專利名稱：飽和脂肪鏈醇rgd五肽雙酯化合物及其合成方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及飽和脂肪鏈醇和寡肽綴合而得的酯類化合物，尤其涉及飽和脂肪鏈醇 與RGD肽的羧端綴合而得的飽和脂肪鏈醇RGD五肽酯類化合物，本發明還涉及該飽和脂肪 鏈醇RGD五肽酯化合物的合成方法以及該飽和脂肪鏈醇RGD五肽酯化合物作為抗血栓劑、 藥物載體或藥物靶向制劑材料的應用，屬于生物醫藥領域
背景技術：
在未來的5年到10年基因治療會有可把基因傳送至細胞的理想載體。從生物制 劑的立場看，基因轉導系統就是藥物釋放系統(DDS)。有多種化學合成的小分子構建的基因 轉導系統受到關注，其中陽離子脂質構成的基因轉導系統是關注熱點。陽離子脂質在藥學 領域遍用于構建脂質體運載小分子(包括多肽)藥物。與在DDS中一樣，在基因轉導系統 中陽離子脂質體有明顯好處，例如可通過電荷吸附與DNA形成復合物并有效避免被細胞內 溶酶體降解、可將DNA高效導入細胞、對DNA的尺寸沒有限制、操作簡便等。陽離子脂質的 基本構造如下，包括高級脂肪鏈構成的疏水臂和親水的陽離子頭。 陽離子脂質的基本構造細胞黏附在細胞黏附性疾病(癌轉移、血栓形成、化學致炎和骨質疏松)的發展過 程中起關鍵作用。調節性糖蛋無例如RGD肽與整合素受體有很強的結合能力，可參與細胞 黏附過程。例如RGD肽與血小板、腫瘤細胞及骨基表面的GP Ilb/IIIa受體特異性結合可 干預血栓、癌轉移和骨質疏松的發展過程。RGD肽的這種作用賦予了含RGD序列的化合物一 種重要性質，即含RGD序列的化合物可以向血栓、癌轉移和骨質疏松的患病部位富集。在這 樣一個前提下，把RGD肽與高級脂肪鏈綴合，便可以獲得靶向藥質體。

發明內容
本發明目的之一是提供一類飽和脂肪鏈醇和RGD五肽的雙酯化合物；本發明目的之二是提供一種合成上述飽和脂肪鏈醇和RGD五肽的雙酯化合物的 方法；本發明目的之三是將飽和脂肪鏈醇和RGD五肽的雙酯化合物應用于抗血栓劑、藥 物載體或藥物靶向制劑材料；本發明的上述目的是通過以下技術方案來實現的
一類飽和脂肪鏈醇和RGD五肽的雙酯化合物，其結構式為通式I所示 其中，ηι是7、9或11 ;n2是9、11或13 ；AA選自苯丙氨酸，絲氨酸或纈氨酸；本發明的目的之二是提供一種合成上述飽和脂肪鏈醇和RGD五肽的雙酯化合物 的方法。本發明的目的之二是通過以下技術方案來實現的(1)按照現有液相接肽技術分別合成保護基保護的RGDSE、RGDVE和RGDFE ；(2)將 CH3 (CH2) 8CH20H、CH3 (CH2) 10CH2OH 或 CH3 (CH2) 12CH20H 中的任意一種以及 CH3 (CH2) 6CH20H、CH3 (CH2) 8CH20H或CH3 (CH2) 10CH2OH中的任意一種各自與保護基保護的 RGDSE、RGDVE或RGDFE寡肽中的的谷氨酸羧端偶聯，脫去保護基，即得。本發明結合了下述認識或依據完成了上述技術方案把基因傳送至細胞的理想載 體(基因轉導系統)是基因治療的關鍵任務之一，從生物制劑的立場看基因轉導系統與藥 物釋放系統(DDS)具有等同性，雖然有多種化學合成的小分子構建的基因轉導系統都受到 關注但是格外看好陽離子脂質構成的基因轉導系統，陽離子脂質體可通過電荷吸附與DNA 形成復合物并有效避免被細胞內溶酶體降解，陽離子脂質體可將DNA高效導入細胞，陽離 子脂質體對DNA的尺寸沒有限制，以及含RGD序列的化合物可以向血栓、炎癥、癌轉移和骨 質疏松的患病部位富集。本發明人基于上述認識，把CH3 (CH2) 8CH20H、CH3 (CH2) 10CH2OH 或 CH3 (CH2) 12CH20H 中的 任意一種以及CH3 (CH2) 6CH20H、CH3 (CH2) 8CH20H或CH3 (CH2) 10CH2OH中的任意一種各自與保護 基保護的RGDSE、RGDVE或RGDFE寡肽中的的谷氨酸羧端偶聯，使制得的分子獲得四種性能， 即依賴于飽和脂肪鏈醇烷基鏈的疏水性、依賴于RGD肽的胍基和α -氨基質子化形成的陽 離子性質和親水性和依賴于RGD肽對GP Ilb/IIIa受體特異親和作用獲得的靶向性。這樣 一來，把RGD五肽與飽和脂肪鏈醇綴合制得的分子便成為飽和脂肪鏈醇RGD五肽雙酯。在大鼠血栓形成模型上的評價表明，本發明飽和脂肪鏈醇RGD五肽雙酯化合物具 有優秀的口服抗血栓活性，可作為抗血栓劑應用；在水相檢測了本發明飽和脂肪鏈醇RGD 五肽雙酯化合物自組裝成為納米顆粒的性能，試驗結果表明，本發明飽和脂肪鏈醇R⑶五 肽雙酯化合物具有優秀的自組裝性能，可作為制備微乳、脂質體等的制劑材料；因為本發明 飽和脂肪鏈醇RGD五肽雙酯的抗血栓活性來自RGD肽對GPIIb/IIIa受體特異親和作用，所 以這種抗血栓活性又表征了本發明飽和脂肪鏈醇RGD五肽雙酯化合物的靶向性，所以本發 明飽和脂肪鏈醇RGD五肽雙酯化合物可作為靶向制劑材料。本發明的又一目的是提供一種含有本發明飽和脂肪鏈醇RGD五肽雙酯化合物的 藥用組合物，該藥用組合物由治療上有效劑量的本發明飽和脂肪鏈醇RGD五肽雙酯化合物 與藥學上可接受的賦型劑或者輔加劑組成；即將有效量的本發明化合物與藥學上可接受 的載體或稀釋劑配合后，按本領域常規的制劑方法將其制備成任意一種適宜的藥物組合 物。通常該組合物適合于口服給藥和注射給藥，也適合其他的給藥方法。該組合物可以是 片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、錠劑、栓劑，或口服液等液體制劑形式。根據不同的給藥方法， 本發明藥物組合物可以含有0. 1% -99%重量，優選10-60%重量的本發明化合物。
本發明所涉及到的氨基酸的縮略術語的說明R(Arg)精氨酸G(Gly):甘氨酸D(Asp)天冬氨酸E(Glu)谷氨酸F(Phe):苯丙氨酸；S(Ser):絲氨酸；V(Val)纈氨酸


圖1本發明飽和脂肪鏈醇RGD五肽雙酯化合物的合成路線圖；i)DCC，HOBt，NMM ； ii)4N HCl-EtOAc ；iii)H2, Pd/C，4N HCl/EtOAc ；iv)H2, Pd/C ；其中 AA = Phe，Val 或 Ser。圖2由透射電鏡描述的本發明代表性化合物在水相組裝的納米球。圖3由掃描電鏡描述的本發明代表性化合物組裝的納米球。
具體實施例方式為了進一步闡述本發明，下面給出一系列實施例。這些實施例完全是例證性的，它 們僅用來對本發明進行具體描述，不應當理解為對本發明的限制。實施例IRGDFE (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備1) Boc-Arg (N02)-Gly-OBzl 的制備稱取0. 867g (2. 7mmol) Boc-Arg (N02)于 IOOml 茄瓶中，用 3ml 無水 DMF 溶解，再加 適量無水THF。然后，加入0. 367g(2. 7mmol)N-羥基苯并三氮唑(HOBt)，并使完全溶解。冰 浴下加入0. 615g(2. 9mmol) 二環己基羰二亞胺(DCC)，攪拌10分鐘左右，得到反應液(I)， 待用。將0. 961g(2. 8mmol)Tos 'Gly-OBzl用5ml無水DMF溶解，然后加入Iml N-甲基嗎啉 (NMM)JfpH 8-9，得到反應液(II)。冰浴下把反應液(II)加入反應液(I)中，先冰浴下攪 拌lh，再室溫攪拌24h，TLC (氯仿甲醇=10 1)顯示Boc-Arg (NO2)消失。濾除二環己 基脲(D⑶)，濾液吹去DMF。殘留物用50ml氯仿溶解。得到的溶液依次用5% NaHCO3水溶 液、飽和NaCl水溶液、5% KHSO4水溶液和飽和NaCl水溶液洗。氯仿層用無水Na2SO4干燥。 