專利名稱：葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物配制方法及制劑的制作方法
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物配制方法及制劑技術領域：
本發明涉及一種室內質控物，尤其涉及一種測定葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性的室內質控物。背景技術：
葡萄糖_6_ 憐酸脫氧酶(glucose-6-phosphatase dehydrogenase, G-6-PD)缺乏癥為紅細胞內該酶顯著缺乏所致的一種遺傳性疾病，俗稱蠶豆病。其主要臨床表現是溶血性貧血。
本病發生溶血的機制尚未完全明了，目前認為葡萄糖-6-磷酸脫氫酶是紅細胞葡萄糖磷酸戊糖旁路代謝中所必需的脫氫酶，它使6-磷酸葡萄糖釋出H+，從而使氧化型輔酶II(NADP+)還原成還原型輔酶II (NADPH)，NADPH是紅細胞內抗氧化的重要物質，它能使紅細胞細胞內的氧化型谷胱甘肽(GSSG)還原成還原型谷胱甘肽(GSH)和維持過氧化氫酶 (Catalase7Cat)的活性。Cat是過氧化氫(H202)還原成水的還原酶。GSH的主要作用是 ①保護紅細胞內含巰基(-SH)的血紅蛋白、酶蛋白和膜蛋白的完整性，避免H202對含-SH 物質的氧化。②與谷胱甘肽過氧化氫(GSHPX)共同使H202還原成水。葡萄糖_6_磷酸脫氫酶缺乏時，NADPH生成不足，Cat和GSH減少。因此，當機體受到氧化物侵害時，氧化作用產生的H202不能被及時還原成水，過多的H202作用于含-SH的血紅蛋白、膜蛋白和酶蛋白致血紅蛋白和膜蛋白均發生氧化損傷。血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白和變形珠蛋白小體 (Heinzbody),紅細胞膜的過氧損傷則致膜脂質和膜蛋白巰基的氧化,上述作用最終造成細胞的氧化損傷和溶血。
測定紅細胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性是診斷本病的主要手段。
2006年衛生部頒布j的《醫療機構臨床實驗室管理辦法》第二十五條規定“醫療機構臨床實驗室應當對開展的臨床檢驗項目進行室內質量控制，繪制質量控制圖”。目前， 多數定量檢測(如谷丙轉氨酶活性測定等)已有商品化質控物，但葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定沒有商品化質控物，如不自行配制就難以開展室內質控。
發明內容
本發明的目的在于提供一種葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物的配制方法及制劑
本發明是通過以下技術方案來實現的
所述葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物的配制方法，包括如下步驟
(I)配制咪唑緩沖液秤取咪唑、二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTANa2 -2H20)、酶保護劑、疊氮鈉適量，溶于900ml蒸餾水中，用lmol/L醋酸調節pH至7. 4，加蒸餾水稀釋至1L。
(2)配制葡萄糖-6-磷酸脫氫酶高、中、低濃度質控物取上述咪唑緩沖液三份，分別加入適量葡萄糖-6-磷酸脫氫酶至終濃度約為6000U/L、3000U/L、1000U/L。
(3)分裝與保存將葡萄糖-6-磷酸脫氫酶質控物分裝至一次性塑料離心管，置-20°C冰箱保存。
高濃度葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑的成份為
咪唑(g)3. 4 至 34;
EDTANa2 · 2H20 (g) O. 93 至 9. 3 ;
酶保護劑(g) 5至20;
疊氮鈉(g)I 至 10;
G-6-PD (U) 5000-7000 ；
lmol/L 醋酸調 pH 至 7. 4 ;
H20(ml) 1000 ；
中濃度葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑的成份為
咪唑(g)3. 4 至 34;
EDTANa2 · 2H20 (g) O. 93 至 9. 3 ;
酶保護劑(g) 5至20 ;
疊氮鈉(g)I 至 10 ;
G-6-PD(U)2000-4000 ；
lmol/L 醋酸調 pH 至 7. 4 ;
H20(ml) 1000 ；
低濃度葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑的成份為
咪唑(g)3. 4 至 34 ;
EDTANa2 · 2H20 (g) O. 93 至 9. 3 ;
酶保護劑(g) 5至20;
疊氮鈉(g)I 至 10 ;
G-6-PD(U)500-1500 ；
lmol/L 醋酸調 pH 至 7. 4 ;
H20(ml) 1000。
本發明的有益效果在于本發明可作為葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定的室內質控物，既可監測相應試劑在流通、保存、使用過程中是否出現變質，還可監測儀器設備的運行狀況，這既是法規的要求，更是實際工作的迫切需要，本發明制備的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶高、中、低濃度質控物均一性好，管間差異小于2%，本發明制備的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶高、中、低濃度質控物中均含有防腐劑和酶保護劑，在低溫保存條件下，有效期大于一年。
具體實施方式
下面根據具體實施方式
對本發明做進一步描述
實施例I :
所述葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物的配制方法，包括如下步驟
(I)配制咪唑緩沖液秤取咪唑、二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTANa2 -2H20)、酶保護劑、疊氮鈉適量，溶于900ml蒸餾水中，用lmol/L醋酸調節pH至7. 4，加蒸餾水稀釋至1L。
(2)配制葡萄糖-6-磷酸脫氫酶高濃度質控物取上述咪唑緩沖液三份，分別加入適量葡萄糖-6-磷酸脫氫酶至終濃度約為6000U/L。4
(3)分裝與保存將葡萄糖-6-磷酸脫氫酶質控物分裝至一次性塑料離心管，置-20°C冰箱保存。
高濃度葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑的成份為
咪唑(g)3.4 ;
EDTANa2 · 2H20(g) O. 93 ；
酶保護劑(g) 5 ；
疊氮鈉(g) I ;
G-6-PD(U)5000 ；
lmol/L醋酸調pH至7. 4 ;
H20(ml) 1000 ；
使用本發明的高值質控物開展葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定室內質控一年，累積均值為6017U/L，累積標準差為175. 7U/L，累積CV值為2. 92%。
實施例2
所述葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物的配制方法，包括如下步驟
(I)配制咪唑緩沖液秤取咪唑、二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTANa2 ·2Η20)、酶保護劑、疊氮鈉適量，溶于900ml蒸餾水中，用lmol/L醋酸調節pH至7. 4，加蒸餾水稀釋至1L。
(2)配制葡萄糖-6-磷酸脫氫酶中濃度質控物取上述咪唑緩沖液三份，分別加入適量葡萄糖-6-磷酸脫氫酶至終濃度約為3000U/L。
(3)分裝與保存將葡萄糖-6-磷酸脫氫酶質控物分裝至一次性塑料離心管，置-20°C冰箱保存。
中濃度葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑的成份為
咪唑(g) 18 ；
EDTANa2 · 2H20(g) 4. 5 ；
酶保護劑(g) 12 ;
疊氮鈉(g) 5 ；
G-6-PD(U)3000 ；
lmol/L醋酸調pH至7. 4 ;
H20(ml) 1000 ；
使用本發明的中值質控物開展葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定室內質控一年，累積均值為2976U/L,累積標準差為103. 3U/L，累積CV值為3. 47%.
