專利名稱：頭孢菌素類抗生素的制作方法
本申請是申請日為1998年6月10日，申請號為96198934．3中國專利申請的分案申請。
1．有關的申請本申請涉及1995年10月12日提交的臨時專利申請60／005，389，該申請被全文引用作為參考，包括所有的圖。
2．發明領域本發明涉及新的頭孢菌素類抗生素及其制備和使用方法，預期這些化合物對很大一類生物體，包括對常規的β-內酰胺抗生素有抗性的生物體，具有抗生活性。
3．背景技術評論以下對本發明背景的評述只是為了幫助理解本發明，該評述和其中引用的任何文獻都不被認為是本發明的先有技術。
在過去三十年內，已有許多種抗生素供臨床使用。一類增長顯著的抗生素是頭孢菌素，自1965年以來已有70多種頭孢菌素在臨床上用于治療哺乳動物的細菌感染。頭孢菌素通過抑制細菌引起的肽聚糖生物合成，顯示出抗細菌活性，而且在治療許多種細菌感染方面極其有效。在美國專利3，992，377和4，256，739中描述了被認為具有抗細菌活性的頭孢菌素。
遺憾的是，這些抗生素的廣泛和無選擇的使用已經導致了對這些化合物有抗性的細菌菌株數目的急劇增長。最重要的是，在具有臨床重要性的微生物中已產生了這種抗性，這威脅到現有的頭孢菌素抗生素的使用要受到限制。特別是，已經產生了沙門氏菌、肺炎鏈球菌、腸桿菌和假單胞細菌的抗性菌株，這可能會破壞在減少細菌感染造成的死亡率和發病率方面的很多進展。
細菌對頭孢菌素的抗性來自三個主要途徑(a)能使頭孢菌素的β-內酰胺環失活的β-內酰胺酶的形成；(b)由于細菌細胞壁成分的變化而使頭孢菌素對細菌的滲入減少；和(c)與青霉素結合蛋白(PBPs)的結合不好。后一途徑特別重要，因為β-內酰胺與PBPs的結合對于抑制細菌細胞壁生物合成是至關重要的。某些革蘭氏陽性細菌，即對二甲氧苯青霉素有抗性的金黃色葡萄球菌(“MRSA”)和腸球菌，是高度耐β-內酰胺抗生素的。MRSA中的抗性是由于有高含量的異常PBP，PBP2a存在，它對β-內酰胺抗生素不敏感或結合很差。β-內酰胺抗生素對抗含PBP2a生物體的活性已顯示出與抗生素對PBP2a的結合親和性密切相關。目前，糖肽萬古霉素和替考拉寧主要用于MRSA菌血癥。喹諾酮抗菌劑和某些碳青霉素烯(如亞胺培南)據報道有對抗少數幾種MRSA菌株的作用，但由于產生了抗性MRSA菌株而限制了它們的使用。
可能作為抗MRSA或抗腸球菌的殺菌劑使用的實驗性化合物包括甘氨酰細胞周期蛋白(glycylcyclines)(例如見P．E．Sum等，醫藥化學雜志(J．Med．Chem．)，37，(1994))，FK-037(例如見H．Ohki等，抗生素雜志(J．Antibiotics，46359-361(1993))，RP-59，500(例如見S．K．Spangler等，抗菌劑與化學治療(Antimicro．Agents．Chemother．)，36，856-9，(1992))，扁枝青霉素復合物(例如見W．E．Sander等，抗菌劑與化學治療，6，232-8(1974))，2-(二芳基)碳青霉素烯(例如見美國專利5，025，006)，3-(苯并噻唑基硫代)頭孢烯(例如見歐洲專利申請527686)，3-(噻唑基硫代)碳青霉素烯(例如見R．J．Ternansky等，醫藥化學雜志(J．Med．Chem．)，361971(1993)和美國專利5，077，287)，以及阿貝卡里(S．Kondo等，抗生素雜志(J．Antibiotics)，46531(1993))。
在共同所有的國際專利申請WO 96／26966中敘述了關于可用于治療對β-內酰胺抗生素有抗性的細菌對哺乳動物感染的化合物，組合物及方法的最新進展。
本發明包括對于治療由抗β-內酰胺抗生素細菌造成的哺乳動物感染有效的化合物、組合物及方法。優選的化合物的最小抑菌濃度(MIC)小于頭孢噻肟或亞胺培南對β-內酰胺抗性生物體(優選對甲氧苯青霉素抗性的葡萄球菌或對氨芐青霉素抗性的腸球菌生物體)最小抑菌濃度的50％，更優選小于10％，最好是小于1％。與頭孢噻肟或亞胺培南相比，其它的優選化合物能在更大程度上防止或減小被對β-內酰胺有抗性的生物體感染的小鼠的死亡率。
本發明的一個方面以結構式Ⅱ-Ⅵ化合物和／或其可藥用鹽及／或前體藥物為特征 其中，R1選自以下基團 Z選自-CH2(X)m-，-C(NOR6)-，-CH(OR7)-，-C(CHCO2R8)-和-CH(NR9R10)-；X選自氧和硫；m選自0和1；R3選自氰基，烷基，芳基，雜環基(其中的雜環可被任選取代，優選被NH2和鹵素(優選氯)雙取代)，雜芳烷基和(CH2)nT；n是1至6；T選自氨基、脒基(C-或N-連接的)，胍基和異硫脲基，可任選被烷基、芳基、羥基或氨基取代；
R4-7獨立地選自氫，烷基，芳基和酰基；R8選自氫，烷基和芳基；R9和R10獨立地選自氫，烷基，?；碗s環羰基；R2選自氫，烷基，鏈烯基，芳基，雜環基，芳烷基，雜芳烷基和三烷基甲硅烷基；或者R2不存在，而它本應連接的CO2基團帶有一個負電荷。
A、B、D和E選自碳、氮和硫，而且基團A、B、D和E的特定并置限于化學專業中已知的雜環基團實例；G、H、J、L和M是碳、氮或+NR11(季銨雜環)，而且基團G、H、J、L和M的特定并置限于化學領域中已知的雜環基團實例；R11選自H，鹵素，烷基，烷氧基，羥基，氨基，氰基，羥烷基，甲酰氨基烷基，任選取代的氨基烷基或季銨烷基，以及季雜芳基鎓烷基；alk1和alk2是烷基，它們各自獨立地任選被以下的一個取代基取代烷基，羥基，任選取代的氨基，烷氧基，羥烷基和任選取代的甲酰胺；p是0、1或2；R99選自硫，SO，SO2，NH，N-烷基，氧，C=C(順或反式)，和C≡C；q是0或1；r是0、1、2或3；R12是 R13-R16各自獨立地選自H，羥基，氨基，脒基，烷基，環烷基，酰基，氨基?；土柞；?，和可以合在一起形成一個5或6元環；R17是H或烷基；
其中alk2和R12合在一起可以形成一個任選取代的5或6元非芳香雜環。
化學領域中已知的雜環基的具體實例包括以下基團(象上面一樣，每種情形均表示與硫原子連接) 結構式Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ表示了將頭孢烯的環與芳硫基或雜芳硫基連接的乙烯基。應該理解，該乙烯基的每個碳原子均可任選地另外被一個低級烷基(如甲基或乙基)取代。
優選的化合物包括這樣的化合物，其中R11是H或鹵素，R12是NR13R14， p是0或1，q是0或1，r是1、2或3，R13-R16是H或低級烷基，R17是H或低級烷基。特別優選的化合物包括這樣的化合物，其中R11是氫，R12是NR13R14， 或者，p是1，q是1，r是1、2或3，R13-R16是氫，R17是氫或低級烷基。優選地有一或二個[(CH2)p(S)q(CH2)rR12]基團存在。優選存在三或四個R11基團。
優選的化合物包括下述化合物，其中(1)R1是NHC(O)ZR3，Z是-CH2(X)m-，X是S，m是1；(2)R1是NHC(O)ZR3，Z是-C(NOR6)-；R6選自氫、甲基、2-氟乙基，環丙基甲基，烯丙基，二氯烯丙基和環戊基；R3選自苯基，2-噻吩基，2-呋喃基，2-氨基噻唑-4-基，2-氨基-5-氯噻唑-4-基和2-氨基噻二唑-4-基；(3)R11是氫或鹵素；(4)R12是，
(5)p是0或1，q是0或1，r是1、2或3；以及／或(6)R13-R17是H或低級烷基。
優選的化合物包括這樣的化合物，其中alk2和R12合在一起成為一個任選取代的含單個氮原子的5或6元碳環。在特別優選的實施方案中，alk2和R12合在一起形成選自以下基團的取代基(下面畫出的硫原子上的取代基) 其它優選的實例是下述的經過硫原子連接到4-吡啶基取代基上 不受關于本發明運用的任何特定理論的約束，應該指出，本發明有幾個新的結構特征被認為對功能的顯著改進起作用。特別是，雜環基R3上的氯取代基看來使MIC值比帶有無氯雜環基R3的化合物改進了2-4倍。
優選的可藥用鹽包括(1)無機鹽，例如氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、磷酸鹽或硫酸鹽；(2)羧酸鹽，如乙酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、馬來酸鹽或富馬酸鹽；(3)烷基磺酸鹽，如甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、正丙基磺酸鹽或異丙基磺酸鹽；和(4)羥基羧酸鹽，如乳酸鹽、蘋果酸鹽和檸檬酸鹽。
在另一實施方案中，本發明提供了含有一定數量式Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ或Ⅵ化合物的組合物，該數量的化合物能有效地治療哺乳動物因對β-內酰胺抗生素有抗性的細菌造成的細菌性感染。
在又一實施方案中，本發明包括治療哺乳動物因對β-內酰胺抗生素有抗性的細菌造成的細菌性感染的方法，該方法包括使受感染的哺乳動物施用治療上有效數量的結構式Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ化合物。當然，本發明化合物在用于治療被對常規的β-內酰胺抗生素敏感的細菌感染的哺乳動物的組合物和方法中也可以使用。
在另一實施方案中，本發明的特點是用于制備中間體Ⅶ的化合物和方法，該中間體可用來制備對殺滅抗甲氧苯青霉素的葡萄球菌和抗氨芐青霉素的腸球菌特別有效的化合物。 本發明的其它特點和優越性在以下關于優選實施方案的說明和權利要求中將會顯而易見。
附圖簡介

圖1-5表示制備本發明化合物的優選合成方案。
圖1表示頭孢烯的制備。
圖2表示C(7)-取代基的制備。
圖3表示3-取代基的制備。
圖4表示最后的組裝。
圖5表示去保護和成鹽。
優選實施方案說明Ⅰ．定義這里所用的術語“烷基”代表支化或無支化的烴鏈，優選含1-6、更優選1-4個碳原子，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基和2-甲基戊基。這些基團可以任選地被一個或多個通常與鏈連接的官能基取代，例如羥基、溴、氟、氯、碘、巰基或硫基、氰基、烷硫基、雜環、芳基、雜芳基、羧基、烷氧羰基、烷基、鏈烯基、硝基、氨基、烷氧基、酰氨基，以及任選取代的異硫脲基、脒基、胍基等，形成諸如三氟甲基、3-羥基己基、2-羧丙基、2-氟乙基、羧甲基、4-氰基丁基、2-胍基乙基、3-N，N′-二甲基異硫脲鎓丙基等烷基基團。
術語“鏈烯基”代表上述定義的烷基有至少一個雙鍵，例如，烯丙基、3-羥基-2-丁烯-1-基、1-甲基-2-丙烯-1-基等。
術語“芳基”代表一個碳原子鏈，其中形成至少一個優選有約6-14個碳原子的芳香環，例如苯基、萘基、茚基等，它可以被通常連接到此鏈上的一個或多個官能基取代，例如羥基、溴、氟、氯、碘、巰基或硫基、氰基、氰基酰氨基、烷硫基、雜環、芳基、雜芳基、羧基、烷氧羰基、烷基、鏈烯基、硝基、氨基、烷氧基、酰氨基等，形成諸如聯苯基、碘代聯苯基、甲氧基聯苯基、蒽基、溴苯基、碘苯基、氯苯基、羥苯基、甲氧苯基、甲酰苯基、乙酰苯基、三氟甲硫基苯基、三氟甲氧基苯基、烷硫基苯基、三烷基銨苯基、酰氨基苯基、噻唑基苯基、噁唑基苯基、咪唑基苯基、咪唑基甲基苯基、氰基苯基、吡啶基苯基、吡咯基苯基、吡唑基苯基、三唑基苯基、四唑基苯基等芳基基團。
術語“雜環”代表一個碳鏈和至少一個非碳原子，它們一起構成的一個或多個優選有6-14個碳原子的芳香或非芳香環，例如呋喃基、噻吩基、咪唑基、吲哚基、吡啶基、噻二唑基、噻唑基、哌嗪基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基。這些環可以任選地被一個或多個通常連接到環上的官能基取代，例如羥基、溴、氟、氯、碘、巰基或硫、氰基、氰基酰氨基、烷硫基、雜環基、芳基、雜芳基、羧基、氧基、烷氧羰基、烷基、鏈烯基、硝基、氨基、烷氧基、酰氨基等，形成諸如2-氨基噻唑-4-基、2-氨基-5-氯噻唑-4-基、2-氨基-噻二唑-4-基、2，3-二氧代哌嗪基、4-烷基哌嗪基、2-碘-3-二苯并呋喃基和3-羥基-4-二苯并噻吩基等。
術語“雜芳的”或“雜芳基”(HetAr)代表上面定義的芳族雜環。
術語“雜三環”代表上面定義的一種芳族雜環取代基，其中包括三個芳香環。
術語“雜環羰基”代表基團-C(O)Het，其中Het是如上定義的雜環。
術語“烷氧基”代表基團-OR，其中R是如上定義的烷基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、三氟甲氧基、3-羥基己氧基、2-羧基丙氧基、2-氟乙氧基、羧基甲氧基和氰基丁氧基等。
術語“烷硫基”代表基團-SR，其中R是定義如上的烷基，例如甲硫基、乙硫基、正丙硫基、異丙硫基、正丁硫基、仲丁硫基、異丁硫基、叔丁硫基、三氟甲硫基、3-羥基己硫基、2-羧基丙硫基、2-氟乙硫基、羧基甲硫基和氰基丁硫基等。
術語“?；贝砘鶊F-C(O)R，其中R是定義如上的烷基，例如甲?；⒁阴；?、丙?；蚨□；?。
術語“芳氧基”代表基團-OAr，其中Ar是定義如上的芳基。
術語“雜烷基”代表基團-RAr，其中R是烷基、Ar是芳基、均定義如上。
術語“雜芳烷基”代表基團-RHetAr，其中R和HetAr分別是上面定義的烷基和雜芳基。
術語“三烷基甲硅烷基”代表基團RR′R″Si-，其中R、R′和R″是定義如上的烷基。
術語“三烷基銨”代表基團[RR′R″N-]+，其中R、R′和R″是定義如上的烷基。
術語“氨基”代表基團NRR′，其中R和R′可以獨立地是定義如上的烷基、芳基或?；?，或是氫。
術語“甲酰氨基”代表基團-C(O)NRR′，其中R和R′可以獨立地是定義如上的烷基、芳基或?；?，或是氫。
術語“氰基酰氨基”代表基團-NH-C≡N。
術語“β-內酰胺抗性細菌”是指β-內酰胺抗生素對它的最小抑菌濃度(MIC)大于32mg／ml的細菌。
術語“二甲氧苯青霉素抗性細菌”是指對甲二氧苯青霉素有抗性的細菌。這類細菌的實例列在表1并標以MethR。術語“二甲氧苯青霉素敏感性細菌”是指對二甲氧苯青霉素敏感的細菌。這類細菌的實例列在表1并標以Meths。
術語“前體藥物”是指在體內轉化成母體藥物的藥劑。在某些情形，前體藥物可能比母體藥物容易給藥。例如，前體藥物可能通過口服被生物利用，而母體藥物不能?；蛘咔绑w藥物可以改進溶解度，從而可以靜脈內給藥。Ⅱ．本發明化合物本發明提供了對治療細菌感染，尤其是治療由對常規的β-內酰胺抗生素已產生抗性的細菌造成的感染有效的化合物、方法和組合物。更重要的是，本發明提供了對于治療由已對常規的頭孢菌素抗生素產生抗性的細菌造成的細菌感染有效的化合物、方法和組合物。A．結構式Ⅱ化合物的合成本發明化合物可以容易地按照以下方案制備。但是，應該理解，還有形成本發明化合物的其它合適途徑，以下提供的僅是示例而并非限制。還應該清楚，將采用本領域中各種標準的保護和去保護手段(例如見Green和Wuts的文獻)。本領域熟練的技術人員會認識到，任何特定保護基(例如羧基保護基)的選擇都取決于被保護部分在后續反應條件下的穩定性。