6小時后過濾，濾液減壓濃縮至干，得到1. lg(86.88%)標題化合物，為無色固體。[a]2°D =-4. 31 (c = 2，CH3OH) ；Mp 72-73°C ；ESI—MS (m/z) 467 [M+H] +2) Boc-Arg (N02) -Gly-OH 的制備將1. Ig(2. 3mmol)Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 溶于 IOml 甲醇。冰浴下將得 到的溶液用NaOH (2N)水溶液調pH12并攪拌2h，TLC (氯仿甲醇=5 1)顯示 Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl消失。反應混合物用飽和KHSO4調pH = 7，減壓濃縮除甲醇。殘留 物用飽和KHSO4調pH = 2，用乙酸乙酯萃取3次。合并乙酸乙酯相，用無水Na2SO4干燥。過 濾，濾液減壓濃縮至干，得0. 792g(90% )標題化合物，為無色固體。[a ]2°d = _2. 1644 (c = 1，CH3OH) ；Mp 99-99°C ；ESI—MS (m/z) 375 [Μ—ΗΓ3) Boc-Glu (OBzl) _0 (CH2) 13CH3 的制備按照Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法由 4. 95g(14. 2mmol)Boc-Glu(OBzl)和
53g(14. 6mmol)肉豆蔻醇(十四醇)得到6. 68g(89% )標題化合物，為無色蠟狀物。[a]2°D =-17. 60 (c = 1，CH3OH) ；Mp 37-38°C ；ESI-MS (m/z) 534 [M+H] +4) Boc-Glu-O (CH2) 13CH3 的制備將3.74g (7mmol)Boc-Glu(OBzl)-O(CH2)13CH3 用甲醇溶解，加 Pd/C 0. 748g (20 % )，并向反應液中加無水甲酸5-6滴，通H2 (0. 02Mba)，室溫攪拌至原料點消 失。濾除Pd/C、濾液減壓濃縮，得到2. 67g(86%)標題化合物，為透明油狀物。[a]2°D =-23. 36 (c = 1, CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 466 [M+Na] +5) Boc-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備將2. 12g (4. 7mmol) Boc-Glu-O (CH2)13CH3 用無水 THF 溶解，冰浴下加入 0. 646g(4. 7mmol)N-羥基苯并三氮唑(HOBt)，并使完全溶解。然后加入1. 035g(5. Ommo 1) 二環己基羰二亞胺(DCC)，反應混合物冰浴攪拌10分鐘，得對應的活潑酯溶液(I)，待用。將0. 907g(4. 8mmol)月桂醇(十二醇)用無水THF溶解，然后加入Iml N-甲基嗎 啉(NMM)JfpH 8-9，得到反應液(II)。冰浴下把反應液(II)加入反應液(I)中，得到的反 應混合物室溫攪拌24h。TLC (展開劑CHCl3 MeOH = 30 1)顯示有產物點生成，反應基 本完全。濾除二環己基脲(D⑶)，反應混合物減壓濃縮至干，殘留物用乙酸乙酯溶解，濾除 不溶物。得到的溶液依次用5% NaHCO3水溶液、飽和NaCl水溶液洗、5% KHSO4水溶液洗和 飽和NaCl水溶液洗。酯層用無水Na2SO4干燥、過濾、濾液減壓濃縮至干，得到2. 67g(91% ) 標題化合物，為無色蠟狀物。[a]2°D = -39. 60 (c = 1，CH3OH) ；Mp 38-39 °C ； ESI-MS (m/ z)612[M+H] +6) HCl · Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備將0. 688g(l. Immo 1)Boc-Glu(OC12H25)-O(CH2) 13CH3 溶解在 5ml 氯化氫-乙酸乙 酯(4N)溶液中，室溫攪拌2小時，TLC(展開劑CHCl3 MeOH = 15 1)顯示原料點消 失，減壓濃縮除去乙酸乙酯，殘留物反復用少量乙醚進行減壓濃縮以除去氯化氫，最后 0.610g(99%)標題化合物，為凝膠狀物，直接用于下一步反應。[a]2°D = -27.43(c= 1， CH3OH) ；Mp 71-720C ；ESI-MS(m/z)512[M+H] +7) Boc-Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 265g (Immol) Boc-Phe 和 0. 135g(Immol)HCl · Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 74g(100% )標題化合物，為淡黃色蠟狀 物。[a ]2°d = -11. 83 (c = 1，CH3OH) ；Mp 42-43 °C ；ESI-MS (m/z) 759 [M+H]+8) HCl · Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 74g(0. 9mmol) Boc-Phe-Glu (OC12H25) -0 (CH2) 13CH3制得0. 680g(99% )標題化合物，為黃色油狀物，直接用 于下一步反應。[a ]2°d = "20. 83 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 659 [M+H]+9) Boc-Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 323g (Immol) Boc-Asp (OBzl)和 0. 680g(0. 9mmol)HCl · Phe-Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 90g(95% )標題化合物，為淡黃 色油狀物。[a J20d = -14. 60 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z)964[M+H] +10) HCl · Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按HCl 'Glu(OC12H25) -0 (CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 90g(0. 9mmol) Boc-Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CHjI^O. 87g(99% )標題化合物，為淡黃色油狀物，直接用于下 一步反應。[a ]2CID = -11. 70(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS(m/z)864[M+H] +11) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 374g(Immol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 0. 879g(0. 9mmol)HCl .Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 1. 170g(98% )標題化合 物，為無色固體。[a ]2Cid =-75. 