專利名稱：一種復方艾夫他濱藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種復方艾夫他濱藥物組合物及其制備方法和用途，尤其涉及一種可用于治療乙肝病毒的穩定的復方艾夫他濱藥物組合物及其制備方法和用途。
背景技術：
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的，在我國約有I. 2億人是乙肝病毒攜帶者，現患乙肝2800萬，有較大一部分人會演變成慢性肝炎、肝硬化或肝癌，嚴重危害著人類健康的疾病，因此開發抗乙肝病毒的藥物具有極其重大的意義。目前臨床上治療乙肝的主要核苷類抗病毒藥物有拉米夫定、阿德福韋酯、恩替卡韋酯、恩替卡韋等等，其中恩替卡韋 是目前最強的藥物。但是對于慢性乙肝患者而言，根治乙肝是非常困難的，其難點在于肝細胞核內的cccDNA(乙肝病毒共價閉環DNA)的清除非常困難，患者體內的乙肝病毒絕大部分分布在肝臟，但在血液(特別是外周單核細胞)和其他組織如脾、腎、胰腺、淋巴、精子等等也有一定的分布。外周血液白細胞(特別是單核細胞)中能夠檢測到cccDNA是比較肯定的，雖然目前的報道對于乙肝病毒能否在其細胞內復制有不少爭議，但其游走性能夠增加其他組織感染的危險性是存在的。因此，在乙肝的早期急性發作期及時防止其慢性轉化具有十分重要的意義。對于普通的慢性乙肝病人，由于肝細胞是病毒的主要復制和殘留場所，其他組織的乙肝病毒的殘留通常可以忽略不計。因此，目前的慢性乙肝患者治療方案采用口服制劑是非常合理的。艾夫他濱是核苷類抗病毒藥物。對體外及實驗性感染動物體內的乙型肝炎病毒(HBV)有較強的抑制作用。艾夫他濱可在HBV感染細胞和正常細胞內代謝生成活性代謝產物艾夫他濱三磷酸鹽，艾夫他濱三磷酸鹽摻入到病毒DNA鏈中、阻斷病毒DNA的合成。對大多數乙型肝炎患者的血清HBVDNA檢測結果表明，艾夫他濱能迅速抑制HBV復制，其抑制作用持續于整個治療過程，同時使血清氨基轉移酶降至正常。長期應用可顯著改善肝臟壞死炎癥性改變，并減輕或阻止肝臟纖維化的進展。恩替卡韋為鳥嘌呤核苷類似物，對乙肝病毒(HBV)多聚酶具有抑制作用。它能夠通過磷酸化成為具有活性的三磷酸鹽，三磷酸鹽在細胞內的半衰期為15小時。通過與HBV多聚酶的天然底物三磷酸脫氧鳥嘌呤核苷競爭，恩替卡韋三磷酸鹽能抑制病毒多聚酶(逆轉錄酶)的所有三種活性=(I)HBV多聚酶的啟動；(2)前基因組mRNA逆轉錄負鏈的形成；
(3)HBV DNA正鏈的合成。現代研究表明，單獨將艾夫他濱或恩替卡韋用于抗乙肝病毒均可獲得較為顯著的效果。但是在臨床表現中，單一治療藥劑在作用一定時間后往往會出現作用降低甚至耐藥性，這會對后續用藥造成很大阻礙，從而影響整體治療效果。對此，一般可采取合并用藥的方法，即聯合使用艾夫他濱和恩替卡韋，增加耐藥所需的基因位點數，降低發生耐藥性的概率。此外，由于艾夫他濱與恩替卡韋對病毒具有相似的作用機制，可以推斷兩種藥物組合具有協同作用。文獻報道恩替卡韋與拉米夫定、阿德福韋和特諾福韋的相互作用時，發現恩替卡韋和與其相互作用藥物的穩態藥代動力學均沒有改變。由此可推斷艾夫他濱與恩替卡韋相互作用時同樣不改變藥代動力學穩態。本發明人在細胞學實驗中證實，艾夫他濱聯合恩替卡韋可以提高抗病毒活性，減少耐藥性，延長有效作用時間，具有較好的抗病毒效果。但在動物實驗中，發現艾夫他濱在胃酸中表現出極不穩定的特性，使得動物體內艾夫他濱的有效含量大為減少，療效也隨之降低
