專利名稱：：采用氨基異吲哚啉化合物治療皮膚狼瘡的方法
技術領域：
：本發明提供了通過單獨或在替代實施方式中聯合其它治療法施用(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1,3-二酮、4-(氨基)-2-(2，6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮(ACTIMIDTM)、3-(4畫氨基隱l-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮(REVLIMID)或環丙基{2-[(lS)-l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺治療、預防和/或控制皮膚狼疾的方法。本發明還^是供了在治療、預防和/或控制皮膚狼瘡的方法中采用的單用或與其它治療法聯用的包含(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l,3-二酮、4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-1,3-二酮、3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氫-異吲咮-2-基)-哌啶-2,6-二酮或環丙基{2-[(1S)-l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(曱基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺的藥物組合物和劑型。2.
背景技術：
：狼癡或紅斑狼瘡是能夠在身體不同部位，尤其是皮膚、關節、血液和腎中引起慢性炎癥的自身免疫性疾病。正常情況下身體的免疫系統可生成稱為抗體的蛋白，以使身體抵御病毒、細菌和其它外來物質(即抗原)。在如狼瘡等自身免疫性疾病中，免疫系統失去了辨別抗原與其自身細胞和組織的差別的能力，并能使抗體直接針對其自身細胞和組織形成免疫復合物。這些免疫復合物可在組織中累積并引起組織炎癥、損傷和/或疼痛。狼瘡的三種最常見的類型包括系統性紅斑狼瘡(SLE)、皮膚型紅斑狼瘡(CLE)和藥物誘導型狼瘡。對《良癡和紅貧王《良癡更具體的描述可參見Wallace,2000,T7g丄M/ms5。o^爿Gw^ybrawd77^>F鍾Z/^'Qx》nit/m'vera^yPmss,修訂和擴充版，其全文在此引用作為參考。系統性紅斑狼癡(SLE)是一種臨床定義的涉及多器官系統的自身免疫疾病，并涉及直接針對細胞核的抗體。SLE可作用于包括關節、皮膚、肺、心臟、血液、腎或神經系統在內的身體任意系統或器官。SLE的癥狀可以從《鼓小的不方便到非常嚴重，甚至威脅生命。例如，SLE患者可能經歷(a)沒有疼痛或極度疼痛，特別在關節處；(b)沒有皮膚表現或毀損狀的皮疹；和/或(c)不涉及器官或嚴重的器官破壞。如上文討論，SLE的許多臨床表現由免疫復合物對各種組織或細胞表面成分的作用所引起。然而，目前仍然不清楚是否存在多克隆B細胞激活或對特定抗原的應答。盡管如此，針對SLE形成的遺傳傾向可能確實存在。更詳細的描述可參見Lahita,1999,丄M/7ws五0^emato^:s,AcademicPress,第三版，其內容在此全文引用作為參考。藥物誘導型狼瘡通常在特定處方藥物的使用后出現。藥物誘導型狼瘡的癥狀與SLE類似。通常與藥物誘導型狼瘡有關的藥物為肼苯噠溱(用于治療高血壓或)和普魯卡因胺(用于治療心率不規則)。然而，服用該藥物的人中僅有極少數會形成外顯的藥物誘導型狼瘡。該癥狀通常會隨藥物的停用而消退。皮膚狼瘡或皮膚型紅斑狼瘡主要影響皮膚并通常以皮膚炎癥、皮膚皮疹和皮膚出血為特征。皮膚狼瘡還可以影響頭發和黏膜，但通常不影響內部器官，如SLE。皮膚狼癡可被分類為包括急性皮膚型紅斑狼瘡(ACLE)、亞急性皮膚型紅斑狼掩(SCLE)、慢性皮膚型紅斑狼瘡(CCLE)或盤狀紅斑狼瘡(DLE)以及新生兒紅斑狼癡(NLE)的組。對皮膚狼癡或皮膚型紅斑狼瘡的更具體描述可參見Kuhn等人，2004,Cwtoweoas^&^/ema/osws,Springer，第一版，其全文在此引用作為參考。ACLE通常是一種光敏感性皮膚病。它可以表現為紅色皮膚無光澤區域，類似于持久曬傷或有類似皮滲的外觀。ACLE可能在面部中央以蝴蝶模式爆發和/或在包括手臂、腿部和身體的其它部位以一般模式爆發。ACLE的病因據認為是多因子的，其中包括遺傳、環境和激素因子。對于具有遺傳易患病的患者，ACLE可被病毒(例如，EBV)或在紫外光下暴露誘發。SCLE是一種無疤痕無萎縮生成的光敏感性皮膚病。在某些情況下，SCLE表現為通常在陽光暴露后在上背部和胸部的不發癢的環形干式皮滲。SCLE可發生于患有系統性紅斑狼瘡患者，Sj6gren綜合征以及補體成分2(C2d)缺陷的患者，或者可被藥物誘導。SCLE通常發生于遺傳易患病的個體，更通常發生于具有人白細胞抗原B8(HLA-B8)、人白細胞抗原DR3(HLA-DR3)、人白細胞抗原DRw52(HLA-DRw52)以及人白細胞抗原DQ1(HLA-DQ1)的患者。SCLE與抗-Ro(SS-A)自體抗體強烈相關。SCLE通常在紫外光暴露后顯現，但還涉及其它誘發或刺激因素。CCLE或DLE是慢性的有疤痕有萎縮生成的光敏感性皮膚病。DLE通常表現為可留下白色疤痕的紅色鱗狀斑塊。DLE主要作用于臉頰和鼻子，但有時涉及上背部、頸部、手背、頭皮棵露部分以及嘴唇。DLE可發生于患有系統性紅斑狼癡(SLE)的患者。部分患者還具有SCLE病灶，部分可具有頰部紅斑。遮光劑、局部皮質類固醇和抗疾藥物具有治療效果。DLE可能發生于遺傳易患病的個體，但確切的遺傳聯系未得到確定。DLE的病理生理學尚未得到很好的理解。據提示角化細胞中熱休克蛋白在紫外線(UV)光照或應力下被誘導，該蛋白可作為y5T-細胞-介導的表皮細胞細胞毒性的靶標。疣狀DLE、深部狼瘙、黏膜DLE、手掌-足底DLE和狼瘡性腫脹是DLE的部分具^l形式。疢狀DLE指具有可形成較厚鱗片的病灶的DLE。深部狼掩指具有可能與皮膚下脂肪組織中的堅硬肺塊同時發生的病灶的DLE。黏膜DLE指在口部，鼻部和眼部的凝膜偶發的病灶。手掌-足底DLE指在手部和足部偶發的病灶。狼疾性肺脹表現為在可能瘙癢并具有較小尺度的頭部和頸部的光滑、有光澤、紅紫色的病斑。狼瘡性種脹病變通常清楚無疤痕，并可在其原來的分布處復發。NLE是在兒童中罕見的病癥并通常表現為無癥痕、無萎縮生成的病灶。在某些情況下，患有SCLE的母親生下的新生嬰兒可能患上具有短時環狀或環形皮滲的NLE。據認為NLE與各種因素相關，其中包括遺傳傾向、病毒感染和其它未知因素。NLE可作用于皮膚、心臟、肝臟、血液形成元件或脾臟。兒童紅斑狼瘡(LE)與遺傳因素有關，并可能與其它環境事件有關。兒童LE可作用于皮膚或可能顯示為系統性LE并作用于體內任意器官系統，通常為腎臟、關節和血液。皮膚狼瘡通常以抗癥疾劑和皮質類固醇進行治療。然而，這些藥物可能對治療部分皮膚狼瘡無效或它們可能在長期連續使用時具有嚴重的副作用。因此，有必要開發治療皮膚狼瘡的新型方法。3.發明綜述一方面，本發明拔:供了治療、預防和/或控制人皮膚狼瘡，包括但不限于急性皮膚型紅斑狼瘡(ACLE)、亞急性皮膚型紅斑狼瘡(SCLE)、新生兒紅斑狼癡(NLE)、兒童紅斑狼瘡以及慢性皮膚型紅斑狼瘡(CCLE)或者盤狀紅斑狼癡(DLE)(例如疣狀DLE、深部狼瘡、黏膜DLE、手掌-足底DLE和狼瘡性腫脹)的方法。本發明提供了治療、預防和/或控制人，包括但不限于男人、女人及兒童皮l夫狼瘡的方法。一方面，所述方法包含了向需要該種治療、預防或控制的患者施用治療或預防有效量的基本不含其(-)對映體的(+)-2-[l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異p引咮啉-1,3-二酮，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物(例如，水合物)。在優選的實施方式中，該化合物的鹽或溶劑化物可fL代該游離化合物進行使用。一方面，本發明提供了向需要該種治療、預防或控制的患者施用治療或預防有效量的4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌咬))-異吲哚啉-l,3-二酮，或其藥學可接受的前藥、代謝物、多晶形、鹽、溶劑化物(例如水合物)、立體異構體或籠形化合物的方法。在優選的實施方式中，可采用該化合物的鹽或溶劑化物。一方面，本發明拐_供了向需要該種治療、預防或控制的患者施用治療或預防有效量的3-(4-氨基-l-氧代-l，3-二氫-異吲咮-2-基)-哌啶-2，6-二酮，或其藥學可接受的前藥、代謝物、多晶形、鹽、溶劑化物(例如水合物)、立體異構體或籠形化合物的方法。在優選的實施方式中，可采用該化合物的鹽或溶劑化物。一方面，本發明提供了以基本不含其(i)對映體的環丙基(2-[(l^-l-(3-乙氧基_4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物(例如水合物)治療、預防和/或控制皮膚狼癡的方法。在其它實施方式中，該化合物的鹽或溶劑化物可取代該游離化合物進行使用。在部分實施方式中，本發明進一步包含了施用治療有效量的至少一種第二活性試劑，其可以是如非類固醇藥劑(例如水楊酸)或皮質類固醇類(例如地塞米松)等抗炎劑、抗癥藥、免疫抑制劑、抗生素、抗病毒劑、免疫增強藥、激素、PGE2或其組合。在另一實施方式中，本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體可通過包括但不限于油膏、乳膏、凝膠、糊劑、粉劑、洗劑、噴霧、擦劑、泥敷劑、氣霧劑、溶液、乳狀液、懸浮液及其組合的劑型進行局部施用。在更進一步的實施方式中，本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體可通過腸胃外或口服或控釋方式施用。4.圖1顯示了CD51/61和ICAM-1在非刺激狀態下在HUVEC中的細胞表達；圖2顯示了E-選擇素和P-選擇素在非刺激狀態下在HUVEC中的細胞表達；圖3顯示了E-選擇素和P-選擇素在TNF-a-刺激狀態下在HUVEC中的細胞表達；圖4顯示了VE-4丐祐蛋白和CD44在TNF-a-刺激狀態下在HUVEC中的細胞表達；圖5顯示了CD51/61、ICAM-1、ICAM-2、VCAM-1、E-選擇素、P-選擇素、HLAI類和HLAII類在TNF-a-刺激狀態下在HUVEC中的細胞表達；圖6顯示了E-選擇素在TNF-a-刺激狀態下在HUVEC中的細胞表達，其中E-選擇素通過ELISA進行檢測；圖7顯示了對人角化細胞在紫外B誘導下生成TNF-a的研究；圖8顯示了對人角化細胞在紫外B誘導下生成TNF-a的研究；圖9顯示了對人角化細胞在紫外B誘導下生成TNF-a的研究。5.發明詳述本發明的一方面包含了治療、控制和/或預防皮膚狼癡的方法，其包括向皮膚狼瘡患者施用治療或預防有效量的基本不含其(-)對映體的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲咮啉-l,3-二酮，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。本發明的另一方面包括治療、控制和/或預防皮膚狼癡的方法，其包括向患有皮膚狼瘡的患者施用治療或預防有效量的4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-派啶))-異吲哚啉-l,3-二酮或其藥學可接受的前藥、代謝物、多晶形、鹽、溶劑化物(例如，水合物)、立體異構體或籠形化合物。本發明的另一方面包括治療、控制和/或預防皮膚狼疾的方法，其包括向患有皮膚狼瘡的患者施用治療或預防有效量的3-(4氨基-l-氧代-l,3-二氬-異"引咮-2-基)-派啶-2,6-二酮或其藥學可接受的前藥、代謝物、多晶形、鹽、溶劑化物(例如，水合物)、立體異構體或籠形化合物。本發明的另一方面包括治療、控制和/或預防皮膚狼瘡的方法，其包括向皮膚狼瘡患者施用治療或預防有效量的基本不含其("對映體的{2-[(15>1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。在本發明范圍內的皮膚狼瘡的范例包括但不限于急性皮膚型紅斑狼瘡(ACLE)、亞急性皮膚型紅斑狼癡(SCLE)、新生兒紅斑狼癡(NLE)、兒童紅斑狼瘡、以及盤狀紅斑狼瘡(DLE)包括疣狀DLE、深部狼掩、黏膜DLE、手掌-足底DLE和狼瘡性腫脹。此外，待治療的患者包括哺乳動物，特別是人。兒童和成年人可通過此處披露的方法和組合物進行治療。也可對免疫低下患者進行治療。本發明預期可以治療未采用其它療法的患者，已采用其它療法的患者以及對上述皮膚狼瘡等狼瘡的療法具有難治性的患者。在部分實施方式中，該患者為女性。在部分實施方式中，該患者為男性。在更進一步的實施方式中，該患者為兒童。