專利名稱：一種防治肝纖維化的中藥組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥組合物，具體說，是涉及一種防治肝纖維化的中藥組合物及其制備方法和應用，屬于中藥技術領域。
背景技術：
肝纖維化是多種常見慢性肝病(急慢性肝炎、脂肪肝、肝癌等)的共同病理過程， 是慢性肝病向肝硬化發展的必經之路，為影響慢性肝病預后的重要病理因素。慢性乙型肝炎患者均存在不同程度的肝纖維化，最終進展為肝硬化或肝癌。對于慢性乙型肝炎，單純抗病毒治療不能解決大部分慢乙肝的肝纖維化進展問題，尤其是近50%抗病毒無效患者，更易發生肝纖維化，繼而向肝硬化、肝癌方向發展。肝纖維化持續發展導致相應器官功能障礙與衰竭，嚴重危害生命健康，因此，減緩、阻止和逆轉肝纖維化是慢性肝病的重要治療策略。肝纖維化的病因繁多，發病機制錯綜復雜。顯然，對于復雜的病變，僅僅作用于某一單一環節或單個靶點予以治療效果不夠理想。中藥復方由多種化學成分組成，往往具有多環節、多途徑、多層次、多靶點的作用特點，對于器官組織纖維化這種復雜的病理表現，具有整體綜合調節的作用。長期臨床實踐尤其是近年的研究已充分證實，中醫藥在抗肝纖維化治療方面具有非常突出的優勢，具有廣闊的應用前景。但如何控制肝纖維化仍是國際性難題，迄今臨床上仍無獲得批準的抗纖維化藥物。臨床上迫切需要研制安全有效的抗肝纖維化藥物。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種防治肝纖維化的中藥組合物及其制備方法和應用。為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案如下—種防治肝纖維化的中藥組合物，其特征在于，由中藥材龍膽草、黃芪、雞血藤、紅花、當歸按質量比為1 :1:1:1: 1制備而成。上述中藥組合物的制備方法包括如下步驟按比例取中藥材龍膽草、黃芪、雞血藤、紅花和當歸；一起水煎煮2次，從沸騰計時每次1小時，第一次煎煮用水質量為總藥材質量的10倍，第二次煎煮用水質量為總藥材質量的8倍；合并兩次煎煮液，濃縮。上述中藥組合物在制備防治肝纖維化藥物中的應用。本發明采用廣泛應用的四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)誘導的小鼠肝纖維化模型和二甲基亞硝胺(Dimethylnitrosamine，DMN)誘導的大鼠肝纖維化模型，分別應用本發明的中藥組合物低(小鼠5g生藥/kg，大鼠3g生藥/kg)、中(小鼠IOg生藥/kg，大鼠6g生藥/kg)、高(小鼠20g生藥/kg，大鼠12g生藥/kg)劑量組預防用藥和治療用藥，結果表明，本發明的中藥組合物對肝纖維化模型小鼠和大鼠，可降低血清轉氨酶活性、減輕肝臟膠原沉積程度、改善肝臟炎性和纖維化病理變化，具有預防和治療肝纖維化病變的作用。


圖1是本發明的中藥組合物對CCl4肝纖維化模型小鼠的血清轉氨酶活性的影響。圖2是本發明的中藥組合物對CCl4肝纖維化模型小鼠的肝組織羥脯氨酸的影響。圖3是本發明的中藥組合物對CCl4肝纖維化模型小鼠的肝臟病理變化的影響。圖4是本發明的中藥組合物對CCl4肝纖維化模型小鼠的肝臟膠原沉積的影響。圖5是本發明的中藥組合物對DMN肝纖維化模型大鼠的血清轉氨酶活性的影響。圖6是本發明的中藥組合物對DMN肝纖維化模型大鼠的肝組織羥脯氨酸的影響。圖7是本發明的中藥組合物對DMN肝纖維化模型大鼠的肝臟病理變化的影響。圖8是本發明的中藥組合物對DMN肝纖維化模型大鼠的肝臟膠原沉積的影響。圖中N-表示正常組；M-表示模型對照組；低-表示小鼠按5g生藥/kg劑量，大鼠按3g生藥/kg劑量；中-表示小鼠按IOg生藥/kg劑量，大鼠按6g生藥/kg劑量；高-表示小鼠按20g生藥/kg劑量，大鼠按12g生藥/kg劑量；P-表示陽性對照組，小鼠按0. 15g/ kg劑量用N-乙酰-L-半胱氨酸，大鼠按5mg/kg劑量用培哚普利。
具體實施例方式下面結合具體實施例和附圖，進一步闡述本發明。這些實施例應理解為僅用于說明本發明而不是用于限制本發明的保護范圍。在閱讀了本發明記載的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等效變化和修飾同樣落入本發明權利要求書所限定的范圍。實施例1取中藥材龍膽草、黃芪、雞血藤、紅花、當歸各900克，水煎煮2次，從沸騰計時每次1小時，第一次煎煮用水質量為45kg (為總藥材質量的10倍)，第二次煎煮用水質量為 36kg (為總藥材質量的8倍)，合并兩次煎煮液，濃縮為2000mL濃縮液。實施例2取中藥材龍膽草、黃芪、雞血藤、紅花、當歸各1500克，水煎煮2次，從沸騰計時每次1小時，第一次煎煮用水質量為為總藥材質量的10倍)，第二次煎煮用水質量為 60kg (為總藥材質量的8倍)，合并兩次煎煮液，濃縮為3000mL濃縮液。