發明內容

本發明的目的在于克服上述現有技術的缺陷，提供一種復方艾夫他濱藥物組合物及其制備方法和用途。本發明人在研究過程中發現艾夫他濱的穩定性較差。尤其是耐酸性不好，且酸性條件下艾夫他濱會產生5-氟胞嘧啶的雜質。試驗結果表明艾夫他濱最穩定的pH范圍為
5.5 7. 5。恩替卡韋在整個pH條件下相對比較穩定,最穩定的pH范圍為小于4. 5和大于
7.5，因此，二者聯合后能夠保證在整個腸道均有吸收。因此，本發明提供了一種復方艾夫他濱藥物組合物，其中，所述藥物組合物包含艾夫他濱或其可藥用鹽、恩替卡韋或其可藥用鹽以及抗酸穩定劑。本發明所述的術語“艾夫他濱或其可藥用鹽”包括4-氨基-5-氟-1_((2R，5S)-5-(羥甲基)-2，5-二氫呋喃-2-基)嘧啶-2(1H)-酮)或其可藥用鹽，可以是晶體形式或非晶體形式，或者各種多晶型的溶劑化物，例如水合物。作為具體化合物的艾夫他濱，其化學結構式如下
HH2
Jj
H艾夫他濱的可藥用鹽的實例包括其堿性殘基與無機酸或有機酸形成的鹽，以及上述各種鹽的組合。所述的無機酸包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等；所述的有機酸包括乙酸、三氟乙酸、丙酸、琥珀酸、羥基乙酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、馬來酸、苯甲酸、苯乙酸、氨基酸、水楊酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富馬酸、對甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羥乙磺酸；所述氨基酸的實例包括但不限于精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等。從療效角度考慮，可以優選為4-氨基-5-氟-I- ((2R，5S) _5_ (羥甲基)_2，5 二氫呋喃-2-基)嘧啶-2 (IH)-酮，并且其光學上的立體異構體、或其外消旋混合物、互變異構體同樣適用。本發明人分別對艾夫他濱、恩替卡韋及兩者混合物的甲醇溶液進行紫外吸收光譜表征，參見圖I 3。圖I顯示艾夫他濱在甲醇溶液中最大紫外吸收峰分別為282. Onm和240. 5nm，有兩個特征峰。圖2顯示恩替卡韋在甲醇溶液中最大紫外吸收峰為255. 5nm，有一個特征峰。圖3表示艾夫他濱與恩替卡韋(I I)混合物在甲醇溶液中最大紫外吸收峰分別為278. Onm和246. Onm,有兩個特征峰，說明兩種成分復配后特征峰發生了變化，并且在246. Onm處為兩種成分混合物的最大吸收峰位。基于此，本發明人考察了艾夫他濱和恩替卡韋之間的相互影響，主要方法是通過HPLC法在246nm條件下檢測兩種成分的分離度，色譜圖參見圖4，結果表明兩種成分在同一色譜條件下可以很好的分離。根據本發明的藥物組合物，其中，所述抗酸穩定劑可選自硅酸鎂鋁、碳酸鈣、精氨酸或葡甲胺中的一種或多種；更優選為葡甲胺或精氨酸中的一種或兩種。根據本發明的藥物組合物，其中，所述艾夫他濱與恩替卡韋的重量比可以為2. 5 80 1，優選為5 40 1，更優選為5 20 I ;所述艾夫他濱與抗酸穩定劑的重量比可以為I : O. I 10，優選為I : O. 5 8，更優選為I : I 5。