5.1趙除非另行指明，此處所用的術語"本發明的化合物"包括但不限于(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異p引咮啉-l,3-二酮、4-(氨基)-2-(2，6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮、3-(4-氨基-1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮或環丙基{2-[(15)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}曱酰胺，或其藥學可接受的前藥、代謝物、多晶形、鹽、溶劑化物(例如，水合物)、立體異構體或籠形化合物。除非另行指明，此處所用的術語"藥學上可接受的鹽"包括但不限于可存在于本發明的化合物中的酸或堿性基團的鹽。在特定的酸性條件下，本發明的化合物可與各種無機和有機酸形成各種鹽。可用于制備該種堿性化合物的藥學上可接受的鹽的酸為可形成包含藥理學可接受陰離子的鹽的酸，該鹽包括但不限于醋酸鹽、苯磺酸鹽、安息香酸鹽、重碳酸鹽、酒石酸氫鹽、溴化物、乙二胺四乙酸鈞、右旋樟腦磺酸鹽、石友酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、檸檬酸鹽、二氫氯化物、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽、依托酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡萄糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙二醇阿散酸鹽、己基間苯二酚鹽、海巴明、羥萘酸鹽、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、muscate、萘磺酸鹽、硝酸鹽、泛酸鹽、磷酸鹽/二磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、疏酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、8-氯茶堿鹽、乙碘化合物和樸酸鹽。在堿性條件下，本發明的化合物可與各種藥理學可接受的陽離子形成堿性鹽。該種鹽的非限制性范例包括堿金屬或堿土金屬，特別包括釣、鎂、鈉、4里、鋅、4甲和4失鹽。除非另行指明，此處所用的術語"水合物"指還包含通過非共價分子間力結合的化學計量量或非化學計量量的水的本發明化合物或其鹽。除非另行指明，此處所用的術i吾"溶劑化物"指由一個或多個溶劑分子與本發明的化合物結合形成的溶劑化物。術^吾"溶劑化物"包括水合物(例如，單水合物、二水合物、三水合物、四水合物等)。除非另行指明，此處所用的術語"多晶形"指本發明的化合物及其復合物的固體晶粒形式。相同化合物的不同多晶形可顯示不同的物理、化學和/或光譜性能。除非另行指明，此處所用的術語"前藥"指能在生物條件下(體外或體內)水例包括但不限于包括如可生物水解酰胺、可生物水解酯、可生物水解氨基甲酸酯、可生物水解碳酸酯、可生物水解酰脲以及可生物水解磷酸酯等可生物水解部分的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l,3-二酮、4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮、3-(4-氨基-1-氧代-1,3-二氫-異吲咮-2-基)-哌啶-2,6-二酮或環丙基{2-[(15)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺的衍生物和代謝物。前藥通常可采用本領域公知的方法進行制備，例如該方法可參見15wrgerSA/ed/"'wa/C7em/W/jawdDrwgZ)/scove/j,172-178,949-982(ManfredE.Wolff編，第5版，1995)。除非另行指明，此處所用的術語"可生物水解氨基甲酸酯"、"可生物水解^_酸酯"、"可生物水解酰脲"、以及"可生物水解磷酸酯"分別指化合物的氨基甲酸酯、石友酸酯、酰力象以及磷酸酯，其l)不干擾該化合物的生物活性，但在體內可賦予該化合物有利屬性，如攝取、作用期限或作用發生；或者2)無生物活性但在體內可轉化為生物活性化合物。可生物水解氨基甲酸酯的非限制性范例包括低級烷基胺、取代乙基二乙酰胺、氨基酸、羥基烷胺、雜環及芳雜環胺以及聚醚胺。除非另行指明，此處所用的術語"立體異構體"包括所有的光學/立體異構純的和光學/立體異構富集的本發明的化合物。除非另行指明，此處所用的術語"立體異構純的"或"光學純的"指包含一種立體異構體，且基本不含其相反立體異構體或對映體的化合物。例如，當一種化合物包含80%、90%或95%或更多的一種立體異構體，并包含20%、10%或5%或更少的相反立體異構體時，該化合物為立體異構或光學純的。在部分情況下，當本發明的化合物相對一個手性中心具有約80%或更大的ee(對映體過量百分比)，優選相對該特定手性中心等于或大于卯X的ee，或更優選相對該特定的手性中心具有95%的ee時，可認為該化合物具有光學活性的或為立體異構/光學純的(例如，基本為R構型或基本為S構型)。除非另行指明，此處所用的術語"基本不含其(i)-對映體"指根據化合物的總重量，(5>對映體的純度等于或大于80%。在部分情況下，術語"基本不含其(i)-對映體"指根據化合物的總重量，(5)-對映體的純度等于或大于85%、90%、95%或99%。除非另行指明，此處所用的術語"基本不含其(-)對映體"指根據化合物的總重量，(+)對映體的純度等于或大于80%。在部分情況下，術語基本不含其"(-)對映體"指根據化合物的總重量，(+)對映體的純度等于或大于85%、90%、95%或99%。除非另行指明，此處所用的術語"立體異構富集的"或"光學富集的"包括本發明化合物的特定立體異構體的混合物(例如，R/S=30/70、35/65、65/35以及70/30)。除非另行指明，此處所用的術語"治療"指在患者患有特定疾病或病癥時，可減少該疾病或病癥的嚴重性或者能防止或減緩該疾病或病癥的進展或癥狀的4亍為。除非另行指明，此處所用的術^吾"治療有效量"包括上述劑量和給藥頻率方案。如本領域普通技術人員所了解，不同的治療有效量可適用于不同的狼瘡病癥和癥狀。類似地，上述劑量和給藥頻率方案還包括足以治療或預防該病癥，但不足以引起，或足以減少與本發明的化合物相關的副作用的量。除非另行指明，此處所用的術語"預防"指在患者患有特定疾病或病癥之前，可抑制或減少該疾病或病癥的嚴重性或癥狀的行為。除非另行指明，此處所用的術i吾"控制"指預防特定疾病或病癥在患有該病或病癥的患者體內復發，和/或延長患有該疾病或病癥的患者的緩解期。該術i吾包括調節疾病或病癥的閾^i、該疾病或病癥的形成和/或持續時間，或改變患者對該疾病或病癥的應答方式。除非另行指明，此處所用的術語"增強"在涉及免疫應答時，指在向曾接受或正接受本發明化合物治療的對象施用抗原性或免疫原性藥劑時，與僅施用等量的抗原性或免疫原性藥劑的對象相比，通過本領域已知的常規抗體水平測定方法(例如，濁度法、免疫電泳、放射性免疫測定以及ELISA)測定到抗體形成上升。在部分實施方式中，當采用本發明的方法時，與未采用該方法時所得的抗體形成相比，其抗體形成上升了約5%、10%、20%、50%或100%或更多。5.2本發明的化合物(+)-2-〖1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基1-4-乙酰氨基異p引咮啉-1.3匿二酮本發明提供了治療、控制或預防皮膚狼瘡的方法，其包括向需要該種治療、控制或預防的患者施用治療或預防有效量的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l，3-二酮的(+)對映體。不希望受限于理論，該(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異"引咮啉-1,3-二酮的(+)對映體可認為是(5>{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1,3-二酮}[化合物(I)]，其具有如下結構因此，(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲咮啉-l,3-二酮可用于描述由化合物(I)表示的化合物。化合物(I)的制備可參照于2005年11月8日公告的題為"(+)-2-[l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1,3-二酮其使用方法和組合物((+)一2-[1—(3-Ethoxy-4-md;hoxyphenyl)-2-methylsulfonykthyl]-4-acGtylaminoisoindoline-l，3-dione:MethodsOfUsingAndCompositionsThereof)"的美國專利6,962,940中描述的方法。在具體方法中，化合物(I)可由3-乙酰氨基酞酸酐和(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-l-(甲基磺酰基)-乙-2-基胺的手性氨基酸鹽合成得到。0S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-l-(甲基磺酰基)-乙-2-基胺的手性氨基酸鹽的范例包括但不限于與丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸、鳥氨酸、4-氨基丁酸、2-氨基異丁酸、3-氨基異丁酸、鳥氨酸、正亮氨酸、正纈氨酸、羥脯氨酸、肌氨酸、瓜氨酸、磺酸、叔丁基甘氨酸、叔丁基丙氨酸、苯基甘氨酸、環己基丙氨酸、以及N-乙酰-L-亮氨酸的L異構體形成的鹽。特定的手性氨基酸鹽為由2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-l-(甲基磺酰基)-乙-2-基胺和N-乙酰-L-亮氨酸在甲醇中轉化得到的(5>2-(3-乙氧基-4-曱氧基苯基)-l-(甲基磺酰基)-乙-2-基胺N-乙酰-L-亮氨酸鹽。可替代地，化合物(I)可通過本領域已知的分離技術由外消旋的2-[l-(3-乙氧基_4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l,3-二酮分離得到。該外消旋化合物可參照美國專利6,020,358(在此引用作為參考)的實施例12中的方法進行簡單地制備。適用的分離技術的范例包括但不限于形成手性鹽、使用手性或高壓液相色譜"HPLC"以及形成和結晶手性鹽。例如，參見Jacques,J.,等人,Enantiomers,RacematesandResolutions(WileyInterscience,NewYork,1981);Wilen,S.H.,等人，Tetrahedron33:2725(1977);Eliel,E.L.,StereochemistryofCarbonCompounds(McGrawHill,NY,1962);以及Wilen,S.H.,TablesofResolvingAgentsandOpticalResolutionsp.268(E,L.Eliel編,Univ.ofNotreDamePress,NotreDame,IN，1972)。4-(氨基)-2-(2,6-二氣代(3-哌啶)-異吲哚啉-l,3-二酮和3-(4-氨基-1-氣代-1,3-二氬-異p引哚-2-基)-p泉啶-2,6-二酮本發明提供了治療、控制或預防皮膚狼癡的方法，其包括向需要該種治療、控制或預防的患者施用治療或預防有效量的具有下式的4-(氨基)-2-(2，6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮(ACTIMIDTM):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>或具有如下化學結構的3-(4-氨基-1-氧代-1,3-二氫-異吲咮-2-基)-哌啶-2,6-二酮(REVLIMID⑧)或其藥學可接受的前藥、代謝物、多晶形、鹽、溶劑化物、立體異構體或籠形化合物。該4匕合物可乂人CelgeneCorporation,Summit,NJ購4尋。該化合物可通過標準合成方法獲耳又(例如參見美國專利5,635,517,在此引用作為參考)。4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮的特定制備方法披露于2006年6月29曰提交的美國專利非臨時申請11/479,823以及2005年6月30日提交的題為"4-(氨基)-2-(2，6-二氧代(3-哌啶))-異吲咮啉-1,3-二酮化合物的制備方法(Processesforthepreparationof4-amino-2-(2,6匪dioxopiperidin-3畫yl)-isoindoline-l,3-dionecompounds)"的美國專利臨時申請60/696,224中，其內容在此引用作為參考。