專利名稱：疏血通組合物在制備治療心肌缺血的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物的用途，具體地說，涉及疏血通組合物的新用途。
背景技術(shù)：
疏血通組合物是以地龍和水蛭為原料的中藥組合物，通常為注射劑，授權(quán)公告號 CN1192782C，公告日2005年3月16日，發(fā)明名稱“治療心腦血管疾病的注射劑的制造方法及其產(chǎn)品”的發(fā)明專利公開了該中藥組合物注射劑的制備方法。目前，疏血通注射劑用于治療急性期腦梗塞，具有抗栓、溶栓、改善血液循環(huán)的作用。心肌缺血性疾病時一種常見疾病，多發(fā)于中老年人群中。且心肌缺血性疾病的發(fā)病隨年齡的增長而增高，程度也隨年齡的增長而加重，有資料表明，自40歲開始，每增加10 歲，心肌缺血性疾病的患病率增加1倍。在我國，心肌缺血性疾病的發(fā)病率約在30%，且逐年增高，現(xiàn)已成為導(dǎo)致人口死亡的主要原因之一。目前治療心肌缺血性疾病的藥物有化學(xué)藥物，也有中藥制劑。其中，常用的化學(xué)藥物包括硝酸酯制劑、β阻滯劑、抗血小板藥物、抗凝藥物、鈣通道阻滯劑等，但這些化學(xué)藥物常常導(dǎo)致一些不良反應(yīng)，如誘發(fā)支氣管哮喘、引起心力衰竭等。常用的中藥制劑包括丹參制劑、復(fù)方銀杏制劑等，但不同患者的個體體質(zhì)不完全相同，因此這些中藥制劑的療效也不完全相同。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種疏血通組合物的新用途。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供疏血通組合物在制備治療心肌缺血藥物中的應(yīng)用，所述疏血通組合物主要由如下重量份的原料藥制成水蛭150 650份、地龍850 350 份。其中，原料藥優(yōu)選的重量份配比為水蛭300 600份、地龍500 800份。本發(fā)明所述的重量份可以是yg、mg、g或kg等醫(yī)藥領(lǐng)域公知的重量單位。本發(fā)明的疏血通組合物可以制成藥學(xué)上可接受的各種劑型，例如，可以通過本領(lǐng)域常規(guī)方法，使用藥學(xué)上可接受的載體制成湯劑、片劑、顆粒劑等口服劑，或者注射劑；優(yōu)選為注射劑。上述疏血通組合物的注射劑，其制備方法可參見授權(quán)公告號CN1192782C的發(fā)明專利中公開的制備方法。經(jīng)試驗證明，本發(fā)明所述的疏血通組合物能夠使心肌缺血范圍縮小、缺血程度減輕，心肌梗死范圍縮小，減少心肌耗氧量，抑制血清心肌酶活性升高；能夠抑制腺苷二磷酸鈉(ADP)、花生四烯酸(AA)及膠原(CG)誘導(dǎo)的血小板聚集；能夠明顯延長實驗性動脈血栓形成時間；能夠降低高分子右旋糖苷引起的全血粘度、血漿粘度的升高，對血沉和紅細胞壓積也有有益的影響；還能夠改善紅細胞流態(tài)和毛細血管開放數(shù)；此外，疏血通組合物對血流動力學(xué)各項指標(biāo)未產(chǎn)生明顯影響。綜上所述，本發(fā)明所述的疏血通組合物具有明顯的抗心肌缺血作用和活血化瘀作用，其作用強度較丹紅注射液稍強或相當(dāng)，為疏血通組合物的應(yīng)用拓展了新的臨床應(yīng)用領(lǐng)域。


圖1為疏血通注射劑對急性心肌缺血犬缺血程度和缺血范圍的影響的示意圖。圖2為疏血通注射劑對急性心肌缺血犬心肌梗死范圍的影響的示意圖。圖3為疏血通注射劑對急性心肌缺血犬血清心肌酶的影響的示意圖。圖4為疏血通注射劑對急性心肌缺血犬心肌耗氧量的影響的示意圖。圖5為疏血通注射劑對急性心肌缺血大鼠心肌梗死范圍的影響的示意圖。圖6為疏血通注射劑對心肌缺血大鼠血清心肌酶的影響的示意圖。圖7為疏血通注射劑對大鼠實驗性血栓形成時間的影響的示意圖。
具體實施例方式以下通過具體實施例來進一步說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。以下實施例中所用到的相關(guān)試驗材料如下1、藥品與試劑受試藥疏血通注射液(以下簡稱疏血通)，牡丹江友搏藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)， 該疏血通的配比及制備方法參見授權(quán)公告號CN1192782C的實施例1，批號070202-2，黃色澄明液體，規(guī)格2mL/支；臨用前，以生理鹽水制成所需濃度的藥液供動物給藥用。陽性對照藥丹紅注射液(以下簡稱丹紅)，濟南步長制藥有限公司生產(chǎn)，批號 070631，紅棕色澄明液體，規(guī)格IOmL/支；臨用前，以生理鹽水制成所需濃度的藥液供動物給藥用。紅四氮唑(TTC)，上海試劑三廠生產(chǎn)，以磷酸鹽緩沖液配制成的溶液供染色用。天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒，乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒杜邦公司生產(chǎn)。