根據本發明的藥物組合物，其中，所述藥物組合物還可以包含藥用輔料；作為優選，所述藥用輔料選自稀釋劑、崩解劑、粘合劑、抗粘劑、潤滑劑或腸溶包衣材料中的一種或多種；所述稀釋劑優選自乳糖、甘露醇、磷酸氫鈣、淀粉或預膠化淀粉的一種或多種，更優選自乳糖、預膠化淀粉或淀粉中的一種或多種；所述崩解劑優選自羧甲基淀粉鈉、交聯聚維酮或低取代羥丙基纖維素的一種或多種，更優選自羧甲基淀粉鈉或交聯聚維酮中的一種或兩種；所述粘合劑優選自羥丙甲纖維素、聚維酮、甲基纖維素、微晶纖維素或預膠化淀粉中的一種或多種；所述抗粘劑優選自微粉硅膠或滑石粉中的一種或兩種；所述潤滑劑優選為硬脂酸鎂；所述腸溶包衣材料優選自丙烯酸樹脂L100-55、丙烯酸樹脂L30D-55水分散體、鄰苯二甲酸羥丙甲纖維素酯HP-55或HP-50中的一種或多種。根據本發明的藥物組合物，其中，所述艾夫他濱和恩替卡韋的總重量與所述藥用輔料的重量比可以為I : O. 5 100，優選為I : I 60。 上述優選實施方案將艾夫他濱、恩替卡韋、抗酸穩定劑以及藥用輔料的配比控制在所述范圍內，以使本發明的復方艾夫他濱藥物組合物及其制劑經口服后在胃液中具有很好的抗酸能力，同時在腸液中具有較好的崩解釋放特性，同時使恩替卡韋在整個生理環境均有較好的吸收，還保證了其良好的存儲穩定性。根據本發明的藥物組合物，其中，所述藥物組合物可以優選為口服片劑或膠囊制劑；作為優選，在該藥物組合物中，艾夫他濱為腸溶型。本發明還提供了上述藥物組合物的制備方法，該制備方法包括以下步驟(I)將艾夫他濱或其可藥用鹽與抗酸穩定劑混合，然后與一種或多種粘合劑混合，將所得混合物附著于空白載體上制成含藥載體；(2)將步驟(I)所得的含藥載體與恩替卡韋或其可藥用鹽以及一種或多種藥用輔料混合。本發明還提供了上述藥物組合物的另一種制備方法，該制備方法包括以下步驟
(I)將艾夫他濱或其可藥用鹽與抗酸穩定劑混合，然后與一種或多種粘合劑和一種或多種用于藥物制粒的藥用輔料混合，將所得混合物制備成含藥顆粒；(2)將步驟(I)所得含藥顆粒與恩替卡韋或其可藥用鹽以及一種或多種藥用輔料混合。根據本發明藥物組合物的制備方法，其中，在所述步驟⑴之后和步驟(2)之前還可以包括以下步驟中的一個或兩個
(Ia)將恩替卡韋或其可藥用鹽制備成顆粒；和(Ib)將腸溶衣材料附著于步驟⑴所制備的顆粒或含藥載體上。根據本發明藥物組合物的制備方法，其中，所述步驟(I)中的粘合劑可以包括
O.5 5wt%輕丙甲纖維素溶液或3 IOwt %聚維酮溶液。根據本發明藥物組合物的制備方法，其中，所述步驟(I)中用于藥物制粒的藥用輔料包括乳糖、微晶纖維素、羥丙甲纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯聚維酮、羧甲基淀粉鈉、滑石粉中的一種或多種。以下是本發明提供的制備方法的兩種優選實施方案在一種實施方案中，本發明的制備方法包括將艾夫他濱與抗酸穩定劑混合均勻， 溶于含有O. 5 5重量％羥丙甲纖維素或3 10重量％聚維酮的水溶液中，將得到的混合液噴涂于直徑為O. I 1_的圓形空白微丸上，干燥后得到含藥微丸。將含藥微丸置于流化床(或包衣鍋)中，使微丸的溫度控制在25 35°C，將常規的腸溶衣水分散體混懸液或溶液噴涂在含藥微丸上，制得艾夫他濱腸溶微丸。最后將艾夫他濱腸溶微丸與一種或多種其它輔料以及恩替卡韋混合均勻，直接裝胃溶膠囊或壓片。