25，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。
實施例13、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6.5)稱取20g糖蜜(食品級)、5g酵母膏(食品級)、lg KH2PO4 (食品WAg MgSO4 7H20 (食品級)、lg MnSO4 .H2O (食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4AH2O(食品級)、lg ZnSO4 7H20 (食品級)和Ig FeSO4 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高溫滅菌 15min,備用。
2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。二、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. 7h, pH值是4. 40，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例14、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6. 5)稱取200g糖蜜(食品級)、150g酵母膏(食品級)、lg KH2PO4(食品級)、lg MgSO4 WH2CK食品級)、Ig MnSO4 哄0(食品級)、Ig CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 *5H20(食品級)、lg ZnSO4 7H20 (食品級)和Ig FeSO4 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高溫滅菌 15min,備用。
2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。二、利用酵母培養物生產酸奶·酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是2. 8h, pH值是4. 23，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例15、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6. 5)稱取50g糖蜜(食品級)、300g酵母膏(食品級)、lg KH2PO4(食品WAg MgSO4 7H20 (食品級)、lg MnSO4 .H2O (食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4AH2O(食品級)、lg ZnSO4 7H20 (食品級)和Ig FeSO4 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高溫滅菌 15min,備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。三、酵母培養物的應用酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. 5h, pH值是4. 33，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例16、酵母培養物及其制備方法與應用 一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、IOg酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnS04 H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min,備用。發酵培養基(pH6. 5)稱取200g蔗糖(食品級)、5g蛋白胨(食品級)、lg KH2PO4(食品WAg MgSO4 7H20 (食品級)、lg MnSO4 .H2O (食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4AH2O(食品級)、lg ZnSO4 7H20和Ig FeSO4 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、
0.IMpa高溫滅菌15min,備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。二、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. 3h, pH值是4. 40，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例17、酵母培養物及其制備方法與應用
一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6. 5)稱取50g葡萄糖(食品級)、50g蔗糖(食品級)、150g蛋白胨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgSO4WH2O (食品級)、lg MnSO4 -H2O (食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 5H20 (食品級)、lg ZnSO4 7H20 (食品級)和 IgFeSO4 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、 200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。三、酵母培養物的應用酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobscillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. Oh, pH值是4. 43，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例18、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6. 5)稱取200g蔗糖(食品級)、300g蛋白胨(食品級)、lg KH2PO4C^品級)、lg MgSO4 WH2CK食品級)、Ig MnSO4 哄0(食品級)、Ig CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 *5H20(食品級)、lg ZnSO4 7H20 (食品級)和Ig FeSO4 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高溫滅菌 15min,備用。2、種子液的獲得
將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得 在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。二、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是3. Oh, pH值是4. 36，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例19、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6.5)稱取50g葡萄糖(食品級)、50g蔗糖(食品級)、5g硫酸銨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgSO4 7H20 (食品級)、lg MnSO4 H2O (食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 5H20 (食品級)、lg ZnSO4 7H20 (食品級)和 Ig FeSO4 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。
