一種狗蟻草提取物的應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了狗蟻草提取物在制備保護肝損傷功能的藥物、食品和保健品中的應用，具體為可以制備保護由于急慢性肝損傷功能的藥物、食品和保健品，狗蟻草優選提取物為乙酸乙酯提取物，可以通過添加藥學和食品相關載體、輔料，制成多種劑型，通過對小鼠試驗結果顯示，狗蟻草提取物可以明顯降低CCl4和D-GalN和所致急性肝損小鼠傷血清ALT、AST含量，并可明顯改善CCl4和D-GalN引起的肝組織病理改變，從而起到保護作用。
【專利說明】一種狗蟻草提取物的應用

【技術領域】
[0001] 本發明屬于藥學領域，具體涉及一種狗蟻草提取物的應用，具體涉及狗蟻草提取 物在制備保護肝損傷功能的藥物、食品和保健品中的應用。

【背景技術】
[0002] 狗蟻草為豆科植物鏈莢豆（Alysicarpus vaginalis(L. )DC.)的全草，另Ij稱山上 豆、山地豆、假花生、大葉青、廖藍豆、單葉草等。原產于南亞、東非。廣布于東半球熱帶地 區。喜熱帶潮濕干旱氣候。稍耐旱、耐酸，不耐漬。在砂壤土上生長良好，但易感染線蟲病， 故通常種于粘土上。狗蟻草具有諸多藥用功效，全草：甘、苦，平；活血通絡，清熱化濕，駁骨 消腫；用于跌打損傷，半身不遂，股骨酸痛，肝炎；蛇咬傷，骨折，外傷出血，瘡瘍潰爛久不收 口。《中華本草》傣藥卷中記載按如下附方可以清火解毒，利膽退黃，主治"攏牛"，即小便熱 澀疼痛等癥：狗蟻草30g，野蘆谷根20g。煎湯內服(景洪市名傣醫康郎侖驗方）；治"攏案答 勒"：狗蟻草30g，射干20g。煎湯內服(景洪市傣醫波的應驗方）。
[0003] 肝臟作為人體腹腔內最大的實質性器官，擔負著重要的生理功能。肝細胞對缺氧 的耐受力較差，故有肝動脈和門靜脈提供豐富的血液供應，并有大小膽管與血管伴行輸送 膽汁。它位于右上腹的深部，有下胸壁和膈肌的保護。在人體受到外界環境刺激或影響時容 易造成肝損傷：1、病毒感染：由多種肝炎病毒引起，具有傳染性強，傳播途徑復雜，流行面 廣泛，發病率高等特點。2、藥物或化學毒物：許多藥物和化學毒物都可引起肝臟損傷，發生 藥物性肝炎或中毒性肝炎。3、酗酒：酒精對肝臟的損害是很嚴重的，損害的后果包括酒精性 肝炎、酒精性脂肪肝、酒精性肝硬化，主要是由于酒精（乙醇）及其代謝產物乙醛的毒性對 肝細胞直接損害造成的。4、其他原因：原發和繼發的肝臟腫瘤、心功能不全導致肝臟淤血、 某些先天性肝臟疾病、靜脈高價營養等，都可以造成不同程度的肝損害，這些肝損害的早期 表現往往是ALT(轉氨酶）或膽紅素的升高，不祛除病因，肝臟的損害會進一步加重。5、很 多全身性傳染病都可侵犯肝臟，如EB病毒、細菌性傳染病中的傷寒等，都可以引起血清轉 氨酶的升高或其他肝功能異常。一旦遭受暴力容易損傷，發生腹腔內出血或膽汁泄漏，引起 出血性休克或膽汁性腹膜炎，后果嚴重，必須及時診斷和正確處理。目前應用于肝損傷病人 的常用藥品有聯苯雙酯、硫普羅寧、綠汀諾、辰吉格、海諾欣及諾百力等。
[0004] 發明人通過過年研究，通過科學的實驗發現，狗蟻草提取物在治療急性肝損傷方 面有較為突出的效果，同時還發現了其治療的作用機理。


【發明內容】

[0005] 本發明的目的是提供一種狗蟻草提取物在制備保護肝損傷功能的藥物、食品和保 健品中的應用。
[0006] 本發明的目的是通過如下技術方案實現的： 狗蟻草提取物在制備保護肝損傷功能的藥物、食品和保健品中的應用。
