專利名稱：光活雙環醇及其制備方法和其藥物組合物與用途的制作方法
背景技術：
本發明涉及光學活性雙環醇即(-)-雙環醇和(+)-雙環醇，其制備方法，含有他們的藥物組合物，以及制備治療慢性病毒性肝炎的藥物用途。
背景技術：
慢性病毒性肝炎是嚴重危害人民健康的常見傳染病。據統計僅乙肝患者就占世界人口的5％。在我國病毒性肝炎的發病率高居世界首位，即約80％的肝炎患者集中在中國。目前我國現有病毒性肝炎患者達3000萬人之多，每年有近50萬人死于與乙肝有關的疾病。因此，慢性病毒性肝炎特別是乙型和丙型肝炎的治療一直是世界醫藥界的難題。
由于龐大的乙肝人群亟待得到治療，因此，目前我國市場上慢性肝炎的治療藥物品種繁多，據不完全統計，中西藥物已達700余種，但療效肯定、副作用小的藥物為數不多。盡管肝炎疫苗的推廣對肝炎防治起到巨大的推動作用，但肝炎患者仍以每年近百萬的速度增加。因此，研制結構新穎，作用肯定的新型抗肝炎藥仍十分迫切。
雙環醇(化學名4、4′-二甲氧基-2、3、2′、3′、-雙(亞甲二氧基)-6-羥甲基-6′-甲氧羰基聯苯)為本發明人研制的我國一類抗肝炎新藥。雙環醇具有顯著保肝作用并具有一定的抗肝炎病毒效果，對四氯化碳、D-半乳糖胺、撲熱息痛引起的小鼠急性肝損傷以及小鼠免疫性肝炎等4種動物模型均有顯著的降低升高的血清轉氨酶作用，減輕肝臟組織病理形態學損害。此外，對大鼠慢性四氯化碳肝損傷模型，雙環醇除有降低升高的血清轉氨酶作用外，兼有改善血清白蛋白/球蛋白比值及肝臟脯氨酸含量的效果，即有減輕肝纖維化的作用。雙環醇具有抑制HBeAg、HBV-DNA及HBsAg分泌的效果，在長期慢性毒性試驗中未發現有毒性，亦無致畸和致突變的毒性。臨床所用雙環醇為外消旋體。
臨床研究結果表明雙環醇對慢性病毒性乙型肝炎和丙型肝炎患者均有很好的改善臨床癥狀和降ALT及AST作用，并可使部分病人的HBeAg、HBV-DNA陰轉。療效顯著并無明顯副作用，安全性及耐受性好。市售的雙環醇的商品名為“百賽諾”。

發明內容
本發明的目的在于提供一種新的對映異構體(-)-雙環醇和(+)-雙環醇，同現有的(±)-雙環醇產品相比，它對慢性病毒性乙型肝炎和丙型肝炎患者均能夠更好地改善臨床癥狀。
本發明的另一目的在于提供一種新的對映異構體(-)-雙環醇和(+)-雙環醇的制備方法；本發明再一目的在于提供一種藥物組合物，其包括有效劑量的作為活性成份的通式(I)的化合物及制藥領域中常用的載體。
本發明的再一目的在于提供一種新的對映異構體(-)-雙環醇和(+)-雙環醇在制備抗肝炎藥物中的應用。
(+)-雙環醇或(-)-雙環醇(±)-雙環醇(I)，化學名4、4′-二甲氧基-2、3、2′、3′-雙亞甲二氧基-6-羥甲基-6′-甲氧羰基聯苯，為多取代聯苯結構。在2、2′、6、6′位均有取代基，使連接兩個苯環間的單鍵旋轉受阻，而不處于同一個平面上，構成一對旋光性阻轉異構體。經X-衍射單晶結構分析證實(±)-雙環醇的兩個苯環間二面角為78.0(1)°。分子間無氫鍵聯系，以分子內氫鍵及分子間的范德華力維系分子在晶態下的穩定排列。由于該空間群為第二類空間群，故該分子在晶態下形成外消旋體結構。因此雙環醇分子為外消旋體，可拆分為(-)-雙環醇和(+)-雙環醇兩個旋光性對映體。由于兩個光活對映體立體構型不同，很可能引起生理活性的差異。本發明制備出(-)-雙環醇及(+)-雙環醇以研究其生理活性的不同及特點，使(±)-雙環醇的藥效更加專一地得到利用。
為了實現本發明的目的，采用如下的步驟(A)由(±)-聯苯雙酯水解制得(±)-聯苯雙酸；(B)(±)-聯苯雙酸脫水制得(±)-聯苯酸酐；(C)(±)-聯苯酸酐還原制得(±)-雙環醇酸；(D)(±)-雙環醇酸(II)與光活生物堿反應生成一對非對映異構體鹽，即(-)-雙環醇酸·光活生物堿鹽與(+)-雙環醇酸·光活生物堿鹽；
