專利名稱：含利培酮的緩釋微球及其制備方法
技術領域：
本發明涉及抗精神病藥物利培酮(risperidone)的緩釋微球及 其制備方法。
背景技術：
利培酮是一種具有獨特性質的選擇性單胺拮抗劑，它與5-HT2(5 -羥色胺)受體和多巴胺D2受體有很高的親和力。利培酮也能與otl -腎上腺素受體結合，并且以較低的親和力與Hl-組胺受體和ot2-腎上腺素受體結合。利培酮不與膽堿能受體結合。利培酮是強有力的 D2拮抗劑，可以改善精神分裂癥的陽性癥狀，但它引起的運動功能抑 制以及強直性昏厥都要比經典的抗精神病藥少。對中樞系統的5-羥
色胺和多巴胺拮抗作用的平衡可以減少發生錐體外系副作用的可能， 并將其治療作用擴展到精神分裂癥的陰性癥狀和情感癥狀.
利培酮在體內部分代謝成9-羥基利培酮，后者與利培酮有相似 的藥理作用。該藥的消除半衰期為3小時左右，9-羥基利培酮的消除 半衰期為24小時。目前國內市場上的片劑、膠嚢均需一天服用兩次， 不能解決精神病人需要長期服藥而且依從性差的問題。因此，研究既 能長期緩釋利培酮制劑具有重要意義。其中，微球作為一種制劑新技 術，具備了緩釋或控釋藥物以及靶向給藥等優點。制備微球所用的載 體材料可分為天然、半合成和合成的高分子材料。近年來，合成高分 子材料因其生物相容性良好，可生物降解吸收，在體內較穩定，降解 期可調控等優點而受到廣泛重視，是一種理想的微球制備材料。其中， 可生物降解的合成高分子材料乳酸/羥基乙酸共聚物 (poly
lactic-co-glycolic acid， PLGA)受到普遍的重視并得到廣泛的應 用。英國于2003年上市的利培酮長效注射液，采用LA/GA比例為"J5的PLGA，緩釋2周，價格將近90英鎊，比較昂貴。而且通過實 驗發現，利培酮經"Co照射滅菌后容易變色，然而，微球制劑不耐高 溫，目前的滅菌方法只有兩種， 一種是全過程實行無菌操作，另一種 是，o照射。前者的成本很高，而且在國內尚很難實現。
所以本發明通過篩選了多種穩定劑，并篩選了 ，o照射的劑量， 即達到了微球的滅菌效果，而且成功地解決了單純的利培酮的PLGA 微球經"Co照射后容易變色的問題。

發明內容
本發明的目的在于提供一種以PLGA為基質材料，表面光滑圓整， 顆粒規則無粘連，微球的平均粒徑在30,以下可控，載藥量和包封 率高，緩釋期在4周以上，且利培酮經"Co照射后穩定的利培酮緩釋 微球及其制備方法。
本發明第一方面涉及一種緩釋微球制劑，其包括利培酮，PLGA及 穩定劑和/或附加劑。
本發明另 一方面涉及制備緩釋微球制劑的方法，它采用乳化-溶劑 揮發法制備的，其特征在于將活性藥物利培酮和可生物降解的藥用高 分子輔料以及附加劑溶于有機溶劑配制成有機相，所述有機溶劑選自 二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、曱醇、苯甲醇、丙酮或二者混合液；另 外配制連續水相，將非離子型乳化劑溶于水中，它們在水相中的重量 百分數為0.1-12%,所述非離子型乳化劑選自聚乙烯醇、聚乙烯吡咯 烷酮、羧曱基纖維素鈉、聚丙烯酸鈉或聚曱基丙烯酸鈉、明膠、西黃 芪膠。單乳法制備微球的步驟是高分子輔料和/或其它附加劑等加入 到二氯甲烷或混合溶劑中，待完全溶解并勻化后加入到以每分鐘 400-5000轉(rpm)攪拌的適宜濃度的連續相溶液中，形成乳液后，適 當稀釋連續相溶液，繼續以較低的速度攪拌約4小時，揮發有機溶劑。 然后，以4000-15000rpm離心、洗滌收集微球，進行真空干燥或冷凍 干燥即得微球干粉。復乳法制備微球的步驟是將高分子輔料加入到 一種或一種以上的有機溶劑中，待完全溶解并勻化后作為油相，將藥物溶解或混懸于水性溶液中作為內水相，將內水相加入到油相中后高