在另一種實施方案中，本發明的制備方法包括將艾夫他濱與抗酸穩定劑混合均勻，再加入一種或多種其它輔料(如乳糖、微晶纖維素、羧甲淀粉鈉、滑石粉等)混合均勻，將得到的混合物加入含有O. 5 5重量％羥丙甲纖維素或3 10重量％聚維酮的水溶液中，制軟材后置于擠壓造粒機中，壓成直徑O. I Imm的小條，置于離心造粒機中切割研磨成含藥圓形微丸，干燥后制得艾夫他濱含藥微丸。將含藥微丸置于流化床(或包衣鍋)中，使微丸的溫度控制在25 35°C，將常規的腸溶衣水分散體混懸液或溶液噴涂在含藥微丸上，制得艾夫他濱腸溶微丸。最后與一種或多種其它輔料以及恩替卡韋混合均勻，直接裝胃溶膠囊或壓片。本發明還提供了本發明藥物組合物或者按照本發明方法制得的藥物組合物用于制備治療乙肝病毒藥物的用途。根據本發明提供的用途，其中，所述藥物的每單位制劑中可以含有艾夫他濱I 50mg,優選為I 25mg,更優選為5 20mg ;可以含有恩替卡韋O. I IOmg,優選為O. I 5mg,更優選為O. I 2mg。本發明具有以下有益效果I、本發明中的復方艾夫他濱藥物組合物具有較好的穩定性，能有效避免艾夫他濱產生5-氟胞嘧啶雜質，適合于長期儲藏。2、本發明的藥物組合物能夠防止艾夫他濱受到胃酸的破壞，并能在腸液中快速完全的釋放藥物，充分發揮活性成分艾夫他濱的治療作用，同時恩替卡韋在整個生理環境中均能保持治療作用，因此二者結合的藥物組合物具有加和的治療作用。2、本發明中制備所述藥物組合物的方法能夠保證物料的流動性，適合工業化大生產。


以下，結合附圖來詳細說明本發明的實施方案，其中圖I示出了艾夫他濱在甲醇溶液中的紫外吸收光譜圖2示出了恩替卡韋在甲醇溶液中的紫外吸收光譜圖；圖3示出了艾夫他濱與恩替卡韋(I I)的混合物在甲醇溶液中的紫外吸收光譜圖；圖4示出了本發明的復方艾夫他濱藥物組合物的含量測定HPLC色譜圖；圖5示出了本發明實施例1、3、5、7中的復方艾夫他濱藥物組合物的艾夫他濱釋放度測定曲線；圖6示出了本發明實施例1、3、5、7中的復方艾夫他濱藥物組合物的恩替卡韋釋放度測定曲線；圖7示出了本發明實施例2、4、6、8中的復方艾夫他濱藥物組合物的艾夫他濱釋放度測定曲線；
·
圖8示出了本發明實施例2、4、6、8中的復方艾夫他濱藥物組合物的恩替卡韋釋放度測定曲線。
具體實施例方式下面通過具體的實施例進一步說明本發明，但是，應當理解為，這些實施例僅僅是用于更詳細具體地說明之用，而不應理解為用于以任何形式限制本發明。本部分對本發明試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性的描述。雖然為實現本發明目的所使用的許多材料和操作方法是本領域公知的，但是本發明仍然在此作盡可能詳細描述。本領域技術人員清楚，在上下文中，如果未特別說明，本發明所用材料和操作方法是本領域公知的。以下實施例中，如無特別說明，所述腸溶衣混懸液或溶液是通過以下步驟制備的將處方量的腸溶型材料丙烯酸樹脂(如L30D-55)水分散體加入水中，再加適量的增塑劑、滑石粉等配制成水性混懸液包衣。這里也可以采用本領域技術人員公知的其他制備方法，例如將丙烯酸樹脂(如L100-55)或鄰苯二甲酸羥丙甲纖維素酯分別溶于80 90%乙醇中充分攪拌溶解，加入增塑劑及滑石粉等混合均勻。以下實施例中，如無特別說明，所述比例、份數均為重量比、重量份數。為了描述方便，原料采用克數，也可以采用重量份替換。