(E)利用非對映異構體鹽的物理性質差異及溶劑中溶解度的不同，進行分步重結晶，分別拆分制得非對映異構體鹽(-)-雙環醇酸·光活生物堿鹽與(+)-雙環醇酸·光活生物堿鹽；(F)兩種非對映異構體鹽分別進行解離，制得(-)-雙環醇酸及(+)-雙環醇酸的純品；(G)(-)-雙環醇酸及(+)-雙環醇酸再分別甲基化制得(-)-雙環醇和(+)-雙環醇。
(±)-雙環醇酸(2) (±)-聯苯雙酯(3) (±)-聯苯雙酸(4) (±)-聯苯酸酐(5)具體講，制備本發明的(-)-雙環醇及(+)-雙環醇各步驟的具體技術方案如下(A)(±)-聯苯雙酸的制備用堿水解(±)-聯苯雙酯進行制備。
所用堿包括氫氧化鉀、氫氧化鈉、甲醇鈉、乙醇鈉、甲醇鉀、乙醇鉀。
所用溶劑為水、稀醇溶液(甲醇、乙醇、異丙醇等醇類)、稀丙酮溶液。
溶液濃度5％-50％，優選濃度20％-40％。
反應溫度20℃-100℃，優選溫度50℃-100℃。
(B)(±)-聯苯酸酐的制備(±)-聯苯雙酸與乙酸酐等脫水劑反應制得(±)-聯苯酸酐。
所用脫水劑為乙酸酐、乙酰氯等。
所用溶劑為乙酸酐、苯、甲苯、二甲苯等。
溶液濃度50％-98％，優選濃度80％-98％。
反應溫度80℃-140℃，優選溫度100℃-140℃。
(C)(±)-雙環醇酸的制備用硼氫化鉀或硼氫化鈉等還原(±)-聯苯酸酐得到(±)-雙環醇酸。
所用還原劑包括硼氫化鉀、硼氫化鈉等。
所用溶劑為二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亞砜、吡啶等。
反應溫度-20℃-50℃，優選溫度0℃-20℃。
(D)由(±)-雙環醇酸(II)與光活生物堿生成一對非對映異構體鹽，即(±)-(II)+光活生物堿→(-)-(II)·光活生物堿鹽+(+)-(II)·光活生物堿鹽。
所用光活生物堿(-)-馬錢子堿、(-)-士的寧、(-)-喹寧、(+)-喹尼丁、(-)-麻黃堿、(+)-α-苯乙胺、(-)-α-苯乙胺、D-苯基異丙胺、L-苯基異丙胺、(-)-嗎啡堿、(-)-薄荷胺、辛可寧堿、辛可尼丁堿。
所用溶劑水、醇(甲醇、乙醇、異丙醇等醇類)、丙酮、稀醇溶液(甲醇、乙醇、異丙醇等醇類)、稀丙酮溶液、乙腈等溶劑。
反應溫度0-100℃，優選溫度20-50℃。
(E)利用非對映異構體鹽的物理性質差異及溶劑中溶解度的不同，進行分步重結晶，分別拆分制得非對映異構體鹽(-)-雙環醇酸·光活生物堿鹽與(+)-雙環醇酸·光活生物堿鹽；所用溶劑水、醇(甲醇、乙醇、異丙醇等醇類)、稀醇溶液(甲醇、乙醇、異丙醇等醇類)、稀丙酮溶液等溶劑。
重結晶溫度30-100℃，優選溫度50-80℃。
(F)兩種非對映異構體鹽分別進行解離，制得(-)-雙環醇酸及(+)-雙環醇酸的純品；解離非對映異構體鹽所用酸鹽酸(濃度范圍0.01-6N)、硫酸(濃度范圍0.01-6N、乙酸(濃度范圍0.01-6N)等酸類，優選鹽酸。
解離非對映異構體鹽所用堿氫氧化鈉、氫氧化鉀、甲醇鈉、乙醇鈉、甲醇鉀、乙醇鉀、氨水等堿類，優選氫氧化鈉和氫氧化鉀，濃度范圍是0.01-15N。
解離所用溶劑水、稀醇溶液(甲醇、乙醇、異丙醇等醇類)、稀丙酮溶液等。
反應溫度-20-100℃。優選溫度-10-30℃。
(G)(-)-雙環醇酸和(+)-雙環醇酸分別與甲基化試劑進行甲酯化，制備得(-)-雙環醇及(+)-雙環醇。
甲基化試劑重氮甲烷、硫酸二甲酯、鹵代甲烷、甲基醇類。
甲基化溶劑四氫呋喃、乙醚、丙酮、甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈。
甲基化反應溫度-20-80℃。優選溫度-10-40℃本發明因此還涉及含有作為活性成份的本發明化合物和常規藥物賦形劑或輔劑的藥物組合物。通常本發明藥物組合物含有0.1-95重量％的本發明化合物。