速攪拌形成初乳，然后加入到以每分鐘400-5000轉攪拌的適宜濃度的 連續相溶液(加鹽)中，繼續攪拌形成乳液后，將連續相溶液稀釋至 一定倍數，以較低的速度攪拌約4小時，揮發有機溶劑。然后，離心、 洗滌收集微球，進行真空干燥或冷凍干燥即得微球干粉，經輻射滅菌。 本發明微球基質材料選用PLGA，其分子量為4. 0xl03-6 xio4， PLA: PGA質量百分比為10:90-90: 10,有機溶劑選自二氯甲烷、氯仿、 乙酸乙酯、乙醇、甲醇、苯曱醇或丙酮中的一種或者兩者的混合后的 溶劑。
本發明采用普通電磁攪拌器或者機械攪拌，其攪拌速度為 400-5000rpm，外水相中無機鹽的濃度可在0 - 10. 0g/100ml，也可適
當增加。
采用本發明方法所制各微球表面光滑圓整，顆粒規則無粘連(圖 l，圖2)，平均粒徑在30nm以下可控(圖3)，載藥量和包封率高，緩釋 期在4周以上，其體外釋藥曲線較為光滑平坦(圖4)，
本發明所述的緩釋微球制劑在生產時制備成注射用粉針劑，在使 用前由醫護人員將其混懸于注射用溶媒中(通常為含0.2%-1%羧甲基 纖維素鈉與0-0. 2V土溫80的5%甘露醇溶液)后進行注射。
本發明的有益效果是本發明所涉及的微球制備方法筒便易行， 成本較低。所制備的微球的粒徑小，減少了對體內組織的刺激。通過 選用適合的PLA:PGA質量百分比的PLGA為基質材料，提高了利培酮的 包封率，改善了此類微球的粒徑分布，延長了微球在體外的釋藥時間； 通過加入穩定劑，即達到了微球的滅菌效果，而且成功地解決了單純 的利培酮PLGA微球經6°Co照射后由白色變為黃色，而且藥物降解的問 題(圖5)。而且附加劑的加入改善了微球內部的拓樸導結構，優化 了藥物從微球中的累積釋放率，
本發明有別于國外利培酮長效注射液的地方是采用的包裹材料 PLGA中的單體比例不同；微球的成分由藥物、PLGA和附加劑構成；所 制備的微球的粒徑在平均粒徑在30pm以下可控，徑距分布較窄；包封率高，可達90%左右；具有優良的緩釋性能，突釋很小，緩釋期在 4周以上。


圖1利培酮-PLGA緩釋微球凍干粉劑
圖2利培酮-PLGA緩釋微球顯微鏡圖(200 x )
圖3利培酮-PLGA緩釋微球粒徑分布圖
圖4三批利培酮-PLGA緩釋微球體外釋藥曲線(實施例1的方法 制備)
圖5經60Co照射后微球含量的HPLC圖謙(不加入穩定劑) 圖6經60Co照射后微球含量的HPLC圖譜(加入穩定劑后) 圖7實施例1的含18mg利培酮的100mg微球微球在家兔體內的血 藥濃度曲線
圖8含18mg利培酮的普通注射液在家兔體內的血藥濃度曲線
具體實施例方式
實施例1緩釋30天的利培酮微球的制備
取PLGA 1.8g (分子量為20000， LA/GA 60: 40)及叔丁基對羥基 茴香醚(BHA)溶于有機溶劑中制成油相。有機溶劑為二氯曱烷(DCM) 或二氯甲烷和曱醇的混合液。將500mg利培酮樣品溶于上述油相中， 超聲混合均勻。稱取適量PVA于雙蒸水中，水浴50XM吏其充分溶解， 調節使其濃度為5%作為水相。在水相分散介質溶液中加入無機鹽。將 上述油相注入150ml PVA溶液，1500rpm攪拌，5min后將水相PVA的 濃度稀釋為1. 5%,室溫下磁力攪拌3-5小時，即得利培酮微球混懸液。 然后洗滌、離心、干燥。平均粒徑10nm左右。
實施例2緩釋45天的利培酮微球的制備
