專利名稱：3,4,5,-三取代氨基噻吩類化合物及其制備和用途的制作方法
技術領域：
本發明屬有機化合物的合成，涉及一類3，4，5，-三取代氨基噻吩類化合物的制備方法，及其在制備抗腫瘤藥物中的應用。隨著全球人口的不斷增加和人口老齡化趨勢的不斷加深，同時也因為包括吸煙在內的各種不健康生活方式的廣泛存在，腫瘤已經成為了發達國家威脅人類健康的頭號殺手和發展中國家威脅人類健康的第二號殺手(Jemal, et al.，CA-Cancer J. Clin. 2011，61， 69-90)。傳統的化學治療藥物如烷化劑、抗代謝物等普遍存在毒副作用大、易產生耐藥性等缺點，而針對信號通路中的關鍵蛋白或激酶而設計的抗腫瘤藥物正在腫瘤治療領域取得令人鼓舞的效果。p53作為一個重要的腫瘤抑制因子在阻止癌癥發展的過程中起到了關鍵作用。p53 主要通過細胞周期阻滯和促使細胞凋亡兩個方面來發揮其功能。近20多年來，許多實驗證明阻斷p53-MDM2(p53的一個主要的負調節子)的相互作用可以有效的重新活化腫瘤細胞中的P53，從而達到殺死腫瘤細胞的效果。過去十年，許多結構種類的小分子化合物被發現具有抑制P53-MDM2相互作用的活性并且具有不同程度的抗癌活性，并已有兩個化合物進入了臨床研究，這更加驗證了該治療策略的有效性(Wang，et al.，Medicinal Research Reviews. D0I10. 1002/med. 20236)。本課題組設計并合成了一系列全新的p53_MDM2相互作用的小分子抑制劑，以3，4，5_三取代氨基噻吩類化合物作為其結構特點，并對該類化合物進行了蛋白水平以及細胞水平的抗腫瘤活性研究。結果表明該類化合物具有明顯的阻斷 P53-MDM2相互作用的活性以及細胞增值抑制活性，是有前景的P53-MDM2相互作用抑制劑， 為癌癥治療藥物的研究提供了新的思路。

發明內容
本發明的目的是提供一類結構新穎的3，4，5，-三取代氨基噻吩類化合物及其鹽， 具有如下結構通式A :
權利要求
1. 一種3，4，5，-三取代氨基噻吩類化合物及其鹽，具有如下結構通式
2. —種3，4，5，-三取代氨基噻吩類化合物的制備方法，通過以下步驟實現(1)化合物I與取代苯在惰性溶劑中經路易斯酸催化得中間體酰化產物II，以乙醚、 二氧六環、二氯甲烷或氯仿為溶劑，所用的路易斯酸選用氯化鐵、氯化鋅、氯化鋁、氯化錫或三氟化硼乙醚，反應溫度為_15°C _25°C，反應時間為8-12小時，所得產物II經重結晶得純品；(2)化合物II在酸性或者堿性條件下與氰基乙酸甲酯縮合得到化合物III，反應在中等極性溶劑中進行，所述的堿為二乙胺、三乙胺或二異丙基乙胺，選用的酸為四氯化鈦、氯化錫或三氟化硼乙醚，反應溫度為0°C -50°C，反應時間為12-24小時，所得產物為Z式和E 式的混合物，所述中等極性溶劑選用四氫呋喃；(3)化合物III在堿性條件下與硫粉環合得化合物IV，反應在極性非質子性溶劑中進行，極性非質子性溶劑選用丙酮或四氫呋喃，選用的堿有二乙胺、三乙胺或二異丙基乙胺， 反應溫度為0°C -50°C，所得產物經重結晶得純品；(4)化合物IV在堿性條件下水解得化合物V，反應在極性溶劑中進行，極性溶劑選用甲醇、乙醇或二氧六環，選用的堿有氫氧化鉀、氫氧化鈉或氫氧化鋰，反應溫度40 0C -80 0C，所得粗產物經重結晶得純品；(5)化合物V在縮合試劑作用下與胺類化合物反應得目標產物VI，選用的縮合試劑為二環己基碳二亞胺/ 4- 二甲氨基吡啶、N-(3- 二甲氨基丙基)-N’ -乙基碳二亞胺鹽酸鹽)/ 1-羥基苯并三氮唑或6-氯苯并三氮唑-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯，反應溫度 200C -60°C，反應時間12-24小時，粗產品經過柱層析得到純品；反應式其中的R1U3的定義與權利要求1同。
3.根據權利要求2所述的一種3，4，5，-三取代氨基噻吩類化合物的制備方法，其特征在于，胺類化合物選用苯胺、芐胺、環丙胺、環己胺，4-羥基-環己胺、吡咯烷、嗎啉、哌啶、 4-甲基哌啶、哌嗪、4-甲基哌嗪、2-哌啶酮，4-哌啶酮或2，4- 二哌啶酮中的一種。
4.一種3，4，5，-三取代氨基噻吩類化合物的制備方法，通過以下步驟實現(1)化合物I與取代苯在惰性溶劑中經路易斯酸催化得化合物II，以乙醚、二氧六環、 二氯甲烷或氯仿為溶劑，所用的路易斯酸選用氯化鐵、氯化鋅、氯化鋁、氯化錫或三氟化硼乙醚，反應溫度為_15°C _25°C，反應時間為8-12小時，所得化合物II經重結晶得純品；(2)氰基乙酸甲酯與胺類化合物無溶劑條件下反應得到化合物VII，反應時間為6-12 小時，在室溫下進行；(3)化合物II在酸性或者堿性條件下與化合物VII縮合得到化合物VIII，反應在四氧呋喃中進行，選用的堿為二乙胺、三乙胺或二異丙基乙胺，選用的酸為四氯化鈦，氯化錫或三氟化硼乙醚，反應溫度0°C -50°C，反應時間12-24小時，所得產物為Z式和E式的混合物；(4)化合物VIII在堿性條件下與硫粉環合得目標化合物VI，反應在極性非質子性溶劑中進行，極性非質子性溶劑選用丙酮或四氫呋喃，選用的堿為二乙胺、三乙胺或二異丙基乙胺，反應溫度0°C -50°C，粗產品經柱層析得純品；反應式
5.根據權利要求4所述的一種3，4，5，-三取代氨基噻吩類化合物的制備方法，其特征在于，胺類化合物選用芐胺、環己胺、環丙胺、嗎啉、哌啶或吡咯烷中的一種。
6.根據權利要求1所述的3，4，5-三取代氨基噻吩類化合物及其鹽在制備腫瘤藥物中的應用，其特征在于，是在制備治療與P53-MDM2信號通路有關的疾病的藥物中的用途。
全文摘要
本發明提供一類3,4,5,-三取代氨基噻吩類化合物，以取代苯為原料，經傅克酰基化反應、Knoevenagel縮合、環合反應、水解反應和縮合反應得3,4,5,-三取代氨基噻吩衍生物。本發明提供的化合物及其鹽，經藥理實驗證實對阻斷p53-MDM2相互作用具有明顯功效，并對腫瘤細胞有顯著的體外增殖抑制活性，IC50達到μM級。本發明設計合理，所用原料來源廣泛，制備方法簡便，反應條件溫和，各步收率高，適于實用，可在制備抗腫瘤藥物中應用；本發明結構通式為。
文檔編號A61K31/4535GK102503930SQ20111033512
公開日2012年6月20日 申請日期2011年10月28日 優先權日2011年10月28日
發明者何俏軍, 劉滔, 楊波, 王味思, 盛榮, 胡永洲, 胡純琦 申請人:浙江大學