在一個實施方式中，4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌咬))-異"引咮啉-l,3-二酮或3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氬-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮為光學純的。在更進一步的實施方式中，4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮或3-(4-氨基-1-氧代-1,3-二氫-異"引哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮為i-對映體。在更進一步的實施方式中，4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮或3-(4-氨基-l-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮為S-對映體。在更進一步的實施方式中，4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮或3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氫-異"引咮-2-基)-哌啶-2,6-二酮為外消旋混合物。在更進一步的實施方式中，本發明中采用的特定化合物為4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮或3-(4-氨基-1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮的多晶型體。3-(4-氨基-1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮的特定多晶型體(如A、B、C、D、E、F、G和H型)披露于2003年9月4日提交的美國臨時申請60/499,723以及2004年9月3日提交的美國非臨時申請10/934,863(公開號2005/009635l)中，其全文在此引用作為參考。例如，3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氬-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮的A型為非溶劑化結晶物，其可由非水性溶劑系統獲得。A型的X射線粉末衍射圖譜在約8、14.5、16、17.5、20.5、24和26度26處包含明顯峰，且具有約270°C的最大差示掃描量熱熔融溫度。3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氫-異丐l咮-2-基)-哌啶-2,6-二酮的B型為半水合結晶物，其可從各種溶劑系統包括但不限于己烷、甲苯和水中獲得。B型的X射線粉末衍射圖譜在約16、18、22和27度26處包含明顯峰，且具有約268"C的最大差示掃描量熱熔融溫度。環丙基{2-[(1》-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基1-3-氧代異"引咮啉-4-基}甲酰胺本發明提供了治療、控制或預防皮膚狼癡的方法，其包括向需要該種治療、控制或預防的患者施用治療或預防有效量的環丙基{2-[(15>1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異"引咮啉-4-基}甲酰胺或A42-[(LS>l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磧酰)乙基]-2,3-二氬-3-氧代-1H-異吲咮-4-基]-環丙烷甲酰胺。環丙基{2-[(15>1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲咮啉-4-基}甲酰胺或,[2-[(15>1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-2,3-二氫-3-氧代-lH-異吲哚-4-基]-環丙烷甲酰胺[即，化合物(II)]具有如下結構S02CH3化合物(II)。化合物(II)可參照2003年12月23日公告的題為"藥物學活性的異吲哚啉書f生凈勿(PharmaceuticallyActiveIsoindolineDerivatives)"的美國專利6,667,316描述的方法進行制備，其全文在此引用作為參考。在一個特定的實施方式中，化合物(II)可通過在四氫呋喃中加熱7-氨基-2-[(15>1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]異吲咮啉-l-酮和環丙烷;炭酰氯的混合物制備得到。此外，化合物(n)可通過本領域普通技術人員已知的分離技術從相應的外消旋環丙基{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺分離得到。該外消旋化合物可參照美國專利6,667,316(在此引用作為參考)的實施例55中的方法進行簡單地制備。適用的分離技術的范例包括但不限于形成手性鹽以及使用手性或高效液相色譜"HPLC"以及形成和結晶手'l"生鹽。例4口，參見RexW.Souter,ChromatographicSeparationsofStereoisomers,(CRCPress,BocaRaton,1985);Jacques,J.,等人,Enantiomers,RacematesandResolutions(WileyInterscience,NewYork,1981);Wilen,S.H.,等人，Tetrahedron33:2725(1977);Eliel,E.L.，StereochemistryofCarbonCompounds(McGrawHill,NY,1962);以及Wilen,S.H"TablesofResolvingAgentsandOpticalResolutionsp.268(E丄.Eliel編，Univ.ofNotreDamePress,NotreDame，IN,1972)。5.3治療和預防的方法
技術領域：
：本發明提供了治療、預防和/或控制皮膚狼瘡的方法。在本發明的方法范圍內的皮膚狼癡的非限制性范例包括但不限于皮膚型紅斑狼癡(CLE)、急性皮膚型紅斑狼瘡(ACLE)、亞急性皮膚型紅斑狼瘡(SCLE)、慢性皮膚型紅斑狼癡(CCLE)或盤狀紅斑狼癡(DLE)、新生兒紅斑狼癡(NLE)、疣狀DLE、深部狼瘡、黏膜DLE、手掌-足底DLE和狼瘡性腫脹。在部分實施方式中，本發明4是供了治療ACLE的方法。ACLE通常是一種光敏感性皮膚病。它可以表現為紅色皮膚無光澤區域，類似于持久曬傷或有類似皮滲的外觀。ACLE可能面部中央以蝴蝶模式爆發和/或在包括手臂、腿部和身體的其它部位以一般模式爆發。ACLE的病因據認為是多因子的，其中包括遺傳、環境和激素因子。因此，本發明包括了對先兆遺傳性或暴露至自然紫外光輻照的患者的治療。在更進一步的實施方式中，本發明提供了治療SCLE的方法。SCLE是一種無疤痕無萎縮生成的光敏感性皮膚病。在某些情況下，SCLE表現為通常在陽光暴露后在上背部和胸部的不發癢的環形干式皮滲。SCLE可發生于患有系統性紅斑狼瘡患者，Sj6gren綜合征以及補體成分2(C2d)缺陷的患者，或者可被藥物誘導。SCLE通常發生于遺傳易患病的個體，更通常發生于具有人白細胞抗原B8(HLA-B8)、人白細胞抗原DR3(HLA-DR3)、人白細胞抗原DRw52(HLA-DRw52)以及人白細胞抗原DQ1(HLA-DQ1)的患者。SCLE與抗-Ro(SS-A)自體抗體強烈相關。因此，在特定的實施方式中，本發明包括了對該類患者群體的治療。在更進一步的實施方式中，本發明提供了治療CCLE或DLE的方法。CCLE或DLE是慢性的有皰痕有萎縮生成的光敏感性皮膚病。DLE通常表現為可留下白色疤痕的紅色鱗狀斑塊。DLE主要作用于臉頰和鼻子，但有時涉及上背部、頸部、手背、頭皮棵露部分以及嘴唇。DLE可發生于患有系統性紅斑狼癡(SLE)的患者。部分患者還具有SCLE病斑，部分可具有頰部紅斑。DLE可能發生于遺傳易患病的個體。因此，在特定的實施方式中，本發明包括了對該類患者群體的治療。在更進一步的實施方式中，本發明提供了通過口服或局部施用治療人疣狀DLE的方法。疣狀DLE是DLE的一種特定形式，指具有可形成極厚鱗片的病灶的DLE。在更進一步的實施方式中，本發明提4共了通過口服或局部施用治療人深部狼瘡的方法。深部狼瘡是DLE的一種特定形式，指具有可能與皮膚下脂肪組織中的堅硬腫塊同時發生的病灶的DLE。在更進一步的實施方式中，本發明提供了通過口服或局部施用治療人教膜DLE的方法。黏膜DLE是DLE的一種特定形式，指在口部、鼻部和眼部的教膜偶發的病灶。在更進一步的實施方式中，本發明提供了通過口服或局部施用治療人手掌-足底DLE的方法。手掌-足底DLE是DLE的一種特定形式，指在手部和足部偶發的病灶。在更進一步的實施方式中，本發明提供了通過口服或局部施用治療人狼癡性胂脹的方法。狼^性腫脹是DLE的一種特定形式，并表現為在可能瘙癢并具有較小尺度的頭部和頸部的光滑、有光澤、紅紫色的病灶。狼瘡性腫脹病變通常清楚無疤痕，并可在其原來的分布處復發。在更進一步的實施方式中，本發明提供了治療NLE的方法。NLE是在兒童中罕見的病癥并通常表現為無疤痕、無萎縮生成病灶。在特定的實施方式中，本方法包括了對患有SCLE的母親的新生嬰兒的口服和/或局部治療。據認為NLE與各種因素相關，其中包括遺傳傾向、病毒感染和其它未知因素。在更進一步的實施方式中，本發明提供了治療兒童紅斑狼瘡(LE)的方法。在特定的實施方式中，對包括由于遺傳因素以及其它可能的環境時間而易患病的兒童的紅斑狼癡(LE)進行了治療。本發明還包括采用本發明的化合物來在患者體內調節免疫系統，以防止其產生不平衡并形成炎癥和自身免疫性疾病，例如狼疾。因此，在另一實施方式中，本發明包括增強對免疫原的免疫應答的方法，其包括向需要該種增強的患者施用治療或預防有效量的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l,3-二酮、4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮、3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮、或環丙基2-[(1S)-l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺，或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體。該化合物可在患者暴露至免疫原之前、同時或之后進行施用。53.1與第二活性試劑的組合療法在本實施方式包含的特定方法中，本發明的化合物在治療、控制和/或預防皮膚狼瘡的方法中與另一藥物("第二活性試劑")聯合施用。該第二活性試劑包括但不限于非類固醇藥劑或皮質類固醇類等抗炎劑、抗癥藥、免疫抑制劑、抗生素、抗病毒劑、免疫增強藥、激素、PGE2及其組合。可用于與本發及干細胞移植。本發明的化合物至少可與一種第二活性試劑在此處披露的發明的方法中聯用。本發明包括治療、預防和/或控制皮膚狼癡的協同組合。本發明的化合物還可用于減輕某些第二活性試劑的不良或不明作用，相反地，部分第二活性試劑可用于減輕本發明化合物的不良或不明作用。在部分令人感興趣的實施方式中，該第二活性試劑可包括但不限于抗炎劑，例如但不限于對乙酰氨基酚(例如，TYLENOL)、5-氨基水楊酸衍生物、水楊酸類、皮質類固醇以及非類固醇類抗炎藥物。5-氨基水楊酸衍生物的一個非限制性范例為柳氮磺胺吡啶(例如，AZULFIDINE)。水楊酸類的一個非限制性范例為乙酰水楊酸(例如，ASPIRIN)。皮質類固醇類的非限制性范例包括地塞米松(例如，AZIUM或VOREN)、氬化可的松(例如，CETACORT、HYTONE②或NUTRACORT)、倍氯米杠X例如，VANCERIL)、布地奈德(例如，PULMICORT)、氟替卡松(例如，FLONASE⑧或FLOVENT)、甲基強的松龍(例如，DEPO-MEDROL、SOLU-MEDROL⑧或MEDROL)、糠酸莫米;j^(例如，NASONE⑧或ELOCON)、強的杠K例如，DELTASON、ORASON、PREDNICEN-M⑧或LIQUIDPRED)以及去炎松(例如，AZMACORT)。