調控水稻開花時間和育性的基因OsRRMh及其應用的制作方法
【專利摘要】本發明首次揭示了OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸與水稻開花時間、結實率或穗型有關。所述多肽或編碼多核苷酸可用于改善水稻的性狀或制備轉基因水稻。本發明的OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸及使用方法對于水稻栽培具有廣泛應用價值，為轉基因技術改良水稻性狀或者研究水稻的性狀提供了很好的平臺。
【專利說明】調控水稻開花時間和育性的基因 OsRRMh及其應用

【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物【技術領域】。具體地說，本發明涉及利用OsRRMh基因及其蛋白控制 水稻開花時間和育性的方法及其應用。

【背景技術】
[0002] Split ends (Spen)家族蛋白是一類由N端的RRM結構域和C端的1個SP0C結構 域構成的分子量很大的蛋白[1，2]。Spen基因在神經發育研究中最先被克隆，spen果蠅突 變體呈現多樣的免疫缺陷表型[1，3]。Spen蛋白利用其RRM結構域結合到特定的RNA片段 上，通過調節染色質的修飾等進而起到共激活子的作用，并調節其靶基因的表達水平。
[0003] 在真核生物中，RNA結合蛋白（RBP)在轉錄后水平對基因的調控涉及可變剪接、多 聚腺苷酰化、RNA穩定性及RNA輸出等所有方面。它們通過調節特定轉錄本的表達對許多 發育過程起著調控作用[4]。盡管對動物中RBP的功能鑒定有越來越多的報道，但對植物而 言，對RBP編碼基因的克隆和功能分析還非常少。
[0004] RiceRBP數據庫為研究水稻中的RNA結合蛋白提供了便利條件。根據Morris等
[5] 2011年的報道，此數據庫中至少包含有由221個基因編碼的257個已經由實驗驗證過有 功能的RNA結合蛋白。數據庫中收錄的大多數蛋白與RNA的結合能力都未得到證實，目前 只能預測出它們可以結合RNA。我們預測其將大力推動對植物中的RNA結合蛋白的研究。
[0005] 對擬南芥中的一個Spen家族蛋白FPA的最新研究[6]揭示，其與另一個RNA結合 蛋白FCA在控制mRNA不同模式3'末端形成上是功能冗余的。FPA和FCA通過控制開花抑 制因子FLC(Flowering Locus C)不同模式的3'多聚腺苷酰化的形成而調節開花時間。在 擬南芥中對FPA、FCA和FLC的功能研究比較詳細，但在水稻中Spen基因還未見研究。
[0006] 水稻（Oryza sativa)是重要的禾谷類作物，特別是對于我國這樣人口眾多的國家 尤其具有重要意義。因此，本領域急需了解水稻中Spen家族蛋白對于水稻開花、育性、結實 等諸方面的作用，進而能夠針對性地改造現有的水稻。


【發明內容】

[0007] 本發明的目的在于揭示與水稻開花時間、結實率或穗型有關的OsRRMh多肽或其 編碼多核苷酸；所述多肽或編碼多核苷酸可用于改善水稻的性狀或制備轉基因水稻；因而 本發明對于水稻栽培具有廣泛應用價值，為轉基因技術改良水稻性狀或者研究水稻的性狀 提供了很好的平臺。
[0008] 在第一方面，本發明提供一種分離的OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的用途，所述 多肽或多核苷酸用于改善水稻的性狀，所述水稻的性狀包括水稻開花時間、結實率、穗型； 或者，
[0009] 所述多肽或多核苷酸用于制備轉基因水稻。
[0010] 在優選的實施方式中，所述改善水稻的性狀包括延遲水稻開花時間、提高或降低 水稻的結實率、增大或減小水稻的穗型；或者 toon] 所述轉基因水稻的開花時間延遲、結實率提高或降低、穗型增大或減小。
[0012] 在另一優選的實施方式中，所述改善水稻的性狀包括提高水稻的結實率、增大水 稻的穗型；或者
[0013] 所述轉基因水稻的結實率提高、穗型增大；
[0014] 從而提1?水稻的廣量。
[0015] 在另一優選的實施方式中，所述多肽或多核苷酸具有以下特征：
[0016] 所述多肽是：⑴具有SEQ ID N0:2所示氨基酸序列的多肽；或（ii)由SEQ ID N0:2所示氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添加而形成的且具有 OsRRMh多肽功能的由（i)衍生的多肽；或