06(c = 1，CH30H) ；Mp 140_142°C;ESI_MS(m/z) :1222[M+H] +12) Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 [RGDFE (OC12H25) -0 (CH2) 13CH3]的制 備將0. 5g (0. 48mmol) Boc-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) -O (CH2) 13CH3置于IOOml茄形瓶中，用甲醇溶解。加0.10g Pd/C (20 % )、通H2 (0. 02Mba)，室溫攪拌 至原料點消失。濾除Pd/C、濾液減壓濃縮至干，加5ml氯化氫-乙酸乙酯(4N)溶液，室溫攪 拌2小時，TLC顯示原料點消失，減壓濃縮除去乙酸乙酯，殘留物反復用少量乙醚進行減壓 濃縮以除去氯化氫氣。最后加少量乙醚將殘留物研磨成0.37g(93%)標題化合物，為無色 固體粉末。[a ]2Cid = -18. 13 (c = 1，CH3OH) ；Mp 181_182°C ；ESI-MS (m/z) 987 [M+H] +實施例2RGDSE (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備1)Boc-Ser (Bzl)-Glu(OC12H25)_0(CH2) 13CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 335g(l. lmmol)Boc-Ser (Bzl)和 0. 610g(l. ImmoDHCl · Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 816g(93% )標題化合物，為淡黃色蠟 狀物。[a ]2°d = -17. 40 (c = 1，CH3OH) ；Mp 37-39 °C ；ESI-MS (m/z) 789 [M+H] +2)HCl · Ser (Bzl)-Glu(OC12H25)_0(CH2) 13CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 816g(0. 8mmol)Boc-Ser (Bzl) -Glu (OC12H25)-O(CH2)13CHji^O. 680g(99% )標題化合物，為黃色油狀物，直接用于下一步 反應。[a J20d = -13. 06 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 689 [M+H] +3) Boc-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 305g(0. 94mmol)Boc-Asp (OBzl)和 0. 671g(0. 92mmol)HCl · Ser (Bzl)-Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 897g(97% )標題化合物， 為淡黃色油狀物。[a ]2°d = "22. 26 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 994 [M+H]+4) HCl · Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 897g(0. 9mmol) Boc-Asp (OBzl )-Ser (Bzl)-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CHjS^O. 860g(99% )標題化合物，為淡黃色油狀物，直 接用于下一步反應。[a J20d = -14. 50 (c = 1, CH3OH) ；ESI-MS (m/z)894[M+H] +5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 354g(0. 94mmol)Boc-Arg(N02) -Gly 和 0. 860g(0. 92mmol)HCl .Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OC12H25)-0(CH2) 13CH3得 0. 952g(82% ) 標題化合物，為無色固體。[α J20d = -36. 96 (c = 1，CH3OH) ；Mp 117-120 °C ； ESI-MS (m/ ζ)1252[M+H]+6) Arg-Gly-Asp-Ser (Bzl) -Glu (OC12H25) -O (CH2) 13CH3 [RGDSE (OC12H25) -0 (CH2) 13CH3] 的制備按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 5g(0. 48mmol)
7Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 制得 0. 32g(93 % )標 題化合物，為無色固體粉末。[a ]2°d = -15. 50 (c = 1，CH3OH) ；Mp 142-143 °C ； ESI-MS (m/ z)927[M+H] +實施例3RGDVE (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備1) Boc-Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 246g (1. lmmol) Boc—Val 禾口 0. 610g(l. lmmol)HCl · Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 760g(96% )標題化合物，為淡黃色蠟 狀物。[a J20d = -30. 23 (c = 1，CH3OH) ；Mp 41. 1-42. 5 °C ；ESI-MS (m/z) 711 [Μ+Η] +2) HCl · Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 760g (0. 8mmol) Boc-Val-Glu (OC12H25) -0 (CH2) 13CH3制得0.671g(99% )標題化合物，為黃色油狀物，直接用 于下一步反應。[a J20d = -9. 76 (c = 1，CH3OH) ；ESI—MS (m/z) 610 [Μ+Η] +3) Boc-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 343g (lmmol) Boc-Asp (OBzl)和 0. 674g(lmmol)HCl · Val-Glu(OC12H25)-0(CH2) 13CH3 得 0. 932g(97% )標題化合物，為淡黃色 油狀物。[a J20d = -30. 76 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 916 [Μ+Η]+4) HCl · Asp (OBzl) -Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按HCl 'Glu(OC12H25) -0 (CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 932g (lmmol) Boc-Asp (OBzl) -V al-Glu (OC12H25)-0(CH2)13CH3制得0. 860g(99% )標題化合物，為淡黃色油狀物，直接用于下 一步反應。