非類固醇類抗炎藥物的非限制性范例包括雙氯芬酸(例如，ARTHROTEC⑧)、二氟尼柳(例如，DOLOBID)、依托度酸(例如，LODINE⑧)、非諾洛芬(例如，NALFON)、布洛芬(例如，ADVIL、CHILDREN'SADVIL/MOT顧⑧、MEDIPREN⑧、MOTRIN、NUPRIN或PEDIACAREFEVER),p引咮美辛(例如，ARTHREXIN)、酮洛芬(例如，ORUVAIL)、酮咯酸(例如，TORADOL)、磷霉素氨丁三醇(例如，MONURAL)、甲氯芬那酸(例如，Meclomen)、萘丁美酮(例如，RELAFEN)、萘普生(例如，ANAPROX、ANAPROXDS、EC-NAPROSYN、NAPRELAN或NAPROSYN⑧)、奧沙普秦(例如，DAYPRO)、吡羅昔康(例如，FELDENE)、舒林酸(如，C固。肌⑧)和托美汀(例如，TOLECTINDS或TOLECTIN)。在其它令人感興趣的實施方式中，該第二活性試劑可包括但不限于抗癥劑，如氯喹(例如，ARALEN)和羥氯喹(例如，PLAQUENII^)等；免疫抑制劑，如硫唑噤呤(例如，IMURAN,、環磷酰胺(例如，CYTOXAN)、苯丁酸氮剤例如，1^111^1^@)和馬法蘭(例如，ALKERAN);和免疫調節化合物，如疏唑嘌呤(例如，IMURAN)、環磷酰胺(例如，CYTOXAN)、甲氨蝶4<例如，RHEUMATREX⑧)和環孢素(例如，NEORAL⑧或SANDIMMUNE)。在更進一步的令人感興趣的實施方式中，該第二活性試劑可包括但不限于抗生素(治療或預防)，例如但不限于氨千西林(例如，UNASYN)、四環素(例如，ACHROMYCIN或SUMYCIN)、青霉素(例如，AMOXIL、POLYMOX、TRIMOX、SPECTROBID㊣或GEOCILLIN⑧)、頭孢菌素類(例如，OMNICEF、SPECTRACEF、SUPRAX、VANTIN、CEFZIL或CEDAX)、鏈霉素(例如，ZANOSAR)、卡那霉素(例如，KANTREX)和紅霉素(例如，E.E.S.、E-MYCIN、ERYC、ERY-TAB、ERYTHROCIN②或PCE);抗病毒類，例如但不僅限于金剛烷胺(例如，SYMMETREL,、金剛乙胺(例如，FLUMADINE)、無環鳥苷(例如，ZOVIRAX^^'J巴韋林(例如，VIRAZOLE);免疫球蛋白；免疫增強藥，例如但不僅限于左旋咪唑(例如，ERGAMISOL)和異丙肌苦(ISOPRINOSINE);生物類，例如但不僅限于丙種球蛋白、轉移因子、白細胞介素和干擾素；激素類，包括但不僅限于胸腺激素；以及其他免疫劑，例如但不僅限于B細胞刺激因子(例如，BAFF/BlyS)、細胞因子(如IL-2、IL-4和IL-5)、生長因子(例如，TGF-(3)，抗體(例如，抗-CD40和IgM抗體)、含有未曱基化CpG基序的寡聚核苷酸(例如，TCGTCGTTTTGTCGTTTTGTCGTT)和疫苗(例如，病毒和月中瘤月大疫苗)。在另一實施方式中，本發明的方法可與用于治療、預防和/或控制皮膚狼瘡的其它方法組合使用。其它方法的范例包括但不限于千細胞移植、采用例如結合了聚乙二醇的牛腺普脫氨酶(PEG-ADA)等的酶替代療法、胎兒胸腺移植、培養的新生兒胸腺移植、胸腺上皮細胞移植以及胎兒肝移植。本發明的特定方法包括至少聯合一種第二活性試劑或其它療法施用(+)-2-[l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l,3-二酮、4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌咬))-異吲哚啉-l,3-二酮、3-(4-氨基-1-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮或環丙基2-[(15>1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺，或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體。本發明化合物和至少一種第二活性試劑可通過相同或不同的給藥途徑同時或順序向患者施用。對于特定第二活性試劑的特定施用途徑的適宜性將取決于該第二活性試劑本身(例如，它是否可以進行局部或口服給藥而不會在進入血流前分解)和待治療的疾病。本發明的化合物的特定施用途徑為局部施用。本發明的第二活性試劑或成分的特定給藥途徑為本領域技術人員所公知。例如，參見T7zeMercA:Ma"船/，430-431(第17版，1999)。第二活性試劑的施用量可根據所采用的特定藥劑、被治療或控制的疾病類型、疾病的嚴重性和階段以及同時向患者施用的本發明化合物和任意附加第二活性試劑的量來決定。本領域的技術人員可參照本領域已知的常規技術決定具體的量。首先，可從在該療法中常規使用的第二活性試劑的量起始并參照上述因素調整該量。例如，參見戶/i^/c/a"'sie/ere"ce(第56版，2004)。此外，此處披露的用于治療、預防和/或控制皮膚狼瘡的第二活性試劑的施用量和方法披露于如尸/z;^/"'a"We/ere"ce(第56版，2004)等文獻，其在此引用作為參考。5.3.2周期療法在部分實施方式中，本發明的化合物可向患者周期施用。周期療法包括在一段時間內施用本發明的化合物，隨后停用一段時間，然后重復該次序施用。周期療法可減少對一種或多種療法形成抗性，避免或減少其中一種療法的副作用，和/或提高治療的功效。因此，在本發明的一個特定實施方式中，本發明的化合物在四至六周的周期中以每日單一劑量或分開劑量給藥，并停藥一至兩周。本發明還允許增加劑量周期的頻率、數量和長度。因此，本發明的另一特定實施方式包括比單獨施用的通常情況施用更多周期的本發明的合物。在本發明的另一個特定實施方式中，本發明的化合物施用比在也沒有施用第二活性成分的患者中通常會引起劑量限制性毒性的周期數更多的周期數。在一種實施方式中，(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l,3-二酮以約10至約200mg/天的劑量每日施用，持續三或四周，接著停藥一或兩周。在另一實施方式中，4-(氨基)-2-(2，6-二氧代(3-哌啶))-異吲咮啉-l，3-二酮以約0.1至約5mg/天的劑量每日施用，持續三或四周，才妄著停藥一或兩周。在一個特定實施方式中，在一個四或六周的周期中，3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氬-異吲哚-2-基)-哌啶-2，6-二酮以約5、10、25或約50mg/天，優選約25mg/天的量施用三至四周，接著停藥一周或兩周。在另一實施方式中，環丙基(2-[(1^-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異"引咮啉-4-基}甲酰胺以約10至約200mg/天的劑量每日施用，持續三或四周，接著停藥一或兩周。在本發明的另一實施方式中，在一個四至六周的周期中，本發明的化合物與第二活性成分通過口服施用，本發明化合物在第二活性成分施用前30至60分鐘施用。在本發明的另一實施方式中，本發明的化合物與第二活性成分的組合在每個周期中以約90分鐘的靜脈輸注施用。在一個特定實施方式中，一個周期包括每日施用約0.1至約200mg/天的本發明化合物以及約50至約200mg/mV天的第二活性成分，持續三至四周，然后停藥一或兩周。在另一特定實施方式中，一個周期包括每日施用約1至約25mg/天的本發明化合物以及約50至約200mg/m々天的第二活性成分，持續三至四周，然后停藥一或兩周。向患者施用聯合治療的周期數通常為約1個至約24個周期，更通常為約2個至約16個周期，更通常為約4個至約3個周期。才艮據本發明施用的藥物組合物的量將取決于被治療的對象、疾病或病癥的癥狀的嚴重性、施用方式、施用頻率以及處方醫師的判斷。施用的頻率介于每小時劑量和每月劑量之間。在特定的實施方式中，施用為每天8次至每隔一天1次，或每天1至3次。在特定的實施方式中，本發明的藥物組合物長期(例如，每天)施用。如本領域普通技術人員可以理解，在部分情況下該活性成分的劑量需要超越此處披露的范圍。此外，應當注意臨床醫師或治療醫師結合個體患者的應答可知道如何和何時中止、調整或終止治療。5.4在本發明的一個實施方式中，(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l，3-二酮可以以每天約lmg至約1000mg的量以單一的或分開的日劑量口服，該日劑量作為每天一次的單一劑量給予，優選作為每天的分開劑量給予。更具體地，(+)-2-[l-(3-乙氧基-4-曱氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異卩引咪啉-1,3-二酮的日劑量以等分的分開劑量每日兩次施用。具體地，(+)-2-[l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l,3-二酮的日劑量為每天約5mg至約500mg，更優選地，為每天約10mg至約200mg。具體地，(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異"引哚啉-1,3-二酮的日劑量可以以5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、50mg或100mg的劑型施用。在控制所述患者時，該療法應該以較低的劑量起始，可以是約1mg至約25mg，并根據患者的總體應答在需要時提高到每天約200mg至約1000mg，作為單一劑量或分開劑量。可替代地，該日劑量為0.01mg/kg至100mg/kg。在一個實施方式中，4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮可以約O.l至約100mg的量施用。在特定的實施方式中，4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌咬))-異吲哚啉-l,3-二酮可以每天約1mg至約100mg的量施用。在具體的實施方式中，4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮可以每天約0.1mg至約2mg、或以每天約0.1mg至約5mg的量施用。在特定的實施方式中，4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮可以每天約0.5mg至約2mg、或以每天約5mg的量施用。在一個實施方式中，3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氳-異吲哚-2-基)-哌啶-2，6-二酮可以約lmg至約150mg的量施用。在特定的實施方式中，3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮可以每天約5mg至約25mg、或以每隔一天約10mg至約50mg的量施用。在本發明更進一步的實施方式中，環丙基{2-[(15>1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺可以以單一或分開的日劑量口服施用，日劑量為每天約1mg至約1000mg，作為一天一次的單一劑量，優選作為一天內的分次劑量。更具體地，環丙基(2-[(l。-l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺的日劑量以等分的劑量每曰兩次施用。具體地，環丙基(2-[(lQ-l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺的日劑量介于每天約5mg至約500mg，更具體地，介于每天約10mg至約200mg。具體地，環丙基(2-[(15)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺的日劑量可以5mg、10mg、15mg、20mg、25mg、50mg或100mg的劑量形式施用。在控制患者時，該療法應當從低劑量起始，可以為約1mg至約25mg，并根據患者的總體應答在需要時作為單獨劑量或分次劑量提高到每天約200mg至約1000mg。可替代地，該日劑量介于0.01mg/kg至100mg/kg。本發明各種劑型的討論可參見下文第5.5節。在一個實施方式中，本發明的典型劑型包含量為約0.10至約1000mg、約0.10至約800mg、約0.10至約600mg、約0.10至約500mg、約0.10至約400mg、約0.10至約300mg、約0.10至約200mg、約0.10至約100mg的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲咮啉-1,3-二酮或環丙基{2-[(15)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺。在一個實施方式中，典型的劑型包含量為約l、2、5、10、25、50、100、150、200、250、300、350、400、450或500mg的所述化合物。