一般來說，本發明的頭孢菌素的合成可以通過眾所周知的方法和容易獲得的材料實現(例如見March，Larock，有機轉化大全(Comprehensive Organic Transformations)，VCH publishers，1989；和G．I．Georg，β-內酰胺的有機化學(VCH 1992)，它們均在這里引用作為參考)。如下面方案I中所示，采用例如在Farina等，有機化學雜志(J．Org．Chem．)，544962(1989)，和美國專利4，870，168(Baker等)中所述的標準方法(上述二文獻均在這里引用作為參考)，用所要的任選保護的硫醇鹽親核試劑2處理頭孢烯三氟甲磺酸酯，得到3-硫代衍生物3。隨后用本領域技術人員所知的步驟去保護，得到具有生物活性的4-羧基頭孢烯4。 化合物1容易由市售的起始物形成，例如按已知步驟(如見Farina文章及Baker等的美國專利4，870，168)通過(7R)-7-〔(苯基乙?；?氨基〕-3-羥基-3-頭孢烯-4-羧酸(大冢化學有限公司，日本大冢)與三氟甲磺酸酐(triflic anhydride)(Aldrich公司，Milwaukee，WI)反應。其它的3-羥基-3-頭孢烯可以由3-外-亞甲基頭孢烯按已知步驟(例如Farina的文獻)進行臭氧分解得到。類似地，硫醇鹽親核試劑2可以利用已知步驟和市售的起始物得到。
取代基R1可以是任何上述基團，而且可以是市場上可買到的(例如由Aldrich，Milwaukee，WI)，或者可以用已知方法和起始物形成(例如見March；Larock)。這些基團可以通過各種公知的方法(例如見Barrett，英國化學會志Perkin匯刊(J．C．S．Perkin)I，1629(1979)或Chauvette，有機化學雜志(J．Org．Chem．)361259(1971)，二者均在本文中引用作為參考)取代起始物上已有的取代基，例如通過現有取代基向所要取代基的轉化，或者水解除去現有取代基后與所要取代基的適當的活化形式(例如?；?反應。同樣，合適的試劑和方法對于本領域技術人員將是顯而易見的。
羧基R2可以是適合還原裂解的那些保護基，例如芐基、對或鄰硝基芐基、2，2，2-三氯乙基、烯丙基、肉桂基、二苯甲基、2-氯烯丙基等?；蛘呤?，R2可以是一個適合酸裂解的保護基，例如叔丁基、叔戊基、三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4，4′二甲氧基三苯甲基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、苯甲酰甲基、β-(三甲基甲硅烷基)乙基、芐基、4或2-甲氧基芐基、2，4-二甲氧基芐基、3，4-二甲氧基芐基、2，4，6-三甲氧基芐基、甲氧基甲基、二苯甲基或3，3-二甲基烯丙基。優選的保護基是對甲氧基芐基、對硝基芐基、烯丙基和二苯甲基。這些基團可以利用已知的試劑和方法，例如在Green和Wuts的文章中敘述的那些，連接到頭孢菌素起始物的未保護的羧基上。B．結構式Ⅲ化合物的合成通式Ⅲ化合物的制備與通式Ⅱ化合物相似。在大多數情形，關鍵步驟是取代的雜芳基硫醇鹽與頭孢烯三氟甲磺酸酯1或在C-(3)上有另一離去基團的、功能上等效的頭孢烯偶合。含G、H、J、L和M的環是4-吡啶基的結構式Ⅲ化合物也可以象圖4示例說明地制備。C．結構式Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ化合物的合成通式Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ化合物通過芳族或雜芳族硫醇鹽與甲苯磺?；^孢烯亞砜6偶合制得?；衔?容易由市售起始物用已知方法(例如見Farge等的美國專利4，307，116)制備。所需的芳族或雜芳族硫醇按實施例中所述用各種文獻中已知的方法制備。如下面方案2中所示，采用例如在Farge等的美國專利4，307，116(該專利在本文中引用作為參考)中所述的方法，用所要的任選保護的硫醇鹽親核試劑如5，處理頭孢烯中間體6，得到3-硫代乙烯基衍生物7，使用本領域技術人員已知的方法進行亞砜還原和隨后去保護，得到具有生物活性的4-羧基頭孢烯8。
D．結構式Ⅶ化合物的合成圖2顯示了一種優選的制備這些中間體的合成方法。特別是，在圖2示出并在實施例18中說明的將6轉化為7的步驟，特別適用于得到殺滅二甲氧基苯青霉素抗性和氨芐青霉素抗性細菌的活性顯著增強的化合物。Ⅲ．藥學應用和制劑根據本發明，使受到二甲氧基苯青霉素抗性細菌感染(或其它β-內酰胺抗性細菌感染，例如萬古霉素抗性或氨芐青霉素抗性細菌感染)，尤其是抗性金黃色葡萄球菌感染的哺乳動物，以至少能部分緩解感染的數量，施用治療上或藥學上有效數量的頭孢菌素，特別是結構式Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ或Ⅵ化合物。尤其重要的是由活性與例如金黃色葡萄球菌Col(MethR)(Lac-)、金黃色葡萄球菌76(MethR)(Lac+)、屎腸球菌ATCC 35667或糞腸球菌ATCC 29212相似的菌株造成的感染。此外，這些化合物對于殺滅對二甲氧苯青霉素、萬古霉素和／或氨芐青霉素敏感的細菌也有效，因此可用于這類組合物和治療方法中。
含有本發明化合物的組合物可以用于預防和／或治療用藥。在用于治療時，使已受到感染的患者如上所述地施用組合物，其數量應足以治愈或至少部分抑制感染的癥狀。足以實現此目的的數量定義為“治療上有效的數量或劑量”。對此種用途有效的數量取決于感染的嚴重程度和過程，先前治療史，患者的健康狀態及對藥物的反應，以及主治醫師的判斷。在用于預防時，使易受感染或處于特定感染危險中的患者服用含本發明化合物的組合物。此數量定義為“預防上有效的數量或劑量”。在這樣應用時，準確的數量同樣取決于患者的健康狀況、體重等。
一旦患者的狀況有了改進，如果需要，服用一種維持劑量。隨后，隨癥狀的變化，用藥的劑量或頻率，或者二者一起，可以減小到改進的癥狀能夠保持的水平。當癥狀已減輕到所要求的水平時，可以停止治療。但是患者可能在長時間內根據疾病癥狀的復發情況需要斷續的治療。
一般來說，本發明化合物的合適有效劑量為每名服藥者每天0．1-1000mg，優選每天1-100mg。所要求的劑量最好在一整天內按適當間隔分1、2、3、4或更多的分劑量用藥。這些分劑量可以以單位劑型施用，例如每單位劑型含5-1000mg，優選含10-100mg活性組分。最好是，本發明化合物按每kg患者體重約2．0-250mg，每天服用約1-4次。
本發明的活性組分可以單獨給藥，但最好是作為藥物制劑的一部分存在。本發明制劑含有至少一種治療上或藥學上有效劑量的本發明化合物或抑制劑，以及一種或多種藥學上或治療上可接受的載體。固體載體包括例如淀粉、乳糖、磷酸氫二鈣、微晶纖維素、蔗糖和高嶺土，以及任選地包括其它治療組分。液體載體包括例如滅菌水、聚乙二醇、非離子型表面活性劑和食用油，如玉米油、花生油和芝麻油。此外，可以加入各種輔劑，例如工藝中常用的輔劑。例如矯味劑、著色劑、防腐劑和抗氧化劑，如維生素E、抗壞血酸、BHT和BHA。在Gilman等編著(1990)的Goodman & Gilman治療的藥理基礎(Goodman andGilman′sThe Pharmacological Basis of Therapeutics)第8版，Pergamon Press，和Remigton的前述文獻中，敘述了各種其它的事項。其中討論了用藥的方法，例如口服、靜脈內、腹膜內或肌內以及其它給藥方法。可藥用的載體包括水、鹽水、緩沖劑，以及在例如默克索引(Merck Index，Merck & CoRahway，NJ)中提到的其它化合物。一般來說，優選的用藥途徑是靜脈內和腹膜內用藥。
這些藥劑可以是各種各樣的形式。這包括例如固體、半固體和液體劑型，如片劑、丸劑、粉劑、液體溶液或懸浮液、脂質體、可注射和可輸注的溶液。優選的形式取決于所計劃的用藥方式和治療應用。一般來說應使用藥理上可接受的本發明化合物的鹽以便簡化組合物的制備。優選的鹽包括鈉鹽、鉀鹽、精氨酸鹽、甘氨酸鹽、丙氨酸鹽、蘇氨酸鹽。它們優選在適當地混有表面活性劑(如羥丙基纖維素)的水中制備。
根據所治療的具體癥狀，這些藥劑可以配制并全身給藥或局部給藥。配制和給藥的技術可以在Remington的“藥物科學”(PharmaceuticalScience)，第18版，Mack出版公司，Easton，PA(1990)中找到。合適的途徑可以包括口服、經直腸、經皮、經陰道、經粘膜或經腸給藥；非腸道給藥，包括肌內、皮下、髓內注射，以及鞘內、心室內、靜脈內、腹膜內、鼻內或眼內注射，這只是列舉出的一些。
為用于注射，可以將本發明試劑配制在水溶液內，優選在生理上相容的緩沖液內，例如Hanks溶液，Ringer溶液或生理鹽水緩沖液。對于經粘膜給藥，在制劑中使用適合要透過的屏障的穿透劑。這類穿透劑通常是本領域已知的。
在軟膠囊中，活性化合物可以溶解或懸浮在合適的液體中，例如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇。此外還可加入穩定劑。Ⅳ．生物活性體外抗菌評價本發明化合物對幾種β-內酰胺抗性(例如二甲氧基苯青霉素抗性、萬古霉素抗性和／或氨芐青霉素抗性)的細菌菌株的作用通過測定各化合物對各菌株的最小抑菌濃度(MIC，μg／ml)來評價。抑制試驗生物體生長的抗生素最低濃度MIC用瓊脂稀釋法測定。
為測定對細菌分離物的MIC，將試驗化合物按一系列兩倍稀釋的方法摻合到液化的Mueller-Hinton瓊脂中。在固化時，用一種復制裝置將一些不同的細菌菌株點狀接種在瓊脂表面上。溫育過夜后，以完全抑制了生長(不管是單個菌落還是模糊的混濁物)的最低藥物濃度作為MIC轉折點。在這些研究中所用的方法已經由臨床實驗室標準全國委員會(NCCLS)標準化，所根據的是題目為“抗微生物敏感性稀釋試驗法”的NCCLS出版物(1991)，該文章在本文中引用作為參考。
抗微生物劑的等分試樣在pH為7．2的磷酸鹽緩沖液鹽水(PBS)中制備。需要時使用吐溫20或二甲基亞砜作為增溶載體。采用標準的渦動、超聲及溫和加熱的方法促進試驗試劑的溶解。通常，貯備溶液的濃度為所試驗的最高藥物濃度的10倍。使用濃度為1．28mg／ml的貯備溶液，后續的最高工作濃度為128μg／ml。進行一系列的兩倍稀釋，直到≤0．25μg／ml。每種藥物濃度均用雙份試驗。兩倍的藥物稀釋是在滅菌的50ml管中進行的，最終藥物體積為5ml。加入45ml熔化的瓊脂，造成10倍的稀釋。然后分兩份25ml倒入15×150ml帶有柵格的方形佩特里平板中令其硬化。
用有參考藥物(頭孢噻肟、萬古霉素或亞胺培南)的對照平板作為正生長對照。配制參考抗生素的貯備濃溶液并在-80℃下冷凍。配制后將對照平板密封并在用前于冰箱中存放至多一周；但是，亞胺培南對照平板必須在使用前臨時配制。所有的試驗平板均在制備后24小時內使用。
在接種物含有約104菌落形成單位(cfu)±0．5log的情形得到令人滿意的結果。由試驗分離物在瓊脂平板上的純培養物出發，將幾個分離的菌落轉移到營養肉湯的試管中令其在35-36℃下生長4-6小時，以達到對數期生長。向PBS中逐滴加入肉湯培養物，以便與等于108cfu／ml的0．5 McFarland濁度標準相對應。將其用PBS進一步稀釋10倍，達到107cfu／ml的接種物使用濃度。當把1μl的接種物使用液施加到瓊脂表面上時，每個斑點的濃度約為104cfu。
使用一次性無菌的1μl接種環接種試驗平板，每種分離物放在瓊脂板上的指定柵格里。另一種接種方法包括使用復制鋪板器，這是一種有48個鋼針的裝置，能同時接種多個分離物。在斑點干燥后，將平板在35-36℃下溫育16-20小時。評定作為抗微生物劑最小抑菌濃度(MIC)的終點。
本發明的新藥劑的對抗金黃色葡萄球菌col和腸球菌(屎腸球菌和糞腸球菌)的活性顯著提高。金黃色葡萄球菌col菌株是一種高水平的PBP2a制造者，而其同基因的伙伴金黃色葡萄球菌col 8A卻缺少PBP2a。
某些化合物顯示出很寬的抗菌活性，對于金黃色葡萄球菌col和金黃色葡萄球菌col 8A以及腸球菌均有作用。金黃色葡萄球菌col 8A菌株對于包括頭孢噻肟對照物在內的所有化合物都有強烈反響。因此，本發明化合物能有效地對抗產生PBP2a的細菌。某些化合物具有很強的抗腸球菌活性。其它的一些本發明化合物除革蘭氏陽性菌之外還能有效地抗大腸桿菌。體內抗菌評價體外活性優于對照抗生素的化合物在對于致死性菌血癥腹膜炎的小鼠模型中作進一步的評價。
5只一組的雌性Swiss-Webster小鼠(Simonsen，Gilroy，CA)均由腹膜內途徑(IP)受到10倍增量的細菌接種物的攻擊。這樣就能夠計算平均致死劑量(LD50)和LD100。為初步評價新的抗生素，用LD100值的細菌由IP途徑攻擊小鼠。在細菌攻擊之時和2小時之后，對10只一組的小鼠各按二倍增量以皮下方式施用兩次相同劑量的試驗藥物和已知對小鼠和人有效的抗生素(即，正對照樣)。觀察小鼠72小時。在72小時后仍活著的被認為是長期存活者。能保護小組內50％小鼠不死的總藥物劑量(mg／kg)稱為平均保護劑量(PD50)。對幾種病原體用類似的方式測定PD50。隨后將新藥的定量終點與由參考抗生素得到的相比。
將六份懸浮在0．5ml滅菌的7％豬腸粘蛋白(Sigma)中的接種物的10倍稀釋液以IP方式注射給5只一組的各個小鼠。對照組的5只小鼠只接受粘蛋白。觀察小鼠72小時。在72小時后仍活著的被認為是長期存活者。通過概率單位試驗確定平均致死劑量(LD50)和100％致死劑量(LD100)。
為進行抗生素效力研究，用能提供試驗菌株LD100的細菌值以IP方式攻擊小鼠。在細菌攻擊時和2小時之后，10只一組的小鼠按2倍增量各以皮下途徑(SC)施用兩次相同劑量的試驗抗生素；另一組類似地用已知對動物和人有效的參考抗生素處理。藥物劑量的范圍可以從0．01至512mg／kg。如果藥物的溶解差，使用吐溫20或聚丙二醇使藥物增溶。觀察動物72小時。用概率單位法計算出以mg／kg為單位的50％保護劑量(PD50)。PD50與50％有效劑量(ED50)和50％治愈劑量(CD50)相同。將死去的所有小鼠及存活的一半小鼠抽取的心臟血樣在腦-心浸液瓊脂中培養。接受保護劑量試驗藥物的動物在72小時時將是活著的，雖然它們在觀察期間可能出現中等到嚴重的病態。用無效劑處理的受感染的對照樣小鼠及接受無效即低劑量的試驗藥物的小鼠則顯示出高死亡率。這些小鼠大部分在6-48小時內死亡。在72小時后仍活著的小鼠被認為是長期存活者。 化合物編號1．(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(3-異硫脲基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽2．(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(4-異硫脲基甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽3．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-異硫脲基甲基吡啶-4-基-硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽4．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-異硫脲基甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽5．(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(4-異硫脲基甲基噻唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽6．(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-〔4-(3-吡咯烷基硫甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽7．