[a J20d = -23. 06 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 816 [Μ+Η]+ 5) Boc-Arg (Ν02) -Gly-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 396g(lmmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 0. 880g (lmmol) HCl .Asp (OBzl)-Val-Glu (OC12H25)-0 (CH2) 13CH3 得 0. 92g(76% )標題化合物， 為無色固體。[a J20d = -15. 50 (c = 1，CH3OH) ；Mp 128_129°C ；ESI-MS (m/z) 1174 [Μ+Η]+6) Arg-Gly-Asp-Val-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 [RGDVE(OC12H25)-O(CH2)13CH3]的制 備按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC12H25) _0 (CH2) 13CH3 的制備方法，由 0. 5g (0. 48mmol) B oc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Val-Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 制得 0. 37g(93%)標題化合物， 為無色固體粉末。[a J20d = -24. 00 (c = 1，CH3OH) ；Mp 177_178°C ；ESI-MS (m/z) 939 [Μ+Η] +實施例4RGDFE0 (CH2) nCH3 的制備1) Boc-Glu-O (CH2) nCH3 的制備按Boc-Glu-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 5. 47g (IOmmol) Boc-Glu (OBzl) -0 (CH2) nCH3 制得 4. 3g(95% )標題化合物，為透明油狀物。[a ]2°D = -41. 56 (c = LCH3OH) ；ESI-MS (m/ z)438[M+Na] +2) Boc-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 4. 3g (IOmmol) Boc-Glu-O (CH2) nCH3 和 1.69g (IOmmol)正癸醇(十醇)制得5.70g(99% )標題化合物，為透明油狀物。[a]2°D =-21. 10(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 556 [Μ+Η] +3) HCl · Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備
按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 5. 70g(IOmmol) B0c-Glu(OCltlH21)-O(CH2)11CH3制得4. 98g(99% )標題化合物，得油狀物，直接用于下一步反 應。[a ]2°D = -4. 0(c = 1，CH3OH) ；Mp 71_72°C ；ESI-MS(m/z) :456[M+H] +4) Boc-Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 912g (3. 4mmol) Boc-Phe 和 1.66g(3. 3mmol)HCl · Glu (OCltlH21)-0 (CH2) nCH3 得 2. 21g (93% )標題化合物，為淡黃色油狀 物。[α ] 2CID = "20. 30 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 703 [M+H]+5) HCl · Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 2. 21g(3. Immol) B0c-Phe-Glu(OCiciH21)-O(CH2)11CH3制得1. 97g(90% )標題化合物，為黃色油狀物，直接用于 下一步反應。[a]2°D = -13. 83 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 603 [M+H] +6) Boc-Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 1. Olg (3. lmmol) Boc-Asp (OBzl)和
1.97g(3. OmmoDHCl · Phe-Glu(OC10H21)-0(CH2) nCH3 得 2. 651g(95% )標題化合物，為淡黃 色油狀物。[a J20d = -51. 03 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 908 [M+H] +7) HCl · Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備按HCl *Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 2. 65g(2. 9mmol) Boc-Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3制得2. 40g (90 % )標題化合物，為淡黃色油狀物，直接用于下 一步反應。[a J20d = -12. 06 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 808 [M+H] +8) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 1. 09g(2. 8mmol) Boc-Arg (N02) -Gly 和
2.40g(2. 8mmol)HCl .Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC10H21)-0 (CH2) nCH3 得 3. Og (90% )標題化合物， 為無色固體。[a J20d = -19. 36 (c = 1，CH3OH) ；Mp 137_139°C ；ESI-MS (m/z) 1166 [M+H]+9) Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC10H21) -O (CH2) nCH3 [RGDFEO (CH2) nCH3]的制備按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 5g(0. 53mmol) Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 制得 0. 38g(91 % )標 題化合物，為無色固體粉末。[a]2°D = -20. 63 (c = 1，CH3OH) ；Mp 187-188 °C ； ESI-MS (m/ z)931[M+H] +實施例5RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3 的制備l)Boc-Ser (Bzl)-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 1. Olg(3. 