專利名稱：一種扶正化瘀植物藥組合物的應用的制作方法
技術領域：
本發明屬扶正化瘀藥物組合物應用領域，特別是涉及一種扶正化瘀植物藥組合物在治療肝硬化門靜脈高壓癥中的應用。
背景技術：
肝硬化是彌漫性肝纖維化伴有結節形成的一種病理改變。我國肝硬化患病率達100多萬人/年(主要與病毒性肝炎有關)，年死亡11萬。這不僅嚴重危害我國人民的健康，而且還為國家帶來嚴重的社會經濟負擔。
門靜脈高壓癥是肝硬化的主要并發癥，是決定肝硬化預后的主要因素。肝星狀細胞(hepatic stellate cell，HSC)的活化(生成大量細胞外基質，形成肝竇毛細血管化和纖維間隔)和收縮(使肝竇狹窄)是肝硬化門脈高壓癥形成的中心環節，內皮素(endothelin，ET)是引起HSC收縮的最重要的血管活性物質之一。
門靜脈高壓癥是肝硬化發展至一定程度后必然出現的后果，主要臨床表現有脾腫大、門腔側支循環形成及腹水。上消化道出血是門靜脈高壓癥最主要的并發癥，食管和胃底靜脈曲張破裂為主要病因。雖然近年來內科和外科治療有了很大進展，但尚未從根本上改變預后，上消化道出血仍然是肝硬化門靜脈高壓患者死亡的主要原因。在發現靜脈曲張的第一、二年里，出血的風險為25～35％，且多數發生在第一年。大多數研究表明首次出血的死亡率達30％～50％，約60％患者死于無法控制的出血。
積極預防上消化道出血和再出血，對減少患者出血的風險、提高生存率、改善預后有重要意義?，F代醫學尚無對食管靜脈輕度曲張的患者有效的預防出血的措施，對食管靜脈中重度曲張者首選β受體阻滯劑普奈洛爾(心得安)以降低門靜脈壓力，預防上消化道出血。但是因部分患者對β受體阻滯劑有禁忌或副反應，常不能耐受治療，而β受體阻滯劑對引起門靜脈高壓的根本原因即HSC的收縮和所導致的肝纖維化無治療作用，因而只是治標，不能治本。
扶正化瘀方是由本公司開發的用于治療慢性肝炎肝纖維化的藥物，是由丹參、桃仁、蟲草菌絲等組成?；诖朔降膬蓚€制劑(膠囊和片劑)已經獲得國家食品藥品監督管理局上市許可，中國專利發明名稱為“一種治療慢性肝病的中藥復方制劑及制備方法”，申請號為200610023308.3。其中并無扶正化瘀方用于肝硬化門脈高壓的觀察報道。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種扶正化瘀植物藥組合物在治療肝硬化門靜脈高壓癥中的應用，對大鼠肝臟的肝細胞變性、壞死，肝內出血、纖維增生有明顯改善，門靜脈壓力顯著下降。
一種扶正化瘀植物藥組合物在治療肝硬化門靜脈高壓癥中的應用。
所述的一種扶正化瘀植物藥組合物，包括下述有效成分丹參提取物25-38％，絞股藍提取物20-25％，五味子醇提取物1-6％，蟲草菌絲體提取物19-26％，松花粉提取物6-％，桃仁提取物6-10％。加入輔料而成。
所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應用，包括下列步驟(1)按組分配比稱取丹參、桃仁、絞股藍加水煎煮，合并濾液，取上清液，濃縮成浸膏，冷卻，加乙醇，使含醇量達70％，靜置，濾過，取濾液濃縮并干燥；(2)稱取發酵蟲草菌粉，五味子加乙醇熱回流，冷卻，合并乙醇液，濾過，濾液濃縮干燥；(3)稱取松花粉乙醇溫浸，合并干燥成干膏，(4)取上述三種干膏，混合粉碎，加淀粉，混勻，制備成復方制劑。
本發明制劑經藥理藥效研究，具有降低肝硬化門脈高壓癥的新用途，其試驗結果如下一、模型與分組腹腔注射0.5％的二甲基亞硝胺(dimethylnitrosamine，DMN)，連續注射3天后休息4天，共進行4周。造模結束后，隨機抽取2只大鼠處死觀察肝臟的病變情況，經病理學檢查證實肝臟有硬化改變后，造模組隨機分為模型組和扶正化瘀方組。扶正化瘀方組給予扶正化瘀方灌胃，模型組和正常值給予相同劑量的飲用水，共3周。
二、藥效作用結果1各組哺乳類死亡及腹水情況造模4W時，各組均無哺乳類死亡，第5W開始出現哺乳類死亡，至第7W末，正常組無哺乳類死亡，模型組死亡4只，扶正化瘀方組死亡2只，死亡原因為肝功能衰竭；腹水發生數則以模型組最多，經卡方檢驗，扶正化瘀方和模型組相比，有顯著差異。參見表1。
表1.各組哺乳類死亡及腹水情況統計