試驗例1 (抗CCl4肝纖維化小鼠實驗)選用10周齡雄性C57BL/6小鼠，清潔級，由上海斯萊克實驗動物有限公司供給。小鼠隨機分為正常組(N)、模型組(M)、低、中、高劑量組和陽性藥組(P)。除正常組(腹腔注射等量生理鹽水)外，其余各組均以10% CCI4橄欖油溶液ani/kg小鼠體重腹腔注射，每周注射3次，連續4周。自造模之日起，低、中、高劑量組分別給予本發明的中藥組合物5g、10g、 20g生藥/kg體重浸膏灌胃，陽性藥組給予N-乙酰-L-半胱氨酸0. 15g/kg體重灌胃，共4 周，正常組和模型組給予等容量生理鹽水。用藥結束后測定小鼠血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶活性和肝組織羥脯氨酸水平，進行肝組織病理染色和天狼星紅染色檢查。試驗結果表明本發明的中藥組合物中、高劑量組預防用藥可降低小鼠血清谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性(見圖1)，圖中*P<0.05，#P<0. Olvs模型。本發明的中藥組合物中劑量還可降低小鼠肝臟羥脯氨酸含量(見圖幻。肝組織HE染色結果表明，模型組可見匯管區大量炎性細胞浸潤，成纖維細胞大量增生，肝細胞廣泛變性和壞死；本發明的中藥組合物低、中、高劑量組炎性細胞浸潤和成纖維細胞增生明顯減少，肝細胞變性和壞死減輕 (見圖幻；肝組織天狼星紅膠原染色結果表明，模型組匯管區可見較多假小葉形成，大量膠原纖維沉積；本發明的中藥組合物各劑量組未見假小葉形成，膠原纖維沉積減輕(見圖4)。上述實驗結果表明本發明的中藥組合物對肝纖維化病變有預防作用。試驗例2 (抗DMN大鼠肝纖維化實驗)選用雄性Wistar大鼠，清潔級，體重150 180g，由上海斯萊克實驗動物有限公司供給。大鼠隨機分為正常組(N)和模型組，模型組以DMN 10 μ Ι/kg體重劑量腹腔注射，每天1次，每周連續3天，共4周，其中第1周注射2/3量；正常組腹腔注射等量生理鹽水。動物經4周成模后，模型大鼠隨機分為模型組(M)、本發明的中藥組合物的低(3g生藥/kg)、 中(6g生藥/kg)、高(12g生藥/kg)劑量組和陽性藥對照組(P，培哚普利5mg/kg)，灌胃給藥共4周，正常組和模型組給予等容量生理鹽水。用藥結束后測定大鼠血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶活性和肝組織羥脯氨酸水平，進行肝組織病理染色、天狼星紅染色檢查。 試驗結果表明本發明的中藥組合物各劑量組治療用藥可降低大鼠血清谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性(見圖幻。本發明的中藥組合物各劑量組還可降低大鼠肝臟羥脯氨酸含量(見圖6)，圖中乍<0.05廣P <0. Olvs模型。肝組織HE染色結果表明，模型組可見匯管區有較多炎性細胞浸潤，成纖維細胞大量增生，肝細胞廣泛變性和壞死；本發明的中藥組合物低、中、高劑量組炎性細胞浸潤和成纖維細胞增生明顯減少，肝細胞變性和壞死減輕 (見圖7)。肝組織天狼星紅膠原染色結果表明，模型組匯管區可見假小葉形成，并見大量膠原纖維沉積；本發明的中藥組合物各劑量組未見假小葉形成，膠原纖維沉積明顯減少(見圖8)。 上述實驗結果表明本發明的中藥組合物對肝纖維化病變有治療作用。
權利要求
1.一種防治肝纖維化的中藥組合物，其特征在于由中藥材龍膽草、黃芪、雞血藤、紅花、當歸按質量比1 :1:1:1: 1制備而成。
2.—種權利要求1所述的防治肝纖維化的中藥組合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟按比例取中藥材龍膽草、黃芪、雞血藤、紅花和當歸；一起水煎煮2次，從沸騰計時每次1小時，第一次煎煮用水質量為總藥材質量的10倍，第二次煎煮用水質量為總藥材質量的8倍；合并兩次煎煮液，濃縮。
3.—種權利要求1所述的中藥組合物在制備防治肝纖維化藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種防治肝纖維化的中藥組合物，由中藥材龍膽草、黃芪、雞血藤、紅花、當歸按質量比1∶1∶1∶1∶1的比例制備而成。所述的中藥組合物是通過將中藥材龍膽草、黃芪、雞血藤、紅花、當歸經過水煎煮提取，濃縮制備成。藥效學試驗證明，本發明的中藥組合物均可降低肝纖維化模型大鼠和小鼠的血清轉氨酶、減輕肝纖維化模型大鼠和小鼠的肝臟膠原沉積程度、改善肝纖維化模型大鼠和小鼠的肝臟炎性和纖維化病理變化，具有預防和治療肝纖維化病變的作用，可用于制備防治肝纖維化的藥物。
文檔編號A61P1/16GK102302544SQ201110245058
公開日2012年1月4日 申請日期2011年8月25日 優先權日2011年8月25日
發明者劉平, 劉成海, 崔紅燕, 朱邦賢, 王崢濤, 陶艷艷, 顧偉梁, 馬越鳴 申請人:上海中醫藥大學