4mmol)Boc-Ser (Bzl)和 1. 66g(3. 3mmol)HCl · Glu(OC10H21)-O(CH2)11CH3 得 2. 406g(97% )標題化合物，為淡黃色油 狀物。[a ]2°d = "17. 86 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 733 [M+H]+2) HCl · Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 2. 406g(3. 2mmol)Boc-Ser (Bzl) -Glu(OCltlH21)-O(CH2)11CH3制得2. lg(90% )標題化合物，為黃色油狀物，直接用于下一步反 應。[a ]2CID =-12. 93(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 633 [M+H]+3) Boc-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 1. 03g(3. lmmol) Boc-Asp (OBzl)和2. Ig (3. ImmoDHCl · Ser (Bzl)-Glu (OC10H21)-0 (CH2) nCH3 得 2. 708g(92% )標題化合物，為 淡黃色油狀物。[α ]2°d = "47. 20 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 938 [M+H] +4) HCl · Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 的制備按HCl *Glu (OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 2. 708g(2. 8mmol) Boc-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3制得2. 40g (90% )標題化合物，為淡黃色油狀物，直接 用于下一步反應。[a]2°D = -13. 66 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 838 [M+H] +5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 1. 05g(2. 7mmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 2. 40g(2. 7mmol)HCl · Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 得 2. 96g(90 % ) 標題化合物，為無色固體。[a]2°D = -14. 36 (c = 1，CH3OH) ；Mp 112-113 °C ； ESI-MS (m/ ζ)1196[Μ+Η]+6) Arg-Gly-Asp-Ser (Bzl) -Glu (OC10H21) -O (CH2) nCH3 [RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3] 的制備按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 5g(0. 48mmol) Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 制得 0. 32g(93 % )標 題化合物，為無色固體粉末。[a J20d = -15. 60 (c = 1，CH3OH) ；Mpl52_154°C ； ESI-MS (m/ z)871[M+H] +實施例6RGDVE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3 的制備1) Boc-Val-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 747g (3. 4mmol) Boc-Val 和 1. 66g(3. 3mmol)HCl · Glu (OCltlH21)-0 (CH2) nCH3 得 2. 103g(95% )標題化合物，為淡黃色油 狀物。[a ]2Cid = -31. 63 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 655 [M+H] +2) HCl · Val-Glu (OBzl) -0 (CH2) nCH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 2. 103g (3. 2mmol) B0c-Val-Glu(OCiciH21)-O(CH2)11CH3制得1. 80g(90% )標題化合物，為黃色油狀物，直接用于 下一步反應。[a ]2°D = -9. 0(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 555 [M+H] +3) Boc-Asp (OBzl)-Val-Glu (OCltlH21)-O(CH2)11CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 1. Og (3. Ommol) Boc-Asp (OBzl)和 1. 80g(3. OmmoDHCl · Val-Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 得 2. 597g(99% )標題化合物，為淡黃 色油狀物。[α ] 2°d = "37. 80 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 860 [M+H]+4) HCl · Asp (OBzl) -Val-Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 2. 597g(3. Ommol) Boc-Asp (OBzl PVaI-Glu(OCiciH21)-O(CH2)11CH3制得2. 30g(90% )標題化合物，為淡黃色油狀物，直接用于 下一步反應。[a]2°D = -18. 93 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 760 [M+H] +5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC10H21) _0 (CH2) nCH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 396g(Immol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 0. 880g (Immol) HCl .Asp (OBzl)-Val-Glu (OC10H21)-0 (CH2) nCH3 得 0. 92g(76% )標題化合物， 為無色固體。[a J20d = -26. 73 (c = 1，CH3OH) ；Mp 126_128°C ；ESI-MS (m/z) 1118 [M+H]+6) Arg-Gly-Asp-Val-Glu (OC10H21) -O (CH2) nCH3 [RGDVE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3]的制備