首先，本發明人通過測定艾夫他濱和恩替卡韋原料在不同pH值溶液條件下其含量隨時間變化的情況，驗證了艾夫他濱和恩替卡韋在不同PH條件下的穩定性，具體詳述如下參照中國藥典2010年版二部附錄根據藥物特性分別配置pH I. 2溶液、pH 3. 6緩沖溶液、PH 4. 5緩沖溶液、pH 5. 5緩沖溶液、pH 6. 5緩沖溶液、pH7. O緩沖溶液、pH 7. 5緩沖溶液、PH 8. O緩沖溶液、pH 9. O緩沖溶液。(I)精密稱取艾夫他濱和恩替卡韋原料各10. Omg分別置于兩個25mL量瓶中，加入PH I. 2溶液至刻度，使原料溶解并搖勻，然后分別于不同時間等量量取上述溶液lmL，加水稀釋一倍，并調節PH約為7. O。按照下述HPLC含量測定條件，進樣20 μ L，記錄色譜圖。其中，為盡量保證實驗的準確性，應在5分鐘內將量瓶內的溶液配好，并在配好后立即取液并按步驟進行測定，且以該次測定時間記為O ;作為對照，假設IOmg艾夫他濱或恩替卡韋穩定存在，以其在相同濃度的ImL檢測溶液中的計算含量值為對比值，并記為100%。下同。
(2)精密稱取艾夫他濱和恩替卡韋原料各10. Omg分別置于兩個25mL量瓶中，重復做8次，然后分別加pH 3. 6、4. 5、5. 5、6. 5、7. O、7. 5、8. O、9. O緩沖溶液并稀釋至刻度，搖勻，將全部量瓶放置在37°C水浴中，分別于不同時間點等量量取上述溶液lmL，加水稀釋一倍，按照下述HPLC含量測定條件，進樣20 μ L，記錄色譜圖。(3) HPLC法的檢測條件艾夫他濱的HPLC條件流動相乙腈:水=92 8 ;流速lmL/min ;波長240nm ；柱溫30 35°C ;色譜柱手性分離柱250mmX4. 6mm, 5 μ m。恩替卡韋的HPLC條件流動相乙腈水=10 90 ;流速lmL/min ;波長254nm ;柱溫30 35°C ;色譜柱KromasilC 184. 6mmX 250mm, 5 μ m。檢測結果見表I和表2。表I艾夫他濱在不同pH值溶液中的穩定性
權利要求
1.一種復方艾夫他濱藥物組合物，所述藥物組合物包含艾夫他濱或其可藥用鹽、恩替卡韋或其可藥用鹽以及抗酸穩定劑。
2.根據權利要求I所述的藥物組合物，其中，所述抗酸穩定劑選自硅酸鎂鋁、碳酸鈣、精氨酸或葡甲胺中的一種或多種；更優選為葡甲胺和精氨酸中的一種或兩種。
3.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，其中，所述艾夫他濱與恩替卡韋的重量比為2.5 80 1，優選為5 40 1，更優選為5 20 I ;所述艾夫他濱與抗酸穩定劑的重量比為I : O. I 10，優選為I : O. 5 8，更優選為I : I 5。
4.根據權利要求I至3中任一項所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物還包含藥用輔料；作為優選，所述藥用輔料選自稀釋劑、崩解劑、粘合劑、抗粘劑、潤滑劑或腸溶包衣材料中的一種或多種；所述稀釋劑優選自乳糖、甘露醇、磷酸氫鈣、淀粉和預膠化淀粉的一種或多種，更優選自乳糖、預膠化淀粉和淀粉中的一種或多種；所述崩解劑優選自羧甲基淀粉鈉、交聯聚維酮和低取代羥丙基纖維素的一種或多種，更優選自羧甲基淀粉鈉和交聯聚維酮中的一種或兩種；所述粘合劑優選自羥丙甲纖維素、聚維酮、甲基纖維素、微晶纖維素和預膠化淀粉中的一種或多種；所述抗粘劑優選自微粉硅膠和滑石粉中的一種或兩種；所述潤滑劑優選為硬脂酸鎂；所述腸溶包衣材料優選自丙烯酸樹脂L100-55、丙烯酸樹脂L30D-55水分散體、鄰苯二甲酸羥丙甲纖維素酯HP-55和HP-50中的一種或多種。