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-異硫脲基甲基噻唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽8．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(環戊氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-異硫脲基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽9．(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(3-氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽10．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽11．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔(甲氨基乙氨基乙硫基甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽12．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔(胍基乙氨基乙硫基甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽13．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(環戊氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽14．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-胍基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽15．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-甲氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽16．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽17．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(3-吡咯烷基硫甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽18．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(N-甲基甘氨酰)氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽19．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-1，1-二甲基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽20．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽21．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-溴噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽22．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔(甲氨基乙氨基乙硫基甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽23．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽24．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(甘氨酰)氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽25．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(N-甲酰氨基)氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽26．(7R)-7-[(Z)-2-苯基-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽
27．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(3-氨丙基)硫甲基吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽28．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔(甲氨基乙氨基乙硫基甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽29．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(甘氨酰)氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽30．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽31．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(N-甲脒基)氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽32．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(3-氨基-2-羥基丙-1-基-基硫甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽33．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽34．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(3-N-甲酰氨基氨基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽35．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(甘氨酰)氨基丙硫基甲基吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽36．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2-氨基丙-1-基硫甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽37．(7R)-7-[(苯基乙酰基)氨基〕-3-(4-(2-氨基乙硫基甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽38．(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-(2-氨基乙硫基甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽39．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-甲酰氨基甲硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸，40．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2-氨基乙氧基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽41．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2-N-甲氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽42．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(吡咯烷-3-基硫甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽43．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(N-甲基甘氨酰)氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽44．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(5-氨基戊氧基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽45．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙磺酰甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽
46．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(4-氨基丁氧基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽47．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(3-氨基丙氧基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽48．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(4-氨基-2-丁炔-1-基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽49．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2-氨基丙氧基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽50．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(4-氨基-2-Z-丁烯-1-基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽51．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(3-氨基丙硫基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽52．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(哌啶-4-基硫甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽53．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙基亞磺酰甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽54．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(N-乙脒基)氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽55．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(5S-5-N，N-二甲基甲酰氨基吡咯烷-3-基硫甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽56．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2RS-2-氨基-3-羥基丙-1-基硫甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽57．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(N-甲氨基乙氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽58．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2R-2-N，N-二甲基甲酰氨基-2-氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽59．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2R-2-甲酰氨基-2-氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽60．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-異硫脲基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽61．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(N，N-二甲基甲酰氨基甲氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽62．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2-氨基-2-甲基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽63．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(N-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽
64．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(N-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽65．(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2R-2-氨基-3-羥丙-1-基硫甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽(化合物編號與MIC表中的編號一致；列出的是用對甲氧苯青霉素敏感的金黃色葡萄球菌(S．aureus strain ATCC 13709)攻擊的結果。) 實施例下面將聯系以下具體實施例對本發明作更全面的說明，這些實施例不以任何方式構成對本發明范圍的限制。