[0017] 所述多核苷酸是：⑴具有SEQ ID NO: 1所示序列的多核苷酸；或（ii)具有與SEQ ID NO: 1所示序列互補的多核苷酸。
[0018] 在第二方面，本發明提供一種改善水稻性狀的方法，所述方法包括：促進或抑制水 稻中OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的表達或活性。
[0019] 在優選的實施方式中，所述改善水稻的性狀包括延遲水稻開花時間、提高或降低 水稻結實率、增大或減小水稻的穗型。
[0020] 在優選的實施方式中，所述多肽是：（i)具有SEQ ID N0:2所示氨基酸序列的多 肽；或（ii)由SEQ ID N0:2所示氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添 加而形成的且具有OsRRMh多肽功能的由（i)衍生的多肽；或
[0021] 所述多核苷酸是：⑴具有SEQ ID NO: 1所示序列的多核苷酸；或（ii)具有與SEQ ID NO: 1所示序列互補的多核苷酸。
[0022] 在另一優選的實施方式中，所述方法包括：抑制水稻中OsRRMh多肽或其編碼多核 苷酸的表達或活性。
[0023] 在優選的實施方式中，通過RNAi、反義RNA、基因敲除、或基因失活等方法來抑制 OsRRMh多肽的表達或活性。
[0024] 在優選的實施方式中，通過外源性導入OsRRMh多肽的編碼多核苷酸來促進 OsRRMh多肽的表達或活性。
[0025] 在另一優選的實施方式中，利用SEQ ID N0:57所示的dsRNA抑制水稻中OsRRMh 多肽或其編碼多核苷酸的表達或活性。
[0026] 在第三方面，本發明提供一種制備轉基因水稻的方法，所述方法包括步驟：
[0027] (a)促進或抑制水稻細胞中OsRRMh多肽的編碼多核苷酸的表達；和
[0028] (b)培養（a)所述的水稻細胞，將其再生成水稻。
[0029] 在優選的實施方式中，所述多肽是：（i)具有SEQ ID N0:2所示氨基酸序列的多 肽；或（ii)由SEQ ID N0:2所示氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添 加而形成的且具有OsRRMh多肽功能的由（i)衍生的多肽；或
[0030] 所述多核苷酸是：⑴具有SEQ ID NO: 1所示序列的多核苷酸；或（ii)具有與SEQ ID NO: 1所示序列互補的多核苷酸。
[0031] 在優選的實施方式中，所述方法包括步驟：
[0032] (a)通過RNAi、反義RNA、基因敲除、或基因失活等方法抑制水稻細胞中OsRRMh多 肽的編碼多核苷酸；和
[0033] (b)培養（a)得到的水稻細胞，將其再生成水稻。
[0034] 在優選的實施方式中，所述方法包括步驟：
[0035] (a)利用SEQ ID N0:57所示的dsRNA抑制水稻細胞中OsRRMh多肽的編碼多核苷 酸；和
[0036] (b)培養（a)得到的水稻細胞，將其再生成水稻。
[0037] 在優選的實施方式中，所述方法包括步驟：
[0038] (a)將OsRRMh多肽的編碼多核苷酸導入水稻細胞；和
[0039] (b)培養（a)得到的水稻細胞，再生成水稻。
[0040] 在優選的實施方式中，所述方法包括步驟：
[0041] (a)提供OsRRMh多肽的編碼多核苷酸的表達載體；
[0042] (b)將（a)的表達載體導入農桿菌；
[0043] (c)將水稻細胞或組織或器官與（b)的農桿菌接觸，從而使OsRRMh多肽的編碼多 核苷酸轉入水稻細胞、組織或器官；
[0044] (d)篩選轉入OsRRMh多肽的編碼多核苷酸的水稻細胞或組織或器官；和
[0045] (e)將步驟（d)的水稻細胞或組織或器官再生成水稻。
[0046] 在第四方面，本發明提供OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的拮抗劑的用途，所述 OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的拮抗劑可用于延遲水稻開花時間、提高水稻的結實率、增 大水稻的穗型。
[0047] 在優選的實施方式中，所述多肽是：（i)具有SEQ ID N0:2所示氨基酸序列的多 肽；或（ii)由SEQ ID N0:2所示氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添 加而形成的且具有OsRRMh多肽功能的由（i)衍生的多肽；或