5.根據權利要求4所述的藥物組合物，其中，所述艾夫他濱和恩替卡韋的總重量與所述藥用輔料的重量比為I : O. 5 100，優選為I : I 60。
6.根據權利要求I至4中任一項所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物為口服片劑 或膠囊制劑；優選地，在所述藥物組合物中，艾夫他濱為腸溶型。
7.權利要求I至6中任一項所述藥物組合物的制備方法，該制備方法包括以下步驟 (1)將艾夫他濱或其可藥用鹽與抗酸穩定劑混合，然后與一種或多種粘合劑混合，將所得混合物附著于空白載體上制成含藥載體； (2)將步驟(I)所得的含藥載體與恩替卡韋或其可藥用鹽以及一種或多種藥用輔料混口 ο
8.權利要求I至6中任一項所述藥物組合物的制備方法，該制備方法包括以下步驟 (1)將艾夫他濱或其可藥用鹽與抗酸穩定劑混合，然后與一種或多種粘合劑和一種或多種用于藥物制粒的藥用輔料混合，將所得混合物制備成含藥顆粒； (2)將步驟(I)所得含藥顆粒與恩替卡韋或其可藥用鹽以及一種或多種藥用輔料混口 ο
9.根據權利要求7或8所述的制備方法，其中，在所述步驟(I)之后和步驟(2)之前還包括以下步驟中的一個或兩個 (Ia)將恩替卡韋或其可藥用鹽制備成顆粒；和 (Ib)將腸溶衣材料附著于步驟(I)所制備的顆粒或含藥載體上。
10.根據權利要求7或8所述的制備方法，其中，所述步驟(I)中的粘合劑包括O.5 5wt%羥丙甲纖維素溶液和3 IOwt%聚維酮溶液中的一種或兩種。
11.根據權利要求8所述的制備方法，其中，所述步驟(I)中用于藥物制粒的藥用輔料包括乳糖、微晶纖維素、羥丙甲纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯聚維酮、羧甲基淀粉鈉、滑石粉中的一種或多種。
12.權利要求I至6中任一項所述的藥物組合物，或者按照權利要求7至11中任一項所述的制備方法制得的藥物組合物用于制備治療乙肝病毒藥物的用途。
13.根據權利要求12所述的用途，其中，所述藥物的每單位制劑中含有艾夫他濱I 50mg,優選為I 25mg,更優選為5 20mg ;含有恩替卡韋O. I IOmg,優選為O. I 5mg,更優選為O. I 2mg。
全文摘要
本發明提供了一種復方艾夫他濱藥物組合物，所述藥物組合物包含艾夫他濱或其可藥用鹽、恩替卡韋或其可藥用鹽以及抗酸穩定劑。本發明還提供了制備上述藥物組合物的方法，該方法包括(1)將艾夫他濱或其可藥用鹽與抗酸穩定劑混合，然后與一種或多種粘合劑混合，將所得混合物附著于空白載體上制成含藥載體；(2)將步驟(1)所得的含藥載體與恩替卡韋或其可藥用鹽以及一種或多種藥用輔料混合。本發明還提供了上述復方艾夫他濱藥物組合物用于制備治療乙肝病毒藥物的用途。
文檔編號A61P31/20GK102949406SQ20111025486
公開日2013年3月6日 申請日期2011年8月31日 優先權日2011年8月31日
發明者任曉文, 徐為人, 鄒美香, 湯立達, 李洪起, 王博, 連瀟嫣 申請人:天津藥物研究院