在一個實施方式中，本發明的典型劑型包含量為約0.1至約150mg的4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮或3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氫-異p引咮-2-基)-派啶-2,6-二酮。在具體的實施方式中，該劑型包含量約為O.l、1、2或5mg的4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮。在具體的實施方式中，該劑型包含量約為5、10、15、25或50mg的3-(4-氨基-l-氧代-1,3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮。在一個實施方式中，典型劑型包含量為約1至約1000mg、約5至約500mg、約10至約350mg、約50至約200mg的第二活性成分。當然，該藥劑的具體量將取決于所用的特定藥劑、被治療或控制的疾病或病癥的類型以及同時向該患者施用的本發明化合物以及任選的附加第二活性試劑的量。5.5藥物組合物及劑型藥物組合物可用于制備單個的、單一的單位劑型。本發明的藥物組合物和劑型包含本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體,和任選的第二活性試劑。任選的第二活性試劑的例子在本說明書中有公開(例如，參見5.3.1節)。本發明的藥物組合物或劑型可進一步包含一種或多種載體、I武形劑或《希釋劑。本發明的單一單位劑型適用于通過口服、粘膜(例如舌下、鼻部、陰道、膽囊、直腸、包皮、眼部、口腔或耳部)、腸胃外(例如皮下、靜脈內、彈丸注射、肌肉內或動脈內)、局部(例如眼部滴劑或其它眼藥)、透皮或經皮向患者給藥。劑型的非限制性范例包括片劑；嚢片；膠嚢如軟凝膠膠嚢；扁嚢劑；錠劑；糖錠；分散劑；栓劑；粉末；氣溶膠(例如，鼻腔噴霧劑或吸入劑)；達是膠；適于向患者進行口服或黏膜施用的液體劑型，包括懸浮劑(例如水性或非水性液體懸浮劑、水包油型乳劑、或油包水型乳劑)，溶液和酏劑；適于腸胃外施用至患者的液體劑型；適于局部施用的滴眼液或其它眼科制劑；以及可以重配成可通過腸胃外施用至患者的液體劑型的無菌固體(例如結晶或非晶質固體)。本發明的劑型的組成、形狀和類型通常根據其用途而變化。例如，用于種或多種活性成分。類似地，腸胃外劑型可比用于治療同種疾病的口服劑型包含更少量的一種或多種其所包含的活性成分。本發明所包括的特定劑型獨L此之間的變化方式對本領域的技術人員而言是顯而易見的。例如，參見ie附/wgtow尸/2ormacew"ca/Sciewces，第18版,MackPublishing,EastonPA(1990)。典型的藥物組合物和劑型包含一種或多種賦形劑。適用的賦形劑已為制藥領域技術人員所公知，且不限于此處所提供的適用賦形劑例子。一種特定賦形劑是否適合用于藥物組合物或劑型取決于本領域公知的多種因素，其包括但不限于該劑型向患者施用的途徑。例如，如片劑等口服劑型可包含不適用于腸胃外劑型的賦形劑。特定賦形劑的適用性還取決于劑型中的特定活性成分。例如，某些活性成分可通過如乳糖等賦形劑或在暴露至水中時加速分解。包含伯胺或仲胺的活性成分特別容易產生該種加速分解。因此，本發明包括包含極少量乳糖或其它單或雙糖的藥物組合物和劑型。此處所用的術語"無乳糖"指當存在乳糖時其量不足以提高活性成分的降解速率。本發明的無乳糖組合物可包含本領域公知的以及如在美國藥典(USP)25-NF20(2002)中列舉的賦形劑。一般而言，無乳糖組合物包含藥學相容且藥學可接受量的活性成分、結合劑/填充劑以及潤滑劑。特定的無乳糖劑型包含活性成分、微晶纖維素、預膠化淀粉以及硬脂酸鎂。由于水可以促進一些化合物的降解，所以本發明進一步包括包含活性成分的無水藥物組合物和劑型。例如，添加水(例如，5%)是制藥領域廣泛采用的一種模擬長期貯存以測定如保質期或制劑長期穩定性等特性的方法。例如，參見JensT.Carstensen,Z>wgSto6/鄉/V/w一/escfe尸rac"ce，第2版,MarcelDekker，NY,NY，1995,第379-80頁。水和熱會產生加速一些化合物的分解的效果。因此，水對制劑可能具有非常重要的影響，因為在制劑的生產、處理、包裝、貯存、運輸以及使用中常會遇到水分和/或濕氣。本發明的無水藥物組合物和劑型可采用無水或低含水量的成分并在低水分或低濕度條件下制備。如果在生產、包裝和/或貯存過程中可能遇到水分和/或濕氣，則包含乳糖和至少一種具有伯胺或仲胺的活性成分的藥物組合物和劑型優選是無水的。無水藥物組合物的制備和貯存應當保持其無水性質。相應地，無水組合物優選使用本領域已知的防水材料進行包裝從而使它們可包含到適當的制劑試劑盒中。適當包裝的非限制性范例包括密封箔、塑膠、單位劑量容器(例如，小藥水瓶)、泡罩包裝以及條狀包裝。本發明進一步包括包含一種或多種能降低活性成分分解速率的化合物的藥物組合物和劑型。該種在此成為"穩定劑"的化合物包括但不限于如抗壞血酸等抗氧化劑、pH緩沖液或鹽緩沖液。與賦形劑的量和類型相似，一種劑型中活性成分的量和特定類型可取決于多種因素，例如但不限于向患者給藥的途徑。5.5.1口月良劑型可進行口服給藥的本發明的藥物組合物可作為分散劑型提供，例如但不限于片劑(例如，咀嚼片)、嚢片、膠嚢和液體(例如，風味糖漿)。該種劑型包含預定量的活性成分，并可通過本領域技術人員公知的制藥方法制備。一般可參見Wew'"gto"'sP/zamacew"ca/5Wewces,第18版，MackPublishing,EastonPA(19卯)。本發明的典型口服劑型可通過將活性成分與至少一種賦形劑參照傳統藥物配制技術充分混合進行制備。賦形劑可根據給藥所期望的制劑形式采取多種形式。適用于口服液體或氣霧劑劑型的賦形劑的非限制性范例包括水、乙二醇、油、醇、風味劑、防腐劑以及著色劑。適用于固體口^^劑型的賦形劑(例如，粉末、片劑、膠嚢和囊片)的非限制性范例包括淀粉、糖、微晶纖維素、稀釋劑、成粒劑、潤滑劑、結合劑以及崩解劑。片劑和膠嚢由于其便于施用而代表最有利的口服單位劑型，其中采用固體賦形劑。如果需要，可通過標準水性或非水性技術對片劑進行包衣。該種劑型可通過任何制藥方法進行制備。一般而言，藥物組合物和劑型可通過將活性成分與液體載體、細顆粒固體載體或兩種載體均勻充分混合后根據需要將產物定形來制備。例如，片劑可通過壓制或成型進行制備。壓制片可通過將活性成分以4分末或顆粒等自由流動形式(根據需要與賦形劑混合)在合適的機器中壓制進行器中成型進行制備。可用于本發明口服劑型的賦形劑的非限制性范例包括結合劑、填充劑、崩解劑和潤滑劑。適用于藥物組合物和劑型的結合劑的非限制性包括玉米淀粉、馬鈴薯淀粉或其它淀粉、凝膠、阿拉伯樹膠等天然和合成樹膠、藻酸鈉、海藻酸、其它藻酸鹽、粉狀黃芪膠、瓜兒膠、纖維素及其衍生物(例如，乙基纖維素、醋酸纖維素、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、預膠化淀粉、羥丙基甲基纖維素(例如，2208、2906、2910)、微晶纖維素及其混合物。微晶纖維素的適用形式的非限制性范例包括商品名為AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103、AVICELRC-581、AVICEL畫Pm05(可從FMCCorporation,AmericanViscoseDivision,AvicelSales,MarcusHook,PA購得)的材料及其混合物。一種特定結合劑為商品名為AVICELRC-581的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉的混合物。適用的無水或低水分賦形劑或添加劑包括AVICEL-PH-103tm和淀粉1500LM。適用于此處披露的藥物組合物和劑型的填充劑的非限定性范例包括滑石、碳酸鈣(例如，顆粒或粉末)、微晶纖維素、粉末狀纖維素、葡聚糖、高嶺土、甘露醇、硅酸、山梨醇、淀粉、預膠化淀粉及其混合物。本發明藥物組合物的結合劑或填充劑通常占該藥物組合物或劑型重量的約百分之五十至約百分之九十九。本發明的組合物中采用崩解劑以才是供在水環境中崩解的片劑。含有過多崩解劑的片劑可能在貯存時崩解，而包含過少崩解劑的片劑在目標條件下不能以目標速率崩解。因此，本發明的固體口服劑型中應采用既不過多也不太少的足量崩解劑以有利地改變活性成分的釋放。崩解劑的量取決于制劑的類型且本領域的普通技術人員可簡單確定。典型的藥物組合物包含重量百分比為從約0.5至約15的崩解劑，優選重量百分比為從約1至約5的崩解劑。可用于本發明藥物組合物和劑型的崩解劑的非限制性范例包括瓊脂、海藻酸、碳酸鈣、微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、交聯聚維酮、波拉克4本鉀、羥乙酸淀粉鈉、馬鈴薯或木薯淀粉、其它淀粉、預膠化淀粉、其它淀粉、粘土、其它褐藻膠、其它纖維素、樹膠及其混合物。可用于本發明藥物組合物和劑型的潤滑劑的非限制性范例包括硬脂酸4丐、硬脂酸鎂、礦物油、輕礦物油、丙三醇、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其它乙二醇、硬脂酸、十二醇硫酸鈉、滑石、氫化植物油(例如，花生油、棉花籽油、葵花籽油、芝麻油、橄欖油、玉米油以及大豆油)、硬脂酸鋅、油酸乙酯、月桂酸乙酯、瓊脂及其混合物。其它潤滑劑包括，例如，syloid石圭月交(AEROSIL200，由Baltimore,MD的W.R.GraceCo.生產)、合成二氧化硅的凝結氣霧劑(由Piano,TX的DegussaCo.銷售)、CAB-O-SIL(由Boston,MA的CabotCo.銷售的一種焦化二氧化硅產品)及其混合物。在使用時，潤滑劑在藥物組合物或劑型中的量少于約百分之一重量。本發明的特定固體口服劑型包含了本發明的化合物(例如，(+)-2-[l-(3-乙氧基_4_甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l，3-二酮、4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-l,3-二酮、3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氫-異吲咮_2-基)-哌啶-2,6-二酮或環丙基{2-[(18)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺)、無水乳糖、微晶纖維素、聚乙烯吡啗^烷酮、石更脂酸、膠狀無水二氧化硅以及明膠。5.5.2緩釋劑型本發明活性試劑可以通過控釋裝置或本領域所屬技術人員眾所周知的遞送裝置給藥。控釋裝置或遞送裝置的非限定性實例包括在以下專利中描述的那些美國專利3,845,770、3,916,899、3,536,809、3,598,123、4,008,719、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556和5,733,566，其分別被納入本文作為參考。通過使用例如羥丙基甲基纖維素、其它聚合物基質、凝膠、可滲透性膜、等滲系統、多層包衣、微顆粒、脂質體、微球或其組合來產生不同比例的理想釋放效果，這種劑型可用來緩釋或控釋一種或多種活性試劑。本領域所屬技術人員已知的合適的控釋制劑，包括本文所述的那些，可易于選擇與本發明的活性成分一起使用。因此本發明包括適于口服給藥的單一單位劑型，包括但不限于適于受控釋放的片劑、膠嚢、凝膠藥丸和嚢片劑。所有控釋藥物產品都具有以下共同目標相對于其非控釋產品，改善藥物治療效果。理想地，在醫療中使用最優設計的控釋制劑的特征在于，采用最少藥物，在最短時間內治愈或控制病癥。控釋制劑的優點包括延長藥物活性、降低給藥頻率和提高患者依從性。此外，控釋制劑可用于影響作用開始的時間或其它特4正，例如藥物的血液水平，以及由此影響副作用(例如不利副作用)的發生率。大部分控釋制劑被設計成在開始時釋放能迅速產生所需療效的藥物(活性試劑)的量，并且逐漸和連續釋放其它藥物的量以在延長的時間內維持該水平的治療或預防效果。為了在體內保持恒定的藥物水平，藥物必須以這樣的速度從劑型中釋放，即能夠彌補代謝以及從體內排泄的藥物的量。活性成分的控釋可通過各種條件來刺激，包括但不限于pH、溫度、酶、水或其它生理條件或化合物。5.5.3腸胃外劑型胃腸外劑型可通過多種途徑，包括但不限于皮下、靜脈內(包括彈丸注射)、肌肉內和動脈內途徑來對患者給藥。由于其給藥一般繞過了患者抗污染物的自然防御，所以胃腸外劑型優選是無菌的，或者能夠在對患者給藥之前滅菌。胃腸外劑型的實例包括但不限于注射溶液、可溶解或懸浮在藥學上可接受的運載體中以用于注射的干燥產品、注射懸浮液和乳劑。可用于提供本發明胃腸外劑型的合適的運載體是本領域所屬技術人員眾所周知的。合適的運載體的非限定性實例包括USP注射用水；水性運載體，例如但不限于氯化鈉注射液、林格注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化鈉注射液和乳酸化林格注射液；可與水混溶的運載體，例如但不限于乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇；以及非水性運載體例如但不限于玉米油、棉籽油、花生油、蓖麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯和苯甲酸千酯。