實施例1(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(4-羥甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯在0℃和攪拌下，向1，3-二氯丙酮(6．85g，54mmol)和3-巰基丙酸乙酯(13．9ml，108mmol)在無水四氫呋喃(150ml)中的溶液里滴加三乙胺(15．0ml，108mmol)，并在室溫下攪拌24小時。蒸發溶劑，殘余物分配在水和乙酸乙酯之中。乙酸乙酯相依次用5％鹽酸和鹽水洗，用硫酸鈉干燥，濃縮至干，得到17．4g粗制1，3-二(2-乙氧羰基乙硫基)丙酮。
將1，3-二〔(2-乙氧羰基乙基)硫代〕丙酮(6．22g，19．3mmol)、肼基甲酸乙酯(2．40g，23．1mmol)和催化量的對甲苯磺酸在含有分子篩的無水乙腈(50ml)中的溶液于室溫下攪拌2小時。用水／乙酸乙酯使反應停止，過濾。濾液用乙酸乙酯萃取。有機萃取液用碳酸氫鈉水溶液洗，用硫酸鈉干燥，濃縮。殘余物用己烷研制，得到7．2g 1，3-二〔(2-乙氧羰基乙基)硫代〕丙酮乙氧羰基腙。1H NMR(CDCl3)δ2．2-2．4(m，9H)，2．6-2．8(m，8H)，3．42(s，2H)，3．54(s，2H)，4．1-4．3(m，6H)，8．82(br s，1H)。
在0℃下向上述腙(7．2g，17．6mmol)在1，2-二氯乙烷(20ml)中的溶液加入亞硫酰二氯(3．9ml，53mmol)，并在室溫下攪拌過夜。將混合物濃縮至體積為10ml，用二氯甲烷稀釋，用碳酸氫鈉水溶液洗，用硫酸鈉干燥，隨后濃縮至干，得到6．47g 5-〔(2-乙氧羰基乙基)硫代〕-4-〔(2-乙氧羰基乙基)硫甲基〕-1，2，3-噻二唑。
1H NMR(CDCl3)δ1．2-1．3(m，6H)，2．60(t，2H，J=7)，2．68(t，2H，J=7)，2．77(t，2H，J=7)，3．24(t，2H，J=7)，4．07(s，2H)，4．1-4．2(m，4H)。
在0℃下向5-〔(2-乙氧羰基乙基)硫代〕-4-〔(2-乙氧羰基乙基)硫甲基〕-1，2，3-噻二唑(1．0g，3．0mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液中分批加入間氯過苯甲酸，直到起始物消失?；旌衔镆来斡蔑柡偷牧虼蛩徕c水溶液、1％氫氧化鈉冷水溶液和鹽水洗，濃縮至干。在室溫下用三氟乙酸酐(2ml)處理此氧化產物30分鐘。減壓除去三氟乙酸酐后，將混合物在乙酸乙酯／1％氫氧化鈉中(30ml／30ml)攪拌30分鐘。將乙酸乙酯層濃縮至5ml，加入10ml甲醇。在0℃于攪拌下加入過量的硼氫化鈉(200mg)，30分鐘后用稀鹽酸使反應停止。用乙酸乙酯萃取混合物并濃縮。殘余物用硅膠層析法純化(1％甲醇／二氯甲烷)，得到225mg 5-〔(2-乙氧羰基乙基)硫代〕-4-羥甲基-1，2，3-噻二唑。1H NMR(CDCl3)δ1．27(t，3H，J=8)，2．71(t，2H，J=7)，3．27(t，2H，J=7)，4．16(q，2H，J=8)，5．03(s，2H)。
向5-〔(2-乙氧羰基乙基)硫代〕-4-羥甲基-1，2，3-噻二唑(225mg，0．91mmol)的無水乙醇(20ml)中加入0．5M的氫氧化鈉甲醇溶液(1．6ml)。10分鐘后將混合物濃縮，用二氯甲烷研制，得到硫醇鈉。將硫醇鈉和(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-三氟甲磺酰氧基-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(500mg，0．85ml)在四氫呋喃(10ml)中的溶液于0℃下攪拌30分鐘，加50ml水。反應混合物用乙酸乙酯萃取，濃縮。殘余物用硅膠層析法純化(2％甲醇／二氯甲烷)，得到407mg標題化合物。1H NMR(CDCl3)δ3．22(d，1H，J=18)，3．46 (d，1H，J=18)，3．61(d，1H，J=16，3．67(d，1H，J=16)，3．81(s，3H)，4．95(d，1H，J=5)，5．02(s，2H)，5．23(d，1H，J=12)，5．28(d，1H，J=12)，5．83(dd，1H，J=5，8)，6．14(d，1H，J=8)，6．86(d，2H，J=9)，7．2-7．4(m，7H)。
實施例2(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(4-氯甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯向5ml二甲基甲酰胺中加入亞硫酰二氯(85ml，1．71mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。加入(7R)-7-[(苯基乙酰基)氨基]-3-(4-羥甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(400mg，0．684mmol)在二甲基甲酰胺(1ml)中的溶液，再攪拌30分鐘。用水使反應停止，混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液用水洗并濃縮之。殘余物用硅膠層析法純化(0．5％甲醇／二氯甲烷)，得到322mg標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ3．20(d，1H，J=18)，3．47(d，1H，J=18)，3．60(d，1H，J=16)，3．66(d，1H，J=16)，3．79(s，3H)，4．95(m，3H)，5．22(d，1H，J=12)，5．25(d，1H，J=12)，5．85(dd，1H，J=5，8)，6．53(d，1H，J=8)，6．84(d，2H，J=9)，7．2-7．4(m，7H)。
實施例3(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(4-異硫脲基甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽將(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(4-氯甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(70mg，0．12mmol)、硫脲(7．6mg，0．1mmol)和碘化鈉(15mg，0．1mmol)在無水乙腈(3ml)中的溶液于室溫下攪拌過夜。將混合物濃縮并用二氯甲烷研制以除去未反應的起始物。將殘余物重新溶在丙酮(2ml)中，過濾。將濾液濃縮至干，得到60mg(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(4-異硫脲基甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸(4-甲氧基)芐酯，碘化物鹽，為淺黃色固體。
1H NMR(丙酮-d6)δ3．56(d，1H，J=18)，3．66(d，1H，J=16)，3．72(d，1H，J=16)，3．80(s，3H)，3．86(d，1H，J=18)，5．06(d，1H，J=15)，5．10(d，1H，J=15)，5．28(m，3H)，5．88(dd，1H，J=5，8)，6．91(d，2H，J=9)，7．2-7．4(m，7)，8．32(d，1H，J=8)。
將(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(4-異硫脲基甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸(4-甲氧基)芐酯，碘化物鹽(60mg)、苯甲醚(0．1ml)和三氟乙酸(1ml)的混合物在0℃下攪拌30分鐘，隨后濃縮至干。殘余物依次用二氯甲烷(40ml)和水(0．5ml)研磨，得到38mg標題化合物。
1H NMR(DMSO-d3)δ3．41(d，1H，J=18)，3．48(d，1H，J=14)，3．55(d，1H，J=14)，3．69(d，1H，J=18)，4．86(d，1H，J=15)，4．94(d，1H，J=15)，5．14(d，1H，J=5)，5．72(dd，1H，J=5，8)，7．1-7．3(m，7H)，9．18(d，1H，J=8)實施例4(7R)-7-氨基-3-(4-氯甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯向(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(4-氯甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(604mg，1．68mmol)和吡啶(0．271ml，3．36mmol)在二氯甲烷(20ml)中的溶液里逐滴加入五氯化磷(208mg，2．68mmol)的二氯甲烷(10．7ml)溶液，并在-10℃下攪拌2小時。冷卻到-40℃以后，加入異丁醇(1．55ml)，所形成的混合物在-10℃下攪拌4小時。用水使反應停止，混合物用二氯甲烷萃取。有機萃取液用飽和碳酸氫鈉水溶液洗，濃縮。殘余物用硅膠層析法純化(10％甲醇／二氯甲烷)，得到599mg標題化合物。1H NMR(CD3OD) d 3．45(d，1H，J=18)，3．65(d，1H，J=18)，3．76(s，3H)，4．75(1H，與水重疊)，4．98(s，2H)，5．05(d，1H，J=5)，5．23(s，2H)，6．82(d，2H，J=9)，7．26(d，2H，J=9)。
實施例54-氯-3-羥甲基吡啶在0℃下向4-氯-3-吡啶甲醛(140mg，1．0mmol)的四氫呋喃(1ml)溶液中加入1ml甲醇，隨后分批加入硼氫化鈉(75mg，2．0mmol)。1小時后，加入乙酸(0．15ml)，將反應混合物在室溫下于旋轉蒸發儀上蒸發至干。固體殘余物在硅膠柱上層析(1％甲醇／二氯甲烷)，得到60mg(42％)標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ4．30(br s，1H)，4．80(s，2H)，7．30(d，1H，J=5)，8．34(d，1H，J=5)，8．62(s，1H)。
實施例6(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(3-羥甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯在室溫和氮氣下向4-氯-3-羥甲基吡啶(60mg，0．42mmol)的二甲基甲酰胺(1ml)溶液中加入硫代乙酸鉀(71mg，0．63mmol)。攪拌過夜后，用旋轉蒸發儀除去溶劑。殘余物用乙醚洗，溶于10％甲醇／二氯甲烷中。濾除不溶的物質，將濾液用旋轉蒸發儀濃縮。殘余物溶在甲醇(3ml)中，加入氫氧化鈉水溶液(0．5ml，3M)。在室溫下反應過夜后將反應混合物用1M鹽酸酸化，用旋轉蒸發儀蒸發至干，分配在飽和碳酸氫鈉溶液與乙酸乙酯之中。有機層用硫酸鈉干燥，用旋轉蒸發儀除去溶劑，殘余物溶在甲醇中，依次加入(7R)-7-[(苯基乙酰基)氨基]-3-三氟甲磺酰氧-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(240mg，0．42mmol)和二氯甲烷。在室溫下反應過夜后，將反應混合物分配在5％碳酸氫鈉溶液和乙酸乙酯之中。在硅膠上純化(Chromatotron，2％甲醇／二氯甲烷)，得到標題化合物(60mg，25％)。
1H NMR(CDCl3)δ3．15(d，1H，J=18)，3．55(d，1H，J=18)，3．63(d，1H，J=18)，3．68(d，1H，J=18)，3．78(s，3H)，4．61(d，1H，J=13)，4．66(d，1H，J=13)，5．05(d，1H，J=5)，5．08(d，1H，J=13)，5．25(d，1H，J=13)，5．89(dd，1H，J=9，5)，6．76(d，2H，J=8)，7．05(m，2H)，7．16(d，21H，J=8)，7．32(m，5H)，8．40(d，1H，J=5)，8．48(s，1H)。
實施例7(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(3-氯甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯在0℃下向(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(3-羥甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(112mg，0．194mmol)和氯化鋰(14mg，0．581mmol)的二甲基甲酰胺溶液中加入二異丙基乙胺(0．101ml，0．581mmol)和甲磺酰氯(0．045ml，0．581mmol)。45分鐘后，將反應混合物分配在水和乙酸乙酯／己烷(v／v，3／1)之中。在硅膠上純化(Chromatotron，2％甲醇／二氯甲烷)，得到標題化合物(52mg，45％)。1H NMR(CDCl3)δ3．17(d，1H，J=18)，3．59(d，1H，J=18)，3．63(d，1H，J=18)，3．68(d，1H，J=18)，3．77(s，3HH)，4．54(d，1H，J=13)，4．66(d，1H，J=13)，5．06(d，1H，J=5)，5．08(d，1H，J=13)，5．22(d，1H，J=13)，5．90(dd，1H，J=9，5)，6．76(d，2H，J=8)，6．95(d，1H，J=9)，7．07(d，1H，J=5)，7．15(d，2H，J=8)，7．30(m，5H)，8．41(d，1H，J=5)，8．45(s，1H)。
實施例8(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(3-異硫脲基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯，鹽酸鹽在室溫下向(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(3-氯甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(52mg，0．087mmol)在乙醇(0．4ml)和二氯甲烷(0．1ml)中的溶液加入硫脲(7mg，0．095mmol)。反應過夜后，用旋轉蒸發儀除去溶劑，殘余物用乙醚研制。隨后將固體沉淀真空干燥，得到標題化合物(56mg，96％)。
1H NMR (CDCl3／CD3OD)δ3．14(d，1H，J=10)，3．53(d，1H，J=10)，3．58(s，2H)，3．73(s，3H)，4．40(s，2H)，5．03(d，1H，J=5)，5．12(d，1H，J=9)，5．15(d，1H，J=9)，5．75(d，1H，J=5)，6．74(d，2H，J=10)，7．10(d，1H，J=5)，7．14(d，2H，J=10)，7．25(m，5H)，8．30(d，1H，J=5)，8．45(s，1H)。