肌酸激酶同工酶(CK-MB)試劑盒利德曼公司生產(chǎn)。高分子右旋糖酐(分子量50萬)，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病研究所科技公司生產(chǎn)。腺苷二磷酸鈉(ADP) :SIGMA公司生產(chǎn)?；ㄉ南┧?AA) :ICM公司生產(chǎn)，以IN Na2CO3溶液中和、溶解，并以Tris緩沖液稀釋配制成20mM的花生四烯酸鈉溶液。膠原(CG)稱取大鼠腹部去毛皮膚lg，放入生理鹽水冰水浴中，以玻璃研磨器研磨成勻漿，3000rpm離心IOmin后取上清液，上清液再以8000rpm離心lOmin，制得100mg/mL 的溶液。凝血酶時間(TT)診斷試劑盒，凝血酶原時間(PT)診斷試劑盒，活化部分凝血活酶時間(APTT)診斷試劑盒德國美創(chuàng)公司生產(chǎn)。2、試驗動物ICR小鼠，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所實驗動物中心提供，動物合格證號 SCXK 津 2005-0001。SD大鼠，北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，動物合格證號SCXK (京)2007-0001。Wistar大鼠，北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，動物合格證號 SCXK (京)2007-0001。beagle犬，中國維光實驗動物中心。合格證號SCXK(皖)06-001。雜種犬，購自天津市郊。飼養(yǎng)觀察兩周以上備用。實施例1對實驗性急性心肌缺血犬的治療作用一、試驗方法成年健康雜種犬，體重11. 4 士 1.2 (10 15) kg，雌雄兼用，靜脈注射3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)麻醉。左側(cè)第四肋間開胸，暴露心臟，分離冠狀動脈左旋支，經(jīng)MFV-3200型電磁血液流量計測定冠狀動脈血流量(CBF)；分離冠狀動脈前降支第二分支以下一段血管， 于其下穿0#絲線，以備結(jié)扎；在結(jié)扎線下擬缺血心肌表面放置30個點的多點固定式心外膜電極，心肌電信號經(jīng)AB-601G生物電放大器，標(biāo)測30個點的心外膜心電圖變化。股動脈插管至腹主動脈，經(jīng)TP-400T型壓力換能器接AP-641G血壓放大器測量收縮壓(SAP)、舒張壓 (DAP)、平均動脈壓(MAP)；四肢皮下插入針狀電極，經(jīng)AC-601G心電放大器測量標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)心電圖(ECGII)。上述模擬信號同步輸入RM-6300型八導(dǎo)生理記錄儀(日本光電公司生產(chǎn))，經(jīng)MP-150系統(tǒng)采集、轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號，以AcqKnowledge v. 3. 5. 7軟件進行分析處理。待各項指標(biāo)穩(wěn)定后開始連續(xù)采集各種數(shù)據(jù)，作為基礎(chǔ)值。隨后結(jié)扎冠脈前降支， 15min后記錄缺血性心外膜心電圖，作為給藥前值。實驗分5組，每組6只犬，采用靜脈恒速輸注方式給藥，給藥時間30min，給藥體積為15mL/只。對照組給予生理鹽水；3個受試藥組給予疏血通，劑量分別為0. 1,0. 2,0. 4mL 原液/kg，按體表面積折算，分別相當(dāng)于臨床用量的0. 5、1、2倍；陽性藥組給予丹紅注射液， 劑量為0. 5mL原液/kg，按體表面積折算，相當(dāng)于臨床用量的2倍。測量開始給藥后10、20、 30、40、60、90、120min 的 ECGII、SAP、DAP、MAP、CBF 及 30 個點的心外膜心電圖。以心外膜心電圖ST段升高值的總和(Σ ST)作為衡量心肌缺血程度的指標(biāo)；將心外膜心電圖ST段升高超過2mV的點定為缺血點，計算總?cè)毖c數(shù)(NST)，作為心肌缺血范圍的指標(biāo)。于給藥前及給藥后30、60min取動脈血及冠狀靜脈竇血以ABL-520型血氣分析儀 (丹麥Radiometre公司)測定動、靜脈血的氧分壓和氧飽和度。于給藥前及給藥后Mi取血離心制備血清，以RXL全自動生化分析儀(杜邦公司)進行AST、LDH、CK-MB測定。分別于給藥前及給藥后30、60min取血離心制備血漿，用凝血儀測定凝血酶時間(TT)、凝血酶原時間(PT)、部分凝血活酶時間(APTT)。分別于給藥前及給藥后30、60、90、120min用試紙法和重量法測定出血時間和出血量。給藥后他放血處死動物，迅速取出心臟，以1/3心臟重量作為左旋支引流區(qū)，計算每百克心肌的血流量(CF)，并按公式計算冠脈阻力(CR)及心肌耗氧量。