一種用于檢測保健食品中不得檢出的致病菌核苷酸片段的引物和探針的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種用于檢測保健食品中常見的“不得檢出”的致病菌核苷酸片段的引物和探針，所述的引物由上游引物Bac?F1a和下游引物Bac?R1組成，所述的上游引物Bac?F1a的堿基序列如序列表中SEQ?ID?NO：1所示，所述的下游引物Bac?R1的堿基序列如序列表中SEQ?ID?NO：2所示；所述的探針為Bac?Pb1探針，其堿基序列如序列表中SEQ?ID?NO：3所示。該引物和探針具有高度的特異性、敏感性、快速簡便、費用較低等特點，還能同時對保健食品中常見的“不得檢出”的多種致病菌核苷酸片段進行檢測。
【專利說明】—種用于檢測保健食品中不得檢出的致病菌核苷酸片段的引物和探針
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種用于檢測保健食品中“不得檢出”的致病菌核苷酸片段的引物和探針。
【背景技術】
[0002]保健(功能)食品是食品的一個種類，具有一般食品的共性，能調節人體的機能，適于特定人群食用，但不以治療疾病為目的。在保健品的生產、銷售與進出口貿易中，致病菌的污染亦成為重要的安全隱患?，F行有效的保健(功能)食品通用標準GB16740-1997中規定致病菌(指腸道致病菌和致病性球菌)不得檢出。我國將致病菌按其是否致病、致病力強弱、感染途徑、危害人體的嚴重性、傳染性的大小、當地人群的免疫水平、有無免疫制劑和特效治療藥物等分為1、2、3類和非致病菌，目前無微生物屬于第I類致病菌。第2、3類致病菌中的腸道致病菌、致病性球菌和常見的醫源性條件致病菌主要種屬及其代表性致病性菌株如下表1所示。由于食品行業長期執行的“不得檢出”的標準，因此對常見致病菌均具有高效靈敏檢出效果的通用型方法在保健食品的致病菌檢測中十分必要，不僅能降低逐項檢測致病菌造成的巨大工作量，也能降低檢測成本縮短檢測時間，在致病菌污染的監控方面起著重要的作用。
[0003]表1保健食品中常見的“不得檢出”致病菌種屬
[0004]
【權利要求】
1.一種用于檢測保健食品中常見的“不得檢出”的致病菌核苷酸片段的引物和探針，其特征是:所述的引物由上游引物Bac Fla和下游引物Bac Rl組成，所述的上游引物BacFla的喊基序列如序列表中SEQ ID NO:1所不,所述的下游引物Bac Rl的喊基序列如序列表中SEQ ID NO:2所不；所述的探針為Bac Pbl探針，其喊基序列如序列表中SEQ ID NO:3所示。
2.一種用于檢測保健食品中常見的“不得檢出”的致病菌核苷酸片段的引物和探針，其特征是:所述的引物的上游引物由堿基序列如序列表中SEQ ID NO:1所示的上游引物BacFla向5’端方向延伸10個堿基，向3’端方向延伸10個堿基組成；所述的下游引物由堿基序列如序列表中SEQ ID NO:2所示的下游引物Bac Rl向3’端方向延伸10個堿基，向5’端方向延伸10個堿基組成；所述的探針由堿基序列如序列表中SEQ ID NO:3所述的Bac Pbl探針向3’端方向延 伸10個堿基，向5’端方向延伸10個堿基組成。
【文檔編號】C12Q1/68GK103805700SQ201410039019
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2014年1月26日 優先權日:2014年1月26日
【發明者】黃生權, 肖性龍, 付萌, 胡雙芳, 唐青濤, 余以剛, 趙娜, 秦垂新 申請人:無限極（中國）有限公司