還可以將能夠提高本文所公開的一種或多種活性成分的溶解度的化合物摻入本發明胃腸外劑型中。例如，可以使用環式糊精及其衍生物來提高本發明化合物及其衍生物的溶解度。5.5.4局部、透皮和粘膜劑型藥物可局部應用于皮膚及其附件或應用于多種粘膜。可供采用的途徑包括局部、透皮、舌下、鼻部、陰道、膽嚢、直腸、包皮、眼部、口腔或耳部。人們已開發了多種劑型來將有效成分傳遞至應用位點以產生局部效果。本發明的透皮、局部和粘膜劑型包括但不限于眼科溶液、噴霧劑、氣霧劑、乳膏、洗劑、軟膏、凝膠、溶液、乳劑、懸浮劑或其它本領域技術人員已知的形式。例如，參見e/m."gtow'sP/^rmacew"ca/Sc/e"c&s,第16牙口18jf反，MackPublishing,EastonPA(1980&1990);以及/"/rat/wc"o"to/V^maceM/fca/DosageFomw,第4版，Lea&Febiger,Philadelphia(1985)。適用于在口腔內治療粘膜組織的劑型可制成漱劑或口服凝膠劑。此外，透皮劑型包括"貯庫型"或"基質型"藥膏，其可應用于皮膚并附著一定的時間以允許所需量的活性成分穿透。可用于提供本發明的透皮、局部和粘膜劑型的合適賦形劑(例如，載體和稀釋劑)以及其它原料已為制藥領域技術人員所公知，并且取決于將施用給定藥物組合物或劑型的特定組織。事實上，典型賦形劑包括但不限于水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙二醇、丁烷基-l,3-二醇、肉豆蔻酸異丙酯、異丙基棕櫚酸酯、礦物油及其混合物，從而形成無毒和藥學可接受的洗劑、酊劑、乳膏、乳劑、凝膠或油膏。也可根據需要向藥物組合物和劑型添加如閉塞劑、潤濕劑、潤滑劑和蛋白再生劑等保濕劑。該種附加成分的范例已為本領域公知。j列l!口,參見，ie附/"gtowk/Vzarmacew/Zca/Sc/ewce^第16矛口18版，MackPublishing,EastonPA(1980&1990)。閉塞劑為物理阻斷水份從角質層損失的物質。閉塞劑的非限制性范例包括凡士林、羊毛脂、礦物油、有機硅如二甲基硅油、氧化鋅及其組合。優選地，該閉塞劑為凡士林和羊毛脂，更優選最低濃度為5%的凡士林。潤濕劑為可在應用于皮膚時鎖住水份，并理論上可提高角質層水合的物質。然而，進入皮膚的水來自于其它細胞，而非大氣中的水。采用該種類型的保濕劑時，皮膚上的蒸發仍然持續且實際上會使干燥加劇。潤濕劑的非限制性范例包括甘油、山梨醇、尿素、a-羥基酸、糖類及其組合。優選地，該潤濕劑為a-鞋基酸，例如乙醇酸、乳酸、果酸、持檬酸和酒石酸。潤滑劑為可通過油滴填充皮膚鱗片之間的空隙以使皮膚光滑，但如非大量使用不會閉塞的物質。在與乳化劑結合使用時，它們可幫助角質層鎖定油和水份。維生素E是常見的添加劑，它除了作為潤滑劑外不具有任何作用。同樣地，還可添加其它的維生素(例如，A和D),但它們的作用尚存疑問。潤滑劑的非限制性范例包括礦物油、羊毛脂、脂肪酸、膽固醇、角鯊烯、結構脂類及其組合。蛋白再生劑為通過補充必須的蛋白使皮膚再生的物質。蛋白再生劑的非限制性范例包括膠原蛋白、角蛋白、彈性蛋白及其組合。根據待治療的特定組織，可在以本發明的活性成分進行治療之前、同時或之后使用附加成分。例如，透皮促進劑可用于協助將活性成分傳遞至組織。適用的透皮促進劑包括但不限于丙酮；各種醇，如乙醇、油醇、四氫呋喃；烷基亞砜如二甲亞砜；二甲基乙酰胺；二甲基甲酰胺；聚乙二醇；吡咯烷酮如聚乙烯吡咯烷酮；科利當(聚維酮、聚乙烯吡咯烷酮)；尿素；各種水溶性或水不溶糖脂如Tween80(聚山梨醇酯80)和Span60(山梨醇酐單硬脂酸酯)。也可對藥物組合物或劑型的pH進行調整以提高一種或多種活性成分的傳遞。類似地，可調整溶劑載體的極性、其離子強度或滲透壓以促進傳遞。例如，可通過敷料、敷擦法或以二甲亞砜作為載體來增強透皮吸收。還可向藥物組合物或劑型添加如金屬硬脂酸鹽(例如，硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂酸鎂、硬脂酸鈉、硬脂酸鋰、硬脂酸鉀等)等化合物，從而有利地改變一種或多種活性成分的親水性或親脂性以促進傳遞。就此而言，^J旨酸鹽可用作制劑的脂質載體、用作乳化劑或表面活性劑以及用作傳遞增強或滲透增強劑。活性成分的不同的鹽、水合物或溶劑化物也可用于進一步調整所得組合物的性質。6.實施例本發明的一些實施方式通過以下非限制性實施例得以闡述。該實施例不應解釋為對其范圍的限制。本發明的范圍僅由所附權利要求書限定。實施例1(+)-2-l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基l-4-乙酰氨基異吲咮啉-l，3-二酮[化合物(l)的制備3-氨基酞酸的制備。將10Q/()Pd/C(2.5g)、3-硝基酞酸(75.0g,355mmol)和乙醇(1.5L)的混合物在氮氣下加入到2.5LParr氫化器后，將氫氣充入反應容器直至55psi(379kPa)。將混合物震蕩13小時，同時將氫氣壓力保持在50psi(245kPa)和55psi(379kPa)之間。釋放氫氣，以氛氣清洗混合物3次。以硅藻土床過濾懸浮液并以甲醇洗涂。真空濃縮濾除液以獲得固體。#_用乙醚懸浮固體，并用真空過濾分離。真空干燥固體至恒重，從而獲得黃色產品54g(84。/產率)的3-氨基酞酸。以^NMR光譜鑒定于DMSO-d6中的產品顯示了如下化學位移(S，ppm):3.17(s,2H),6.67(d,1H),6.82(d，1H),7.17(t,1H),8-10(brs,2H)。以13C-NMR光譜鑒定于DMSO-d6中的產品顯示了如下化學位移(S,ppm):112.00,115.32,118.20,131.28,135.86,148.82,169.15,170.09。3-乙酰氨基酞酸酐的制備。將3-氨基酞酸(108g，596mmol)和乙酸酐(550mL)的混合物加入到配備了機械攪拌器、溫度計和冷凝器的1L3口圓底燒瓶中。將反應混合物回流3小時，冷卻至室溫，并在0-5"C下再維持l小時。真空過濾采集結晶的固體并以醚洗滌。在室溫下將固體產物真空干燥至恒重，從而獲得75g(61%產率)的白色產品3-乙酰氨基酞酸酐。以&NMR光譜鑒定于CDC13中的產品顯示了如下化學位移(5，卯m):2.21(s,3H),7.76(d，1H),7.94(t,1H),8.42(d,1H),9.84(s,1H)。2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-l-(甲M酰)-乙-2-基胺的拆分。將2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-1-(甲基磺酰基)-乙醚-2-基胺(137.0g,500mmol)、N-乙酰-L-亮氨酸(52g，300mmol)和甲醇(l.OL)的混合物加入到配備了機械攪拌器、溫度計和冷凝器的3L3口圓底燒瓶中。反應混合物回流l小時后，將混合物冷卻至室溫，然后在室溫下繼續攪拌3小時。過濾漿液并以甲醇(250L)洗滌。風干固體，然后在室溫下真空干燥至恒重，從而得到109.5g(98%產率)的粗產品(85.8%ee)。將固體粗產品(55.0g)和甲醇(440mL)回流1小時，冷卻至室溫并在室溫下繼續攪拌3小時。過濾漿水，以甲醇(200mL)洗滌濾餅。吹干固體，然后在3(TC下真空干燥至恒重，以獲得49.6g(90。/o回收率)的(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-l-(甲基磺酰基)-乙醚-2-基胺-忭乙酰丄-亮氨酸鹽(98.4%ee)。手性HPLC(1/99EtOH/20mMKH2P04@pH7.0,UltronChiralES-OVS購自AgilentTechnologies,150mmX4.6mm,0.5mL/min,@240nm):18.4min(S-異構體，99.2%),25.5min(R-異構體，0.8%)。(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基-4-乙酰氨基異吲哚啉-1.3-二酮的制備。以機械攪拌器、溫度計和冷凝器裝備500mL3口圓底燒并瓦。向反應容器中添加(S)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-l-(甲基磺酰基)-乙-2-基胺N-乙酰-L-亮氨酸鹽(25g，56mmol，98%ee)、3-乙酰氨基酞酸酐(12.1g，58.8mmol)、和冰醋酸(250mL)。將混合物回流過夜然后冷卻至〈50。C。真空去除溶劑后，以乙酸乙酯溶解殘余物。以水(250mLx2)、飽和水NaHC03(250mLX2)和鹽水(250mLx2)洗滌所得溶液，然后使用無7j^克酸鈉進行干燥。真空蒸發溶劑后，以含有乙醇(150mL)和丙酮(75mL)的二元溶劑對殘余物重結晶。通過真空過濾分離該固體并以乙醇洗滌(100mLx2)。在60。C下將產物真空干燥至恒重，從而獲得19.4g(75%產率)98%ee的(5>{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-曱基磺酰乙基]-4-異吲哚啉-l,3-二酮。手性HPLC(15/85EtOH/20mMKH2P04@pH.5，UltronChiralES-OVS購自AgilentTechnologies，150mmX4.6mm,0.4mL/min，@240nm):25.4min(S陽異構體，98.7%),29.5min異構體，1.2%)。以iHNMR光譜鑒定于CDCl3中的產品顯示了如下化學位移(5,ppm):1.47(t,3H),2.26(s,3H),2.87(s,3H)53.68-3.75(dd,1H),3.85(s,3H),4.07-4.15(q,2H),4.51-4.61(dd,IH)，5.84-5.90(dd,1H),6.82-8.77(m,6H),9.46(s,1H)。以13CNMR光譜鑒定于DMSO-d6中的產品顯示了如下化學位移(S,ppm):14.66,24.92,41.61,48.53,54.46,55.91,64.51，111.44,112.40,115.10,118.20,120.28，124.94,129.22,131.02，136.09,137.60,148.62,149.74,167.46,169.14,169.48。實施例24-氨基-2-(2，6-二氧代-3-哌咬)異吲哚啉-1，3-二酮[化合物(2)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>將乙腈(42L)和N-(3-氨基鄰苯二甲酰)-谷氨酰胺(2120g，7.28摩爾)的混合物添加入配備了機械攪拌器、冷凝器、氮氣入口以及加熱臺的圓底燒瓶中。攪拌混合物后加熱至40-45°〇，并添加1,1，-羰基二咪唑(1290g,7.95摩爾)。將反應混合物攪拌并回流4.5小時。反應的進展可通過HPLC進行監測，其條件為采用WatersNova-PakC18柱(3.9X150mm，粒徑=4微米,UV波長=240nm，保留時間=3.64分鐘)，以體積比為20/80的乙腈和0.1%H3P04水溶液混合物作為洗脫液，流速為1mL/min。冷卻至室溫后，過濾反應混合物以得到黃色固體，隨后以乙腈洗滌(6.5L)。將黃色固體風干，然后在60°〇和<1mm的壓力下真空干燥以得到1760g(88%)的產品。通過HPLC測得產品的純度為99.57%,HPLC條件為采用WatersNova-PakC18柱(3.9X150mm,粒徑=4微米，UV波長=240nm,保留時間=3.64分鐘)，以體積比為20/80的乙腈和0.1MH3P04水溶液混合物作為洗脫液，流速為1mL/min。以&NMR光譜鑒定于DMSO-d6中的產品顯示了如下化學位移(5，ppm):11.10(s,1H),7.47(t,J=7.9Hz,1H),7.03-6.99(dd,J=4.8和8.4Hz,2H)，6.52(s,2H),5.09-5.02(dd，J=5.3和12.4Hz,1H),2.96-2.82(m,lH)，2.62-2.46(m，2H),2.07-2.00(m,1H);而以13CNMR光譜鑒定顯示了如下化學位移(S,ppm):172.82,170.11,168.57,167.37，146.71,135.46,131.99,121.70，110.97,108.52,48.47,30.97,22.14。該產物的熔點為315.5-317.5°C。由元素分析可得到如下以重量百分比顯示的結果C,56.98;H,3.86;N,15.35，其與由C13HN304計算得到的以重量百分比顯示的值C,57.14;H,4.06;N,15.38相當。