本發明化合物的藥物組合物可根據本領域公知的方法制備。用于此目的時，如果需要，可將本發明化合物與一種或多種固體或液體藥物賦形劑和/或輔劑結合，制成可作為人藥或獸藥使用的適當的施用形式或劑量形式。
本發明化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮膚、腹膜或直腸等，優選口服。
本發明化合物或含有它的藥物組合物的給藥途徑可為注射給藥。注射包括靜脈注射、肌肉注射、皮下注射和皮內注射等。
給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型。如液體劑型可以是真溶液類、膠體類、微粒劑型、乳劑劑型、混懸劑型。其他劑型例如片劑、膠囊、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、栓劑、凍干粉針劑等。
本發明化合物可以制成普通制劑、也可以是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統。
為了將單位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領域公知的各種載體。關于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、硫酸鈣、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、碳酸鈣、白陶土、微晶纖維素、硅酸鋁等；濕潤劑與粘合劑，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解劑，例如干燥淀粉、海藻酸鹽、瓊脂粉、褐藻淀粉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等；崩解抑制劑，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氫化油等；吸收促進劑，例如季銨鹽、十二烷基硫酸鈉等；潤滑劑，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸鹽、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。
例如為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領域公知的各種載體。關于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高嶺土、滑石粉等；粘合劑，如阿拉伯膠、黃蓍膠、明膠、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。
例如為了將給藥單元制成膠囊，將有效成分本發明化合物與上述的各種載體混合，并將由此得到的混合物置于硬的明膠膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發明化合物制成微囊劑，混懸于水性介質中形成混懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應用。
例如，將本發明化合物制成注射用制劑，如溶液劑、混懸劑溶液劑、乳劑、凍干粉針劑，這種制劑可以是含水或非水的，可含一種和/或多種藥效學上可接受的載體、稀釋劑、粘合劑、潤滑劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑。如稀釋劑可選自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、多氧化的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，為了制備等滲注射液，可以向注射用制劑中添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加常規的助溶劑、緩沖劑、pH調節劑等。這些輔料是本領域常用的此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑或其它材料。