[0007] 所述肝損傷為急性肝損傷。
[0008] 所述狗蟻草提取物提取方法為：水提、醇提、酯提、酮提、層析、真空提取、超臨界流 體萃取法、超聲提取法、酶法提取、微波提取法。
[0009] 所述醇提溶劑為甲醇、乙醇、正丁醇；所述酯提溶劑為乙酸乙酯、醋酸丁酯、醋酸乙 酯；酮提溶劑為丙酮、環己酮。
[0010] 所述狗蟻草提取物優選為乙酸乙酯提取物：提取具體步驟為： (1)將狗蟻草洗凈、在18-25°c室溫下通風干燥、剪碎并稱重，置于開口反應器中。
[0011] (2)在開口反應器中加入3-5倍95%乙醇（v/v)浸泡12-24h，再加入95%乙醇（v/ v)至藥材10-15倍量，進行回流提取。
[0012] (3)保持微沸2h，過濾，得第一次提取液；藥材冷卻后，第二次加10-15倍量95%乙 醇（v/v)，保持微沸1. 5小時，得第二次濾液；藥材冷卻后，第三次加入10-15倍量95%乙醇 (v/v)，保持微沸1小時，得第三次濾液，合并3次提取液，經旋轉蒸發儀濃縮，得到相對密度 為1. 25-1. 28的乙醇浸膏。
[0013] (4)將乙醇浸膏置于水浴鍋上，加熱至80_85°C，揮發，真空干燥，直至浸膏重量不 再減輕，得到相對密度為1. 30-1. 32的浸膏，稱重。
[0014] (5)加入5-10倍純水將乙醇浸膏全部溶解，再加入2-3倍量石油醚進行萃取，輕輕 震搖，靜置，直至出現清晰的分層界面，吸取上層石油醚溶液，重復石油醚萃取過程2-5次， 直至石油醚層顏色為淡黃色且不再變淡。
[0015] (6)按步驟（5)方法，用乙酸乙酯對浸膏進行萃取，將乙酸乙酯萃取液用旋轉蒸 發儀進行濃縮，得到相對密度為1.22-1. 24的狗蟻草乙酸乙酯浸膏，將乙酸乙酯浸膏置 于水浴鍋上，加熱至80-85 °C，揮發溶劑并轉移入真空干燥箱繼續干燥，得到相對密度為 1. 28-1. 30的狗蟻草乙酸乙酯提取物。
[0016] 保護肝損傷功能的藥物，是由以狗蟻草提取物為主要有效成分和藥學上可接受的 輔料組成，狗蟻草提取物在藥物配方中的重量百分比為0. 1-99%。同時加工為多種劑型，可 以為丸劑、顆粒劑、液劑、注射劑、膠囊劑、片劑。所述輔料可以為：甘露醇、山梨醇、山梨酸或 鉀鹽、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素 A、 維生素 C、維生素 E、維生素 D、氮酮、EDTA二鈉、EDTA鈣鈉，乳酸鈉、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、 果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚 乙烯吡咯烷酮、甘油、丙二醇、乙醇、蜂蠟、羊毛脂、液體石蠟、十六醇、沒食子酸酯類、瓊脂、 三乙醇胺、堿性氨基酸、聚乙二醇、環糊精、β -環糊精、磷脂類材料、高嶺土、滑石粉、硬脂酸 I丐、硬脂酸鎂，大豆油、橄欖油、茶油、棕櫚油、當歸油、沙棘油、莪術油、川彎油、薏米仁油、紅 花油、花椒油、大蒜油、蛋黃卵磷脂、大豆磷脂、氫化蛋黃卵磷脂、氫化大豆磷脂、人工合成磷 月旨、油酸或油酸鹽、維生素 E ;亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、維生素 C等。