實施例3環丙基{2-[(15)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基卜3-氧代異吲咮啉-4-基}甲酰胺的制備環丙基{2-[(15>1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異巧|咮啉-4-基}甲酰胺可參照美國專利6,667,316中實施例57的制備方法進行制備。在四氫呋喃(IOmL)中將攪拌的7-氨基-2-[(15>1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]異吲哚啉-1-酮(1.7g,4.2mmol)與環丙烷碳酰氯(0.46mL，5.1mmol)的混合物攪拌并加熱回流15分鐘。在室溫下向混合物添加甲醇(4mL),攪拌混合物10分鐘。真空去除溶劑以得到油。將油用乙醇(20mL)重結晶以得到白色固體狀的化合物(1)(1.4g,71%產率)熔點172-174°C;iHNMR(CDC13)5:0.86-0.93(m,2H,2CHH),1.07-1.14(m,2H,2CHH),1.46(t,1=6.9Hz,3H,CH3),1.63-1.73(m，1H,CH),2.95(s,3H,CH3)，3.68(dd,J=4.4,14.3Hz,IH,CHH),3.86(s,3H,CH3),4.07(q,J=7.1Hz,2H,CH2),4.20(d,J=16.7Hz，IH,CHH),4.21(dd,J=9.9,14.3Hz,IH,CHH),4.44(d,J=16.7Hz,1H:CHH),5.73(dd,J=4.3，9.9Hz,IH,NCH),6.84-7.02(m,4H,Ar),7.44(t,J=7.8Hz:1H，Ar),8.43(d,J=8.3Hz,IH,Ar)，10.46(s,IH,NH);13C麗R(CDC13)5:8.24,14.61，16.10,41.43,47.81,51.55，55.75,55.88,64.56,111.46，112.09,116.69,116.99,117.76,119.17,129.27,133.54,138.06,141.22,148.84,149.67,169.96,172.59;由C24H28N206S分析計算得到C，61.00;H，5.97;N,5.93。實測C,60.87;H，6.13;N，6.12。實施例4分別包含50毫克活性成分的片劑可以如下方式制備組成(IOOO片)活性成分50.0克乳糖50.7克小麥淀粉7.5克聚乙二醇60005.0克滑石5.0克硬脂酸鎂1.8克軟化水q.s.首先將固體成分強制通過網格寬度為0.6mm的篩網。然后混合活性成分、乳糖、滑石、硬脂酸鎂和一半淀粉。該活性成分為本發明的化合物，或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體。將另一半淀粉懸浮于40毫升水中，將懸浮液添加至含聚乙二醇的100毫升水的沸騰溶液中。將所得糊狀物添加至粉狀物質，將混合物制成顆粒，必要時添加水。將顆粒在35。C下干燥過夜，強制通過網4各寬度為1.2mm的篩網，并壓制成兩側凹陷的直徑約為6mm的片劑。實施例5分別包含100毫克活性成分的片劑可以如下方式制備:組成(IOOO片)活性成分100.0克乳糖100.0克小麥淀粉47.0克硬脂酸鎂3.0克首先將所有固體成分強制通過網格寬度為0.6mm的篩網。然后混合活性成分、乳糖、硬脂酸鎂和一半淀粉。將另一半淀粉懸浮于40毫升水中，將懸浮液添加至100毫升滯水中。將所得糊狀物添加至粉狀物質，將混合物制成顆粒，必要時添加水。將顆粒在35t:下干燥過夜，強制通過網格寬度為1.2mm的篩網，并壓制成兩側凹陷的直徑約為6mm的片劑。實施例6分別包含75毫克活性成分的咀嚼片可以如下方式制備組成(畫0片)活性成分75.0克甘露醇230.0克乳糖150.0克滑石21.0克甘氨酸12.5克硬脂酸10.0克糖精1.5克5%明膠溶液q.s.首先將所有固體成分強制通過網格寬度為0.25mm的篩網。混合甘露醇和乳糖，通過添加明膠溶液制成顆粒，強制通過網格寬度為2mm的篩網，將顆粒在5(TC下干燥過夜，強制通過網格寬度為1.7mm的篩網。小心混合活性成分、甘氨酸和糖精。添加甘露醇、乳糖顆粒、硬脂酸和滑石，將所有成分充分混合，并壓制成兩側凹陷并在上側具有斷裂槽的直徑約為10mm的片劑。實施例7分別包含10毫克活性成分的片劑可以如下方式制備組成(IOOO片)活性成分10.0克乳糖328.5克玉米淀粉17.5克聚乙二醇60005.0克滑石25.0克硬脂酸鎂4.0克專欠化水q-s.首先將固體成分強制通過網格寬度為0.6mm的篩網。然后充分混合活性成分、乳糖、滑石、硬脂酸鎂和一半淀粉。將另一半淀粉懸浮于65毫升水中，將懸浮液添加至含聚乙二醇的260毫升水的沸騰溶液中。將所得糊狀物添加至粉狀物質，完全混合并制成顆粒，必要時添加水。將顆粒在35。C下干燥過夜，強制通過網格寬度為1.2mm的篩網，并壓制成兩側凹陷并在上側具有斷裂缺口的直徑約為10mm的片劑。實施例8分別包含100毫克活性成分的凝膠干式填充膠囊可以如下方式制備:組成(IOOO膠嚢)活性成分100.0克微晶纖維素30.0克十二醇辟L酸鈉2.0克硬脂酸鎂8.0克將十二醇疏酸鈉通過網格寬度為0.2mm的篩網過篩進入活性成分，將兩個組分充分混合10分鐘。將微晶纖維素通過網格寬度為0.9mm的篩網進行添加，并全體再次混合10分鐘。最后，將硬脂酸鎂通過網格寬度為0.8mm的篩網進行添加，繼續混合3分鐘后，將每份140毫克的混合物分別導入0號尺寸(加長)的凝膠干式填充膠囊。實施例90.2%的注射或灌輸溶液可以如下示范方式進行制備<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>將活性成分溶解于1000毫升水中，并用微孔過濾器過濾。添加緩沖溶液，將整個溶液定容至2500毫升。為制備單位劑型，可將每份1.0或2.5毫升分別導入玻璃安瓿(分別包含2.0或5.0毫克的活性成分)。實施例10局部使用的油膏可以如下示范方式進行制備<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>采用常規混合器或勻漿機通過震蕩或超聲將上述成分均勻混合以形成油膏。實施例11局部使用的凝膠可以如下示范方式進行制備<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>采用常規混合器或勻漿機通過震蕩或超聲將上述成分均勻混合以形成凝膠。實施例12局部使用的糊劑可以如下示范方式進行制備:組成活性成分10g羧酸甲基纖維素2.0g甘油25.0g鯨蠟醇2.8g單硬脂酸甘油酯9.3gTween802.0g葡萄糖醛酸1.0g0.4摩爾/升檸檬酸鹽緩沖液20.0g蒸餾水至100g采用常規混合器或勻漿機通過震蕩或超聲將上述成分均勻混合以形成糊劑。實施例13局部使用的液體組合物可以如下示范方式進行制備組成活性成分10g羧酸曱基纖維素0.1g甘油15.0g0.4摩爾/升檸檬酸鹽緩沖液50.0g(pH4.5)蒸餾水至100g采用常規混合器或勻漿機通過震蕩或超聲將將固體成分均勻分彭溶解于液體成分中以形成液體。實施例14局部使用的噴霧劑可以如下示范方式進行制備:組成實施例12的液#^組合物100.0g氟利昂114畫,Og將液體組合物與氟利昂114填充入覆有Teflon的鋁制噴霧容器中。實施例15以人臍靜脈內皮細胞進行試驗A)材料人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)來自于LifeBank,用多種吸附分子在實驗A-K中進行了測試。測試的吸附分子為CD51/CD61FITC(購自BDPharMingen,SanDiego,CA;目錄編號555505);ICAM-1PE，也稱為CD54(購自BDPharMingen,SanDiego,CA;目錄編號555511);ICAM-2，也稱為CD102(購自ResearchDiagnosticsInc.,Concord,MA;目錄編號RDI-CBL539FT);VCAM-l(購自BDPharMingen.SanDiego,CA;目錄編號555647);P隱選擇素FITC(購自R&DSystems,Inc.,Minneapolis,MN;目錄編號BBA34);E-選擇素FITC(購自R&DSystems,Inc.,Minneapolis,MN;目錄編號BBA21);HLAI類FITC(購自BDPharMingen,SanDiego,CA;目錄編號555553);HLAII類PE(購自BDPharMingen,SanDiego,CA;目錄編號555558);CD44FITC(購自BDPharMingen,SanDiego,CA;目錄編號347943);CD144(釣粘素VE)(購自CHEMICONInternational,Inc.,Temecula,CA;目錄編號MAB1989);IgG2aFITC(購自BDPharMingen，SanDiego,CA;目錄編號556652);MsIgG2a(購自CHEMICONInternational,Inc.,Temecula,CA;目錄編號PP102);IgGlFITC(購自BDPharMingen,SanDiego，CA;目錄編號349041)以及IgGlPE(購自BDPharMingen，SanDiego,CA;目錄編號349043)。化合物(l)((+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1,3-二酮)和化合物(2)(4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-1，3-二酮)參照本說明書所描述的制備方法制備得到。16,16-二甲基-PGE2(以下稱為PGE2)購自BIOMOLInternational,L.P.(PlymouthMeeting,PA;目錄編號PG-021)。TNF-a購自PierceBiotechnology(Rockford,IL;目錄編號RTNFAIO)。B)方法將HUVEC以1X105細胞/孔的濃度涂布在6孔板上的3mlEBM內皮基石出i咅養基(購自CambrexCorporation,EastRutherford,NewJersey;目錄編號CC-3121)和singlequotsi咅養基(購自CambrexCorporation,EastRutherford,NewJersey;目錄編號CC-4133)中。將細胞在37。C下并含有5%C02的增濕培養箱中孵育過夜以允許細胞附著。次日去除舊培養基并以3ml新鮮EBM⑧內皮基礎培養基替換。然后，將10mM的化合物(1)、化合物(2)、PGE2以及化合物(l)與PGE2的混合物的3nl樣本分別以一式兩份地添加到板上的各孔中以得到10nM的終濃度。分別一式兩份地添加非刺激的DMSO對照和TNF-a-刺激對照。將這些平板在37°C下并含有5%C02的增濕培養箱中孵育1小時。向除了DMSO對照孔外的各孔添加3(xl的TNF-a(1嗎/ml)以得到lpg/ml的終濃度。將該平板在37。C下并含有5Q/。C02的增濕培養箱中孵育過夜。該細胞還在無TNF-a的情況下測試。次日去除培養基并以3ml磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌各孔。然后向各孔添加3ml含1mMEDTA(乙二胺四乙酸)的PBS以使細胞脫附。一旦細胞脫附后，將其輕柔刮取并置于4.5mlFalcon管中。將管子在4。C下1200RPM離心8分鐘。小心去除上清液。然后，按如下方式向所有的管子中添加50^tlPBS-FACS緩沖液(5%胎牛血清(FBS),0.02%疊氮化鈉的PBS溶液)以及20jxl抗體實驗A和B<table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table>實驗H<table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>添加抗體后，將管子在冰上孵育30分鐘并以鋁箔覆蓋。然后，將管子在4。C下1200RPM離心8分鐘。小心去除上清液。將細胞重懸浮于2ml的PBS-FACS緩沖液中并按上述步驟再次離心。再次小心去除上清液并將細胞在500pl的PBS-FACS緩沖液中重懸浮。使用流式細胞儀分析管子。對各吸附分子試驗兩或三次，每次采用不同的HUVEC供體。C)結果在非刺激情況下和用化合物(l)(10nM)、PGE2(10|iM)、化合物(2)(10pM)或以化合物(l)(10pM)和PGE2(10^M)的混合物進行處理的情況下檢測在HUVEC上表達的吸附標記CD51/61、ICAM-1、E-選擇素和P-選才奪素。在非刺激情況下，與未處理情況相比CD51/61細胞表面表達未受到化合物(1)或化合物(2)的影響。PGE2以及化合物(l)和PEG2混合物處理可導致CD51/61細胞表面表達下降20%。ICAM-1的細胞表面表達在化合物(l)和化合物(2)處理時均顯示了10-20Q/q的達度升高。