[0048] 所述多核苷酸是：⑴具有SEQ ID NO: 1所示序列的多核苷酸；或（ii)具有與SEQ ID NO: 1所示序列互補的多核苷酸。
[0049] 在另一優選的實施方式中，所述OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的拮抗劑是SEQ ID NO:57 所示的 dsRNA。
[0050] 在第五方面，本發明提供一種OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的拮抗劑，所述拮抗 劑抑制或下調OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的活性或表達。
[0051] 在優選的實施方式中，所述拮抗劑是dsRNA。
[0052] 在優選的實施方式中，所述dsRNA的序列如SEQ ID NO:57所示。
[0053] 在第六方面，本發明提供一種篩選OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的促進劑或拮 抗劑的方法，所述方法包括以下步驟：
[0054] a)將待測物質給予水稻；
[0055] b)檢測水稻中OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的活性或表達情況；
[0056] 如果與未給予待測物質的對照水稻相比，所述OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的 活性或表達上調，則所述待測物質是OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的促進劑；
[0057] 如果與未給予待測物質的對照水稻相比，所述OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的 活性或表達下調，則所述待測物質是OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的拮抗劑。
[0058] 在優選的實施方式中，所述多肽是：（i)具有SEQ ID N0:2所示氨基酸序列的多 肽；或（ii)由SEQ ID N0:2所示氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添 加而形成的且具有OsRRMh多肽功能的由（i)衍生的多肽；或
[0059] 所述多核苷酸是：（i)具有SEQ ID NO: 1所示序列的多核苷酸；或（ii)具有與SEQ ID NO: 1所示序列互補的多核苷酸。
[0060] 在第七方面，本發明提供OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的用途，所述OsRRMh多肽 或其編碼多核苷酸用于制備預測水稻性狀的試劑或試劑盒，所述水稻性狀包括開花早晚、 結實率或穗型。
[0061] 在優選的實施方式中，所述多肽是：（i)具有SEQ ID N0:2所示氨基酸序列的多 肽；或（ii)由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添 加而形成的且具有OsRRMh多肽功能的由（i)衍生的多肽；或
[0062] 所述多核苷酸是：（i)具有SEQ ID NO: 1所示序列的多核苷酸；或（ii)具有與SEQ ID NO: 1所示序列互補的多核苷酸。
[0063] 在第八方面，本發明提供一種預測水稻性狀的方法，所述水稻性狀包括開花早晚、 結實率或穗型，所述方法包括以下步驟：
[0064] (a)檢測待測水稻中OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的活性或表達；和
[0065] (b)將（a)檢測到的OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的活性或表達值與標準品的相 應檢測值比較；
[0066] 如果（a)的檢測值顯著高于標準品的檢測值，則所測水稻有可能結實率降低、或 穗型減小；