實施例3
所述葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物的配制方法，包括如下步驟
(I)配制咪唑緩沖液秤取咪唑、二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTANa2 ·2Η20)、酶保護劑、疊氮鈉適量，溶于900ml蒸餾水中，用lmol/L醋酸調節pH至7. 4，加蒸餾水稀釋至1L。
(2)配制葡萄糖-6-磷酸脫氫酶低濃度質控物取上述咪唑緩沖液三份，分別加入適量葡萄糖-6-磷酸脫氫酶至終濃度約為1000U/L。
(3)分裝與保存將葡萄糖-6-磷酸脫氫酶質控物分裝至一次性塑料離心管，置-20°C冰箱保存。
低濃度葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑的成份為
咪唑(g)34;
EDTANa2 · 2H20 (g) 9. 3 ；
酶保護劑(g) 20 ；
疊氮鈉(g)10 ；
G-6-PD(U) 1500 ；
lmol/L 醋酸調 pH 至 7. 4 ;
H20(ml) 1000。
使用本發明的低值質控物開展葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定室內質控一年，累積均值為1038U/L,累積標準差為50. 3U/L，累積CV值為4. 85%。
根據上述說明書的揭示和教導，本發明所屬領域的技術人員還可以對上述實施方式進行適當的變更和修改。因此，本發明并不局限于上面揭示和描述的具體實施方式
，對本發明的一些修改和變更也應當落入本發明的權利要求的保護范圍內。此外，盡管本說明書中使用了一些特定的術語，但這些術語只是為了方便說明，并不對本發明構成任何限制。
權利要求
1.一種葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物的配制方法，其特征在于包括如下步驟 (1)配制咪唑緩沖液秤取咪唑、二水乙二胺四乙酸二鈉(EDTANa2· 2H20)、酶保護劑、疊氮鈉適量，溶于900ml蒸餾水中，用lmol/L醋酸調節pH至7. 4，加蒸餾水稀釋至IL ； (2)配制葡萄糖-6-磷酸脫氫酶高、中、低濃度質控物取上述咪唑緩沖液三份，分別加入適量葡萄糖-6-磷酸脫氫酶至終濃度約為6000U/L、3000U/L、1000U/L ； (3)分裝與保存將葡萄糖-6-磷酸脫氫酶質控物分裝至一次性塑料離心管，置_20°C冰箱保存。
2.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑，其特征在于高濃度葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑的成份為 咪唑(g) 3. 4至34;EDTANa2 · 2H20(g)O. 93 至 9. 3 ; 酶保護劑(g) 5至20 ; 疊氮鈉(g) I至10 ;G-6-PD(U)5000-7000 ；lmol/L醋酸調pH至7. 4 ;H20(ml) 1000 ； 中濃度葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑的成份為 咪唑(g) 3. 4至34;EDTANa2 · 2H20(g)O. 93 至 9. 3 ; 酶保護劑(g) 5至20 ; 疊氮鈉(g) I至10 ;G-6-PD(U)2000-4000 ；lmol/L醋酸調pH至7. 4 ;H20(ml) 1000 ； 低濃度葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物制劑的成份為 咪唑(g) 3. 4至34;EDTANa2 · 2H20(g)O. 93 至 9. 3 ; 酶保護劑(g) 5至20 ; 疊氮鈉(g) I至10 ;G-6-PD(U)500-1500 ；lmol/L醋酸調pH至7. 4 ;H20(ml)1000。
全文摘要
本發明提供了一種葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定質控物的配制方法，包括如下步驟(1)配制咪唑緩沖液(2)配制葡萄糖-6-磷酸脫氫酶高、中、低濃度質控物；(3)分裝與保存，本發明的有益效果在于本發明可作為葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性測定的室內質控物，既可監測相應試劑在流通、保存、使用過程中是否出現變質，還可監測儀器設備的運行狀況，這既是法規的要求，更是實際工作的迫切需要，本發明制備的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶高、中、低濃度質控物均一性好，管間差異小于2％，本發明制備的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶高、中、低濃度質控物中均含有防腐劑和酶保護劑，在低溫保存條件下，有效期大于一年。
文檔編號C12Q1/32GK102925536SQ20121043462
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月2日 優先權日2012年11月2日 公開號201210434626.發明者劉和錄, 袁詠梅, 吳雄君, 竇宇紅, 華建江, 汪奇云 申請人:劉和錄