為達到用藥目的，增強治療效果，本發明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。
本發明化合物藥物組合物的給藥劑量取決于許多因素，例如所要預防或治療疾病的性質和嚴重程度，患者或動物的性別、年齡、體重、性格及個體反應，給藥途徑、給藥次數、治療目的，因此本發明的治療劑量可以有大范圍的變化。一般來講，本發明中藥學成分的使用劑量是本領域技術人員公知的。可以根據本發明化合物組合物中最后的制劑中所含有的實際藥物數量，加以適當的調整，以達到其治療有效量的要求，完成本發明的預防或治療目的。本發明化合物的每天的合適劑量范圍本發明的化合物的用量為0.001-150mg/Kg體重，優選為0.01-100mg/Kg體重，更優選為0.01-60mg/Kg體重，最優選為0.1-10mg/Kg體重。上述劑量可以單一劑量形式或分成幾個，例如二、三或四個劑量形式給藥這受限于給藥醫生的臨床經驗以及包括運用其它治療手段的給藥方案。
每一種治療所需總劑量可分成多次或按一次劑量給藥。本發明的化合物或組合物可單獨服用，或與其他治療藥物或對癥藥物合并使用并調整劑量。
藥理實驗表明，(-)雙環醇對四氯化碳引起的血清GPT和GOT升高均有明顯的降低作用。(-)雙環醇200mg/kg作用強于消旋雙環醇200mg/kg，(-)雙環醇100mg/kg的藥理作用與消旋雙環醇200mg/kg的作用相似，(+)雙環醇200mg/kg的藥理作用弱于消旋雙環醇100mg/kg組或無效。


圖1(±)-雙環醇HPLC手性柱2(-)-雙環醇HPLC手性柱3(+)-雙環醇HPLC手性柱4(±)-雙環醇HPLC手性柱5(-)-雙環醇HPLC手性柱6(+)-雙環醇HPLC手性柱圖
具體實施例方式
下面的實施例用來進一步說明本發明，但是這并不意味著對本發明的任何限制。
所得(-)-雙環醇酸及(+)-雙環醇酸用熔點、旋光檢測。所得(-)-雙環醇及(+)-雙環醇純品以熔點、旋光儀及手性柱檢測。
實施例1 (±)-聯苯雙酸(2)的制備50克(0.12mol)聯苯雙酯(1)和20克(0.36mol)氫氧化鉀于水及乙醇中，回流反應至完全，用濃鹽酸酸化，過濾，水洗至中性，干燥，得46.6克化合物(2)，收率99％，熔點260℃。
1HNMR(DMSO-d6)δppm DMSO-d63.88，OCH3x2；5.94，-OCH2O-；5.97，-OCH2O-；7.24，Ar-Hx2；10.24，-COOHx2MS分子離子峰390(基峰)實施例2 (±)-聯苯酸酐(3)的制備50克(0.13mol)化合物(2)，于100毫升乙酸酐中，回流反應至完全，蒸干，得46.6克化合物(3)，收率97％，熔點266℃。
1HNMR(CDCl3) δppm CDCl33.95，OCH3x2；6.03、6.14，-OCH2O-；7.0，Ar-Hx2MS分子離子峰372(基峰)。
實施例3 (±)-雙環醇酸(4)的制備50克(0.14mol)化合物(3)和150毫升二甲基甲酰胺，于攪拌下加入15克(0.27mol)的硼氫化鉀，室溫反應至完全，控制內溫低于15℃，加入水，用濃鹽酸酸化，過濾，干燥，得47.0克化合物(4)，收率90％，熔點192-195℃。