實施例9(7R)-7-[(苯基乙酰基)氨基]-3-(3-異硫脲基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽向(7R)-7-[(苯基乙?；?氨基]-3-(3-異硫脲基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯鹽酸鹽(56mg，0．083mmol)在二氯甲烷(1ml)中的溶液依次加入苯甲醚(0．1ml)的三氟乙酸(1ml)。30分鐘后，反應混合物用旋轉蒸發儀濃縮，殘余物用乙醚研制。沉淀用新鮮的乙醚反復地洗滌和傾析，在真空下干燥，得到標題化合物(49mg，79％)。1H NMR(CD3OD)δ3．20(d，1H，J=18)，3．58(d，1H，J=13)，3．62(d，1H，J=13)，3．83(d，1H，J=18)，4．56(d，1H，J=10)，4．60(d，1H，J=10)，5．25(d，1H，J=5)，5．78(d，1H，J=5)，7．28(m，5H)，7．43(d，1H，J=5)，8．45(d，1H，J=5)，8．55(s，1H)。
實施例10(7R)-7-[(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-氯甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯在-60℃下向(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酸鈉鹽(2．11g，3．05mmol)在二甲基甲酰胺(4ml)中的懸浮液加入甲磺酰氯(0．28ml)并在該溫度下攪拌1．5小時。隨后將該溶液在-10℃下加入(7R)-7-氨基-3-(4-氯甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)硫代-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯鹽酸鹽(920mg，1．88mmol)和二異丙基乙胺(0．4ml)在二甲基甲酰胺(2ml)中的溶液，攪拌1小時。將反應混合物倒入冰水中，過濾收集形成的沉淀。濾餅用硅膠柱層析法純化(0．5％甲醇／二氯甲烷)，得到558mg標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ3．07(d，1H，J=18)，3．44(d，1H，J=18)，3．81(2H)，4．96(2H)，5．06(1H)，6．07(1H)，6．43(s，1H)，6．80(br s，1H)，6．88(1H)，7．25-7．45(40H)。
實施例11(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-異硫脲基甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽將(7R)-7-[(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-氯甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(221mg，0．19mmol)、碘化鈉(34mg，0．23mmol)和硫脲(14mg，0．18mmol)在乙腈(10ml)中的溶液于45℃下攪拌3小時。將所形成的混合物分配在水和乙酸乙酯之中。乙酸乙酯層用水洗并濃縮之。殘余物經研制后得到異硫脲鎓鹽，在與實施例9中使用的基本上相同的去保護條件下進行處理，得到27mg標題化合物。
1H NMR(D2O)δ3．48(d，1H，J=18)，3．84(d，1H，J=18)，5．39(s，1H)，5．90(s，1H)，7．16(s，1H)。
實施例124-乙氧羰基-5-〔2-(苯磺?；?乙硫基〕噻唑在-40℃下向叔丁醇鉀(496mg，4．4mmol)在10ml四氫呋喃中的溶液里加入異氰基乙酸乙酯(0．48ml，4．4mmol)在5ml四氫呋喃中的溶液，繼續攪拌反應混合物10分鐘。在將反應混合物冷卻到-60℃之后，加入二硫化碳在5ml四氫呋喃中的溶液。令所形成的混合物溫熱至0℃，加入2-碘乙基苯基砜(4．4mmol)。隨后將混合物回流攪拌5小時，冷卻到室溫，加水和乙酸乙酯。水層用稀鹽酸酸化，用乙酸乙酯萃取。合并的有機層用無水硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑。粗制的殘余物用層析法純化，得到標題化合物(890mg，56％)。1H NMR(CDCl3)δ1．40(t，3H，J=7)，3．3-3．5(m，4H)，4．40(q，2H，J=7)，7．6(t，2H，J=8)，7．70(t，1H，J=8)，7．93(d，2H，J=8)，and 8．64(s，1H)。
實施例134-羥甲基-5-〔2-(苯磺酰基)乙硫基〕噻唑在-30℃下向4-乙氧羰基-5-〔2-(苯磺酰基)乙硫基〕噻唑(702mg，2mmol)在20ml四氫呋喃中的溶液加入硼氫化鋰(2M，1ml)和甲醇(0．16ml，4mmol)。將反應混合物慢慢溫熱至室溫并攪拌過夜。減壓除去溶劑，殘余物粗品用二氯甲烷和甲醇作為洗脫劑進行層析，得到標題化合物(400mg，65％)。
1H NMR(CDCl3)δ2．55(s，1H)，3．00(t，2H，J=6)，3．40(t，2H，J=6)，4．71(s，2H)，7．6(t，2H，J=7)，7．68(t，1H，J=7)，7．82(d，2H，J=7)，和8．80(s，1H)。
實施例14(7R)-7-[(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-羥甲基噻唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯向4-羥甲基-5-〔2-(苯磺酰基)乙硫基〕噻唑(39mg)在1ml二甲基甲酰胺中的溶液里加入叔丁醇鉀(14mg)，繼續攪拌所形成的混合物2小時。在將反應溶液冷卻到-40℃以后，加入(7R)-7-[(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-三氟甲磺酰氧基-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(104mg)在1．5ml DMF中的溶液。將混合物慢慢溫熱至0℃，用氯化銨稀水溶液使反應停止，用乙酸乙酯和己烷萃取。減壓除去溶劑，粗制的殘余物用層析法純化，得到標題化合物(61mg)。1H NMR(CDCl3)δ3．28(q，2H，J=8)，3．82(s，3H)，4．72(q，2H，J=8Hz)，4．98(d，1H，J=4)，5．25(q，2H，J=8)，5．96(q，1H，J=4)，6．42(s，1H)，6．85(s，1H)，6．93(d，2H，J=7)，7．20-7．42(m，33H)，和8．8(s，1H)。
實施例15(7R)-7-[(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-氯甲基噻唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯在0℃下向1ml二甲基甲酰胺中加入0．016ml亞硫酰二氯，在同一溫度下將所形成的混合物攪拌30分鐘。將所形成的溶液用插管加到(7R)-7-[(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-羥甲基噻唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(61mg)在1ml二甲基甲酰胺中的溶液里，在同一溫度下繼續攪拌1小時。反應溶液用乙酸乙酯和己烷稀釋，用水洗，粗制的殘余物用層析法純化，得到標題化合物(43mg)。1H NMR(CDCl3)δ3．22(q，2H，J=12)，3．80(s，3H)，4．78(q，2H，J=8)，5．04(d，1H，J=4)，5．30(q，2H，J=5)，6．00(q，1H，J=4)，6．42(s，1H)，6．72(s，1H)，6．92(d，2H，J=7)，7．08(d，1H，J=4)，7．20-7．45(m，32H)，和8．95(s，1H)。
實施例16(7R)-7-[(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-異硫脲基甲基噻唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯將(7R)-7-[(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-氯甲基噻唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(43mg)溶于2ml乙腈中，向其中加入硫脲(4．5mg)和碘化鈉(13mg)。所形成的混合物在室溫下攪拌過夜。減壓除去溶劑，粗制的殘余物用快速層析法純化，得到標題化合物(40mg)。
1H NMR(CDCl3／CD3OD)δ3．2(q，2H，J=12)，3．80(s，3H)，4．4(q，2H，J=12)，5．02(d，1H，J=4 5．25 (q，2H，J=5)，5．85(d，1H，J=4)，6．45(s，1H)，6．90(d，2H，J=7)，7．2-7．4(m，32H)，和9．00(s，1H)。
實施例17(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-異硫脲基甲基噻唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽將(7R)-7-[(Z)-2-(N-三苯甲基氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-異硫脲基甲基噻唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(40mg)溶于0．1ml苯甲醚和0．9ml二氯乙酸中。在室溫下將所形成的混合物攪拌3小時，然后加入乙醚(100ml)使之沉淀。將沉淀過濾，用HP-20逆相色譜儀層析，得到標題化合物。
1H NMR(D2O)δ3．60(q，2H，J=6)，4．60(q，2H，J=10)，5．20(d，1H，J=4)，5．80(d，1H，J=4)，6．90(s，1H)，和9．13(s，1H)。IR (KBr) 997，1042，1180，1349，1386，1533，1615，1655，和1768 cm-1。
實施例18(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酸在室溫下向(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酸(5．81g，13．47mmol)在二甲基甲酰胺(30ml)中的溶液里加入N-氯丁二酰亞胺(1．80g，13．47mmol)。反應過夜后將反應混合物倒入水(約500ml)中，濾出所形成的沉淀，依次用水和乙酸乙酯洗，真空干燥，得到4．43g(71％)標題化合物。13C NMR(CDCl3)δ108．5，125．6，126．2，126．6，12．3，134．7，141．8，146．5，162．1，163．3。
實施例19(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲酯在室溫下向7-氨基-3-氯頭孢烷酸二苯基甲基酯甲苯磺酸鹽(5．0g，8．72mmol)在無水四氫呋喃(100ml)中的溶液加入吡啶(0．63g，l0．0mmol)，隨后加入(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酸(5．81g，13．47mmol)。將所形成的漿狀物冷卻到-15℃，再加入吡啶(1．42g，22．5mmol)，隨后逐滴加三氟氧磷(1．64g，17．5mmol)，其間保持反應溫度低于-10℃。反應30分鐘后，加入乙酸乙酯(200ml)。再加水(150ml)。用乙酸乙酯徹底萃取水層，合并的有機萃取液用硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到粗產物，將其在硅膠上快速柱層析(乙酸乙酯／己烷，3∶1)，得到標題化合物(5．37，65％)。1H NMR(CDCl3／CD3OD)δ3．35(d，1H，J=18)，3．68(d，1H，J=18)，5．07(d，1H，J=5)，5．80(br s，2H)，6．04(dd，1H，J=9，5)，7．03(s，1H)，7．06(d，1H，J=9)，7．22-7-50(m，25H)。
實施例20(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-巰基-3-頭孢烯-4-羧酸酯，二苯基甲基酯向冷卻到-20℃的(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲酯(4．0g，4．72mmol)在二甲基甲酰胺(30ml)中的溶液一次加入粉狀的水合硫氫化鈉(1．1g，19．6mmol)。15分鐘后將反應混合物倒入0．5M磷酸二氯鈉(約100ml)中，用乙酸乙酯萃取，有機層用水充分洗滌。在減壓濃縮后，得到黃色泡沫狀的粗制標題產物3．8g(95％)。1H NMR(CDCl3／CD3OD)δ3．38(d，1H，J=15)，4．43(d，1H，J=15)，5．03(d，1H，J=5)，5．80(d，1H，J=5)，5．99(br s，1H)，6．80(s，1H)，7．05-7．50(m，25H)。
實施例213-氯甲基-4-氯吡啶鹽酸鹽在室溫下向7ml無水二甲基甲酰胺中加入亞硫酰二氯(0．714ml，9．78mmol)。30分鐘后將以上溶液用插管吸入3-羥甲基-4-氯吡啶(700mg，4．89mmol)在二甲基甲酰胺(3ml)中的溶液里。45分鐘后，加入無水乙醚(100ml)使產物沉淀，用乙醚洗，真空干燥，得到813mg(84％)標題化合物。
1H NMR(CD3OD)δ5．00(s，2H)，8．31(d，1H，J=5)，8．99(d，1H，J=5)，9．18(s，1H)。
實施例223-(N-叔丁氧羰基氨基乙硫基甲基)-4-氯吡啶在室溫下向3-氯甲基-4-氯吡啶鹽酸鹽(513mg，2．59mmol)的二甲基甲酰胺(6ml)溶液中加入碘化鈉(386mg，2．59mmoml)、二異丙基乙胺(1．12ml，6．47mmol)和2-(N-叔丁氧羰基氨基)乙硫醇(458mg，2．59mmol)。2小時后，將反應混合物分配在稀鹽酸和乙酸乙酯之中。有機層用水洗，用硫酸鈉干燥，濃縮，得到750mg油狀產物(96％)，它不經進一步純化直接用于下一步驟。
1H NMR(CDCl3)δ1．43(s，9H)，2．61(m，2H)，3．35(m，2H)，3．81(s，2H)，4．90(br s，1H)，7．35(d，1H，J=4)，8．40(d，1H，J=4)，8．57(s，1H)。
