專利名稱：銀杏內酯口腔崩解片及制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種可斂肺、平喘、活血化瘀，止痛，用于治療肺虛咳喘、冠心病、心絞痛、高脂血癥、(腦血栓形成、腦栓塞)中風中經(jīng)絡的痰瘀阻絡癥的銀杏內酯口腔崩解片及其制備方法。
背景技術：
銀杏內酯是目前發(fā)現(xiàn)最強的血小板活化因子(plateletacllvatfactor，PAF)受體拮抗劑，血小板活化因子(PAF)是一種由多種細胞產(chǎn)生又可作用于多種細胞的內源活性物質，具有廣泛的生物學作用。在體內，PAF參與許多病理生理過程，作用面廣，且活性很大。已發(fā)現(xiàn)PAF在血栓形成、哮喘、器官移植排斥、急性炎癥、心臟過敏、內毒素及IgG導致的休克等病理過程中起著重要的作用。目前銀杏內酯口服劑型主要為普通片劑，由于銀杏內酯本身難溶于水，普通口服片劑，則不易崩解、在體內釋放不完全，生物利用度也較低。
中國專利CN1502340A公開了的銀杏葉分散片制備方法，是將從銀杏葉中提取物(銀杏內酯和黃酮類混合物)，加入不小于總片重5％、不大于30％，溶脹度大于5ml/g的羧甲基淀粉鈉(CMS-Na)、低取代羥丙基纖維素(LS-HPC)、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉(CCMC-Na)等崩解劑，以及淀粉、微晶纖維素等填充輔料和助流劑壓成片，制成崩解時間小于180秒的分散片。但該分散片不僅達不到口腔快速崩解要求，仍需藥物到達胃部才能分解，不能達到快速發(fā)揮藥物作用，且不利于吞咽困難者服用，不利于心絞痛患者快速發(fā)揮藥效作用；而且主藥為杏葉提取的含銀杏內酯和銀杏黃酮的混合物，所含銀杏內酯含量低，僅6％左右，不能充分發(fā)揮銀杏內酯本身特有的藥效作用。且該劑型不能口腔崩解吸收，與口崩片相比其吸收慢，生物利用度較低。
中國專利CN1660222A公開的銀杏葉提取物口崩片及制備方法，是將裹有甲(乙)基纖維素包衣材料的銀杏提取物與賦形劑(崩解劑、稀釋劑、矯味劑、助流劑)按1∶1～1∶3混合壓片。通過制成包衣顆粒方法制成崩解片，由于工藝繁鎖成本高，需首先制成包衣顆粒，再加賦形劑制成崩解片，主藥經(jīng)包衣后被包裹在顆粒中，會影響主藥的體內快速、完全吸收。其所解決的僅是通過包衣掩蓋銀杏葉提取物本身苦味，仍然因銀杏內酯含量低，而不具有治療上述疾病作用。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種銀杏內酯含量高，口服方便，快速吸收，可提高生物利用度的銀杏內酯口腔崩解片。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種上述銀杏內酯口腔崩解片的制備方法。
本發(fā)明銀杏內酯口腔崩解片，其特征是基本上由1份銀杏內酯，0.1～1份低取代羥丙基纖維素和/或羧甲基淀粉鈉和/或交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和/或交聯(lián)聚維酮崩解劑，1～10份微晶纖維素和/或甘露醇填充劑，0.01～0.1份十二烷基硫酸鈉表面活性劑，0.05～0.5份無水枸櫞酸和/或碳酸氫鈉組成。
本發(fā)明所說銀杏內酯，是指從銀杏葉中提取所得的銀杏內酯有效部位，包括銀杏內酯A、銀杏內酯B、銀杏內酯C，其中較好是內酯總含量≥70％，銀杏內酯B含量≥40％。
