專(zhuān)利名稱(chēng)：一種苦木生物堿的高效分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物中有效成分的分離純化方法，特別是涉及一種苦木生物堿的分離純化方法。
背景技術(shù)：
苦木為苦木科苦木屬植物Picrasmaquassioides (D. Dom) Benn.的地上部分，中藥大辭典、中國(guó)藥典(2000版)有收載，又名土樗子、苦楝樹(shù)，系苦木科苦木屬植物。主要分布于河北、山西、河南、山東、江蘇、江西、湖南、陜西、甘肅、四川、云南、廣東和廣西等省。以其樹(shù)皮、根皮及莖木入藥，我國(guó)民間主要用于清熱燥濕、解毒殺蟲(chóng)、抗菌消炎、治療菌痢、胃腸炎、 膽道感染、急性化膿性感染、疥癬、濕疹、毒蛇咬傷等疾患。因其味極苦，國(guó)外亦用作苦味健胃劑。中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所于70年代中期組織科研小分隊(duì)，深入到粵北山區(qū)時(shí)， 發(fā)現(xiàn)該植物在民間廣泛用于治療疾病。為發(fā)掘祖國(guó)醫(yī)藥學(xué)遺產(chǎn)，對(duì)其進(jìn)行比較深入的藥物資源學(xué)、化學(xué)成分、藥理學(xué)、毒理學(xué)、制劑工藝學(xué)和藥品質(zhì)量控制等方面的研究，證明生物堿是其有效成分之一。中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所在對(duì)苦木生物堿的抗菌消炎研究中發(fā)現(xiàn)， 苦木具有抗真菌活性，體外抗真菌實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)苦木總堿對(duì)溶血性乙型鏈球菌816、金黃色葡萄球菌209P、宋內(nèi)氏痢疾桿菌51334、枯草桿菌6633和八疊球菌有抑菌作用。苦木生物堿包括鐵屎米酮類(lèi)生物堿、二聚體生物堿、β -carboline生物堿。目前苦木生物堿的提純多是采用熱回流提取，有機(jī)溶劑萃取，柱色譜純化等方法， 該方法能耗大，有機(jī)溶劑用量大。尚未見(jiàn)采用超臨界萃取技術(shù)結(jié)合超臨界流體逆向萃取結(jié)晶技術(shù)對(duì)苦木生物堿進(jìn)行提取、純化的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是針對(duì)現(xiàn)有制備高含量苦木生物堿的方法所存在的缺陷而進(jìn)行的研究，旨在提供一種工藝簡(jiǎn)單、效率高、可工業(yè)化實(shí)現(xiàn)的分離純化方法。一種苦木生物堿的高效分離方法，其具體步驟如下取苦木原料粉碎，采用超臨界 CO2作溶劑，乙酸乙酯作夾帶劑，提取壓力25-40MPa，提取溫度40_60°C，靜態(tài)浸泡1_3小時(shí)， 動(dòng)態(tài)提取60-180min，經(jīng)解析得萃取物，解析壓力為6_15MPa，解析溫度15_20°C，萃取物溶于環(huán)己烷-丙酮混合溶劑中，置于結(jié)晶釜中，通入CO2至結(jié)晶釜中達(dá)到預(yù)定溫度和壓力，保持6(Tl20min，使苦木生物堿從溶劑中析出，依此方法純化廣3次，干燥即得苦木生物堿產(chǎn)品。所述的夾帶劑加入量為原料量的10-20%，CO2流量2-5ml/g生藥/min。所述的正己烷-丙酮混合溶劑體積比為5-7:3。所述的結(jié)晶釜溫度為3(T60°C，壓力為l(T25MPa。本發(fā)明具有分離純化時(shí)間短，分離效率高，工藝簡(jiǎn)單，相較于上柱色譜等復(fù)雜、耗能、耗時(shí)的工藝，具有工業(yè)化意義。
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超臨界CO2作溶劑，(X)2流量3ml/g生藥/min，通入原料量的13%的乙酸乙酯作夾帶劑，在提取壓力^MPa,提取溫度45°C的條件下，靜態(tài)浸泡1.5 小時(shí)，動(dòng)態(tài)提取80min，經(jīng)解析得萃取物，解析壓力為12MPa，解析溫度15°C，萃取物溶于環(huán)己烷-丙酮混合溶劑(7:3)中，配成10mg/ml的樣品溶液；
(2)將上述樣品溶液置于結(jié)晶釜中，打開(kāi)超臨界裝置中CO2氣瓶，向結(jié)晶釜中通入0)2達(dá)到預(yù)定溫度40°C和壓力15MPa，關(guān)閉氣瓶，打開(kāi)調(diào)壓閥控制壓力平衡，保持80min，使苦木生物堿從溶劑中析出，依此方法純化3次，收集產(chǎn)品31g，生物堿含量不低于60%。實(shí)施例2:
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超臨界(X)2作溶劑，CO2流量2ml/g生藥/min，通入原料量的10%的乙酸乙酯作夾帶劑，在提取壓力40MPa，提取溫度60°C的條件下，靜態(tài)浸泡1 小時(shí)，動(dòng)態(tài)提取60min，經(jīng)解析得萃取物，解析壓力為6MPa，解析溫度20°C，萃取物溶于環(huán)己烷-丙酮混合溶劑(5:3)中，配成10mg/ml的樣品溶液；
(2)將上述樣品溶液置于結(jié)晶釜中，打開(kāi)超臨界裝置中CO2氣瓶，向結(jié)晶釜中通入0)2達(dá)到預(yù)定溫度60°C和壓力25MPa，關(guān)閉氣瓶，打開(kāi)調(diào)壓閥控制壓力平衡，保持60min，使苦木生物堿從溶劑中析出，依此方法純化2次，收集產(chǎn)品^g，生物堿含量不低于60%。實(shí)施例3:
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超臨界CO2作溶劑，(X)2流量5ml/g生藥/min，通入原料量的20%的乙酸乙酯作夾帶劑，在提取壓力25MPa，提取溫度40°C的條件下，靜態(tài)浸泡3小時(shí)，動(dòng)態(tài)提取180min，經(jīng)解析得萃取物，解析壓力為15MPa，解析溫度18°C，萃取物溶于環(huán)己烷-丙酮混合溶劑(7:3)中，配成10mg/ml的樣品溶液；
(2)將上述樣品溶液置于結(jié)晶釜中，打開(kāi)超臨界裝置中CO2氣瓶，向結(jié)晶釜中通入0)2達(dá)到預(yù)定溫度30°C和壓力lOMPa，關(guān)閉氣瓶，打開(kāi)調(diào)壓閥控制壓力平衡，保持120min，使苦木生物堿從溶劑中析出，依此方法純化2次，收集產(chǎn)品34g，生物堿含量不低于60%。實(shí)施例4:
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超臨界CO2作溶劑，(X)2流量3ml/g生藥/min，通入原料量的18%的乙酸乙酯作夾帶劑，在提取壓力32MPa，提取溫度48°C的條件下，靜態(tài)浸泡2. 5 小時(shí)，動(dòng)態(tài)提取120min，經(jīng)解析得萃取物，解析壓力為8MPa，解析溫度18°C，萃取物溶于環(huán)己烷-丙酮混合溶劑(6:3)中，配成10mg/ml的樣品溶液；
(2)將上述樣品溶液置于結(jié)晶釜中，打開(kāi)超臨界裝置中CO2氣瓶，向結(jié)晶釜中通入0)2達(dá)到預(yù)定溫度45°C和壓力18MPa，關(guān)閉氣瓶，打開(kāi)調(diào)壓閥控制壓力平衡，保持85min，使苦木生物堿從溶劑中析出，依此方法純化3次，收集產(chǎn)品33g，含量不低于60%。實(shí)施例5:
(1)取苦木原料1kg，粉碎，采用超臨界(X)2作溶劑，(X)2流量2. 5ml/g生藥/min，通入原料量的17%的乙酸乙酯作夾帶劑，在提取壓力34MPa，提取溫度55°C的條件下，靜態(tài)浸泡1. 5小時(shí)，動(dòng)態(tài)提取llOmin，經(jīng)解析得萃取物，解析壓力為14MPa，解析溫度17°C，萃取物溶于環(huán)己烷-丙酮混合溶劑(5:3)中，配成10mg/ml的樣品溶液；
(2)將上述樣品溶液置于結(jié)晶釜中，打開(kāi)超臨界裝置中CO2氣瓶，向結(jié)晶釜中通入0)2達(dá)到預(yù)定溫度43°C和壓力16MPa，關(guān)閉氣瓶，打開(kāi)調(diào)壓閥控制壓力平衡，保持lOOmin，使苦木生物堿從溶劑中析出，，收集產(chǎn)品^g，生物堿含量不低于60%。
權(quán)利要求
1.一種苦木生物堿的高效分離方法，其特征在于具體步驟如下取苦木原料粉碎，采用超臨界(X)2作溶劑，乙酸乙酯作夾帶劑，提取壓力25-40MPa，提取溫度40_60°C，靜態(tài)浸泡1-3小時(shí)，解析壓力為6-15MPa，解析溫度15_20°C，動(dòng)態(tài)提取60-180min，萃取物溶于環(huán)己烷-丙酮混合溶劑中，置于結(jié)晶釜中，通入CO2至結(jié)晶釜中達(dá)到預(yù)定溫度和壓力，保持 6(Tl20min，使苦木生物堿從溶劑中析出，依此方法純化廣3次，干燥即得苦木生物堿產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述的一種苦木生物堿的高效分離方法，其特征在于所述的夾帶劑加入量為原料量的10-20%，CO2流量2-5ml/g生藥/min。
3.如權(quán)利要求1所述的一種苦木生物堿的高效分離方法，其特征在于所述的結(jié)晶釜溫度為3(T60°C，壓力為10 25MPa。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種苦木生物堿的高效分離方法，具體是涉及一種采用超臨界萃取技術(shù)結(jié)合超臨界流體逆向萃取結(jié)晶技術(shù)對(duì)苦木生物堿進(jìn)行提取、純化的方法，步驟包括取苦木原料粉碎，采用超臨界CO2作溶劑，乙酸乙酯作夾帶劑，提取壓力25-40MPa，提取溫度40-60℃，靜態(tài)浸泡1-3小時(shí)，解析壓力為6-15MPa，解析溫度50-60℃，動(dòng)態(tài)提取60-180min，萃取物溶于環(huán)己烷-丙酮混合溶劑中，置于結(jié)晶釜中，向結(jié)晶釜中通入CO2，控制結(jié)晶參數(shù)在預(yù)定壓力、溫度范圍內(nèi)保持一段時(shí)間，純化1~3次可得到含量不低于60%苦木生物堿。本發(fā)明工藝合理、操作簡(jiǎn)單、低成本且產(chǎn)品清潔，CO2可重復(fù)利用。
文檔編號(hào)A61P1/00GK102327303SQ20111030462
公開(kāi)日2012年1月25日 申請(qǐng)日期2011年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月10日
發(fā)明者劉東鋒, 吳艷波 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司