注與模型組比較*p＜0.052各組哺乳類肝體比及脾體比比較模型組造模后3W周(第7W末)哺乳類體重(不包括腹水)明顯比正常組降低，肝/體減小為0.029，脾/體增大為0.005；經扶正化瘀方治療3W后的哺乳類體重有所回復，與模型組相比，肝/體增加，脾/體降低。參見表2。
表2.各組哺乳類肝/體及脾/體比較(mean±SD)

注與正常組比較##P＜0.013.肝組織病理學觀察3.1肝組織HE染色觀察正常哺乳類肝小葉結構清晰，肝細胞索由中央靜脈向四周呈放射狀排列，可見少許竇旁細胞，匯管區可見極少量纖維結締組織。造模結束3W時模型組哺乳類肝臟可見大面積出血壞死，并見大量腫脹壞死的肝細胞，同時有大量淋巴細胞、單核細胞等炎性細胞浸潤，肝竇扭曲變形；匯管區明顯增寬，廣泛增生的纖維組織形成間隔，將肝小葉分割包繞成大小不等的假小葉；扶正化瘀方組大鼠肝臟的肝細胞變性、壞死，肝內出血、纖維增生都有不同程度的改善。參見圖1。


圖1.DMN模型哺乳類肝組織炎癥變化及扶正化瘀方的作用，肝組織HE染色(×200)。
圖2.DMN模型哺乳類肝組織膠原纖維沉積變化及扶正化瘀方的作用，肝組織天狼猩紅染色(×200)。
圖3.正常組哺乳類門靜脈壓力。
圖4.模型組哺乳類門靜脈壓力。
圖5.扶正化瘀方組哺乳類門靜脈壓力。
圖6.哺乳類肝組織中ET-1含量和門靜脈壓力的相關性。
圖7.扶正化瘀方治療后哺乳類肝組織中ET-1含量和門靜脈壓力的相關性4.各組哺乳類門靜脈壓力的變化經DMN造模以后，模型組哺乳類門靜脈壓力顯著升高，與正常組比較，升高幅度達到了8mmHg，而在給予扶正化瘀方治療3周之后，門靜脈壓力顯著下降，與模型組比較，兩組間的差異有統計學意義(p＝0.035)。參見表7，圖3-5。
表7.各組哺乳類門靜脈壓力的變化(mean±SD)

注與正常組比，##p＜0.01，與模型組比，*p＜0.055.肝硬化哺乳類肝組織ET-1含量的變化造模后第3w時，模型組肝組織中ET-1含量明顯高于正常組，給予扶正化瘀方治療之后，肝組織中ET-1含量顯著下降，與同期模型組比較有統計學意義(p＝0.044)。參見表8。
表8.肝硬化哺乳類肝組織ET-1含量的變化(mean±SD)

