專利名稱：利用菌群發酵促進沉香油提取的方法
技術領域：
本發明涉及生物技術領域，ー種利用沉香內生菌中多種優勢真菌或菌群與沉香材料進行混合發酵的エ藝方法，通過這種方法可顯著促進沉香材料的進ー步轉化，從而大幅度提聞沉香油的提取率。
背景技術：
國產沉香為瑞香科沉香屬植物白木香Aquilaria sinensis (Lour. )Gilg含有黑色樹脂的病變木材，可通過自然結香或人工結香等方式產生。在我國，白木香是生產國產沉香的唯一植物資源，為我國特有的珍貴藥用植物。從沉香中提取的沉香油又是高附加值的沉香產品，隨著沉香油的藥用及作為美容保健用量的大幅増加，市場對沉香油系列產品的需求呈供不應求的趨勢。目前國內外市場上好的沉香油價格已高達300元/克，在中東國家 市場上特別搶手，出ロ創匯前景十分廣闊。由于普通沉香材料中的油脂含量很低，提取率通常僅為O. 23%左右，故產量少而十分珍貴，國內外市場因此一直是供不應求，目前沉香原料價格也在不斷上漲；通過提高沉香油的提取率和產品的經濟效益成為十分緊迫的課題。為了緩解市場的供需矛盾，提高沉香油的產量和經濟效益，根據天然沉香自然產香的規律和形成機理，從正在生長的野生沉香中提取能促進沉香生成的一些沉香內生真菌，通過優化組合優勢產香菌株經純化培養成專用菌群制劑與沉香材料混合發酵，實驗表明可大幅度促進并提高沉香油的提取率，提取率從原來的O. 23%提高到O. 48%，其產量通過菌群制劑發酵轉化而提高了一倍多，由此摸索并試驗出顯著提高沉香油產量的エ藝路線和方法。

發明內容
本發明所述在不增加沉香原料供應的基礎上，大幅提高沉香油的單位產量，為此利用沉香內生菌對沉香材料進行混合發酵來促進轉化處理，從而顯著促進沉香油的得率，發明內容是；從正在生長中的天然沉香里提取多株具有優勢產香能力的真菌；有色ニ抱菌(Diplodia sp.),蒂腐色ニ抱(Botryosphaeria rhodina),祿刀菌(fusarium)枝頂孢霉(acreonium),光黑殼(fIeischhakii)等菌株經分別消毒、純化培養為原種,其過程如下；沉香內生菌提取、純化培養的固體試管菌種一組合液體搖床培養菌群菌種一菌群種子擴大的液體菌種經搖床培養。
具體實施例方式將從廣西北流市清灣鎮龍南沉香種植園中的多株活體沉香內生菌中，分別提取多種具有產香優勢能力的真菌；有色ニ孢菌(Diplodia sp.),蒂腐色ニ孢(Botryosphaeriarhodina),祿刀菌(fusarium)枝頂抱霉(acreonium),光黑殼(f Ieischhakii)
上述菌株經分別提取、消毒并接種于麥芽汁固體瓊脂的種子培養基中(葡萄糖10g/L，蛋白棟10g/L，酵母提取物5g/L，NaC110g/L，瓊脂20g/L，pH7. O)置28°C培養7天成試管原種。切取試管中的兒種原種真菌分別接入IOOml液體培養基(葡萄糖20g/L，蛋白棟10g/L，酵母粉5g/L，牛肉膏10g/L，こ酸鈉2g/L，檸檬酸棗g/L，硝酸鈉2mLpH6. 5) 100ml X 10的三角瓶，在32°C組合培養，轉速200 250轉/分鐘，搖床培養7天，得復合菌種培養液。取復合菌種培養液500ml，接入10000ml于擴大的液體菌種培養基中，(與上述液體培養基成分相同，其量按照10000ml相應增加，室溫28 32°C發酵培養，200 250轉/分鐘，搖床培養5天，得到擴大后的復合菌種或培養液。與沉香材料的發酵制備；沉香干料200公斤，粉碎為碎屑，置入發酵罐，加入菌群 培養液1000ml，(用150公斤的無菌水稀釋)滲透劑吐溫_60添加200克混勻，混合料的濕度以手捏成團少有溢水即可，溫度32 37°C發酵反應15天，充分促進沉香材料中的白木成分得到有效反應并轉化。轉化后的沉香材料再經溶劑法萃取沉香油，其提取率與原未經發酵的沉香材料提取對比有大幅度提高，從而在不增加沉香原料供應的基礎上，沉香油的得率從平均O. 23%提高到O. 48 %，不僅節省了大量的沉香材料，而且顯著增產出高附加值沉香油產品，擴大了出ロ創匯，具有十分可觀的經濟和社會效益。
權利要求
1.利用菌群發酵促進沉香油提取的方法；其發明特征是指可以是利用單ー菌株，也可以是幾種至幾十種菌株組合培養的菌群，通過與沉香材料聯合發酵的方法，用于顯著促進及提聞沉香油的提取率。
2.利用菌群發酵促進沉香油提取的方法的四種菌株特征足；從正在生長中的天然沉香里提取多種具有產香能力的真菌；有色ニ孢菌(Diplodia sp.),蒂腐色ニ抱(Botryosphaeria rhodina)，祿刀菌(fusarium)枝頂抱霉(acreonium),光黑殼(fleischhakii)等菌株經分別消毒、純化培養為原種。
3.切取試管中的幾種原種真菌分別接入IOOml液體培養基(葡萄糖20g/L，蛋白棟10g/L，酵母粉5g/L，牛肉膏10g/L，こ酸鈉2g/L，檸檬酸棗g/L，硝酸鈉2mLpH6. 5) IOOml X 10的三角瓶，在32°C組合培養，轉速200 250轉/分鐘，搖床培養7天，得復合菌種培養液。
4.取復合菌種培養液500ml，接入IOOOOml于擴大的液體菌種培養基中，(與上述液體培養基成分相同，其量按照10000ml相應增加，室溫28 32°C發酵培養，200 250轉/分鐘，搖床培養5天，得到擴大后的復合菌種或培養液。
5.沉香材料的發酵制備；沉香干料200公斤，粉碎為碎屑，置入發酵罐，加入菌群培養液1000ml，(用150公斤的無菌水稀釋)滲透劑吐溫_60添加200克混勻，混合料的濕度以手捏成團不散即可，溫度32 37°C發酵反應15天，促進沉香材料中的白木成分得到充分反應并轉化。
全文摘要
本發明所述在不增加原料供應的基礎上，可大幅提高沉香油的單位產量，利用沉香內生菌經提取、培養菌群制劑對沉香材料進行混合發酵和轉化處理，從而顯著促進沉香油的提取率。培養步驟是；沉香內生菌的提取、純化培養的一級固體試管菌種→組合液體搖床培養菌群二級菌種→菌群種子擴大三級液體菌種經搖床培養→與沉香材料混合發酵。轉化后的沉香材料，其提取率在原有的基礎上大幅提高，從而在不增加沉香原料供應的基礎上，沉香油的得率從平均0.23％提高到0.48％，不僅節省了大量的沉香材料，而且創造出高附加值沉香精油產品，擴大了出口創匯，具有可觀的經濟和社會效益。
文檔編號C12P7/64GK102703562SQ201210197509
公開日2012年10月3日 申請日期2012年6月15日 優先權日2012年6月15日
發明者唐顯 申請人:唐顯