1HNMR(CDCl3)δppm CDCl3，δppm3.926，-OCH3；3.959，-OCH3；4.424，4.385，4.359，4.320，Ar-CH2-OJ＝11.7Hz.19.5Hz；5.895，-OCH2O-；6.039、6.013，-OCH2O-J＝7.8Hz；6.729、7.396，Ar-H；MS分子離子峰376實施例4 (-)-雙環醇酸·(+)-喹尼丁鹽(5)的制備化合物(4)10g(0.027mol)溶于丙酮中，加入9g(+)-喹尼丁(0.028mol)，攪拌反應30分鐘，析出白色固體，過濾得9.2g，用乙醇重結晶三次，得化合物(5)7.3g，收率78.4％，比旋光度[α]1D7＝+65.7(c＝0.56 CHCl3)，m.p.230-231℃。
實施例5 (+)-雙環醇酸·(+)-喹尼丁鹽(6)的制備將化合物(5)析出后的母液蒸干，得白色固體11g，乙醇重結晶三次，得化合物(6)2.6g，收率28％，比旋光度[α]1D7＝+106.6，(c＝0.97CHCl3)，m.p.149-150℃。
實施例6 (-)-雙環醇酸(7)的制備化合物(5)2.5g用稀鹽酸酸化，過濾，水洗至中性，得化合物(7)1.02g，收率76％，比旋光度[α]1D9＝-37.1，(c＝0.61吡啶)，m.p.182-184℃。
實施例7 (+)-雙環醇酸(8)的制備1.6g化合物(6)，用稀鹽酸酸化，過濾，水洗至中性，干燥，得化合物(8)0.6g，收率70％，比旋光度[α]1D9＝+37.7，(c＝060，吡啶)，m.p.174-175℃。
實施例8 (-)-雙環醇((-)I)的制備化合物(7)500mg溶于THF中，加入700mg亞硝基甲基尿素用濃KOH溶液分解后的乙醚溶液(含重氮甲烷)，攪拌反應。TLC顯示反應完全，加入Na2SO4干燥，蒸干溶劑，純化，得化合物((-)I)470mg，收率91％，比旋光度[α]1D9＝-41.8，(c＝0.51，CHCl3)，m.p.80-82℃，手性柱測得光純度為100％(HP1100，柱長250mm×4.6mm，流動相異丙醇/正己烷＝88/12)。
1HNMR(CDCl3，δppm)δ3.71，s，-CH3；δ3.95、3.97，-OCH3；δ4.37，-CH2OH；δ5.91、δ6.02，-OCH2O-；δ7.26、δ7.33，Ar-H。
MS390(M+)，358(-CHO)，329(CH3)，314，(-CH3)，299(-CO)。
實施例9 (+)-雙環醇((+)I)的制備360mg化合物(8)，溶于THF中，加入500mg亞硝基甲基尿素用濃KOH溶液分解后的乙醚溶液(含重氮甲烷)，反應至TLC顯示完全，加入無水Na2SO4干燥，蒸干溶劑，純化，得化合物((+)I)320mg，收率86％，比旋光度[α]1D9＝+40.2，(c＝0.60，CHCl3)，m.p.81-83℃，手性柱測得光純度為100％(HP1100，柱長250mm×4.6mm，流動相異丙醇/正己烷＝88/12)。
1HNMR(CDCl3，δppm)δ3.71，-CH3；δ3.95、3.97，-OCH3；δ4.37，-CH2OH；δ5.91、δ6.02，-OCH2O-；δ7.26、δ7.33，Ar-H。
MS390(M+)，358(-CHO)，329(-CH3)，314(-CH3)，299(-CO)。
實施例10 (+)-雙環醇酸·(-)-馬錢子堿鹽(9)的制備化合物(4)500mg(0.0013mol)溶于丙酮中，加入524mg(-)-馬錢子堿(0.0013mol)，攪拌反應30分鐘，析出白色固體，過濾得505mg，用無水乙醇重結晶，得化合物(9)410mg，收率80.1％，比旋光度[α]1D7＝+48.7，(c＝0.53 CHCl3)，m.p.160.5-162.5℃。