本發(fā)明所說填充劑，優(yōu)選量為1.5～3份。
此外，為方便壓片，本發(fā)明中還可以加入適量如微粉硅膠、硬脂酸鎂等助流劑，以提高微粉顆粒的流動性；以及加入適量改進口味的藥常用矯味劑。
本發(fā)明銀杏內酯口腔崩解片制備其特征是將所需原輔料分別過100目篩，備用；按處方分別稱取輔料充分混合均勻；加入處方量的銀杏內酯，與上述輔料充分混勻，干法壓片。
本發(fā)明銀杏內酯口腔崩解片，由于不僅選用低取代羥丙基纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮崩解劑中一種或多種，而且還加入無水枸櫞酸和/或碳酸氫鈉崩解劑，因而使制得的本發(fā)明片劑不僅能迅速崩解，而且只需在少量唾液存在下即可溶散，完全能達到在口腔中即可崩解要求。試驗表明將難溶性銀杏內酯制成本發(fā)明口腔崩解片后，樣品在1分鐘內崩解完全，有利于迅速發(fā)揮銀杏內酯的藥效作用，從而加快了銀杏內酯在體內的釋放速度。本發(fā)明較現(xiàn)有銀杏內酯口服劑具有釋放速度快，服用方便，生物利用度高，因可直接在口腔中利用唾液將藥片分解完全，方便了吞咽困難(如老年人)患者，并且由于口腔粘膜吸收不存在首過效應，因而提高了血藥濃度和生物利用度；順應性好，由于本品能迅速在口腔中分散，且口感好，患者服用本品的順應性好，不會引起不良的刺激反應。并且由于銀杏內酯含量高(內酯總含量≥70％，銀杏內酯B含量≥40％)，藥效作用明顯。藥效試驗表明本發(fā)明銀杏內酯口腔崩解片，可降低腦梗塞的發(fā)生，對腦缺血有保護作用，并可減少血栓的形成，抑制血小板聚集，可斂肺，平喘，活血化瘀，止痛，適用于肺虛咳喘，冠心病，心絞痛，高脂血癥，治療(腦血栓形成、腦栓塞)中風中經(jīng)絡的痰瘀阻絡癥。克服了普通片崩解速度慢、釋放度低的問題。(詳見藥效學試驗)具體實施方式
實施例按實施例配方表，將原輔料分別過100目篩，備用。按處方分別稱取輔料充分混合均勻，加入處方量的銀杏內酯，充分混勻，干法壓片，包裝。
實施例配方表

本發(fā)明口腔崩解片藥效學試驗1、藥品與試劑受試藥物名稱本發(fā)明口腔崩解片；尼莫地平片山西亞寶藥業(yè)股份有限公司水合氯醛A.R，中國醫(yī)藥(集團)上海化學試劑公司；0.9％氯化鈉注射液國營張家港市制藥廠；紅四氮唑(TTC)A.R，中國醫(yī)藥(集團)上海化學試劑公司，10g/瓶；伊文思藍中國醫(yī)藥(集團)上海化學試劑公司；阿司匹林腸溶片，25mg/片，南京恒生制藥廠；肝素鈉中國惠興生化試劑有限公司(上海)；戊巴比妥鈉中國醫(yī)藥(集團)上海化學試劑公司；10％葡萄糖注射液山東華魯制藥有限公司；阿司匹林腸溶片，南京恒生制藥廠；AA(花生四烯酸)規(guī)格100mg/瓶，由sigma公司提供。血小板活化因子(PAF)，規(guī)格1mg/支，sigma公司提供。檸檬酸三鈉規(guī)格500g/瓶，AR，常熟市永華精細化學品有限公司生產(chǎn)。
2、實驗儀器1411高頻小電刀，上海醫(yī)療器械高技術公司；WG2003臺式干燥箱，重慶萬達有限公司；JA3003電子天平上海精科天平儀器廠；SJ-42多道生理記錄儀上海醫(yī)用電子儀器廠；XX-1型血栓監(jiān)測儀，上海南匯林青醫(yī)學儀器廠；RM6000型多道生理記錄儀，Nihon Koden；MFV-3200電磁流量計，Nihon Koden；MFV-1200電磁流量計，NihonKoden；KHW-501恒溫小槽，江蘇超聲設備廠；PAPER-I型血小板聚集及血凝測定儀，北京世帝科學儀器公司；LDZ5-2離心機，北京醫(yī)用離心機廠；HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋國華電器有限公司。