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按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC12H25)-0 (CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 5g(0. 48mmol)B oc-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC10H21) -0 (CH2) nCH3 制得 0. 37g (93 % )標題化合物， 為無色固體粉末。[a J20d = -24. 46 (c = 1，CH3OH) ；Mp 187_189°C ；ESI-MS (m/z) 883 [M+H] +實施例7RGDFE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3 的制備
1) Boc-Glu-O (CH2) 9CH3 的制備按照Boc-GIu-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 2. 97g (6. 2mmol) Boc-G1u(0Bz1)-0(CH2)9CH3 制得 2. 84g(95 % )標題化合物，為透明油狀物。[a J20d =-20. 56 (c = 1, CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 410 [M+Na] +2) Boc-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 2. 84g(7. 3mmol) Boc-GIu-O(CH2)9CH3和 0. 973g(7. 4mmol)正辛醇(八醇)制得3. 568g(97% )標題化合物，為透明油狀物。[a]2°D =-29. 73(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 500 [M+H]+3) HCl · Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 3. 568g (7. Immol) Boc-Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3制得2. 85g (90 % )標題化合物，為油狀物，直接用于下一步反 應。[a ]2CID = -0. 90(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 400 [M+H]+4) Boc-Phe-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 589g (2. 2mmol) Boc-Phe 禾口
0.95g(2. ImmoDHCl · Glu(OC8H17) -O(CH2)9CH3 得 1. 368g(97% )標題化合物，為淡黃色油狀 物。[a ]20d = "18. 13 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 647 [M+H]+5) HCl · Phe-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 1. 368g (2. Immol) B0c-Phe-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1.20g(90% )標題化合物，為黃色油狀物，直接用于 下一步反應。[a ]2CID = "15. 73 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 547 [M+H]+6) Boc-Asp (OBzl)-Phe-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 678g(2. Ommol) Boc-Asp (OBzl)和
1.20g (2. OmmoDHCl .Phe-Glu (OC8H17)-0(CH2)9CH3 得 1. 70g(96% )標題化合物，為淡黃色 油狀物。[a ] 2Cid = "20. 90 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 852 [M+H]+7) HCl · Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 1. 70g(l. 9mmol)Boc-Asp (OBzl) -Phe-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1. 52g(90% )標題化合物，為淡黃色油狀物，直接用于下 一步反應。[a ]2CID = "10. 50 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 752 [M+H]+8) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 740g(l. 9mmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 1. 52g(l. 9mmol)HCl ‘ Asp (OBzl) -Phe-Glu (OC8H17) -0(CH2)9CH3 得 1. 957g(91 % )標題 化合物，為無色固體。[a ]2°D =-21. 56(c = 1，CH3OH) ；Mp 139. 1-141. 2 °C ；ESI-MS (m/ ζ)1110[M+H]+9) Arg-Gly-Asp-Phe-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 [R⑶FE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3]的制備按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 5g(0. 45mmol)Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp (OBz 1)-Ser (Bz 1)-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 制得 0.35g(91 % )標 題化合物，為無色固體粉末。[a]2°D = -20. 20 (c = 1，CH3OH) ；Mpl80-182C ；ESI-MS (m/ z)875[M+H] +實施例8RGDSE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3 的制備1) Boc-Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 656g(2. 2mmol) Boc-Ser (Bzl)和