取PLGA 1. 8g (分子量為25000, LA/GA 90: 10 )及BHA溶于有機 溶劑中制成油相。有機溶劑為二氯曱烷(DCM)或二氯甲烷和曱醇的混合液。將500mg利培酮樣品溶于上述油相中，超聲混合均勻。稱取適量 PVA于雙蒸水中，水浴50t:使其充分溶解，調節使其濃度為5%作為水 相并在水相分散介質溶液中加入無機鹽。將上述油相注入150ml PVA 溶液，1500rpm攪拌，5min后將水相PVA的濃度稀釋為1.5%，室溫下 磁力攪拌3-5小時，即得利培酮微球混懸液。然后洗滌、離心、干燥。 平均粒徑15jim左右。
實施例3 單乳法制備利培酮微球
取PLGA 1.8g (分子量為20000， LA/GA 60:40 )溶于有機溶劑中 制成油相。有機溶劑為乙酸乙酯(DCM)或乙酸乙酯和甲醇的混合液。將 500mg利培酮樣品溶于上述油相中，超聲混合均勻。稱取適量PVA于 雙蒸水中，水浴501C使其充分溶解，調節使其濃度為5%作為水相，并 在水相分散介質溶液中加入無機鹽。將上述油相注入150ml PVA溶液， 1500rpm攪拌，5min后將水相PVA的濃度稀釋為1.5%，室溫下磁力攪 拌3-5小時，即得利培酮微球混懸液。然后洗滌、離心、干燥后加入 少量的甲硫氨酸溶液，凍干。
實施例4 未加附加劑的微球的制備
取PLGA (LA/GA 50: 50 )溶于有機溶劑中制成油相。有機溶劑為 乙酸乙酯(DCM)或乙酸乙酯和甲醇的混合液。將利培酮樣品溶于上述油 相中，超聲混合均勻。稱取適量PVA于雙蒸水中，水浴S01C使其充分 溶解，調節使其濃度為5%作為水相，并在水相分散介質溶液中加入無 機鹽。將上述油相注入150ml PVA溶液，1500rpm攪拌，5min后將水 相PU的濃度稀釋為1. 5%，室溫下磁力攪拌3-5小時，即得利培酮微 球混懸液。然后洗滌、離心、干燥。
實施例5 復乳法制備利培酮微球(水/油/水)
取PLGA1.8g溶于有機溶劑中制成油相。將利培酮溶于0. 1N的鹽 酸溶液中作為內水相，將此溶液加入油相中，高速勻漿攪拌后作為初乳。稱取適量PVA于雙蒸水中，水浴50'C使其充分溶解，調節使其濃 度為5%作為水相，并在水相分散介質溶液中加入無機鹽。將上述初乳 注入150ml PVA溶液，1500rpm攪拌，5min后將水相PVA的濃度稀釋 為1.5%,室溫下磁力攪拌3-5小時，即得利培酮微球混懸液。然后洗 滌、離心、干燥。
實施例6復乳法制備利培酮微球(固/油/水)
取PLGA1.8g溶于有機溶劑中制成油相。將利培酮500mg混懸于 2ml明膠溶液中，高速攪拌后作為內水相，將此溶液加入油相中，高 速勻漿攪拌后作為初乳。稱取適量PVA于雙蒸水中，水浴50TC使其充 分溶解，調節使其濃度為5%作為水相，并在水相分散介質溶液中加入 無機鹽。將上述初乳注入150ml PVA溶液，1500rpm攪拌，5min后將 水相PVA的濃度稀釋為1. 5%，室溫下磁力攪拌3-5小時，即得利培酮 微球混懸液。然后洗滌、離心、干燥。
實施例7 實施例1的微球及普通含利培酮注射液在家兔體內的血藥 濃度比較
取6只重量在2. Okg~ 3. 5kg的新西蘭大耳白兔，其中3只經肌肉 注射含18mg利培酮注射液1.2mL，分別于lh， 1. 5h， 2h, 3h， 5h， 6h， 8h， 9h， 10h， 12h， 16h， 24h耳緣靜脈取血樣1. 5mL;另3只新西蘭 大耳白兔同樣肌肉注射含18mg的100mg微球(該微球可按實施例1 方法制備)的1. 2ml含0. 5%CMC水溶液的混懸液，分別于第4h， 10h， ld， 2d， 3d, 5d， 7d， 14d， 21d， 28d， 35d及40d耳緣靜脈取血樣 1.5mL。所有采集的血樣均于8， 000rpm離心10min后取上清液-"70t;凍 存，然后采用本領域已知方法測上述所有血樣中利培酮的血藥濃度， 結果見圖7和圖8。由圖7和圖8可看到，本發明的微球顯示出良好