[0017] 保護肝損傷功能的食品和保健品，是由以狗蟻草提取物為主要有效成分和食品添 加劑、食品原料組成，狗蟻草提取物在配方中的重量百分比為1-50%。可以加工為液劑、片 齊U、顆粒劑、膠囊劑或作為食品輔料加工為粗糧、糕點、飲料。加工為食品和保健品是因為發 明人發現：狗蟻草提取物不僅作為藥物可以直接作用于肝損傷部位起到保護效果，還可以 作為食品或保健品被病人服用后進行調理身體，對于肝損傷病人的身體恢復也能起到良好 效果。
[0018] 本發明的有益效果：本發明的狗蟻草提取物對急慢性肝損傷有良好的治療效果， 同時狗蟻草提取物在作為食品和保健品應用方面，對于肝損傷病人也有較好的恢復效果， 這說明本發明的狗蟻草提取物具有較好的保護肝損傷作用，可用于制備保護肝損傷功能的 藥物、食品和保健品，為狗蟻草提取物的應用開發了一種新用途。

【具體實施方式】
[0019] 實施例一狗蟻草乙酸乙酯提取物的制備 具體步驟為： (1) 將狗蟻草洗凈、在18-25°C室溫下通風干燥、剪碎并稱重，置于開口反應器中； (2) 在開口反應器中加入3-5倍95%乙醇（v/v)浸泡12-24h，再加入95%乙醇（v/v)至 藥材10-15倍量，進行回流提取； (3) 保持微沸2h，過濾，得第一次提取液；藥材冷卻后，第二次加10-15倍量95%乙醇 (v/v)，保持微沸1. 5小時，得第二次濾液；藥材冷卻后，第三次加入10-15倍量95%乙醇（v/ v)，保持微沸1小時，得第三次濾液，合并3次提取液，經旋轉蒸發儀濃縮，得到相對密度為 1. 25-1. 28的乙醇浸膏； (4) 將乙醇浸膏置于水浴鍋上，加熱至80-85°C，揮發，真空干燥，直至浸膏重量不再減 輕，得到相對密度為1. 30-1. 32的浸膏，稱重； (5) 加入5-10倍純水將乙醇浸膏全部溶解，再加入2-3倍量石油醚進行萃取，輕輕震 搖，靜置，直至出現清晰的分層界面，吸取上層石油醚溶液，重復石油醚萃取過程2-5次，直 至石油醚層顏色為淡黃色且不再變淡； (6) 按步驟（5)方法，用乙酸乙酯對浸膏進行萃取，將乙酸乙酯萃取液用旋轉蒸發儀進 行濃縮，得到相對密度為1. 22-1. 24的狗蟻草乙酸乙酯浸膏，將乙酸乙酯浸膏置于水浴鍋 上，加熱至80-85°C，揮發溶劑并轉移入真空干燥箱繼續干燥，得到相對密度為1. 28-1. 30 的狗蟻草乙酸乙酯提取物。
[0020] 實施例二狗蟻草提取物加工為食品和保健品 1將狗蟻草乙醇提取物真空干燥，加入淀粉、葡萄糖、膳食纖維后，充分攪拌，粗粉碎至 60-80目，真空包裝，按IOg/袋分裝，即得其速溶粉劑。
[0021] 2.將狗蟻草乙醇提取浸膏，再次蒸發乙醇至含量低于0. 1%，加入膳食纖維、麥乳 精、木糖醇、面粉，在粉碎機中粉碎至60-80目，加入5-10%純凈水，擠壓造粒，干燥，過篩，包 裝，即得其顆粒劑。
[0022] 3.將狗蟻草乙酸乙酯提取物浸膏，加純水攪拌溶解，加入防腐劑、蜂蜜、紅豆汁，經 滅菌、消毒后灌裝，得其液劑。
[0023] 4.將狗蟻草全株超臨界流體萃取法制得的提取物，烘干后，作為輔料加入粗糧制 品中，添加量為20%，最終制成各易被人體消化吸收的粗糧制品。
[0024] 5.將狗蟻草全株真空提取制得的提取物，烘干后，作為輔料加入小蘇打餅干原料 中，精加工制成狗蟻草蘇打餅干，其提取物添加量為5%。
[0025] 6.將狗蟻草乙酸乙酯提取物再次揮發溶劑，至溶劑含量不得高于0. 01%，加入蜂 蜜、維生素 E、維生素 B1、葉酸、葡萄糖酸亞鐵、葡萄糖酸鋅、大豆油和蜂蠟，制成保健品膠 囊，每粒含狗蟻草提取物50mg，每粒重500mg。