0.95g(2. ImmoDHCl · Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3 得 1. 401g(95% )標題化合物，為淡黃色油狀 物。[a ]2°d = "18. 63 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 677 [M+H] +2) HCl · Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 1. 401g(2. Ommol)Boc-Ser (Bzl) -Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1. 20g(90% )標題化合物，為黃色油狀物，直接用于下一步反 應。[a ]2CID =-17. 00(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 577 [M+H] +3) Boc-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 645g(l. 9mmol) Boc-Asp (OBzl)和
1.20g(l. 9mmol)HCl · Ser (Bzl)-Glu (OC8H17)-0 (CH2) 9CH3 得 1.70g(98% )標題化合物，為淡 黃色油狀物。[α ] 二 = "53. 63 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 882 [M+H] +4) HCl · Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制備按HCl 'Glu(OC12H25) -0(CH2)13CH3 的制備方法，由 1. 70g(l. 9mmol)Boc-Asp (OBzl)-Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) "0(CH2)9CH3制得1. 50g(90% )標題化合物，為淡黃色油狀物，直接用 于下一步反應。[a ]2°d = "12. 26 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 782 [M+H]+5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 703g(l. 8mmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 1. 50g(l. 8mmol)HCl · Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-Glu (OC8H17)-0 (CH2) 9CH3 得 1. 802g(86 % ) 標題化合物，為無色固體。[α J20d = -15. 46 (c = 1，CH3OH) ；Mp IlO-Ill0C ； ESI-MS (m/ ζ)1140[M+H]+6)Arg-Gly-Asp-Ser(Bzl)-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3[RGDSE(OC8H17)0(CH2)9CH3]的制 備按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 5g(0. 43mmol) Boc-Arg(NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -Glu (OC8H17) -0(CH2)9CH3 制得 0. 32g(91 % )標題 化合物，為無色固體粉末。[a]2°D = -17. 83 (c = 1，CH3OH) ；Mp 149-152 °C ； ESI-MS (m/ z)815[M+H] +實施例9RGDVE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3 的制備1) Boc-Val-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 482g (2. 2mmol) Boc-Val 和 0. 95g(2. ImmoDHCl · Glu(OC8H17) -O(CH2)9CH3 得 1. 284g(98% )標題化合物，為淡黃色油狀 物。[α ] 2CID = "47. 63 (c = 1，CH3OH) ； ESI-MS (m/z) 599 [M+H]+2) HCl · Val-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 1. 284g (2. Immol) B0c-Val-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1. IOg(90% )標題化合物，為黃色油狀物，直接用于下一步反應。[a ]2°D = -8. 4(c = 1，CH3OH) ；ESI-MS(m/z)499[M+H] +3) Boc-Asp (OBzl)-Val-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 的制備按Boc-Arg (NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 678g(2. Ommol) Boc-Asp (OBzl)和 1. IOg (2. OmmoDHCl .Val-Glu (OC8H17)-0 (CH2) 9CH3 得 1. 60g(96% )標題化合物，為淡黃色油 狀物。[a J20d = -44. 16 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z)804[M+H] +4) HCl · Asp (OBzl) -Val-Glu (OC8H17) -0 (CH2) 9CH3 的制備按HCl · Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 1. 60g(l. 9mmol)Boc-Asp (OBzl) -Val-Glu(OC8H17)-O(CH2)9CH3制得1.42g(90% )標題化合物，為淡黃色油狀物，直接用于下 一步反應。[a ]2CID = "22. 76 (c = 1，CH3OH) ；ESI-MS (m/z) 704 [M+H] + 5) Boc-Arg (N02) -Gly-Asp (OBzl) -Val-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 的制備按Boc-Arg(NO2)-Gly-OBzl 的制備方法，由 0. 736g(l. 9mmol)Boc-Arg(N02)-Gly 和 1. 42g(l. 9mmol)HCl .Asp (OBzl)-Val-Glu (OC8H17)-0(CH2)9CH3得 1. 828g(90% )標題化合 物，為無色固體。[α J20d = -15. 10 (c = 1，CH3OH) ；Mp 128_130°C ；ESI-MS (m/z) 1062 [M+H] +6) Arg-Gly-Asp-Val-Glu (OC8H17) _0 (CH2) 9CH3 [R⑶VE (OC8H17) 0 (CH2) 9CH3]的制備按照Arg-Gly-Asp-Phe-Glu(OC12H25)-O(CH2)13CH3 的制備方法，由 0. 5g(0. 47mmol) Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Val-Glu (OC8H17)-O(CH2)9CH3 制得 0. 35g(92% )標題化合物， 為無色固體粉末。[a J20d = -25. 