的緩釋作用。
權利要求
1.一種緩釋微球制劑，其包括利培酮，PLGA及穩定劑。
2. 權利要求l的緩釋制劑，其中利培酮為利培酮，羥基利培酮或 它們的藥用酸或鹽的形式，PLGA分子量為4. 0xl03-6xl()4道爾頓，LA:GA 的質量百分比為10: 90-90: 10。
3. 權利要求1或2的緩釋制劑，其中PLGA分子量為20000道爾 頓，LA/GA為60: 40,
4. 權利要求1或2的緩釋制劑，其中PLGA分子量為25000道爾 頓，LA/GA為90: 10。
5. 緩釋微球的制備方法，其包括將藥物利培酮、PLGA和/或其 它附加劑等加入到 一種或 一種以上的有機溶劑中，待完全溶解并勻化 后加入到以每分鐘400-5000轉攪拌的適宜濃度的連續相溶液(加鹽) 中，繼續攪拌形成乳液后，將連續相溶液稀釋至一定倍數，以較低的 速度攪拌約4小時，揮發有機溶劑；然后，以4000-15000rpm離心、 洗滌收集微球，進行真空干燥或冷凍干燥即得微球干粉，經輻射滅菌； 或將高分子輔料PLGA加入到一種或一種以上的有機溶劑中，待完全 溶解并勻化后作為油相，將藥物利培酮溶解或混懸于水性溶液中作為 內水相，將內水相加入到油相中后高速攪拌形成初乳，加入到以每分 鐘400-5000轉攪拌的適宜濃度的連續相溶液(加鹽)中，繼續攪拌形 成乳液后，將連續相溶液稀釋至一定倍數，以較低的速度攪拌約4小 時，揮發有機溶劑；然后，離心、洗滌收集微球，進行真空干燥或冷 凍干燥即得微球干粉，經輻射滅菌。
6. 根據權利要求5的方法，其中所述的活性藥物利培酮包括利培 酮、羥基-利培酮、或其藥用的酸和鹽的形式。
7. 根據權利要求6的方法，其特征為微球基質成分中PLA:PGA 質量百分比為10: 90-90: 10，并且其分子量為4. 0 xi03-6xl04。
8. 根據權利要求6的方法，所加的附加劑包括助溶劑、穩定劑、防腐劑，包括叔丁基對羥基茴香醚(BHA) ， 二丁曱苯酚(BHT)， 培酸丙酯(PG),生育酚，肉豆蔻酸異丙酯，亞硫酸鈉，亞硫酸氬鈉， 焦亞硫酸鈉，硫代硫酸鈉，硫脲，半膀氨酸，蛋氨酸，硫代乙酸，硫 代甘油，所述有機溶劑選自二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、苯 曱醇、丙酮；或者是二者的混合液，水相分散介質是將非離子型乳化 劑溶于水中，它們在水相中的重量百分數為0.1-12%,所述的非離子 型乳化劑選自聚乙晞醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯
9. 根據權利要求5的方法，其特征為勻化方式包括渦旋混合、超 聲和高速勻漿、每次勻化時間為5s-3min，攪拌方式包括機械攪拌和 磁力攪拌，每次攪拌混合時間30s-8min左右。
10. 根據權利要求5的方法，連續相中的無機鹽選自無水碳酸鈉、 氯化鈉、糖類，水相中無機鹽的濃度可在0- 10. Og/1 OOml，也可適 當增加。
11. 根據權利要求5的方法，輻射滅菌的方式包括6°Co照射或137Cs 照射，滅菌劑量為25xlQ4-250 xl(r拉德。
全文摘要
本發明涉及抗精神病藥物利培酮(risperidone)的緩釋微球及其制備方法。
文檔編號A61K47/34GK101292960SQ20071010231
公開日2008年10月29日 申請日期2007年4月27日 優先權日2006年4月29日
發明者梅興國, 王襄平 申請人:中國人民解放軍軍事醫學科學院毒物藥物研究所