[0067] 如果（a)的檢測值顯著低于標準品的檢測值，則所測水稻有可能開花延遲、結實 率提高、或穗型增大。
[0068] 在優選的實施方式中，所述方法還包括：（c)根據預測結果選擇有可能結實率提 高、或穗型增大的水稻作為候選水稻以供進一步測定。
[0069] 在優選的實施方式中，所述多肽是：（i)具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的多 肽；或（ii)由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添 加而形成的且具有OsRRMh多肽功能的由（i)衍生的多肽；或
[0070] 所述多核苷酸是：（i)具有SEQ ID NO: 1所示序列的多核苷酸；或（ii)具有與SEQ ID NO: 1所示序列互補的多核苷酸。
[0071] 應理解，在本發明范圍內中，本發明的上述各技術特征和在下文（如實施例）中具 體描述的各技術特征之間都可以互相組合，從而構成新的或優選的技術方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0072] 圖1顯示OsRRMh基因的序列、結構示意及基因拷貝數檢測結果。其中，A ：OsRRMh 基因 （SEQ ID N0:1)及其編碼蛋白（SEQ ID NO:2)的全長序列。內含子序列用小寫字母表 示。Southern blot標記探針片段用下劃線標出；B :Southernblot分析OsRRMh基因在水稻 基因組中的拷貝數；C:0sRRMh結構示意圖。數字表示內含子在基因中的位置（翻譯起始點 ATG的A作為+1位)
[0073] 圖2顯示OsRRMh在ZH11中的表達模式。其中，A :qRT_PCR檢測OsRRMh在水稻各組 織中的表達；B :用Western blot檢測ZH11各組織部位中OsRRMh蛋白的表達水平。OsRRMh 蛋白的分子量為97kD ;陽性對照是在BL21 (DE3)中表達的帶His標簽的OsRRMh蛋白。
[0074] 圖3顯示了 OsRRMh mRNA形成過程中存在可變剪切。其中，A :Northernblot方法 檢測到水稻不同組織中OsRRMh存在不同轉錄本；B :0sRRMh可變剪切產生的不同轉錄本的 剪切模式；黑框顯示為檢測到的cDNA片段。剪切模式圖右側標注對應條帶大小。模式圖中 用數字標注內含子的位置信息（翻譯起始點ATG的A作為+1位）。
[0075] 圖4顯示了 OsRRMh下調表達植株的表型分析。其中，A :0sRRMh下調表達質粒 pRiG-OsRRMh的構建圖；B :0sRRMh下調表達植株的開花延遲表型；C :qRT-PCR分析轉基因 植株中OsRRMh的下調表達程度；pRiG，轉化空質粒pRiG的轉基因植株；1-3, T2代OsRRMh dsRNAi獨立轉基因植株；D :0sRRMh下調表達植株的穗型變化；E :對OsRRMh下調表達植 株開花時間和每穗粒數的統計結果。*和**分別表示用t-test進行統計學分析顯示為 P〈0. 05或P〈0. 01的差異顯著或極顯著。下同此描述。
[0076] 圖5顯示了 OsRRMh下調表達轉基因植株葉片組織中控制水稻開花時間基因的表 達程度變化。其中，pRiG為轉化空質粒pRiG的轉基因植株；1-3, T2代OsRRMh dsRNAi獨 立轉基因植株。
[0077] 圖6顯示了 OsRRMh或其SP0C結構域過量表達植株的表型分析。其中，A : ρΗΒ-OsRRMh構建圖；B :pHB-〇sRRMh轉基因植株表現為穗型變小和結實率降低；C :qRT-PCR 分析轉基因植株中OsRRMh的表達；1-3代表pHB-〇sRRMh T2代轉基因純合株；D :0sRRMh過 量表達植株的每穗著粒數和結實率統計數據；E :pHB-〇sRRMh SP0C轉基因植株表現出結實 率降低和小穗表型；F :qRT_PCR檢測SP0C過量表達轉基因植株中SP0C構域的表達水平；G :SP0C結構域過量表達的轉基因植株的每穗著粒數和結實率統計數據；Η和I分別為SP0C過 量表達和對照轉基因植株花粉在1%Ι2-ΚΙ溶液中的染色結果；Β和Ε的標尺為lcm，Η和I的 標尺為10 μ m ;Β和Ε中的紅色箭頭指示不育的小花穗，Η中指示不育的花粉顆粒。