實施例11 (-)-雙環醇酸·(+)-馬錢子堿鹽(10)的制備化合物(9)析出后的母液蒸干，用無水乙醇重結晶，得化合物(10)430mg，收率84％，比旋光度[α]1D7＝-37.4，(c＝0.43 CHCl3)m.p.157-158.5℃。
實施例12 (+)-雙環醇酸(8)的制備化合物(9)350mg用稀鹽酸酸化，過濾，水洗至中性，干燥，得化合物(8)140mg，收率81.9％，比旋光度[α]1D9＝+38.4，(c＝0.37，吡啶)，m.p.172.5-174℃。
實施例13 (-)-雙環醇酸(7)的制備420mg化合物(10)，用稀鹽酸酸化，過濾，水洗至中性，干燥，得化合物(7)200mg，收率97.5％，比旋光度[α]1D9＝-37.9，(c＝0.28，吡啶)，m.p.183-185℃。
實施例14 (+)-雙環醇((+)I)的制備化合物(8)130mg溶于THF中，加入180mg亞硝基甲基尿素用濃KOH溶液分解后的乙醚溶液(含重氮甲烷)，攪拌反應至TLC顯示反應完全，無水Na2SO4干燥，蒸干溶劑，純化，得化合物((+)I)110mg，收率82.1％，比旋光度[α]2D0＝+40.3，(c＝0.58，CHCl3)，m.p.80-82℃，手性柱測得光純度為99.4％，(HP1100，柱長250mm×4.6mm，流動相異丙醇/正己烷＝88/12)。
1HNMR(CDCl3，δppm)δ3.71，-CH3；δ3.95、3.97，-OCH3；δ4.37，-CH2OH；δ5.91、δ6.02，-OCH2O-；δ7.26、δ7.33，Ar-H。
MS390(M+)，358(-CHO)，329(-CH3)，314(-CH3)，299(-CO)。
實施例15 (-)-雙環醇((-)I)的制備190mg化合物(7)，溶于THF中，加入260mg亞硝基甲基尿素用濃KOH溶液分解后的乙醚溶液(含重氮甲烷)，攪拌反應1小時，TLC顯示反應完全，無水Na2SO4干燥，蒸干溶劑，純化，得化合物((-)I)165毫克，收率83.7％，比旋光度[α]2D0＝-41.5，(c＝0.61 CHCl3)，m.p.80-82℃，手性柱測得光純度為99.8％，(HP1100，柱長250mm×4.6mm，流動相異丙醇/正己烷＝88/12)。
1HNMR(CDCl3，δppm)δ3.71，s，-CH3；δ3.95、3.97，-OCH3；δ4.37，-CH2OH；δ5.91、δ6.02，-OCH2O-；δ7.26、δ7.33，Ar-H。
MS390(M+)，358(-CHO)，329(CH3)，314，(-CH3)，299(-CO)。
藥理實驗試驗例1雙環醇和(+)，(-)雙環醇對小鼠實驗性肝損傷保護作用的比較1.試驗材料及實驗方法a.雙環醇由藥研所合成室張純貞教授提供，(+)，(-)雙環醇是由本發明的實施例7、8、14、15制備。用時以0.5％CMC或PEG 400配成50，100，200mg/10ml懸液。
b.動物雄性昆明種小鼠，體重18-22g，購自醫科院動物繁育中心。
c.試劑GPT試劑盒和CCl4購自北京化工廠。
d.方法將小鼠隨機分為11組，每組7只。給藥組于實驗第一天上下午各一次口服不同劑量雙環醇(50，100，200mg/kg，10ml/kg)，對照組給同體積0.5％CMC或PEG 400。次日下午各組動物均于腹腔注射0.12％CCl4花生油液，10ml/kg后，禁食過夜。給CCl4后16小時，將動物斷頭處死，離心分離血清，測定GPT，GOT活性。