3、試驗動物SD大鼠，體重250～300g，第二軍醫(yī)大學實驗動物中心；大耳白家兔，雄性，2.0～2.3kg，由南京安立默科技有限公司提供。
實驗方法與結果(一)銀杏內酯口腔崩解片對大鼠實驗性局灶性腦缺血的保護作用取SD大鼠，體重250～300g，按體重性別隨機分為6組，每組10只，雌雄各半。分別為銀杏內酯口腔崩解片高劑量組60.0mg/kg(以銀杏內酯計，下同)，中劑量組30.0mg/kg，低劑量組15.0mg/kg，陽性對照尼莫地平組12mg/kg(1.2mg/ml)，假手術組及缺血模型對照組(均給以等量0.5％CMC-Na)。于實驗前四天，每日給藥一次，連續(xù)灌胃給藥4天。第四天最后一次于缺血前30分鐘給藥。采用頸內動脈線栓法制備大鼠大腦中動脈閉塞(MCAO)模型大鼠用10％水合三氯乙醛(300mg/kg)ip麻醉，仰臥手術臺上頸部正中切口，暴露右側頸總動脈，向外牽引二腹肌及胸鎖乳突肌，由頸總動脈分叉處向頭端依次游離，結扎并剪斷頸外動脈的分支枕骨下動脈和甲狀腺上動脈。在頸外動脈遠端結扎，切斷頸外動脈使其主干游離備用。然后分離頸內動脈，用絲線在頸外動脈根部打一松扣，夾閉頸總動脈和頸內動脈。將尼龍線(長4cm，直徑0.26mm)經(jīng)頸外動脈主干切口，緩慢向頸內動脈入顱方向推進，以頸總動脈分叉處為標記，推進18mm左右時感到阻力，即達到了較細的大腦前動脈內，阻斷了MCA的所有血供來源，扎緊頸外動脈根部松扣。一小時后，拔出尼龍線，扎緊動脈殘端。縫合皮膚，完成MCAO導致局灶性腦缺血-再灌模型。假手術組大鼠麻醉后，僅暴露頸內外動脈分叉，不閉塞MCA。
MCAO 24h后按Bederson的方法對動物的行為缺陷進行分級評分，標準如下0分未觀察到神經(jīng)癥狀；1分提尾懸空時，動物的手術對側前肢表現(xiàn)為腕肘屈曲，肩內旋，肘外展，緊貼胸壁；2分將動物置于光滑平面上，推手術側肩向對側移動時，阻力降低；3分動物自由行走時向手術對側環(huán)轉或轉圈；4分；軟癱，肢體無自發(fā)活動。
MCAO后24h斷頭處死大鼠，取出全腦于10％甲醛溶液中固定，取腦冠狀切面，脫水，石蠟包埋，制片(4μm)，HE染色，由病理專業(yè)人員在光學顯微鏡下閱片，觀察其大腦皮質海馬區(qū)細胞形態(tài)學改變，根據(jù)病變程度分別記為”-””+””++””+++”。
正常對照組(偽手術組)10例腦組織大腦皮層和海馬區(qū)神經(jīng)元(錐體細胞)基本正常，核居中，未見神經(jīng)元明顯變性、壞死及炎細胞浸潤等病理學改變。
模型對照組10例腦細胞大腦皮質和CA1-CA3海馬區(qū)神經(jīng)元(錐體細胞)均見中—重度變性、壞死(++～+++)。神經(jīng)元結構模糊、胞體腫脹、尼氏小體減少或消失，出現(xiàn)不同程度的核深染、核固縮、核溶解，神經(jīng)元數(shù)目明顯減少。
尼莫地平組(陽性藥組)10例腦組織中有8例腦組織未見明顯神經(jīng)元變性、壞死及炎細胞浸潤等病理學改變。2例腦組織CA1-CA3海馬區(qū)神經(jīng)元(錐體細胞)見輕—中度變性、壞死(+)，神經(jīng)元結構模糊、胞體腫脹、尼氏小體減少或消失，出現(xiàn)不同程度的核深染、核固縮、核溶解，神經(jīng)元數(shù)目較模型對照組增多。