注與正常組比，##p＜0.01，與模型組比，*p＜0.056.哺乳類肝組織中ET-1含量和門靜脈壓力的相關性肝硬化哺乳類肝組織中ET-1含量和門靜脈壓力之間呈顯著正相關，r＝0.675，p＜0.01。參見圖6。
在運用扶正化瘀方治療3w后，肝組織ET-1含量和門靜脈壓力之間仍然呈顯著正相關，r＝0.447，p＜0.05。參見圖7。
三、藥效結果分析哺乳類造模4w肝硬化成型后，隨機分組，用扶正化瘀方治療3w。結果顯示，扶正化瘀方治療后，哺乳類死亡率和腹水發生率均較模型組明顯降低，肝體比增加，脾體比則下降；肝臟纖維化程度大為減輕，肝內纖維間隔變窄變短，門靜脈壓力較模型組顯著下降了4.6mmHg，幅度達33％，差異相當顯著。
本項研究中，模型組哺乳類肝組織中ET-1的含量較正常組明顯升高，約達40％，同時模型組哺乳類的門靜脈壓力也顯著上升了1.4倍，而給予扶正化瘀方治療之后，哺乳類門靜脈壓力降低，肝組織中ET-1的含量也相應的下降。相關性分析顯示，肝硬化哺乳類肝組織中ET-1含量和門靜脈壓力之間呈顯著正相關。在肝硬化早期，肝內阻力增高是引起門脈高壓的始動因素，而HSC的收縮加強是肝內阻力增高最重要的原因。ET就是通過促進HSC的收縮而在門脈高壓形成的始動因素中起著重要作用。
具體實施例方式
下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。
病例1吳××，男，34歲，2002年9月體檢發現“肝硬化”，來上海第七人民醫院進一步診療，檢查發現HBV-M示“HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)”，HBV DNA(+)，血清肝纖四項示P-III-P(III型前膠原肽)1.81ng/ml，IV-C(IV型膠原)547ng/ml，HA(透明質酸)377ng/ml，LN(層粘蛋白)369ng/ml。肝功能正常，B超示肝臟光點增粗，呈慢性肝病改變，門靜脈12mm，脾臟腫大，144mm×52mm，腹脹，納呆，乏力，胃鏡下可見胃底靜脈曲張中度。
予扶正化瘀膠囊治療，1月后復查，血清肝纖四項基本正常。半年后復查B超，門靜脈11mm，脾臟縮小，100mm×39mm，繼續服用扶正化瘀膠囊，1年后，腹脹、納呆、乏力諸癥減輕，2003年2月胃鏡檢查，胃底靜脈曲張輕度。
病例2陳××，男，41歲，慢乙肝11年，2003年3月查HBV-M“HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)”，肝功能正常，B超示門靜脈內徑14mm，門靜脈流速15mm/s，脾臟體積115mm×37mm，胃鏡可見食道靜脈曲張中度。開始服用扶正化瘀膠囊。
1年后查，門靜脈內徑12mm，門靜脈流速19mm/s，脾臟體積112mm×35mm，食道靜脈曲張輕度，連續服用2年后，2005年3月查，門靜脈內徑12mm，門靜脈流速21mm/s，脾臟體積101mm×31mm，食道靜脈曲張消失。
權利要求
1.一種扶正化瘀植物藥組合物在制備治療肝硬化門靜脈高壓癥的植物藥制劑中的應用。
2.根據權利要求1所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應用，其特征在于所述組分包括丹參提取物25-38％、絞股藍提取物20-25％、五味子醇提取物1-6％、蟲草菌絲體提取物19-26％、松花粉提取物6-8％、桃仁提取物6-10％、加入輔料而成。
3.根據權利要求1所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應用，其特征在于所述的制備步驟(1)按組分配比稱取丹參、桃仁、絞股藍加水煎煮，合并濾液，取上清液，濃縮成浸膏，冷卻，加乙醇，使含醇量達70％，靜置，濾過，取濾液濃縮并干燥；(2)稱取發酵蟲草菌粉，五味子加乙醇熱回流，冷卻，合并乙醇液，濾過，濾液濃縮干燥；(3)稱取松花粉乙醇溫浸，合并干燥成干膏，(4)取上述三種干膏，混合粉碎，加淀粉，混勻，制備成復方制劑。
4.根據權利要求1所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應用，其特征在于對哺乳類肝臟的肝細胞變性、壞死，肝內出血、纖維增生有改善。
5.根據權利要求1所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應用，其特征在于哺乳類門靜脈壓力顯著下降。
全文摘要
本發明涉及一種扶正化瘀植物藥組合物在治療肝硬化門靜脈高壓癥中的應用，組合物包括丹參提取物25－38％、絞股藍提取物20－25％、五味子醇提取物1－6％、蟲草菌絲體提取物19－26％、松花粉提取物6－8％、桃仁提取物6－10％、加入輔料而成。制備步驟包括按組分配比稱取丹參、桃仁、絞股藍加水煎煮，靜置，濾干燥；稱取發酵蟲草菌粉，五味子加乙醇熱回流，冷卻濾過干燥；稱取松花粉乙醇溫浸，合并干燥成干膏，取上述三種干膏，混合粉碎，加淀粉，混勻，制備成復方制劑。本發明對哺乳類肝臟的肝細胞變性、壞死，肝內出血、纖維增生都有明顯改善，門靜脈壓力顯著下降。
文檔編號A61P1/00GK101045092SQ20071004033
公開日2007年10月3日 申請日期2007年4月29日 優先權日2007年4月29日
發明者徐列明, 劉成 申請人:上?，F代中醫藥技術發展有限公司