實施例23(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-N-叔丁氧羰基氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，二苯基甲基酯在室溫下向(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯基甲氧亞氨基)乙酰氨基]-3-巰基-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯(650mg，0．777mmol)在二甲基甲酰胺(3ml)中的溶液中加入3-(N-叔丁氧羰基氨基乙硫基甲基)-4-氯吡啶(242mg，0．80mmol)。反應過夜后將反應混合物分配在水和乙酸乙酯之中。用水充分地洗有機層，用硫酸鈉干燥，濃縮，生成粗產物，將其在硅膠上用徑向層析法純化(二氯甲烷／甲醇，體積比50／1)，得到220mg標題化合物(26％)。1H NMR(CDCl3／CD3OD)δ1．23(s，9H)，2．32(t，2H，J=6)，2．98(d，1H，J=18)，3．06(m，2H)，3．40(d，1H，J=18)，3．46(s，2H)，5．03(d，1H，J=5)，5．52(br s，1H)，5．94(d，1H，J=5)，6．80(s，1H)，6．90(d，1H，J=6)，7．00-7．22(m，25H)，8．01(d，1H，J=6)，8．08(s，1H)。
實施例24(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，甲磺酸鹽在0℃下向(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-N-叔丁氧羰基氨基乙硫基甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯(1．0g，0．907mmol)在二氯甲烷(10ml)和苯甲醚(1．0ml)中的溶液里加入三氟乙酸(13ml)。1．5小時后，將反應混合物在室溫下減壓濃縮，油狀殘余物溶在98％甲酸(20ml)中。室溫下4小時后減壓除去甲酸，殘余物溶在水(25ml)中。離心除去不溶物，清液在HP20柱上純化，依次用水、0．1M乙酸銨、水和乙腈／水(1∶4)洗脫、將洗脫液濃縮至原始體積的1／10，濾出形成的沉淀，用水洗，真空干燥，得到兩性離子型產物(260mg)。將上述物質懸浮于水(15ml)中，隨后加入甲磺酸(1．0M水溶液，0．98當量)和乙腈(5ml)，制得甲磺酸鹽。將所形成的溶液蒸發至干，殘余物溶在水(30ml)中，離心除去不溶物，將清液冷凍干燥，得到標題化合物(274mg，44％)。1H NMR(D2O)δ3．11(s，3H)，3．19(m，2H)，3．52(m，2H)，3．67(d，1H，J=17)，4．22(d，1H，J=17)，4．33(s，2H)，5．76(d，1H，J=4)，6．29(d，1H，J=4)，7．93(d，1H，J=4)，8．78(d，1H，J=4)，8．87(s，1H)。
實施例253-(N-叔丁氧羰基氨基乙硫基)-4-氯吡啶在-70℃下向4-氯吡啶鹽酸鹽(2g)在40ml無水四氫呋喃中的懸浮液加入剛制得的LDA(2．5當量)，在同一溫度下繼續攪拌所形成的混合物4小時。向上述溶液中用插管加入N，N′-二(叔丁氧羰基)胱胺(2．5g，0．5當量)在10ml四氫呋喃中的溶液。將反應混合物溫熱至0℃，用水使反應停止，隨后用乙酸乙酯萃取。減壓除去溶劑，粗制的殘余物用快速層析法純化，得到標題化合物，為白色固體。1H NMR(CDCl3)δ1．42(s，9H)，3．15(t，2H，J=7)，3．38(t，2H，J=7)，4．95(s，1H)，7．32(d，1H，J=6)，8．35(d，1H，J=6)，和8．60(s，1H)。
實施例26(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯基甲氧亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(N-叔丁氧羰基氨基乙硫基)吡啶基-4-硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，二苯基甲基酯在-20℃和攪拌下向(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-巰基-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯(6．7g，7．8mmol)在20ml無水二甲基甲酰胺中的溶液加入3-(N-叔丁氧羰基氨基乙硫基)-4-氯吡啶(2．3g，7．8mmol)。將反應混合物慢慢溫熱至室溫并攪拌過夜。用乙酸乙酯和己烷稀釋反應混合物，用水洗。減壓除去溶劑，粗制的殘余物用層析法純化，得到黃色固體狀標題化合物(6g，68％)。1H NMR(CDCl3)δ1．40(s，9H)，2．75(t，2H，J=7)，3．10(t，2H，J=7)，3．15(d，1H，J=14)，3．60(d，1H，J=14)，4．95(s，1H)，5．20(d，1H，J=4)，5．90(s，2H)，6．25(q，1H，J=4)，6．85(d，1H，J=4)，6．90(s，1H)，7．15-7．4(m，26H)，8．1(s，1H)，8．21(d，1H，J=7)。
實施例27(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙硫基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽在0℃下向(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(N-叔丁氧羰基氨基乙硫基)吡啶基-4-硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯(6g)在10ml二氯甲烷和1ml苯甲醚的溶液加入10ml三氟乙酸，在室溫下攪拌所形成的混合物1小時。去除溶劑之后，將殘余物重新溶解在20ml甲酸中并在室溫下攪拌過夜。減壓除去溶劑。殘余物在高真空下干燥，隨后用乙酸乙酯研制。所形成的固體在Amberchrom柱上進行逆向層析(0．1％三氟乙酸水溶液／乙腈)，得到標題化合物(1．5g，48％)。1H NMR(D2O)δ3．5-3．7(m，4H)，3．8(d，1H，J=14)，4．4(d，1H，J=14)，5．84(d，1，J=4)，6．4(d，1H，J=4)，7．65(d，1H，J=6)，8．82(d，1H，J=6)，和9．02(s，1H)。 IR(KBr) 778，1042，1173，1541， 1610， 1780， 3187 cm-1。
實施例28(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基氧代亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-(2-叔丁氧羰基氨基乙硫基甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，二苯基甲基酯向4-〔(2-叔丁氧羰基氨基乙基)硫甲基〕-5-(2-乙氧羰基乙基)硫代-1，2，3-噻二唑(181mg，0．44mmol)的乙醇(5ml)溶液中加入甲醇鈉的甲醇溶液(0．55M，1ml)并濃縮之。殘余物用9∶1己烷／乙酸乙酯研制，與(7R)-7-[[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰基]氨基]-3-氯-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯(200mg，0．25mmol)混合，溶在乙醇和二氯甲烷的混合溶劑中。在室溫下攪拌該溶液16小時后濃縮。粗產物用硅膠柱層析法純化(3％甲醇／二氯甲烷)，得到100mg標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．46(9H)，2．68(2H)，3．19(d，1H，J=18)，3．33(2H+1H)，4．03(2H)，4．88(br s，1H)，5．09(1H)，5．93(br s，2H)，6．44(s，1H)，7．03(1H)，7．20-7．45(25H)。
實施例29(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-(2-氨基乙硫基甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，二氯乙酸鹽將(7R)-7-[(Z)-2-(氨基噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基氧代亞氨基)乙酰氨基]-3-(4-(2-氨基乙硫基甲基)-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯(82mg，0．076mmol)溶于含5％苯甲醚的0．8ml二氯乙酸中，在室溫下攪拌過夜。加入過量的乙醚，過濾收集所形成的沉淀。濾餅用HP-20逆相柱色譜儀純化，得到16mg標題化合物。
1H NMR(DMSO-d6)δ2．64(2H)，2．90(2H)，3．4(1H，與水重疊)，3．82(d，1H，J=17)，4．04(d，1H，J=15)，4．14(d，1H，J=15)，5．17(d，1H，J=5)，5．74(dd，1H，J=5，8)，6．64(s，1H)，7．08(s，1H)，9．50(d，1H，J=8)。
實施例303-(2-N-叔丁氧羰基氨基乙氧基甲基)-4-氯吡啶將4-氯-3-氯甲基吡啶鹽酸鹽(396mg，2mmol)、N-叔丁氧羰基氨基乙醇(132mg，2mmol)和溴化芐基三乙基銨(544mg，2mmol)，在甲苯(20ml)和50％氫氧化鈉水溶液中的兩相混合物于室溫下激烈攪拌24小時。取出有機層，濃縮，得到490mg標題化合物。1HNMR(CDCl3)δ1．46(s，9H)，3．39(2H)，3．65(2H)，4．64(s，2H)，4．90(br s，1H)，7．33(d，1H，J=5)，8．46(d，1H，J=5)，8．64(s，1H)。
實施例31(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2-叔丁氧羰基氨基乙氧基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，二苯基甲基酯在與實施例26中使用的基本上相同的條件下，使(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯基甲氧亞氨基)乙酰氨基]-3-巰基-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯與3-(2-N-叔丁氧羰基氨基乙氧基甲基)-4-氯吡啶反應，得到標題化合物。1H NMR(CDCl3)δ1．42(9H)，3．11(d，1H，J=18)，3．24(2H)，3．40(2H)，3．46(d，1H，J=18)，4．30(2H)，4．83(br s，1H)，5．17(1H)，5．72(br s，2H)，6．20(1H)，6．99(s，1H)，7．25-7．45(25H)，8．28(1H)，8．33(1H)。
實施例32(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2-氨基乙氧基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(2-叔丁氧羰基氨基乙氧基甲基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯在與實施例27中所用的基本上相同的條件下去保護，得到標題化合物。
1H NMR(D2O)δ3．35(2H)，3．45(d，1H，J=18)，3．91(2H)，4．00(d，1H，J=18)，5．52(d，1H，J=5)，6．04(d，1H，J=5)，7．73(d，1H，J=6)，8．57(d，1H，J=6)，8．65(s，1H)。
實施例333-(N-叔丁氧羰基氨基乙磺酰甲基)-4-氯吡啶向3-(N-叔丁氧羰基氨基乙基)硫甲基)-4-氯吡啶(302mg，1mmol)在乙酸乙酯(10ml)和甲醇(5ml)的混合溶劑中的溶液里加入甲磺酸(144mg，1．5mmol)。加入3-氯過苯甲酸(700mg)并在室溫下攪拌5小時。用飽和硫代硫酸鈉水溶液使反應停止。溶液用10％氫氧化鈉中和，用乙酸乙酯萃取。將乙酸乙酯萃取液在硫酸鈉上干燥，濃縮至干，得到286mg標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．44(9H)，3．22(2H)，3．66(2H)，4．50(s，2H)，5．21(br s，1H)，7．42(d，1H，J=5)，8．54(s，1H，J=5)，8．72(1H)。
實施例34(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-N-叔丁氧羰基氨基乙磺酰甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，二苯基甲基酯在與實施例26中使用的基本上相同的條件下，(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-巰基-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯與3-(N-叔丁氧羰基氨基乙磺酰甲基)-4-氯吡啶反應，生成標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．44(9H)，3．20(3H)，3．66(3H)，4．48(s，2H)，5．19(1H)，7．25-7．45(25H)，8．50(s，1H，J=5)，8．70(1H)。
實施例35(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙磺酰甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽在與實施例27中使用的基本上相同的條件下，對(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-N-叔丁氧羰基氨基乙磺酰甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯進行去保護，得到標題化合物。
1H NMR(D2O)δ3．47(d，1H，J=18)，3．3．70(2H)，3．85(2H)，4．02(d，1H，J=18)，5．07(s，2H)，5．52(d，1H，J=5)，6．03(d，1H，J=5)，7．79(d，1H，J=6)，8．64(d，1H，J=6)，8．76(s，1H)。
實施例363-(4-N-叔丁氧羰基氨基丁炔-1-基)-4-氯吡啶在實施例30中所述的相轉移條件下使4-氯-3-氯甲基吡啶鹽酸鹽與3-叔丁氧羰基氨基-1-丙炔反應，得到標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．4-1．6(9H，旋光混合物)，4．0-4．2(2H)，7．32(d，1H，J=5)，8．43(d，1H，J=5)，8．53(s，1H)。