化合物(1)和PEG2的混合物增強了約25-30%的ICAM-1的細胞表面表達，盡管其增強少于單用PGE2所觀察到的結果(參見圖1)。可能由于靈敏度不足，E-選擇素細胞表面表達水平較小。然而，化合物(l)和化合物(2)抑制了E-選擇素表達，而PEG2似乎阻斷了化合物(l)誘導抑制，而將E-選擇素表達水平恢復至基線值。化合物(1)和化合物(2)同樣可以分別抑制約55%和35%的P-選擇素表達。PGE2在與化合物(l)合用時可將化合物(l)的抑制水平由約55%減少至27%，然而剩余的表達水平與PGE2單用時類似(參見圖2)。對于TNF-a(lng/ml)刺激的情況，粘附分子的細胞表面表達水平被歸一為TNF-a-刺激表達的百分比(100Q/。)。在該情況下，TNF-a-刺激的E-選擇素細胞表面表達未受到化合物(l)的影響，而化合物(2)(10nM)抑制了約20%的TNF-a-誘導的E-選擇素表達。單用PGE2可導致TNF-a-誘導的E-選擇素表達下降50%。化合物(l)的添加減少了PGE2介導的E-選擇素阻斷(參見圖3)。化合物(l)和化合物(2)使TNF-a-誘導的P-選擇素細胞表達分別提高到基線以上40%和>2倍。化合物(l)和PGE2的混合物將TNF-a-刺激的P-選擇素細胞表達提高至與PGE2單用相當的水平(參見圖3)。TNF-a-刺激的VE-鈣粘素細胞表面表達未受到化合物(l)、化合物(2)、PGE2或化合物(l)和PGE2混合物的影響(參見圖4)。然而，TNF-a-刺激的CD44細胞表面表達被化合物(1)和化合物(2)均抑制了約30%。盡管單用PGE2未見可檢測的作用，但化合物(1)和PGE2的混合物消除了單用化合物(l)時所觀察到的30%抑制，并使表達水平恢復至單用PGE2時與基線水平相當的水平(參見圖4)。在TNF-a刺激情況下結合化合物(I)(IO^M)、PGE2(10^M)、化合物(2)(10iaM)或化合物(l)(10(iM)和PGE2(10^M)的混合物對HUVEC上表達的多種吸附標記進行了檢測。在測試組中，化合物(1)處理使ICAM-1和P-選擇素細胞表面表達上升了約35%，并使VCAM表達下降了30%。采用相同的測試標記時，化合物(2)使P-選擇素的表達提升了將近2倍。PGE2以及化合物(l)和PGE2的混合物顯著提高了VCAM以及E-選擇素的細胞表面表達。所觀察到的下降與PGE2單用時相當，這表明機制與化合物(l)磷酸二酯酶抑制無關(參見圖5)。化合物(l)和PGE2(10^M)的混合物與各藥劑單用時相比在0.25、0.5和1ng/ml的TNF-a時明顯抑制表達。在該測定中，化合物(1)和PGE2的混合物顯示出了協同作用。此外，化合物(2)對于TNF-a-刺激的E-選擇素細胞表面表達顯示出了抑制作用(參見圖6)。實施例16對紫外B誘導下人角化細胞生成TNF-a的研究皮膚狼瘡患者常在暴露至紫外(UV)光時病情加重。據認為這是由于UVB-誘導人角化細胞生成TNF-a。已經表明角化細胞在體外暴露至低水平UVB輻射時可釋放細胞因子，包括TNF-a(Takashima，1996)。我們進行了皮膚狼疾體外研究以考察本發明的化合物如何影響人角化細胞生成TNF-a。人新生兒表皮角化細胞(HEKn細胞)得自CascadeBiologies并培養于添加了生長因子的無血清培養基中。當細胞匯合達80%時，對其進行胰蛋白酶J匕并以1乂105細胞/孔涂布于6孔板上。將平板孵育24小時以使細胞附著。為優化TNF-a的釋放條件，可通過不同暴露程度的UVB輻射處理細胞(l、4和24小時)。然后采集上清液并在TNF-aELISA中進行測試。圖7顯示了以0、10、50、100或300mJ/cm2UVB輻射處理HEKn細胞。在暴露后1小時(無圖案的圖塊)、4小時(帶線條的圖塊)或24小時(帶方格的圖塊)采集上清液并以TNF-aELISA進行測驗。所得結果為兩個試驗的平均值。圖7的結果顯示，HEKn細胞暴露至UVB后24小時采集的上清液具有最高水平的TNF-a。在暴露至10、50或100mJ/cm2后，細胞仍然附著至孩吏孔且未觀察到細胞損傷。300mJ/cm2UVB暴露對HEKn細胞而言過高，許多細胞受損并從微孔底部脫附。基于這些結果，后面的試驗將集中測試本發明的化合物對HEKn細胞暴露至50mJ/cm2輻射24小時后的TNF-a水平的影響。細胞以0.1uM、1uM或10uM的(+)-2-[l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1,3-二酮(化合物名為10004)或環丙基(2-[(lS)-l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基》甲酰胺(化合物名為U050)處理4小時。吸出培養基洗滌細胞并暴露至50mJ/cn^UVB輻射。添加新鮮培養基并將細胞孵育24小時。去除上清液并用購自PierceBiotechnology的TNF-aELISA試劑盒進行測試。經化合物處理的細胞在UVB暴露后顯示TNF-a釋放水平呈劑量依賴性下降。(圖8)。以10的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-U-二酮(化合物名為10004)進行處理對TNF-a水平具有更大的影響，顯示出與非經輻射處理的細胞相似的TNF-a水平。(圖8)。在另一實施方式中，以0.1或1|iM的3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氫-異吲咮-2-基)-哌啶-2,6-二酮(化合物名為5013)、(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-l,3-二酮(化合物名為10004)或名為16057的化合物處理細胞4小時。以(+)-2-[l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異p引咮啉-l,3-二酮(化合物名為10004)處理的細胞在UVB暴露后顯示TNF-a釋放水平呈劑量依賴性下降。(圖9)。3-(4-氨基-l-氧代-l,3-二氫畫異W哚-2-基)-哌啶-2，6-二酮(化合物名為5013)對TNF-a水平具有更大的影響，以0.1進行的處理顯示出比非經輻射處理的細胞更低的TNF-a水平。(圖9)。以上所述的本發明的實施例目的僅在于舉例，且本領域的技術人員采用不超出常規的試驗將可以識別、或能夠確定許多等同的特定化合物、材料和方法。所有的該種等效物被認為在本發明的范圍內且包含在附加權利要求書中。權利要求1.治療人皮膚狼瘡的方法，其包括向皮膚狼瘡患者施用治療有效量的基本不含其(-)對映體的(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。2.治療皮膚狼瘡的方法，其包括向皮膚狼瘡患者施用治療有效量的4-(氨基)-2-(2,6-二氧代(3-哌啶基))-異p引咮啉-l，3-二酮，或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體。3.治療皮膚狼瘡的方法，其包括向皮膚狼瘡患者施用治療有效量的3-(4-氨基-l-氧代-l，3-二氬-異吲哚-2-基)-哌啶-2,6-二酮，或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體。4.治療人皮膚狼瘡的方法，其包括向皮膚狼瘡患者施用治療有效量的基本不含其(i)對映體的環丙基{2-[(18)-1-(3-乙氧基-4-曱氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲咮啉-4-基}甲酰胺，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。5.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述化合物以藥學上可接受的鹽施用。6.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述化合物以藥學上可接受的溶劑化物施用。7.如權利要求6所述的方法，其中所述溶劑化物為水合物。8.如權利要求2或3所述的方法，其中所述化合物為R-對映體。9.如;f又利要求2或3所述的方法，其中所述化合物為S-對映體。10.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述皮膚狼瘡為急性皮膚型紅斑狼瘡。11.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述皮膚狼瘡為亞急性皮膚型紅斑狼瘡。12.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述皮膚狼瘡為盤狀紅斑狼瘡。13.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述皮膚狼掩為新生兒紅斑狼瘙。14.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述皮膚狼瘙為兒童紅斑狼瘡。15.如權利要求l、2、3或4所述的方法，還包括向所述患者施用治療有效量的第二活性試劑。16.如權利要求15所述的方法，其中所述第二活性試劑為抗炎劑、免疫調節化合物、抗疸藥、免疫抑制劑、抗生素、抗病毒劑、免疫球蛋白、免疫增強藥、激素、PGE2或其組合。17.如權利要求16所述的方法，其中所述第二活性試劑為PGE2。18.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體通過口服施用。19.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體通過腸胃外施用。20.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體通過局部施用。21.如權利要求20所述的方法，其中所述化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體以油膏、乳膏、凝膠、糊劑、粉劑、洗劑、噴霧、擦劑、泥敷劑、氣霧劑、溶液、乳狀液或懸浮液的劑型局部施用。22.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體以片劑或膠囊的劑型口服施用。23.如權利要求22所述的方法，其中所述化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體以5mg、10mg、15mg或25mg的片劑或膠囊劑口服施用。24.如權利要求l或4所述的方法，其中所述治療有效量為每天約1mg至約1000mg。25.如權利要求24所述的方法，其中所述治療有效量為每天約5mg至約500mg。26.如權利要求25所述的方法，其中所述治療有效量為每天約10mg至約200mg。27.如權利要求2或3所述的方法，其中所述治療有效量為每天約0.1mg至約150mg。28.如權利要求27所述的方法，其中所述治療有效量為每天約1mg至約100mg。29.如權利要求27所述的方法，其中所述治療有效量為每天約0.1mg、1mg、2mg、5mg、10mg或25mg。30.如權利要求2所述的方法，其中所述治療有效量為每天約0.5mg至約2mg。31.如權利要求2所述的方法，其中所述治療有效量為每隔一天約5mg。32.如權利要求3所述的方法，其中所述治療有效量為每天約5mg至約25mg。33.如權利要求3所述的方法，其中所述治療有效量為每隔一天約25mg或50mg。34.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體每天施用一次或兩次。35.如權利要求l、2、3或4所述的方法，其中所述化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或立體異構體周期性施用。全文摘要本發明公開了治療人皮膚狼瘡的方法。具體的方法包括單獨或聯合第二活性試劑施用(+)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基磺酰乙基]-4-乙酰氨基異吲哚啉-1，3-二酮、4-(氨基)-2-(2，6-二氧代(3-哌啶))-異吲哚啉-1，3-二酮(ACTIMID^TM)、3-(4-氨基-1-氧代-1，3-二氫-異吲哚-2-基)-哌啶-2，6-二酮(REVLIMID^)或環丙基{2-[(1S)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-(甲基磺酰)乙基]-3-氧代異吲哚啉-4-基}甲酰胺。文檔編號A61K31/4035GK101389330SQ200680053428公開日2009年3月18日申請日期2006年12月28日優先權日2005年12月29日發明者帕特麗夏·E·W·羅漢,彼得·H·謝弗,杰羅米·B·杰奧迪斯申請人:細胞基因公司