一種小鼠組織mRNA的提取方法
【專利摘要】本發明公開了一種小鼠組織mRNA的提取方法，其特征在于，步驟如下：首先將小鼠進行初步處理：即引頸處死法處死小鼠，然后解剖出其內臟器官；加入組織研磨成粉末狀，搖勻后室溫靜置10分鐘；加入重量體積為百分之十的氯化鈣溶液，然后蓋緊蓋子；隨后搖晃，37攝氏度孵育5分鐘；加入體積比為百分之五十的異丙醇，然后高速離心；棄上清；保留ＲＮＡ沉淀；加入無水乙醇；靜置半小時后再次高速離心，時間為２分鐘；用瓊脂糖凝膠進行電泳檢測即可；所述瓊脂糖凝膠質量百分比為百分之十；棄上清之前需要進行干燥，在溫度為８０度的烤箱中烘烤一分鐘。本發明的有益效果是：操作簡單，成本較低，可以準確進行篩選，重復操作性強，篩選精確。
【專利說明】—種小鼠組織mRNA的提取方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及生化實驗領域，具體涉及一種小鼠組織mRNA的提取方法。
【背景技術】
[0002]mRNA,即信使核糖核酸，攜帶遺傳信息，在蛋白質合成時充當模板的RNA。從脫氧核糖核酸(DNA)轉錄合成的帶有遺傳信息的一類單鏈核糖核酸(RNA)。它在核糖體上作為蛋白質合成的模板，決定肽鏈的氨基酸排列順序。mRNA存在于原核生物和真核生物的細胞質及真核細胞的某些細胞器(如線粒體和葉綠體沖。mRNA的復制，轉錄和翻譯:由一個DNA分子，邊解旋，邊轉錄。利用細胞核內部的游離核糖核苷酸和成其需要的堿基，規則遵循堿基互補配對原則。注:因為mRNA沒有T (胸腺嘧啶)，所以模版中出現A (腺嘌呤)時，由U(尿嘧啶)代替。以上過程叫做轉錄，在細胞核中完成。接著，mRNA穿過核孔。和細胞質中的核糖體結合。選擇tRNA運輸氨基酸，和對應的三個堿基排列好(如何排列請查詢:密碼子)。再與其它的氨基酸通過肽鍵連接在一起，形成肽鏈。以上過程叫做翻譯，在細胞質中完成。雖然人們已經破譯了決定生命基礎的蛋白質的氨基酸合成密碼，也知道了是DNA攜帶著這種密碼，但是，根據細胞學所掌握的事實:所有DNA都呆在細胞核內，而蛋白質卻存在于細胞質中，像DNA這樣的大分子是無法隨意進入細胞質的。然而密碼總是會被帶入細胞質的，這一來，人們不禁要問，是誰把鎖在細胞核內的DNA手里的密碼帶入了細胞質的呢？科學家們從DNA那里拷貝了一份密碼文件，并帶入了細胞質中。經過試驗和觀察，發現這個信使就是RNA——核糖核酸。
【發明內容】
[0003]本發明要解決的技術問題在于，針對現有技術缺陷，提供一種技術方案:
一種小鼠組織mRNA的提取方法，步驟如下:首先將小鼠進行初步處理:即引頸處死法
處死小鼠，然后解剖出其內臟器官；加入組織研磨成粉末狀，搖勻后室溫靜置10分鐘；加入重量體積為百分之十的氯化鈣溶液，然后蓋緊蓋子；隨后搖晃，37攝氏度孵育5分鐘；加入體積比為百分之五十的異丙醇，然后高速離心；棄上清；保留R N A沉淀；加入無水乙醇；靜置半小時后再次高速離心，時間為2分鐘；用瓊脂糖凝膠進行電泳檢測即可。
[0004]本發明中，所述瓊脂糖凝膠質量百分比為百分之十。
[0005]本發明中，棄上清之前需要進行干燥，在溫度為8 O度的烤箱中烘烤一分鐘。
[0006]本發明的有益效果是:操作簡單，成本較低，可以準確進行篩選，重復操作性強，篩選精確。
【具體實施方式】
[0007]—種小鼠組織mRNA的提取方法，其特征在于，步驟如下:首先將小鼠進行初步處理:即引頸處死法處死小鼠，然后解剖出其內臟器官；加入組織研磨成粉末狀，搖勻后室溫靜置10分鐘；加入重量體積為百分之十的氯化鈣溶液，然后蓋緊蓋子；隨后搖晃，37攝氏度孵育5分鐘；加入體積比為百分之五十的異丙醇，然后高速離心；棄上清；保留RN A沉淀；加入無水乙醇；靜置半小時后再次高速離心，時間為2分鐘；用瓊脂糖凝膠進行電泳檢測即可；所述瓊脂糖凝膠質量百分比為百分之十；棄上清之前需要進行干燥，在溫度為8 O度的烤箱中烘烤一分鐘。
[0008]以上所述，僅為本發明較佳的【具體實施方式】，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術領域】的技術人員在本發明披露的技術范圍內，根據本發明的技術方案及其發明構思加以等同替 換或改變，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.一種小鼠組織mRNA的提取方法，其特征在于，步驟如下:首先將小鼠進行初步處理:即引頸處死法處死小鼠，然后解剖出其內臟器官；加入組織研磨成粉末狀，搖勻后室溫靜置10分鐘；加入重量體積為百分之十的氯化鈣溶液，然后蓋緊蓋子；隨后搖晃，37攝氏度孵育5分鐘；加入體積比為百分之五十的異丙醇，然后高速離心；棄上清；保留RNA沉淀；加入無水乙醇；靜置半小時后再次高速離心，時間為2分鐘；用瓊脂糖凝膠進行電泳檢測即可。
2.如權利要求1所述的一種小鼠組織mRNA的提取方法，其特征在于，所述瓊脂糖凝膠質量百分比為百分之十。
3.如權利要求1所述的一種小鼠組織mRNA的提取方法，其特征在于，棄上清之前需要進行干燥，在溫度為8 O度的烤箱中烘烤一分鐘。`
【文檔編號】C12N15/10GK103614368SQ201310540660
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年11月5日 優先權日:2013年11月5日
【發明者】辛竹 申請人:辛竹