本發明涉及微生物飼料添加劑技術領域，尤其涉及一種提高中華絨螯蟹肉質的微生物飼料添加劑及其制備方法。

背景技術：

在中國，中華絨螯蟹是極受歡迎的美食，近幾年大閘蟹的人工養殖產量逐年快速增長，成為水產經濟養殖重要組成部分。但隨著水產養殖集約化的提高，抗生素不斷濫用，導致環境污染，病害加重，新的抗菌方法或者替代品急需被研制出來以減少抗生素的使用。人和動物的體表和體內含有數量龐大物種極多結構復雜的微生物，這其中腸道細菌數量和種類又是最多的。目前研究發現，腸道細菌主要在消化吸收、免疫系統和新陳代謝等方面協助人體腸道發揮作用。水產動物的腸道中同樣擁有復雜的微生物系統，針對魚類的腸道微生物研究較為充足，功能與人類腸道細菌相似。目前，尚無針對提高中華絨螯蟹生產性能和肉質的微生物飼料添加劑，而此類飼料添加劑亟待開發。

技術實現要素：

本發明的目的是提供一種提高中華絨螯蟹肉質的微生物飼料添加劑及制備方法，有效提高中華絨螯蟹重量，同時提高蟹肉品質，降低飼料餌料系數。

為了實現上述技術目的，本發明采用的技術措施為：

一種提高中華絨螯蟹肉質的微生物飼料添加劑，微生物飼料添加劑包括枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢桿菌(Bacillus lincheniformis)及蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)。其中，上述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)保藏于農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC 11060；所述地衣芽孢桿菌(Bacillus lincheniformis)保藏于農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC 10236；所述蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)保藏于農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC 11077。

進一步地，草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌的活菌數量比例為1-5：1-5：1-3；優選地，所述微生物飼料添加劑中枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌的活菌數量比例為4-5：3-4：1-2。

另一方面，本發明還提供一種制備上述的微生物飼料添加劑的方法，包括以下步驟：

步驟1，將枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌按照比例預混合得到預混合復合菌；

步驟2，將步驟1所得到的預混合復合菌溶解于1.5-2.5％濃度的海藻酸鈉溶液中，乳化并攪拌混合，菌膠比例1:2-15包被后噴霧干燥，得到提高中華絨螯蟹肉質的微生物飼料添加劑。

進一步地，所述步驟2中的乳化時間為5-30min,攪拌混合速度為200-800r/min。

最后，本發明還提供一種提高中華絨螯蟹肉質的飼料，飼料添加有上述的微生物飼料添加劑；優選地，微生物飼料添加劑添加量為100-200克/噸。

本發明利用有益微生物降解蛋白質、脂肪，協助消化，提高飼料利用轉化率，促進生長，可顯著增加粗蛋白和粗脂肪含量，并且全蟹的總氨基酸、必需氨基酸和不飽和脂肪酸含量顯著提高。飼料中適量微生物產生大量活性酶可促進中華絨螯蟹的生長性能，提高肝胰腺重量及其營養組成，平衡對不飽和脂肪酸和蛋白質的吸收，避免中華絨螯蟹性早熟。本發明可以減少嗜氣假單胞菌對中華絨螯蟹的侵害，提高存活率。

本發明中芽孢菌隨糞便進入水體，有益微生物進入水體后，演變成優勢菌群，有效抵制水霉菌等有害病菌的滋生，提高水質，減少蟹的病害發生的機率。本發明通過明膠包被工藝，減少中華絨螯蟹全價飼料膨化飼料損傷，更大程度保護芽孢活性。

具體實施方式

下面通過具體實施例對本發明進行詳細和具體的介紹，以使更好的理解本發明，但是下述實施例并不限制本發明范圍。

實施例1

本實施例中，預混合復合菌采用含量為500億/克枯草芽孢桿菌、500億/克地衣芽孢桿菌和500億/克蠟狀芽孢桿菌，復合前的重量百分比為枯草芽孢桿菌40％、地衣芽孢桿菌40％、蠟狀芽孢桿菌20％。預混合復合菌溶解到2％海藻酸鈉濃度溶液中，乳化時間20min，攪拌速度500r/min，菌膠比例1:10包被后噴霧干燥。所得微生物飼料添加劑總活性芽孢含量500億/克。

實施例2

本實施例中，預混合復合菌采用含量為1000億/克枯草芽孢桿菌、1000億/克地衣芽孢桿菌和1000億/克蠟狀芽孢桿菌混合，復合前的重量百分比為枯草芽孢桿菌50％、地衣芽孢桿菌30％、蠟狀芽孢桿菌20％。預混合復合菌溶解到2.5％海藻酸鈉濃度溶液中，乳化時間25min，攪拌速度400r/min，菌膠比例1:12.5包被后噴霧干燥。所得微生物飼料添加劑總活性芽孢含量500億/克。

對比實驗

按照添加100克/噸本發明實施例1得到的微生物飼料添加劑到中華絨螯蟹全價飼料中，經過膨化檢測最終活菌含量為495萬cfu/克，在高溫膨化后基本上活菌沒有任何損耗。本產品在江蘇高郵、溧陽等地進行了中華絨螯蟹對比實驗表明：

在全價配合飼料中添加100克/噸、200克/噸本發明提高中華絨螯蟹肉質的微生物飼料添加劑后，對中華絨螯蟹生長性能的影響見表一。

表一、微生態制劑對中華絨螯蟹生長性能的影響

注：同一行中右上角^a代表組間差異顯著(P＜0.05)，小寫字母相同則代表差異不顯著(P＞0.05)。

由表一可見，在中華絨螯蟹全價日糧中添加100-200克/噸微生物添加劑，結果表明，與對照組相比，本發明微生物飼料添加劑能夠顯著提高中華絨螯蟹重量，降低飼料餌料系數，并且提高及存活率。

在全價配合飼料中添加100克/噸、200克/噸本發明提高中華絨螯蟹肉質的微生物飼料添加劑后，對中華絨螯蟹蟹肉品質的影響見表二。

表二、微生態制劑對中華絨螯蟹品質的影響

注：同一行中右上角^a代表組間差異顯著(P＜0.05)，小寫字母相同則代表差異不顯著(P＞0.05)。

由表二可見，在中華絨螯蟹全價日糧中添加100-200克/噸微生物添加劑，結果表明，與對照組相比，本發明微生物飼料添加劑能夠顯著提高中華絨螯蟹重量鮮味氨基酸和總氨基酸的含量，還能提高飽和脂肪酸的含量，提升蟹品質。

以上對本發明的具體實施例進行了詳細描述，但其只是作為范例，本發明并不限制于以上描述的具體實施例。對于本領域技術人員而言，任何對本發明進行的等同修改和替代也都在本發明的范疇之中。因此，在不脫離本發明的精神和范圍下所作的均等變換和修改，都應涵蓋在本發明的范圍內。