銀杏內酯低劑量組10例腦組織中有5例腦組織未見明顯神經(jīng)元變性、壞死及炎細胞浸潤等病理學改變。5例腦組織CA1-CA3海馬區(qū)神經(jīng)元(錐體細胞)見輕—重度變性、壞死(+～+++)，神經(jīng)元結構模糊、胞體腫脹、尼氏小體減少或消失，出現(xiàn)不同程度的核深染、核固縮、核溶解。
銀杏內酯中劑量組10例腦組織中有7例腦組織未見明顯神經(jīng)元變性、壞死及炎細胞浸潤等病理學改變。3例腦組織CA1-CA3海馬區(qū)神經(jīng)元(錐體細胞)見輕—中度變性、壞死(+～++)，神經(jīng)元結構模糊、胞體腫脹、尼氏小體減少或消失，出現(xiàn)不同程度的核深染、核固縮、核溶解，神經(jīng)元數(shù)目較模型對照組增多。
銀杏內酯高劑量組10例腦組織中有8例腦組織未見明顯神經(jīng)元變性、壞死及炎細胞浸潤等病理學改變。2例腦組織CA1-CA3海馬區(qū)神經(jīng)元(錐體細胞)見輕—中度變性、壞死(+～++)，神經(jīng)元結構模糊、胞體腫脹、尼氏小體減少或消失，出現(xiàn)不同程度的核深染、核固縮、核溶解，神經(jīng)元數(shù)目較模型對照組增多。
(二)銀杏內酯口腔崩解片對血小板功能的影響1、銀杏內酯對家兔Chandler血栓形成的影響采用Chandler方法，取雄性家兔40只，隨機分成5組，每組8只，銀杏內酯口腔崩解片高劑量組30mg/kg，中劑量組15mg/kg，低劑量組7.5mg/kg；溶劑對照組(0.5％CMC)，阿司匹林(ASP)組15mg/kg。灌胃給藥，每天給藥1次，連續(xù)給藥5天；第5天給藥后45min，背位固定于手術臺上。采用10mg.ml-1的鹽酸普魯卡因局麻，分離一側頸總動脈并作頸總動脈插管，用一次性注射器自頸總動脈取血2ml注入聚乙烯管環(huán)內，血栓在血栓形成儀轉動15分鐘后，自環(huán)內取出血栓，吸干血液，即刻稱量濕重，60℃干燥30分鐘，稱量干重。計算干重抑制率(結果見下表)。
抑制率＝(對照組血栓干重-給藥組血栓干重)/對照組血栓干重×100％

*P＜0.05，**P＜0.01與溶劑對照組比較結果表明銀杏內酯口腔崩解片高、中劑量組均有明顯抑制家兔Chandler血栓形成作用，與溶劑對照組比較均有極顯著差異(P＜0.01)。高、中劑量組血栓干重抑制率分別為53.33％和38.57％。
2、銀杏內酯口腔崩解片對家兔血小板聚集的影響分組及給藥方法家兔隨機分為5組正常對照組(等容積CMC-Na)，陽性對照組阿斯匹林(10.0mg/kg)，銀杏內酯口腔崩解片高劑量(32.0mg/kg)、中劑量(16mg/kg)、低劑量(8mg/kg)。灌胃給藥，每日1次，連續(xù)3天。
血小板聚集率檢測于第3天注射給藥后20min(陽性對照組于給藥后60min)頸總取血，枸櫞酸鈉(3.8％)1∶9抗凝，以1000r/min離心10min，取富血小板血漿(PRP)，剩余部分以3000r/min離心，取貧血小板血漿(PPP)，聚集誘導劑用PAF(終濃度0.38μg/ml)、ADP(5.54ug/ml)、AA(76.9ug/ml)。用PAPER-I型血小板聚集及血凝測定儀測定血小板1min、5min、max聚集率，并按下述公式計算抑制率。

銀杏內酯口腔崩解片對家兔在體血小板聚集率的影響實驗結果表明銀杏內酯灌胃給藥三個劑量均能抑制ADP誘導的家兔血小板的最大聚集率，中劑量對1min、5min聚集率也有抑制作用(見表A)；銀杏內酯高、中劑量對PAF誘導的家兔血小板的1min和最大聚集率有抑制作用，高劑量對5min聚集率亦有抑制作用(見表B)；銀杏內酯高、中劑量對AA誘導的家兔血小板的5min、最大聚集率有抑制作用(見表C)。