實施例37(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(4-N-叔丁氧羰基氨基丁炔-1-基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，二苯基甲基酯在與實施例26中所用的基本上相同的條件下，(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-巰基-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯與3-(4-N-叔丁氧羰基氨基丁炔-1-基)-4-氯吡啶反應，得到標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．4-1．8(9H)，3．10(d，1H，J=18)，3．47(d，1H，J=18)，3．85(2H)，5．16(1H)，5．62(br s，2H)，6．13(1H)，7．00(1H)，7．2-7．5(25H)，8．35(2H)。
實施例38(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(4-氨基-2-丁炔-1-基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽在與實施例27中所用的基本上相同的條件下，對(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(4-N-叔丁氧羰基氨基丁炔-1-基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯進行去保護，得到標題化合物。
1H NMR(D2O)δ3．46(d，1H，J=18)，4 02(d，1H，J=18)，4．16(2H)，4．70(2H)，5．52(d，1H，J=5)，6．03(d，1H，J=5)，7．76(d，1H，J=6)，8．66(d，1H，J=6)，8．78(s，1H)。
實施例39(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(4-氨基-2-(Z)-丁烯-1-基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽在與實施例27中所用的基本上相同的條件下對(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-(4-叔丁氧羰基氨基-2-(Z)-丁烯-1-基)吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯進行去保護，得到標題化合物，為帶有1-丁烯基異構體的混合物。
1H NMR(D2O)δ3．46(d，1H，J=18)，3．91(2H)，4．02(d，1H，J=18)，4．56(2H)，5．52(d，1H，J=5)，5．63(2H)，6．03(d，1H，J=5)，7．76(d，1H，J=6)，8．65(d，1H，J=6)，8．76(s，1H)。
實施例403-(N-叔丁氧羰基氨基乙基亞磺酰甲基)-4-氯吡啶在0℃下向3-(N-叔丁氧羰基氨基乙基)硫甲基-4-氯吡啶(687mg，2．26mmol)在二氯甲烷(10ml)中的溶液里加入3-氯過氧苯甲酸(467，2．72mmol)。室溫下反應過夜后，將反應混合物分配在二氯甲烷和碳酸氫鈉稀溶液中。有機層用硫酸鈉干燥，濃縮。粗產物自乙酸乙酯／己烷中結晶，得到標題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ1．40(s，9H)，2．90(m，1H)，3．01(m，1H)，3．59(m，2)，4．00(d，1H，J=13)，4．22(d，1H，J=13)，5．30(br s，1H)，7．40(d，1H，J=4)，8．45(d，1H，J=4)，8．57(s，1H)。
實施例41(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基乙基亞磺酰甲基吡啶-4-基硫代)3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽在與實施例43中使用的基本上相同的條件下，使(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-巰基-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯與3-(N-叔丁氧羰基氨基乙基亞磺酰甲基)-4-氯吡啶反應，生成(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(三苯甲氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-N-叔丁氧羰基氨基乙基亞磺酰甲基吡啶-4-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸二苯基甲基酯，隨后在與實施例35中使用的基本上相同的條件下去保護，得到標題化合物。
1H NMR(D2O)δ2．90(s，3H)，3．20-3．35(m，1H)，3．50-3．70(m，4H)，4．00(dd，1H，J=18，3)，4．55(dd，1H，J=13，3)，4．65(dd，1H，J=13，3)，5．51(m，1H)，6．02(m，1H)，7．75(m，1H)，8．60(m，2H)。
實施例42(7R)-7-{[2-[N，N′-二(叔丁氧羰基)胍基]乙硫基]乙酰基]氨基}-3-(4-氯甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯向(7R)-7-氨基-3-(4-氯甲基-1，2，3-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(485mg，0．794mmol)和{2-[NW，NW′-二(叔丁氧羰基)胍基]乙基}硫代乙酸(329mg，0．873mmol)的溶液中加入氯化氧磷(0．103ml，1．11mmol)和二異丙基乙基胺(0．55ml，3．18mmol)，在-10℃下攪拌16小時。加水，混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液用碳酸氫鈉水溶液洗，隨后濃縮。殘余物用硅膠層析純化(1％甲醇／二氯甲烷)，得到440mg標題化合物。
1H NMR(CD3OD) d 1．44(s，9)，1．47(s，9)，2．79(m，2)，3．30(2，與溶劑重疊)，3．35(d，1，J=18)，3．57(m，2)，3．64(d，1，J=18)，3．77(s，3)，4．96(s，2)，5．15(d，1，J=5)，5．20(d，1，J=12)，5．23(d，1，J=12)，5．77(d，1，J=5)，6．81(d，2，J=9)，7．25(d，1，J=8)。
實施例43(7R)-7-{[2-[N，N′-二(叔丁氧羰基)胍基]乙硫基]乙?；鵠氨基}-3-(4-異硫脲鎓甲硫基甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸酯，4-甲氧基芐酯，碘化物鹽將(7R)-7-{[2-[N，N′-二(叔丁氧羰基)胍基]乙硫基]乙?；鵠氨基}-3-(4-氯甲基-1，2，3--1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯(200mg，0．24mmol)、硫脲(18mg，0．24mmol)和碘化鈉(35mg，0．24mmol)在乙腈(3ml)中的溶液于室溫下攪拌過夜。將混合物濃縮并用二氯甲烷研制，殘余物重新溶解在2ml丙酮中，過濾。將濾液濃縮至干，得到200mg標題化合物。1H NMR(CDCl3) d 1．45(s，18)， 2．81(m，2)，3．15(d，1，J=18)，3．36 (d，1，J=15)，3．55(d，1，J=15)，3．62(m，2)，3．80(s，3)，3．83(d，1，J=18)，4．80(d，1，J=15)，4．86(d，1，J=15)，5．08(d，1，J=5)，5．23(d，1，J=12)，5．27(d，1，J=12)，5．58(dd，1，J=5，8) 6．85(d，2，J=9)，7．37(d，2，J=9)，8．24(d，1，J=8)。
實施例44(7R)-7-{[(2-胍基乙硫基)乙?；鵠氨基}-3-(4-異硫脲鎓乙硫基甲基-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸，2，2-二氯乙酸鹽將(7R)-7-{[2-[N，N′-二(叔丁氧羰基)胍基]乙硫基]乙?；鵠氨基}-3-(4-異硫脲鎓甲硫基甲基-1，2，3-1，2，3-噻二唑-5-基硫代)-3-頭孢烯-4-羧酸-(4-甲氧基)芐酯，碘化物鹽(200mg)和苯甲醚(0．1ml)在二氯乙酸(2ml)中的溶液于室溫下攪拌16小時。該混合物用乙醚／己烷沉淀，過濾，真空干燥，得到70mg標題化合物。
使用與上述實施例中所述基本上相同的方法，還制備了以下化合物
實施例45(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例46(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例47(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-亞氨基甲基)氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例48(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例49(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例50(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例51(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例52(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例53(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代]-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例54(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代]-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例55(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代]-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例56(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代]-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例57(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例58(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例59(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例60(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例61(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例62(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例63(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例64(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例65(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例66(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例67(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例68(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例69(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例70(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例71(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例72(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例73(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例74(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例75(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例76(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例77(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例78(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例79(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例80(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例81(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例82(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例83(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例84(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例85(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例86(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例87(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例88(