[0078] 圖7顯示了在fpa(Ler)和Col-Ο中過量表達OsRRMh的表型分析。其中，A :在 擬南芥fpa中過量表達OsRRMh產生的表型；B :半定量RT-PCR分析fpa+35s: :OsRRMh中 OsRRMh和FPA的表達水平；C :Col-0中過量表達OsRRMh造成晚開花；D :Col+35s: : OsRRMh 相比Col-Ο在蓮座葉數和延遲開花天數上的差異；1-5代表獨立轉基因植株篩選到的T3代 純合植株；E :半定量RT-PCR檢測自主開花控制途徑部分基因的表達水平。
[0079] 圖8顯示了水稻中的Spen-like蛋白組成元件及序列同源性。其中，A :由OsRRM、 OsRRMh、0s01g0765300編碼的水稻Spen-like蛋白的構成特征；B :用MEGA4[7]對水稻 和擬南芥中的Spen-like蛋白作系統進化樹分析；所用算法為Neighbor-Joining(NJ)， bootstrap重復為1000。系統進化樹中所顯示數字代表占 bootstrap值的百分比（%)。標 尺標注進化距離。C、D、E :水稻與擬南芥中的Spen-like蛋白之間分別進行RRM結構域和 SP0C結構域的序列比對。
[0080] 圖9顯示了對水培30天ZH11小苗在不同光照周期處理下OsRRMh的表達進行分 析。其中，A :長日照條件下（14小時光照，10小時黑暗）0sRRMh的表達模式；B:在短日照條 件下（10小時光照，14小時黑暗）0sRRMh的表達模式。白色、黑色標尺分別顯示光照和黑暗 時間。
[0081] 圖10顯示了 OsRRMh參與調控水稻開花時間的模式圖。

【具體實施方式】
[0082] 發明人經過廣泛而深入的研究，出乎意料地發現OsRRMh下調表達造成轉基因植 株開花延遲、每穗粒數變多以及穗變大，而OsRRMh或其SP0C編碼結構域的過量表達會造成 轉基因植株育性降低、穗型變小和結實率明顯降低；因此，對OsRRMh進行調控就可能對水 稻的各種性狀，例如開花時間、穗型以及結實率等等進行調節，進而調控水稻及稻米的產量 和質量。在此基礎上完成了本發明。
[0083] 本文所用的術語"分離的"是指物質從其原始環境中分離出來（如果是天然的物 質，原始環境即是天然環境）。如活體細胞內的天然狀態下的多聚核苷酸和多肽是沒有分離 純化的，但同樣的多聚核苷酸或多肽如從天然狀態中同存在的其他物質中分開，則為分離 純化的。因此，本文所用的術語"分離的OsRRMh多肽"是指OsRRMh蛋白基本上不含天然與 其相關的其它蛋白、脂類、糖類或其它物質。本領域的技術人員能用標準的蛋白質純化技術 純化OsRRMh蛋白。基本上純的多肽在非還原聚丙烯酰胺凝膠上能產生單一的主帶。
[0084] 本文所用的術語"OsRRMh多肽"或"OsRRMh蛋白"具有相同的含義，表示氨基酸序 列如SEQ ID N0:2所示的多肽，而其編碼多核苷酸表示SEQ ID NO: 1所示的多核苷酸。然 而，鑒于本發明的教導以及現有技術，本領域技術人員還應明白該術語包括OsRRMh蛋白的 變異形式，所述變異形式具有與OsRRMh蛋白相同或相似的功能，但其氨基酸序列與SEQ ID N0:2所示氨基酸序列有少量差異。這些變異形式包括（但不限于）：一個或多個（通常為 1-50個，較佳地1-30個，更佳地1-20個，最佳地1-10個，還更佳如1-8個、1-5個）氨基酸 的缺失、插入和/或取代，以及在C末端和/或N末端添加一個或多個（通常為20個以內， 較佳地為10個以內，更佳地為5個以內）氨基酸。例如，本領域技術人員熟知，用性能相近 或相似的氨基酸進行取代，例如，異亮氨酸與亮氨酸相互取代時，不會改變所得蛋白質的功 能。再例如，在C末端和/或N末端添加一個或數個氨基酸，例如為便于分離而添加的標簽 通常不會改變所得蛋白質的功能。
[0085] 多肽的變異形式包括：同源序列、保守性變異體、等位變異體、天然突變體、誘導突 變體、在高或低的嚴格性條件下能與OsRRMh蛋白DNA雜交的DNA所編碼的蛋白、以及利用 抗OsRRMh蛋白的抗血清獲得的多肽或蛋白。本發明還提供了其他多肽，如包含OsRRMh蛋 白或其片段的融合蛋白。除了幾乎全長的多肽外，本發明還包括了 OsRRMh蛋白的可溶性片 段。通常，該片段具有OsRRMh蛋白序列的至少約20個連續氨基酸，通常至少約30個連續 氨基酸，較佳地至少約50個連續氨基酸，更佳地至少約80個連續氨基酸，最佳地至少約100 個連續氨基酸。
