一種顯微操作持定針的制作方法
【專利摘要】本發明公開了顯微操作持定針的制作方法。該制作方法包括如下步驟：(1)毛細玻璃管經加熱后進行拉伸，在外徑為150～170μm處斷開，得到連接有尖端部分的管體；(2)加熱所述管體的尖端部分，使所述尖端部分的內徑收縮至40～50μm；(3)將經步驟(2)處理后的所述管體與熱源水平放置且位于所述熱源的上方，沿水平方向上，使所述管體的尖端與所述熱源的距離為2～3mm；將所述管體進行加熱至其尖端部分向下彎曲至20～30°；至此即實現顯微操作持定針的制作。本發明提供的制作方法簡單快捷，利用本發明的制作方法制備得到的持定針能有效降低顯微操作持定針的制作成本，且該方法制作的持定針外徑在150～170μm，能有效固定豬的卵母細胞以及胚胎。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種顯微操作持定針的制作方法，屬于顯微操作工具制作【技術領域】。 一種顯微操作持定針的制作方法

【背景技術】
[0002] 顯微操作針是制作轉基因動物、體細胞核移植動物和嵌合體動物等操作的必備工 具之一。光滑、平整的操作針不僅能提高操作效率，減小對卵母細胞和胚胎的傷害，而且有 助于胚胎的恢復。目前商業化生產的持定針，其內外直徑較小，在用于豬體細胞核移植操作 以及胚胎操作時，不能對其進行有效固定，且由于內徑較小，在壓力較大時易對豬卵母細胞 造成損傷。另外，商業化的持定針價格較貴，增加了顯微操作的成本。而使用拉針儀自行制 作持定針還需要另外購買昂貴的拉針儀。因此，提供一種制作方便，價格低廉且能有效固定 豬卵母細胞的顯微操作持定針顯得尤為重要。


【發明內容】

[0003] 本發明的目的是提供一種顯微操作持定針的制作方法。本發明提供的顯微操作持 定針的制作方法簡單快速，成本低廉，制備得到的持定針可有效固定豬卵母細胞以及胚胎， 方便注射和去核操作。
[0004] 本發明提供的顯微操作持定針的制作方法，包括如下步驟：
[0005] (1)毛細玻璃管經加熱后進行拉伸，在外徑為150?170 μ m處斷開，得到連接有尖 端部分的管體。
[0006] (2)加熱所述管體的尖端部分，使所述尖端部分的內徑收縮至40?50 μ m ;
[0007] (3)將經步驟（2)處理后的所述管體與熱源水平放置且位于所述熱源的上方，沿 水平方向上，使所述管體的尖端與所述熱源的距離為2?3mm ;將所述管體進行加熱至其尖 端部分向下彎曲至20?30° ;至此即實現顯微操作持定針的制作。
[0008] 上述制作方法，步驟（1)中，所述毛細玻璃管的外徑可為1. 0mm，內徑可為0. 8mm， 長度可為1〇〇謹。
[0009] 上述制作方法，步驟（1)中，控制所述拉伸的長度可為40?50mm，具體操作時可使 用小砂輪斷開所述管體。
[0010] 上述制作方法，步驟（2)和步驟（3)中，具體可利用鍛針儀進行加熱。
[0011] 上述制作方法，步驟（3)中，控制所述管體的尖端與所述鍛針儀的電熱絲的距離 為2?3mm。
[0012] 上述制作方法，步驟（3)中，利用鍛針儀中的電熱絲對所述尖端部分加熱后，所述 尖端部分變軟，且可在自身重力的作用下彎曲。
[0013] 本發明具有如下優點：
[0014] 本發明提供的制作方法簡單快捷，利用本發明的制作方法制備得到的持定針能有 效降低顯微操作持定針的制作成本，且該方法制作的持定針外徑為150?170 μ m，能有效 固定豬的卵母細胞以及胚胎。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0015] 圖1為顯微操作持定針的結構示意圖。
[0016] 圖2為顯微操作持定針的尖端部分的結構示意圖。
[0017] 圖3為拉伸過程示意圖，其中，圖3(a)為拉伸過程示意圖，圖3(b)為拉伸之后毛 細玻璃管的示意圖。
[0018] 圖4為加熱過程示意圖，其中，圖4(a)為煅燒前，圖4(b)為煅燒后。
[0019] 圖5為彎針過程示意圖，其中，圖5(a)為彎針前，圖5(b)為彎針后。
[0020] 圖6為本發明提供的顯微操作持定針和商業化的顯微操作持定針的對比圖，其 中，圖6(a)為本發明提供的顯微操作持定針，圖6(b)為商業化的持定針。
[0021] 圖7為利用商業化持定針固定豬卵母細胞時進行顯微操作的照片，其中，圖7(a) 為入針，圖7(b)和圖7(c)為入針導致卵母細胞從持定針上滑開，箭頭為滑動的方向，圖 7(d)為退針。
[0022] 圖8為本發明提供的顯微操作持定針固定豬卵母細胞進行顯微操作的照片，其 中，圖8(a)為側面入針，圖8(b)和圖8(c)為側面入針可以使卵母細胞原地轉動，但不會脫 離持定針，箭頭為轉動的方向，圖7(d)為退針。