公式如下CF = CBF X 300/ 心臟重量 CR = MAP/CF血氧含量=1.39 X 15 X氧飽和度+0.03 X血氧分壓心肌耗氧量=(動脈血氧含量-靜脈血氧含量)XCBF/100心臟稱重后以伊文思蘭冠脈SOmmHg逆向灌流，在結(jié)扎部位以下，將心室按約 5mm厚平行于房室溝冠狀切片，切片上未染蘭的區(qū)域為結(jié)扎血管的灌流區(qū)，即危險區(qū)；室溫下切片以TTC避光染色lOmin，危險區(qū)內(nèi)梗死心肌呈白色，存活心肌呈紅色，測量危險區(qū)、梗死區(qū)面積，并計算心肌梗死范圍。以t檢驗比較給藥前后和組間均數(shù)差異的顯著性。 結(jié)果如表1、圖1所示。二、試驗結(jié)果1、對心外膜心電圖的影響(1)對缺血程度(Σ ST)的影響對照組靜脈給予生理鹽水后池內(nèi)，Σ ST與給藥前比較無顯著變化。靜脈給予疏血通后，Σ ST劑量依賴性地降低；0. 1,0. 2,0. 4mL/kg疏血通組分別于給藥30、20、10min 后，Σ ST開始明顯下降，3個劑量池內(nèi)最大下降百分?jǐn)?shù)分別為25.511.0% (P < 0.01)、 40. 59. 2% (P< 0. 001),56.311.6% (P < 0. 001)，高劑量作用持續(xù)2h以上。與丹紅注射液(0.5mL/kg)比較，疏血通(0.4mL/kg)作用更快，強度也更高。結(jié)果見表1、圖1。(2)對缺血范圍(NST)的影響靜脈給予NS后池內(nèi)，NST無明顯改變。靜脈給予疏血通后心肌缺血范圍有不同程度縮小，0. 1、0. 2、0. %iL/kg疏血通組分別于給藥40、30、30min NST后，NST開始明顯減少，2h 內(nèi)心肌缺血范圍最大下降了 11.0 士 8. 4% (P > 0. 05),24. 1 士 13. 1 % (P < 0.05)、 28. 1 士 14. 6% (P < 0. 01)，高劑量作用持續(xù)2h以上。與丹紅注射液(0. 5mL/kg)比較，疏血通(0. 4mL/kg)作用略強，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P > 0. 05)。結(jié)果見表1、圖1。表1疏血通對急性心肌缺血犬缺血程度(Σ ST)和缺血范圍(NST)的影響(士s， η = 6)注1、括號內(nèi)數(shù)據(jù)為與給藥前的差值；2、與給藥前配對比較< 0.05，**Ρ < 0. 01 ；3、與對照組比較ΔΡ<0. 05，δδΡ<0. 01 ；4、疏血通0. 4mL/kg與丹紅注射液0. 5mL/ kg 比較，++P < 0. 01。2、對心肌梗死范圍的影響TTC染色結(jié)果表明，對照組梗死區(qū)占危險區(qū)的6% ；靜脈給予疏血通后，心肌梗死范圍劑量依賴性縮小，0. 1、0. 2、0.4mL/kg梗死區(qū)占危險區(qū)分別縮小了 17.2% (P >0. 05),32. 1 % (P < 0. 05),42. 1 % (P < 0.01)；梗死區(qū)占左室分別縮小了 22.7% (P > 0. 05),34.0% (P > 0.01),43. 3% (P < 0. 01)。陽性藥組明顯縮少心肌梗死范圍。與丹紅注射液(0.5mL/kg)比較，疏血通(0.4mL/kg)稍強，但無統(tǒng)計學(xué)差別。結(jié)果見表2、圖2。
表2疏血通對急性心肌缺血犬心肌梗死范圍的影響(士s，η = 6)
權(quán)利要求
1.疏血通組合物在制備治療心肌缺血的藥物中的應(yīng)用，所述疏血通組合物主要由如下重量份的原料藥制成水蛭150 650份、地龍850 350份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述疏血通組合物主要由如下重量份的原料藥制成水蛭300 600份、地龍500 800份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述疏血通組合物的劑型為藥學(xué)上可接受的劑型。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述疏血通組合物的劑型為注射劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了疏血通組合物在制備治療心肌缺血的藥物中的應(yīng)用，所述疏血通組合物主要由如下重量份的原料藥制成水蛭干品250～750份、地龍干品750～250份。本發(fā)明所述的疏血通組合物具有明顯的抗心肌缺血作用和活血化瘀作用，其作用強度較丹紅注射液稍強或相當(dāng)，為疏血通組合物的應(yīng)用拓展了新的臨床應(yīng)用領(lǐng)域。
文檔編號A61K35/62GK102389441SQ20111036606
公開日2012年3月28日 申請日期2011年11月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月17日
發(fā)明者李振國 申請人:牡丹江友搏藥業(yè)有限責(zé)任公司