一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養基的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養基，該培養基的制備過程如下：稱取3.0g新鮮麩皮，加1000mL蒸餾水，微火煮沸1小時后，補水至1000mL，使麩皮液濃度為3g／L，然后用6層紗布過濾，濾液置4℃冰箱沉淀，虹吸上清液作為原液分別配制麩皮含量分別為0.1g／L，0.3g／L，0.6g／L麩皮瓊脂培養基，瓊脂含量均為2％；隨后在氣壓103kPa下滅菌20分鐘，傾注到平板或斜面上即得。本發明中所敘述的麩皮瓊脂培養基，易于儲存；實際應用中較馬鈴薯瓊脂培養基(PDA)具有更高的透明度，易于觀察，較之玉米粉瓊脂培養基(CMA)，真菌生長發育良好，縮短菌株培養時間，也易于形成孢子便于觀察和鑒定以及捕食結構的觀察，而且適合于菌種的保存。
【專利說明】一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養基
【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養基。
【背景技術】
[0002]目前用于食線蟲真菌初次分離的培養基主要有水瓊脂和0.4g / L的玉米粉瓊脂，純化培養基有馬鈴薯瓊脂培養基和0.4g / L的玉米粉瓊脂，而水瓊脂培養基在分離時要多次加入多量的線蟲又不能用于純化培養，0.4g / L的玉米粉瓊脂菌絲生長很細，馬鈴薯瓊脂培養基雖然菌絲生長粗但由于雜質較多不易觀察，兩者對于真菌的捕食結構觀察較難，且形成分生孢子的時間較長，如果要保存菌種于4°C則保持時間不長。

【發明內容】

[0003]本發明的目的是找到一種能夠更適合用于食線蟲真菌分離、純化和保存的培養基。該培養基的配方、制作和用途(技術方案)是:稱取3.0g新鮮麩皮，加1000mL蒸餾水，微火煮沸Ih后，補水至1000mL,使麩皮液濃度為3g / L，6層紗布過濾，濾液置4°C冰箱沉淀，虹吸上清液作為原液分別配制麩皮含量分別為0.1g / L，0.3g / L，0.6g / L麩皮瓊脂培養基，瓊脂含量均為2%。103kPa滅菌20min，傾注平板或斜面。0.1g / L和0.3g / L麩皮瓊脂平板，分別用于初次分離、純化食線蟲性真菌，將純化菌種接種于0.3g / L斜面上加膠塞密封，4°C冰箱保存I年后仍存活，0.6g / L麩皮瓊脂平板和斜面用于少數生長緩慢或極緩慢的捕食線蟲性真菌的純化和保存。以上為制作1000mL培養基的技術方案，如果少量制作或大量制作，則按以上比例縮小或擴大即可。
[0004]本發明的優點是:麩皮是面粉廠生產面粉后的副產品，來源廣泛，易獲得，價格低廉。本發明中所敘述的麩皮瓊脂培養基，經試驗培養捕食線蟲性真菌有其獨特優勢，較之下列培養基制作更方便，不用切碎或粉碎過篩，且麩皮比馬鈴薯易于儲存；實際應用中較馬鈴薯瓊脂培養基(PDA)具有更高的透明度，易于觀察，較之玉米粉瓊脂培養基(CMA)，真菌生長發育良好，縮短菌株培養時間，也易于形成孢子便于觀察和鑒定以及捕食結構的觀察，而且適合于菌種的保存。
【具體實施方式】
[0005]在下文中，現在將更充分地描述本發明，示出了各種實施例。然而，本發明可以以許多不同的形式來實施，且不應該解釋為局限于在此闡述的實施例。相反，提供這些實施例使得本公開將是徹底和完全的，并將本發明的范圍充分地傳達給本領域技術人員。
[0006]在下文中，將更詳細地描述本發明的示例性實施例。
[0007]本發明的目的是找到一種能夠更適合用于食線蟲真菌分離、純化和保存的培養基。該培養基的配方、制作和用途(技術方案)是:稱取3.0g新鮮麩皮，加1000mL蒸餾水，微火煮沸Ih后，補水至1000mL,使麩皮液濃度為3g / L，6層紗布過濾，濾液置4°C冰箱沉淀，虹吸上清液作為原液分別配制麩皮含量分別為0.1g / L，0.3g / L，0.6g / L麩皮瓊脂培養基，瓊脂含量均為2%。103kPa滅菌20min，傾注平板或斜面。0.1g / L和0.3g / L麩皮瓊脂平板，分別用于初次分離與純化食線蟲性真菌，將純化菌種接種于0.3g / L斜面上加膠塞密封，4°C冰箱保存I年后仍存活，0.6g / L麩皮瓊脂平板和斜面用于少數生長緩慢或極緩慢的捕食線蟲性真菌的純化和保存。。以上為制作1000mL培養基的技術方案，如果少量制作或大量制作，則按以上比例縮小或擴大即可。
[0008]本發明的優點是:麩皮是面粉廠生產面粉后的副產品，來源廣泛，易獲得，價格低廉。本發明中所敘述的麩皮瓊脂培養基，經試驗培養捕食線蟲性真菌有其獨特優勢，較之下列培養基制作更方便，不用切碎或粉碎過篩，且麩皮比馬鈴薯易于儲存；實際應用中較馬鈴薯瓊脂培養基(PDA)具有更高的透明度，易于觀察，較之玉米粉瓊脂培養基(CMA)，真菌生長發育良好，縮短菌株培養時間，也易于形成孢子便于觀察和鑒定以及捕食結構的觀察，而且適合于菌種的保存。
[0009]以上所述僅為本發明的實施例而已，并不用于限制本發明。本發明可以有各種合適的更改和變化。凡在本發明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保 護范圍之內。
【權利要求】
1.一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養基，其特征在于: 該培養基的制備過程如下:稱取3.0g新鮮麩皮,加1000mL蒸懼水,微火煮沸I小時后，補水至1000mL,使麩皮液濃度為3g / L，然后用6層紗布過濾，濾液置4°C冰箱沉淀，虹吸上清液作為原液分別配制麩皮含量分別為0.1g / L，0.3g / L，0.6g / L麩皮瓊脂培養基，瓊脂含量均為2% ;隨后在氣壓103kPa下滅菌20分鐘，傾注到平板或斜面上即得。
2.如權利要求1所述的一種食線蟲真菌分離、純化和保存培養基，其特征在于: 所述的0.1g / L和0.3g / L麩皮瓊脂平板，分別用于初次分離與純化食線蟲性真菌，將純化菌種接種于0.3g / L斜面上加膠塞密封，并在4°C冰箱保存； 。 0.6g / L麩皮瓊脂平板和斜面用于少數生長緩慢或極緩慢的捕食線蟲性真菌的純化和保存。
【文檔編號】C12N1/14GK103952319SQ201410150385
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2014年4月15日 優先權日:2014年4月15日
【發明者】蔡葵蒸, 劉翊中, 王波波, 徐春蘭, 王康英, 劉偉, 李禤, 徐強, 易林鑫, 王慧, 秦鴿鴿, 王冬梅 申請人:西北民族大學