二、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. 5h, pH值是4. 45，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例20、酵母培養物及其制備方法與應用一、酵母培養物的制備I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6. 5)稱取200g蔗糖(食品級)、150g硫酸銨(食品級)、lg KH2PO4C^品級)、lg MgSO4 WH2CK食品級)、Ig MnSO4 哄0(食品級)、Ig CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 *5H20(食品級)、lg ZnSO4 7H20 (食品級)和IgF eS04 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa 高溫滅菌 15min,備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。二、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5% (體積百分含量)上述一得到的酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. lh, pH值是4. 35，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。實施例21、酵母培養物及其制備方法與應用—、酵母培養物的制備、
I、培養基的配制種子培養基(自然pH):稱取20g葡萄糖(食品級)、10g酵母粉(食品級)、20g蛋白胨(食品級)和2g MnSO4 H2O (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。發酵培養基(pH6.5)稱取50g葡萄糖(食品級)、50g蔗糖(食品級)、300g硫酸銨(食品級)、lg KH2PO4 (食品級)、lg MgSO4WH2O (食品級)、lg MnSO4 -H2O (食品級)、lg CaCl2 (食品級)、lg CuSO4 5H20 (食品級)、lg ZnSO4 7H20 (食品級)和 IgFeSO4 4H20 (食品級)，用蒸餾水溶解并定容至IL ;121°C、0. IMpa高溫滅菌15min，備用。2、種子液的獲得將活化后的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)接入至種子培養基中 ，50°C、200rpm (擺振幅度25mm)振蕩培養40h，獲得種子液。3、發酵液的獲得在250ml三角瓶中，將30ml上述2得到的種子液接種至200ml發酵培養基(即接種量為15%體積比)，得到發酵初始體系，發酵初始體系中釀酒酵母的濃度為1.5X106cfu/ml ;將發酵初始體系30°C靜置發酵45h，得到發酵液。4、酵母培養物的獲得將上述3得到的發酵液4000rpm離心5min (離心半徑13. 5cm),收集上清液,將上清液用細菌過濾器(0. 22 ym)過濾，得到無細胞濾液(經平板檢驗無菌長出)，又稱酵母培養物(無菌)。二、利用酵母培養物生產酸奶酵母培養物組將牛奶95°C加熱處理5min后，迅速冷卻至43°C，接入嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiIus)CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckii sub sp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482 和 5. 0% (體積百分含量)上述一得到酵母培養物，于42°C恒溫培養箱中進行發酵，直至凝固，然后置于4°C冰箱中進行后熟。酵母培養物組的凝固時間是4. 6h, pH值是4. 80，無乳清析出，組織形態良好。對照組按照上述的方法進行生產酸奶，與上述不同的是不加入上述一得到酵母培養物，結果為凝固時間是5. Oh, pH值4. 89，乳清稍有析出，組織形態良好。
權利要求
1.一種酵母培養物在制備促進酸奶生產的產品中的應用； 所述酵母培養物是按照包括如下步驟的方法制備得到的將釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae) CGMCC No. 2. 1882進行液體發酵后，收集發酵液，除去所述發酵液中的所述釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No. 2. 1882細胞得到的無菌液體，即得到所述酵母培養物。
2.根據權利要求I所述的應用，其特征在于所述液體發酵在如下條件下進行200C _50°C靜置培養30小時-60小時。
3.根據權利要求I或2所述的應用，其特征在于所述液體發酵所使用的發酵培養基由溶質I和溶劑組成，所述溶劑為水，所述溶質I由如下I) -3)的物質組成 1)碳源,如下A)-C)中的任一種 A)葡萄糖和蔗糖； B)葡萄糖和糖蜜； C)葡萄糖、蔗糖和糖蜜中的任一種； 2)氮源，所述氮源為如下D)-F)中的任一種 D)酵母膏、蛋白胨和硫酸銨； E)酵母膏、蛋白胨和硫酸銨中的任兩種； F)酵母膏、蛋白胨和硫酸銨中的任一種；3)無機鹽，所述無機鹽為KH2PO4^MgSO4 WH2CKMnSO4 .H20、CaCl2、CuS04 ·5Η20,ZnSO4 ·7Η20和 FeSO4 · 4Η20 ； 所述碳源在所述發酵培養基中的總濃度為20-200g/L ； 所述氮源在所述發酵培養基中的總濃度為5-300g/L ； 所述無機鹽中的各組分在所述發酵培養基中的濃度分別為=KH2PO4 O. lg/L — 10g/L、MgSO4 · 7H20 O. lg/L—10g/L、MnSO4 · H2O 0. lg/L—4g/L、CaCl2 0. lg/L—4g/L、CuSO4 · 5H200. lg/L—4g/L、ZnSO4 · 7H20 0. lg/L—4g/L、FeSO4 · 4H20 0. lg/L—4g/L ； 所述發酵培養基的pH值為4. 0 — 6. 5。
4.根據權利要求1-3中任一所述的應用，其特征在于所述液體發酵按照包括如下步驟的方法進行將所述釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) CGMCC No. 2. 1882接種于種子培養基中，20-50°C、100-200轉/分鐘振蕩培養18-40小時，獲得種子液；再將所述種子液按照(1-30) 100的體積比接種于所述發酵培養基中按照所述液體發酵的條件進行發酵。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于所述種子培養基由溶質2和溶劑組成，所述溶劑為水，所述溶質2為葡萄糖、酵母粉、蛋白胨和MnSO4 · H2O,在所述種子培養基中各溶質的濃度分別為葡萄糖10g/L-40g/L、酵母粉5g/L-40g/L、蛋白胨10g/L_40g/L、MnSO4 · H2O O. lg/L-4g/L。
6.—種生產酸奶的方法，包括如下步驟將將嗜熱鏈球菌(StreptococcusthermophiIus) CGMCC I. 2471、德式乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillusdelbrueckiisubsp. Bulgaricus) CGMCC I. 1482和權利要求1-5中所述應用中的所述酵母培養物接種到牛奶中，發酵至凝固，即得到酸奶。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于所述發酵的溫度為42°C。
8.根據權利要求6或7所述的方法，其特征在于 所述酵母培養物均按照(O. 1-10) 100的體積比接種于所述牛奶中。
9.權利要求1-5中任一所述應用中所述酵母培養物在促進酸奶生產的中的應用； 或權利要求1_5中任一所述應用中所述釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCCNo. 2. 1882在制備促進酸奶生產的產品中的應用； 或權利要求1_5中任一所述應用中所述釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCCNo. 2. 1882在促進酸奶生產的中的應用。
10.一種用于發酵培養的培養基1，由權利要求3-5中任一所述應用中的所述溶質I和所述溶劑組成； 或一種用于發酵培養的培養基2，由權利要求5中所述應用中所述溶質2和所述溶劑組成。
全文摘要
本發明公開了一種酵母培養物在促進酸奶生產中的應用。本發明提供一種酵母培養物在制備促進酸奶生產的產品中的應用；所述酵母培養物是按照包括如下步驟的方法制備得到的將釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC No.2.1882進行液體發酵后，收集發酵液，除去所述發酵液中的所述釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CGMCC No.2.1882細胞得到的無菌液體即為所述酵母培養物。本發明的實驗證明，本發明將酵母培養物應用于酸奶生產中，可獲得顯著減少發酵劑用量、縮短發酵時間同時使酸奶更加細滑的發酵增強劑。
文檔編號C12R1/865GK102669269SQ201210170090
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月28日 優先權日2012年5月28日
發明者刑精精, 劉萍, 徐樂, 解洛香, 魏宏博 申請人:中國農業大學