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例89(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例90(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例91(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例92(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(羥基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例93(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例94(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例95(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例96(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例97(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例98(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例99(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例100(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例101(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例102(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例103(7R)-7-〔(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例104(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例105(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例106(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例107(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例108(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例109(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例110(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例111(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例112(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例113(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例114(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例115(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例116(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例117(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例118(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例119(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例120(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例121(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例122(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例123(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例124(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例125(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-2-甲酰氨基乙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例126(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例127(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例128(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-3-羥基丙硫基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例129(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例130(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例131(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例132(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例133(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例134(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例135(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例136(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例137(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-2-甲酰氨基乙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例138(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-氨基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例139(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-胍基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽實施例140(7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-5-氯噻唑-4-基)-2-(2-氟乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-〔3-(2-N-(亞氨基甲基)氨基-3-羥基丙硫基甲基)吡啶-4-基硫代〕-3-頭孢烯-4-羧酸酯，三氟乙酸鹽。
于是，應當理解，本發明的化合物、方法和組合物能有效地對抗對人類社會健康危害日益增長的各種β-內酰胺抗性細菌菌株。
雖然使用了某些實施方案和實施例來說明本發明，但本領域專業人員顯然可以在不偏離本發明的范圍和精神的情況下對所述實施方案和實施例進行改動。
先前未被引用作為參考的那些參考文獻，包括專利文獻和非專利文獻，都被專門引用作為通用的參考文獻。
其它的實施方案是在以下權利要求的范圍之內。
權利要求
1．一種下式化合物或其可藥用鹽 其中R1選自 Z選自-CH2(X)m-，-C(NOR6)-，-CH(OR7)-，-C(CHCO2R8)-和-CH(NR9R10)-；X選自氧和硫；m選自0和1；R3選自氰基；C1-C6烷基，它可以被以下的一個或多個取代基取代羥基，溴，氟，氯，碘，巰基或硫基，氰基，C1-C6烷硫基，選自呋喃基、噻吩基、咪唑基、吲哚基、吡啶基、噻二唑基、噻唑基、哌嗪基、二苯并呋喃基和二苯并噻吩基的雜環，C6-C14芳基，雜芳基，羧基，C1-C6烷氧羰基，C1-C6烷基，C1-C6鏈烯基，硝基，氨基，C1-C6烷氧基和酰氨基；C6-C14芳基，它可以被以下的一個或多個取代基取代羥基，溴，氟，氯，碘，巰基和硫基，氰基，氰基酰氨基，C1-C6烷硫基，選自呋喃基、噻吩基、咪唑基、吲哚基、吡啶基、噻二唑基、噻唑基、哌嗪基、二苯并呋喃基和二苯并噻吩基的雜環，C6-C14芳基，雜芳基，羧基，C1-C6烷氧羰基，C1-C6烷基，C1-C6鏈烯基，硝基，氨基，C1-C6烷氧基和酰氨基；選自呋喃基、噻吩基、咪唑基、吲哚基、吡啶基、噻二唑基、噻唑基、哌嗪基、二苯并呋喃基和二苯并噻吩基的雜環，它可以被以下一個或多個取代基取代羥基，溴，氟，氯，碘，巰基或硫基，氰基，氰基酰氨基，C1-C6烷硫基，雜環，C6-C14芳基，雜芳基，羧基，氧，C1-C6烷氧羰基，C1-C6烷基，C1-C6鏈烯基，硝基，氨基，C1-C6烷氧基和酰氨基；或是一個雜烷基(RHetAr，其中R是C1-C6烷基，HetAr是如上定義的芳族雜環)，以及(CH2)nT，其中n是1到6；T選自氨基、(NRR′，其中R和R′可以是C1-C6烷基、C6-C14芳基或酰基C(O)R，其中R是C1-C6烷基)、脒基(C-或N-連接的)，胍基和異硫脲基，它們可以被C1-C6烷基、C6-C14芳基、羥基或如上定義的氨基取代；R4-7獨立地選自氫，C1-C6烷基，C6-C14芳基和如上定義的酰基；其中R6還可以是與相鄰的氧形成一個被保護的羥基的基團；R8選自氫，C1-C6烷基和C6-C14芳基；R9和R10獨立地選自氫，C1-C6烷基，如上定義的酰基，以及雜環羰基(C(O)Het，其中Het是如上定義和雜環)；R2選自氫，C1-C6烷基，它可以按上述定義被取代；C1-C6鏈烯基，它可以被以下一個或多個官能基取代羥基，溴，氟，氯，碘，巰基或硫基，氰基，C1-C6烷硫基，雜環，C6-C14芳基，雜芳基，羧基，C1-C6烷氧羰基，C1-C6烷基，C1-C6鏈烯基，硝基，氨基，C1-C6烷氧基和酰氨基；C6-C14芳基，它可以按上述定義被取代；雜環，它可以按上述定義被取代；芳烷基(RAr，其中R是可以按上述定義被取代的C1-C6烷基，Ar是可以按上述定義被取代的C6-C14芳基)，雜芳烷基和三烷基甲硅烷基(RR′R″Si，其中R、R′和R″是C1-C6烷基)；或者R2不存在，它本應連接的CO2基帶有負電荷；環A、B、D和E是含碳、氮和硫的雜環，選自噻吩基，咪唑基，噻唑基，噻二唑基和吡唑基；R11選自H，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，羥基，如上定義的氨基，氰基，C1-C6羥烷基，C1-C6甲酰氨基烷基，C1-C6氨基烷基或C1-C6季銨烷基，以及季雜芳鎓烷基；alk1和alk2是C1-C6烷基，它可以獨立地被選自C1-C6烷基、羥基、如上定義的氨基、C1-C6烷氧基、C1-C6羥烷基和甲酰胺的一個取代基取代；p是0、1或2；R99選自硫，SO，SO2，NH，C1-C6N-烷基，氧，C=C(順或反式)，以及C≡C；q是1；r是0、1、2或3；R12是 R13-R16獨立地選自H，羥基，如上定義的氨基，脒基，C1-C6烷基，環烷基，如上定義的酰基，氨基?；土柞；?，它們可以合在一起形成一個5或6元環；R17是H或C1-C6烷基；其中alk2和R12合在一起可以形成一個5或6元非芳香雜環，它可以按上述定義被取代。
2．權利要求1的化合物或鹽，其中R1是-NHC(O)ZR3。
3．權利要求2的化合物或鹽，其中R3是C6-C14芳基或雜環，可以按權利要求1的定義被取代。
4．權利要求3的化合物或鹽，其中R3選自苯基、噻吩基或呋喃基，它們可以如權利要求1中所定義的被取代，或者R3是2-氨基噻唑-4-基，2-氨基-5-氯噻唑-4-基和2-氨基噻二唑-4-基。
5．權利要求4的化合物或鹽，其中Z是-C(NOR6)-，R6選自氫和可以按權利要求1中的定義被取代的C1-C6烷基。
6．權利要求5的化合物或鹽，其中R6選自氫、2-氟乙基、環丙基甲基、烯丙基、二氯烯丙基和環戊基，R3選自苯基、2-噻吩基、2-呋喃基、2-氨基噻唑-4-基、2-氨基-5-氯噻唑-4-基和2-氨基噻二唑-4-基。
7．權利要求6的化合物或鹽，其中R6是氫或2-氟乙基，R3是2-氨基噻唑-4-基或2-氨基-5-氯噻唑-4-基。
8．權利要求7的化合物或鹽，其中該化合物對于抗二甲氧苯青霉素、抗萬古霉素或抗氨芐青霉素的細菌具有活性，其表現為最小抑菌濃度低于頭孢噻肟或亞胺培南。
9．權利要求1的下式化合物或其可藥用鹽 其中R34是鹵素或氫；R53選自NH2，NH3+和被保護的氨基；R2、R6、A、B、D、E、R11、alk1、p、R99、q、alk2、r和R12的定義同權利要求1。10．權利要求9的化合物或鹽，其中R34是氯；R2是氫，或者不存在，它本應連接的CO2基則帶負電荷；R6是氫；A、B、D和E選擇成形成噻唑和噻二唑；R11是氫、鹵素或C1-C6烷基；alk1是CH2；p是0或1；R99是硫；alk2是CH2；r是2或3；R12是NH2或NH3+。
11．權利要求1-10中任何一項的化合物或鹽作為在制備用于治療受到抗二甲氧苯青霉素、抗萬古霉素或抗氨芐霉素細菌感染的哺乳動物藥物方面的應用。
12．權利要求11的應用，其中哺乳動物受到抗二甲氧苯青霉素的葡萄球菌或抗氨芐青霉素的腸球菌的感染。
13．一種用于治療抗二甲氧苯青霉素、抗萬古霉素或抗氨芐青霉素的細菌感染的殺菌組合物，該組合物在可藥用的載體中含有治療有效量的權利要求1-10中任何一項的化合物或鹽。
14．權利要求13的組合物，其中所述的細菌是抗二甲氧苯青霉素的葡萄球菌或抗氨芐青霉素的腸球菌。
全文摘要
本發明涉及新的(7R)－7－(乙酰氨基)－3－(芳硫基)－3－頭孢烯－4－羧酸或其藥理上可接受的鹽,這些化合物對于很大一類生物體,包括對β－內酰胺抗生素有抗性的生物體,具有抗菌活性,可作為殺菌劑使用。本發明還涉及可用來制備本發明新化合物的新中間體以及制造這些新化合物和中間體化合物的新方法。
文檔編號A61P31/04GK1291611SQ0012687
公開日2001年4月18日 申請日期2000年9月1日 優先權日1995年10月12日
發明者I·－S·曹, S·赫克, T·格林卡, V·J·勒, Z·J·張 申請人:邁克羅賽藥品公司