[0086] 本發明還提供OsRRMh蛋白或多肽的類似物。這些類似物與天然OsRRMh蛋白的差 別可以是氨基酸序列上的差異，也可以是不影響序列的修飾形式上的差異，或者兼而有之。 這些多肽包括天然或誘導的遺傳變異體。誘導變異體可以通過各種技術得到，如通過輻射 或暴露于誘變劑而產生隨機誘變，還可通過定點誘變法或其他已知分子生物學的技術。類 似物還包括具有不同于天然L-氨基酸的殘基（如D-氨基酸）的類似物，以及具有非天然 存在的或合成的氨基酸（如β、氨基酸）的類似物。應理解，本發明的多肽并不限于上 述例舉的代表性的多肽。
[0087] 修飾（通常不改變一級結構）形式包括：體內或體外的多肽的化學衍生形式如乙 酰化或羧基化。修飾還包括糖基化。修飾形式還包括具有磷酸化氨基酸殘基（如磷酸酪氨 酸，磷酸絲氨酸，磷酸蘇氨酸）的序列。還包括被修飾從而提高了其抗蛋白水解性能或優化 了溶解性能的多肽。
[0088] 在本發明中，"OsRRMh蛋白保守性變異多肽"指與SEQ ID N0:2所示氨基酸序列相 t匕，有至多20個，較佳地至多10個，更佳地至多5個，最佳地至多3個氨基酸被性質相似或 相近的氨基酸所替換而形成多肽。
[0089] 因此，鑒于本發明的教導和現有技術，本領域技術人員可根據，例如下表所示進行 氨基酸替換而產生保守性變異的突變體。
[0090]

【權利要求】
1. 一種分離的OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的用途，其中，所述多肽或多核苷酸用于 改善水稻的性狀，所述水稻的性狀包括水稻開花時間、結實率、穗型；或者， 所述多肽或多核苷酸用于制備轉基因水稻。
2. 如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述改善水稻的性狀包括提高水稻的結實 率、增大水稻的穗型；或者 所述轉基因水稻的結實率提高、穗型增大； 從而提高水稻的產量。
3. 如權利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述多肽或多核苷酸具有以下特征： 所述多肽是：（i)具有SEQ ID N0:2所示氨基酸序列的多肽；或（ii)由SEQ ID NO: 2所示氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添加而形成的且具有OsRRMh 多肽功能的由（i)衍生的多肽；或 所述多核苷酸是：（i)具有SEQ ID NO :1所示序列的多核苷酸；或（ii)具有與SEQ ID NO :1所示序列互補的多核苷酸。
4. 一種改善水稻性狀的方法，所述方法包括：促進或抑制水稻中OsRRMh多肽或其編碼 多核苷酸的表達或活性。
5. 如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法包括：抑制水稻中OsRRMh多肽或 其編碼多核苷酸的表達或活性。
6. 如權利要求5所述的方法，其特征在于，利用SEQ ID NO :57所示的dsRNA抑制水稻 中OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的表達或活性。
7. -種制備轉基因水稻的方法，其中，所述方法包括步驟： (a) 促進或抑制水稻細胞中OsRRMh多肽的編碼多核苷酸的表達；和 (b) 培養（a)所述的水稻細胞，將其再生成水稻。 8. OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的拮抗劑的用途，其特征在于，所述OsRRMh多肽或其 編碼多核苷酸的拮抗劑可用于延遲水稻開花時間、提高水稻的結實率、增大水稻的穗型。
9. 如權利要求8所述的用途，其特征在于，所述OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的拮抗 劑是 SEQ ID NO :57 所示的 dsRNA。
10. -種OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的拮抗劑，其特征在于，所述拮抗劑抑制或下 調OsRRMh多肽或其編碼多核苷酸的活性或表達。
【文檔編號】C12N15/113GK104045697SQ201310084884
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2013年3月15日 優先權日:2013年3月15日
【發明者】蔡秀玲, 劉德瑞 申請人:中國科學院上海生命科學研究院