2.結果表1.雙環醇及光學異構體(CMC)對小鼠四氯化碳肝損傷保護作用的比較組別 動物數 sGPTu±SD正常對照7 44±6CCl4對照 7 510±46a雙環醇50mg7 315±192100mg 7 280±99c200mg 7 101±28c(+)雙環醇50mg7 509±56100mg 7 410±144200mg 7 297±155b(-)雙環醇50mg7 167±156b100mg 7 100±47c200mg 7 52±18ca P＜0.001，與正常對照相比b P＜0.01，與CCl4對照相比c P＜0.001，與CCl4對照相比表2.雙環醇及光學異構體(PEG400)對小鼠四氯化碳肝損傷保護作用的比較組別動物數sGPT sGOT(u±SD) (u±SD)正常對照 7 64±9127±13CCl4對照 7 1623±533a990±196a雙環醇37.5mg7 855±347b761±240b75mg 7 598±312c649±196b150mg 7 127±39d321±49d(+)雙環醇37.5mg7 1616±213970±12675mg 7 1454±291887±177150mg 7 1097±570669±341(-)雙環醇37.5mg7 446±259d670±170c75mg 7 289±143d427±15d150mg 7 82±29d342±80da P＜0.001，與正常對照相比b P＜0.05，與CCl4對照相比c P＜0.01，與CCl4對照相比d P＜0.001與CCl4對照相比3.結論雙環醇對四氯化碳引起的血清GPT和GOT升高均有明顯的降低作用，(-)雙環醇200mg/kg作用強于雙環醇200mg/kg，(-)雙環醇100mg/kg的藥理作用與雙環醇200mg/kg的作用相似，(+)雙環醇200mg/kg的藥理作用弱于雙環醇100mg/kg組或無效。
權利要求
1.如通式(I)所示的化合物 其特征在于所述化合物為光活對映異構體(-)-雙環醇和(+)-雙環醇。
2.如權利要求1所述化合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟(A) (±)-雙環醇酸與光活生物堿反應生成一對非對映異構體鹽；(B) 分步重結晶，分別拆分制得非對映異構體鹽(-)-雙環醇酸·光活生物堿鹽與(+)-雙環醇酸·光活生物堿鹽；(C) 兩種非對映異構體鹽分別進行解離制得(-)-雙環醇酸及(+)-雙環醇酸的純品；(D) (-)-雙環醇酸及(+)-雙環醇酸再分別用甲基化試劑甲基化制得(-)-雙環醇和(+)-雙環醇。
3.根據權利要求2的制備方法，其特征在于，所述的光活生物堿包括(-)-馬錢子堿、(-)-士的寧、(-)-喹寧、(+)-喹尼丁、(-)-麻黃堿、(+)-α-苯乙胺、(-)-α-苯乙胺、D-苯基異丙胺、L-苯基異丙胺、(-)-嗎啡堿、(-)-薄荷胺、辛可寧堿、辛可尼丁堿。
4.根據權利要求2的制備方法，其特征在于，所述的拆分所用的溶劑包括水、醇類、丙酮、稀醇水溶液、稀丙酮水溶液、乙腈。
5.根據權利要求2的制備方法，其特征在于，所述的解離所用的堿包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、甲醇鈉、甲醇鉀、乙醇鈉、乙醇鉀。
6.根據權利要求2的制備方法，其特征在于，所述的解離所用的酸包括鹽酸、硫酸、乙酸。
7.根據權利要求2的制備方法，其特征在于，所述的甲基化試劑包括重氮甲烷、硫酸二甲酯、鹵代甲烷、甲基醇類。
8.一種藥物組合物，其特征在于，含有有效劑量的如權利要求1所述的任一化合物，以及藥效學上可接受的載體。
9.權利要求1所述化合物在制備抗肝炎藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了通式(I)所示的光學活性雙環醇即(－)－雙環醇和(+)－雙環醇，其制備方法，含有他們的藥物組合物，以及制備治療慢性病毒性肝炎的藥物用途。
文檔編號A61P31/00GK1506363SQ0215672
公開日2004年6月23日 申請日期2002年12月12日 優先權日2002年12月12日
發明者張純貞, 胡偉, 李燕 申請人:中國醫學科學院藥物研究所