56 (c = 1，CH3OH) ；Mp 193_194°C ；ESI-MS (m/z) 827 [M+H] +試驗例1本發明化合物靜脈給藥的抗血栓活性試驗1)給藥劑量阿斯匹林和本發明化合物(本發明實施例1-9所制備)在給藥前分別配制成生理 鹽水溶液。分為三組，空無對照組、阿斯匹林組和試驗組，其中，空無對照組靜脈給予生理 鹽水(劑量為3ml/kg)、阿斯匹林組靜脈給予阿斯匹林的生理鹽水溶液(劑量為12mg/kg， 66umol/kg)、試驗組靜脈給予本發明化合物的生理鹽水溶液(劑量為lOnmol/kg)。2)大鼠手術與器械SD大鼠(雄性，180 210g)按1. 2g/kg劑量腹腔注射烏拉坦溶液進行麻醉。麻 醉大鼠仰臥位固定，分離右頸總動脈，左側靜脈端，各自于近心端夾動脈夾，近心端和遠心 端分別穿入手術線，將遠心端的手術線結扎，準備插管。3)插管插管為硅烷化過的聚乙烯膠管，分三段，中段為聚乙烯膠管，長60. Omm,內徑 3. 5mm ；兩端為相同的聚乙烯管，管長100. Omm,內徑1. Omm，外徑2. Omm該管的一端拉成尖管 (用于插入大鼠頸動脈或靜脈)，外徑為1.0mm。將編好號的EP管中分別裝入6cm長的黑色 手術線，稱重；然后取出絲線，按照編號放入準備好的插管的中段較粗的插管中。用注射器通過尖管端將管中注滿肝素生理鹽水溶液(50IU/kg)，然后將插管的靜 脈端插入大鼠左側頸靜脈，將計算量的肝素緩緩注入大鼠體內，然后注入計算量的本發明 藥物。夾閉右側頸動脈，動脈遠心端結扎，將插管的動脈端插入分離好的大鼠右頸動脈，打 開動脈夾，使血液開始循環。并同時開始計時。此過程中插管中央的粗管中的絲線上會因 為血液循環而產生血栓。4)血栓稱重計時開始15分鐘后，剪斷動靜脈插管，停止循環，用眼科鑷小心取出絲線，在濾紙上輕輕蘸掉血滴，放入事先稱重好的EP管中，精確稱重并記錄。計算出血栓的濕重。每個 藥品重復10次給藥。統計各組的血栓濕重(Z±SD),并做t檢驗。5)結果結果列入表1。結果表明，在lOnmol/kg劑量下本發明的化合物有很好的抗血栓活 性。可見，本發明化合物都是優秀的抗血栓劑。表1本發明化合物經靜脈給藥的抗血栓活性 η = 10 ；NS =生理鹽水；a與生理鹽水組相比，P < 0. 01 ；試驗例2本發明化合物RGDSE(OCiqH21)O(CH2)11CH3 口服給藥的量效關系1)大鼠手術與器械SD 大鼠(雄性，180 210g)按 10nmol/kg、lnmol/kg、0. lnmol/kg 禾口 0. 01nmol/kg 劑量口服RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3, 30min后按1. 2g/kg-1劑量腹腔注射烏拉坦溶液進行麻 醉。麻醉大鼠仰臥位固定，分離右頸總動脈，于近心端夾動脈夾，近心端和遠心端分別穿入 手術線，將遠心端的手術線結扎，準備在遠心端插管。2)插管插管為硅烷化過的聚乙烯膠管，分三段，中段為聚乙烯膠管，長60. 0mm,內徑 3. 5mm ；兩端為相同的聚乙烯管，管長100. 0mm,內徑1. 0mm，外徑2. Omm該管的一端拉成尖管 (用于插入大鼠頸動脈或靜脈)，外徑為1.0mm。將編好號的EP管中分別裝入6cm長的黑色 手術線，稱重；然后取出絲線，按照編號放入準備好的插管的中段較粗的插管中。打開大鼠右側動脈夾，用注射器通過尖管端將管中注滿肝素生理鹽水溶液 (50IU · kg—1)，然后將插管的動脈端插入大鼠右側頸總動脈，將計算量的肝素緩緩注入大鼠 體內。3)血栓稱重
計時開始15分鐘后，剪斷動靜脈插管，停止循環，用眼科鑷小心取出絲線，在濾紙 上輕輕蘸掉血滴，放入事先稱重好的EP管中，精確稱重并記錄。計算出血栓的濕重。每個 藥品重復12次給藥。統計各組的血栓濕重(X±SD)，并做t檢驗。4)結果經口 服給藥，在 10nmol/kg、lnmol/kg、0. lnmol/kg 和 0. 01nmol/kg 劑量下， RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3劑量依賴地發揮抗血栓作用。結果見表2。表 2 口 服給予 RGDSE (OC10H21) 0 (CH2) nCH3 的量效關系 η = 12 ； IOnmol 與 Inmol 比較，P < 0. 05 ；0. Inmol 與 0. Olnmol 比較，P < 0. 01試驗例3本發明化合物在水相中組裝成為納米球試驗1)本發明9種陽離子藥質體(實施例1-9所制備的化合物)按照10_5mOl/l的濃 度配置成為水溶液，在激光散射納米粒度儀(ZetaPlus JEM-1230)上連續測定8天，觀察粒 徑大小及其穩定性，結果見表3和表4。得到的數據表明，這9種陽離子藥質體在水相中可 以自組裝成為穩定的納米球，因而是優秀的微乳和脂質體藥物的制備材料。表3本發明的9種陽離子藥質體在水中自組裝成為納米球的粒徑 表4本發明的9種陽離子藥質體在水中自組裝成為納米球的粒徑穩定性 2)按照掃描電鏡的測定要求，配置9種陽離子藥質體的水溶液，置于銅網上揮 發干后測定本發明的化合物在水相組裝的納米球的圖。結果表明，由這9種陽離子藥 質體組裝的納米球在掃描電鏡下可以看到均勻的粒狀態。這里給出的是代表性化合物 RGDFE (OC10H21)O(CH2)13CH3 的透射電鏡圖(圖 2)3)按照掃描電鏡的測定要求，配置9種陽離子藥質體的水溶液，冷凍干燥后測定 本發明的化合物的微觀結構和粒徑。結果表明，由這9種陽離子藥質體組裝的納米球在掃 描電鏡下可以看到均勻的粒狀態。這里給出的是代表性化合物RGDFEO(CH2)13CH3的掃描 電鏡圖(圖3)
權利要求
飽和脂肪鏈醇和RGD五肽的雙酯化合物，其結構式為通式I所示通式I其中，n1＝7、9或11；n2＝9、11或13；AA選自苯丙氨酸，絲氨酸或纈氨酸F200910084801XC0000011.tif
2.一種制備權利要求1的飽和脂肪鏈醇和RGD五肽的雙酯的方法，包括(1)分別合成保護基保護的以下寡肽RGDSE、RGDVE、RGDFE；(2)將CH3 (CH2) 8CH20H、CH3(CH2)10CH2OH 或 CH3(CH2)12CH2OH 中的任意一種以及 CH3 (CH2) 6CH20H、CH3 (CH2) 8CH20H或CH3 (CH2) 10CH2OH中的任意一種各自與保護基保護的 RGDSE、RGDVE或RGDFE寡肽中的的谷氨酸羧端相偶聯，脫去保護基，即得。
3.—種藥物組合物，其特征在于由治療或預防上有效量的權利要求1所述的飽和脂 肪鏈醇和RGD五肽的雙酯化合物和藥學上可接受的載體或輔料所組成。
4.權利要求1所述的飽和脂肪鏈醇和RGD五肽的雙酯化合物在制備抗血栓藥物中的用途。
5.權利要求1所述的飽和脂肪鏈醇和RGD五肽的雙酯化合物在制備微乳或脂質體藥物 載體的制劑材料中的用途。
全文摘要
本發明公開了飽和脂肪鏈醇RGD五肽雙酯化合物及其合成方法和應用。將CH3(CH2)8CH2OH、CH3(CH2)10CH2OH或CH3(CH2)12CH2OH中的任意一種以及CH3(CH2)6CH2OH、CH3(CH2)8CH2OH或CH3(CH2)10CH2OH中的任意一種各自與保護基保護的RGDSE、RGDVE或RGDFE寡肽中的谷氨酸羧端相偶聯，脫去保護基，即得本發明化合物。本發明化合物除具有優秀的口服抗血栓活性外，還具有優秀的自組裝性能，可作為制備微乳、脂質體等藥物載體的制劑材料或靶向制劑材料。
文檔編號A61K38/08GK101891801SQ20091008480
公開日2010年11月24日 申請日期2009年5月22日 優先權日2009年5月22日
發明者彭師奇, 趙明, 齊愛平 申請人:首都醫科大學