表A.銀杏內酯對ADP誘導家兔血小板聚集率的影響—(X±SD)

注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.01(下同)表B.銀杏內酯對PAF誘導家兔血小板聚集率的影響—(X±SD)

表C.銀杏內酯對AA誘導家兔血小板聚集率的影響—(X±SD)

注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.01(下同)
試驗結論銀杏內酯口腔崩解片高、中劑量組局灶性腦缺血24h后，病理組織學檢查表明銀杏內酯可明顯改善局灶性腦缺血下大鼠的腦代謝；維持腦缺血狀態(tài)下神經(jīng)細胞的正常形態(tài)和功能，延緩、減輕其壞死。
銀杏內酯口腔崩解片高、中劑量組均有明顯抑制家兔Chandler血栓形成作用，與溶劑對照組比較均有極顯著差異(P＜0.01)。最高血栓干重抑制率可達45.59％。
銀杏內酯體內給藥及體外給藥對PAF誘導的家兔血小板聚集率有明顯的抑制作用，且抑制作用的強弱與劑量呈依賴關系。
權利要求
1.銀杏內酯口腔崩解片，其特征是基本上由1份銀杏內酯，0.1～1份低取代羥丙基纖維素和/或羧甲基淀粉鈉和/或交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和/或交聯(lián)聚維酮崩解劑，1～10份微晶纖維素和/或甘露醇填充劑，0.01～0.1份十二烷基硫酸鈉表面活性劑，0.05～0.5份無水枸櫞酸和/或碳酸氫鈉組成。
2.根據(jù)權利要求1所述銀杏內酯口腔崩解片，其特征在于所說銀杏內酯內酯總含量≥70％，銀杏內酯B含量≥40％。
3.根據(jù)權利要求1所述銀杏內酯口腔崩解片，其特征在于所說填充劑為1.5～3份。
4.根據(jù)權利要求1、2或3所述銀杏內酯口腔崩解片，其特征在于還加入適量微粉硅膠、硬脂酸鎂等助流劑。
5.根據(jù)權利要求4所述銀杏內酯口腔崩解片，其特征在于還加入適量矯味劑。
6.根據(jù)權利要求1-5所述銀杏內酯口腔崩解片的制備，其特征是將所需原輔料分別過100目篩，備用；按處方分別稱取輔料充分混合均勻；加入處方量的銀杏內酯，與上述輔料充分混勻，干法壓片。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種銀杏內酯口腔崩解片及其制備方法，其特征是基本上由1份銀杏內酯，0.1～1份低取代羥丙基纖維素和/或羧甲基淀粉鈉和/或交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和/或交聯(lián)聚維酮崩解劑，1～10份微晶纖維素和/或甘露醇填充劑，0.01～0.1份十二烷基硫酸鈉表面活性劑，0.05～0.5份無水枸櫞酸和/或碳酸氫鈉組成，將原輔料分別過100目篩，先將輔料充分混合均勻，再加入銀杏內酯充分混勻，干法壓片。本發(fā)明片劑不僅能迅速崩解，而且只需在少量唾液存在下1分鐘內崩解完全，完全能達到在口腔中即可崩解要求。
文檔編號A61K47/34GK1883472SQ20061004037
公開日2006年12月27日 申請日期2006年5月19日 優(yōu)先權日2006年5月19日
發(fā)明者張國清, 吳洪君 申請人:江蘇鵬鷂藥業(yè)有限公司