[0026] 7.將狗蟻草超聲提取物烘干后，加入亞硒酸鈉、蜂蠟、甘油、明膠、氧化鐵棕，制成 保健品膠囊，每粒含狗蟻草提取物80mg，每粒膠囊重500mg。
[0027] 效果實施例 1狗蟻草乙酸乙酯提取物對CCl4和D-DalN所致小鼠急性肝損傷的保護作用 1. 1實驗材料 1. 1. 1實驗動物 昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重20±2g，由廣西中醫藥大學實驗動物中心提供，合格 證號，桂醫動字第11004號。
[0028] I. 1. 2實驗試劑 聯苯雙酯滴丸：250丸/瓶浙江萬邦藥業股份有限公司，批號：A02140101 四氯化碳（CCL4):(分析純500ml/瓶）廣東西隴化工廠產品，批號：20111130 ; D-半乳糖胺鹽酸鹽（D-GalN · HCL) :Sigma Batch No:080612 谷丙轉氨酶（ALT)測試盒，南京建成試劑有限公司，批號：20140410 谷草轉氨酶（AST)測試盒，南京建成試劑有限公司，批號：20140303 I. 1. 3實驗儀器

【權利要求】
1. 狗蟻草提取物在制備保護急性肝損傷功能的藥物、食品和保健品中的應用。
2. 根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述肝損傷為急性肝損傷。
3. 根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述狗蟻草提取物提取方法為：水提、醇 提、酯提、酮提、層析、真空提取、超臨界流體萃取法、超聲提取法、酶法提取、微波提取法。
4. 根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述醇提溶劑為甲醇、乙醇、正丁醇；所述 酯提溶劑為乙酸乙酯、醋酸丁酯、醋酸乙酯；酮提溶劑為丙酮、環己酮。
5. 根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述狗蟻草提取物為乙酸乙酯提取物：提 取具體步驟為：先將狗蟻草干燥粉碎后，用95%乙醇浸泡后，進行回流提取，保持微沸2h，過 濾，得第一次提取液，藥材冷卻后，再加12倍量95%乙醇，保持微沸1. 5小時，得第二次濾 液； 藥材稍稍冷卻，加入12倍量95%乙醇，保持微沸1小時，得第三次濾液，合并3次提取 液，旋轉蒸發儀濃縮，先制得95%乙醇浸膏；干燥后用水溶解，然后依次用石油醚、氯仿、乙 酸乙酯進行萃取，經濃縮、揮發溶劑和真空干燥后，即得。
6. -種保護肝損傷功能的藥物，其特征在于：是由以狗蟻草提取物為主要有效成分和 藥學上可接受的輔料組成，狗蟻草提取物在藥物配方中的重量百分比為〇. 1-99%。
7. 根據權利要求6所述的保護肝損傷功能的藥物，其特征在于：可以加工為丸劑、顆粒 齊U、液劑、注射劑、膠囊劑、片劑。
8. -種保護肝損傷功能的食品和保健品，其特征在于：是由以狗蟻草提取物為主要有 效成分和食品添加劑、食品原料組成，狗蟻草提取物在配方中的重量百分比為1-50%。
9. 根據權利要求8所述的保護肝損傷功能的食品和保健品，其特征在于：可以加工為 液劑、片劑、顆粒劑、膠囊劑或作為食品輔料加工為粗糧、糕點、飲料。
【文檔編號】A23L2/52GK104367612SQ201410667200
【公開日】2015年2月25日 申請日期:2014年11月20日 優先權日:2014年11月20日
【發明者】鄭作文, 唐云麗, 黃麗貞 申請人:廣西中醫藥大學