【具體實施方式】
[0023] 下面結合實施例對本發明做進一步說明，但本發明并不局限于以下實施例。
[0024] 實施例1、顯微操作持定針的制作
[0025] 本發明提供的顯微操作持定針的制作方法，包括如下步驟：
[0026] (1)拉伸：如圖3所示，用兩手固定BJ-40毛細玻璃管（外徑1.0mm，內徑0.8mm， 長100mm)，在酒精燈外焰上旋轉加熱中部，感覺到融化后迅速運力拉伸，同時離開酒精燈外 焰。選擇外徑在150?170 μ m的部分，用小砂輪斷開一端。
[0027] 如圖1和圖2所示，毛細玻璃管拉伸之前外徑為1. 0mm，內徑0· 8mm ;拉伸之后，拉 細部分的外徑為150?170 μ m，長度為1?2cm。若拉伸后無法找到外徑在150?170 μ m 的部分，則需重新拉制。
[0028] (2)鍛燒：如圖4所示，把上述拉伸后的毛細玻璃管的尖端靠近電熱絲，并固定到 MF-900型鍛針儀上，斷續加熱電熱絲，將尖端接近電熱絲，開始加熱使之融化。同時利用目 鏡中的標尺觀察尖端內徑的變化情況，使之收縮到40?50 μ m左右。
[0029] (3)彎針：如圖5所示，將經步驟（2)處理后的管體水平放置到MF-900型煅針儀 上，使其位于電熱絲上方，尖端末端突出加熱絲約2?3mm。移動電熱絲，使其幾乎接觸固定 針，斷續加熱電熱絲直到針變軟在自身重力作用下彎曲20?30°。
[0030] 如圖1所示，彎曲部分的長度為2?3mm，彎曲部分與管體的夾角為20?30°。
[0031] 利用上述制作方法制作得到的顯微操作持定針如圖6(a)所示，圖6(b)為商業化 的顯微操作持定針的對比圖。由圖6可知，利用本發明的制作方法制得的持定針與商業化 的持定針相比，外徑和內徑更大，這為對豬卵母細胞以及胚胎操作提供了有利條件。
[0032] 實施例2、利用顯微操作持定針固定豬卵母細胞
[0033] 利用本發明提供的制作方法制得的持定針和商業化的持定針分別固定豬卵母細 胞進行顯微操作，對比實驗效果：
[0034] 圖7為利用商業化持定針固定豬卵母細胞時進行顯微操作的照片，由圖7可以看 出，圖7(b)和圖7(c)中的入針操作導致卵母細胞從持定針上滑開，其中圖中箭頭為滑動 的方向；圖8為本發明提供的顯微操作持定針固定豬卵母細胞進行顯微操作的照片，由圖 8 (b)和圖8 (c)可以看出，側面入針可使卵母細胞原地轉動，但不會脫離持定針，圖中的箭 頭為轉動的方向。
[0035] 這是由于商業化的持定針外徑較小，在對豬的卵母細胞或者胚胎進行顯微操作 時，細胞或胚胎容易從持定針上劃開，導致操作失敗。而本方法制作獲得的持定針外徑與豬 卵母細胞基本相當，在顯微操作中能有效固定細胞或胚胎，且可以使用注射針對細胞或胚 胎進行轉動，調整其方位。
【權利要求】
1. 一種顯微操作持定針的制作方法，包括如下步驟： (1) 毛細玻璃管經加熱后進行拉伸，在外徑為150?170 μ m處斷開，得到連接有尖端部 分的管體； (2) 加熱所述管體的尖端部分，使所述尖端部分的內徑收縮至40?50 μ m ; (3) 將經步驟（2)處理后的所述管體與熱源水平放置且位于所述熱源的上方，沿水平 方向上，使所述管體的尖端與所述熱源的距離為2?3mm ;將所述管體進行加熱至其尖端部 分向下彎曲至20?30° ;至此即實現顯微操作持定針的制作。
2. 根據權利要求1所述的制作方法，其特征在于：步驟（1)中，所述毛細玻璃管的外徑 為1. 0mm,內徑為0· 8mm,長度為100mm。
3. 根據權利要求1或2所述的制作方法，其特征在于：步驟（1)中，控制所述拉伸的長 度為40?50mm。
4. 根據權利要求1-3中任一項所述的制作方法，其特征在于：步驟（2)和步驟（3)中， 利用鍛針儀進行加熱。
5. 根據權利要求1-4中任一項所述的制作方法，其特征在于：步驟（2)中，所述尖端部 分與所述加熱的熱源垂直放置。
6. 根據權利要求4或5所述的制作方法，其特征在于：步驟⑶中，控制所述管體的尖 端與所述鍛針儀的電熱絲的距離為2?3mm。
【文檔編號】C12M1/00GK104099239SQ201410328051
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2014年7月10日 優先權日:2014年7月10日
【發明者】劉志國, 李奎, 李林 申請人:中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所