本發(fā)明屬于生物飼料技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種新型的用于動物疾病預(yù)防和治療的特異性卵黃抗體制劑配方及制備方法。

背景技術(shù)：

由于抗生素的使用而導(dǎo)致的藥物殘留，已成為制約我國水產(chǎn)產(chǎn)品國際市場競爭力的一個主要問題。IgY(卵黃抗體)具有無毒、無殘留、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點，發(fā)展前景備受矚目。此外IgY制備成本低、產(chǎn)出率高、提純簡便快捷，并具有耐熱、穩(wěn)定性好等優(yōu)點，已經(jīng)被廣泛地制成產(chǎn)品來進(jìn)行動物疾病的預(yù)防和治療。例如用制成的IgY制劑來喂食海參，防治海參腐皮綜合征等。

當(dāng)前的IgY產(chǎn)品大都為凍干粉或片狀、膏狀制劑，但是凍干粉以及片狀、膏狀制劑的制備工藝復(fù)雜，成本較高，而且有效成分在制備提純的過程中會有較大損失。基于以上考慮，我們直接將含特異性卵黃抗體的雞蛋與經(jīng)過微切助互作技術(shù)處理過的玉米芯載體結(jié)合，制成飼料添加劑，不但解決了有效成分損失的問題而且制備工藝大為簡化，節(jié)約大量能源，生產(chǎn)成本大為降低。

將微切助互作技術(shù)用于飼料添加劑的制備，破碎細(xì)胞壁和改性天然活性物質(zhì)，是近年來發(fā)展起步的一個新的應(yīng)用領(lǐng)域。微切助互作技術(shù)源于機(jī)械化學(xué)，其基本原理是在粉碎過程中，固體原料顆粒團(tuán)經(jīng)過微切變，細(xì)胞壁破碎，細(xì)胞表面產(chǎn)生新鮮切面，化學(xué)助劑與有效成分之間發(fā)生基團(tuán)或分子間的相互吸附或作用，改變植物有效成分的微觀性能,表面能增加,比表面積增大，吸附性、極性增加,改變其溶解性，進(jìn)而提高目標(biāo)有效成分的生物利用度。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

發(fā)明人從節(jié)約成本出發(fā)，認(rèn)真考慮了特性性卵黃抗體的提純制備方法，并從中吸取寶貴的經(jīng)驗，采用將特異性帶殼全蛋液與經(jīng)過微切助互作處理過的玉米芯載體直接混合的方法，使產(chǎn)品不但在功能上完全滿足要求，而且節(jié)省了卵黃抗體提純過程中需要消耗的大量能量，降低了生產(chǎn)成本。

本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：一種特異性卵黃抗體制劑，按照質(zhì)量比，由下述組分組成：

所述的微切玉米芯載體用微切助互作技術(shù)處理玉米芯粉過程中，使用的助劑為碳酸鈣或碳酸氫鈣，助劑用量為1％-8％(w/w)，超微粉碎時間為5min-15min。

特異性帶殼全蛋和玉米芯粉的質(zhì)量配比為1:1-3:1。

所述的特異性卵黃抗體制劑的制備方法，包括如下步驟：

(1)將玉米芯粉用微切助互作技術(shù)處理后，過60-200目篩子備用；

(2)將高免蛋清洗后，帶殼打入容器中，攪拌；

(3)將特異性帶殼全蛋液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀；

(4)添加山梨酸鉀、丙酸鈣，攪拌均勻；

(5)將過篩后的玉米芯載體加入蛋黃液中，攪拌至均勻，形成軟硬適中的團(tuán)狀固體，制成軟顆粒

(6)室溫下晾干；

(7)粉碎過篩；

(8)制成飼料添加劑。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

本發(fā)明從IgY發(fā)揮最佳效果以及節(jié)約能源降低成本的目的出發(fā)，改變了傳統(tǒng)的制備IgY產(chǎn)品的方法，不再將IgY制成凍干粉或者提純以后當(dāng)做飼料添加劑加入到飼料當(dāng)中。而是直接將含有富含特異性IgY的特異性帶殼全蛋液與玉米芯粉進(jìn)行混合加工，這樣不但減少了在分離、提純以及凍干過程中IgY的損失，而且還簡化了生產(chǎn)工藝，本產(chǎn)品很重要的一點就是，天然的玉米芯載體解決了以往卵黃抗體生產(chǎn)提純過程中需要大量消耗能源的難題,極大的降低了成本。

表1各種方法生產(chǎn)IgY制劑綜合比較

從表1可以看出，在不考慮人工成本及設(shè)備折舊等因素的情況下，本方法前期投入的設(shè)備成本最低，單位能耗降到了原來的1/5甚至更多，節(jié)能效果顯著，而且生產(chǎn)過程簡單，生產(chǎn)方式靈活，制約因素較少，具有很強(qiáng)的實際應(yīng)用價值。

附圖說明

圖1是低成本生產(chǎn)特異性卵黃抗體制劑的流程圖；

圖2是普通玉米芯顆粒圖；

圖3是微切助互作技術(shù)處理的玉米芯載體；

圖4標(biāo)準(zhǔn)IgY曲線；

圖5不同時期IgY制劑的吸光值。

具體實施方式

以下結(jié)合技術(shù)方案詳細(xì)敘述本發(fā)明的實施例。

實施例1

將玉米芯粗粉進(jìn)行超微粉碎，超微粉碎時加入助劑，使用的助劑為碳酸鈣，助劑用量為5％(w/w)，粉碎時間10min。

通過掃描電鏡照片進(jìn)行對比，可以發(fā)現(xiàn)采用微切助互作技術(shù)處理后的玉米芯載體其表面更加粗糙，表面積變得更大，相應(yīng)的其結(jié)合吸附能力更強(qiáng)。實驗表明，相對于普通玉米芯載體，采用微切助互作技術(shù)處理后的玉米芯載體吸附能力可增加30％-100％。

實施例2

將玉米芯粉用微切助互作技術(shù)處理后，過100目篩子，稱取300g備用；將經(jīng)過注射滅活黃海希瓦氏菌免疫后的高免蛋，用蛋黃分離器取蛋黃600g打入容器中，攪拌；將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀；添加0.9g山梨酸鉀、2.7g丙酸鈣，攪拌均勻；將過篩后的玉米芯粉加入到帶殼全蛋液中，攪拌至均勻，形成軟硬度適中的團(tuán)塊狀固體；然后用制粒機(jī)制成直徑3mm軟顆粒；室溫下晾干；用粉碎機(jī)粉碎后過100目篩子，包裝；制成飼料添加劑。

實施例3

將玉米芯粉用微切助互作技術(shù)處理后，過60目篩子，稱取500g備用；將經(jīng)過注射滅活燦爛弧菌免疫后的高免蛋，用蛋黃分離器取蛋黃900g打入容器中，攪拌；將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀；添加1.5g山梨酸鉀、4.5g丙酸鈣，攪拌均勻；將過篩后的玉米芯粉加入到帶殼全蛋液中，攪拌至均勻，形成軟硬度適中的團(tuán)塊狀固體；然后用制粒機(jī)制成直徑3mm軟顆粒；室溫下晾干；用粉碎機(jī)粉碎后過100目篩子，包裝；制成飼料添加劑。

實施例4

IgY含量檢測

稱取制得的IgY制劑1g,加30ml包被液,超聲波震蕩15min,稀釋100倍后，每孔加100ul包被96孔酶標(biāo)板，4℃過夜。用洗滌液洗滌酶標(biāo)板3次,每孔加100ul封閉液,37℃溫育2h后甩干、洗滌3次,再向各孔加兔抗雞IgG-HRP100ul,37℃反應(yīng)lh；洗滌液洗滌各孔5次,每孔加100ul TMB底物緩沖液,室溫下顯色20min,每孔加50ul 2M硫酸終止反應(yīng),用酶標(biāo)儀測OD_450/630nm。然后與標(biāo)準(zhǔn)IgY曲線對比，算出不同時期樣品里的特異性IgY含量。

由圖4可以看出，本產(chǎn)品在半年內(nèi)特異性IgY含量并無明顯降低并維持在較高的狀態(tài)，說明本產(chǎn)品可在較長的時間內(nèi)持續(xù)有效。