專利名稱：預(yù)防仔豬疾病的注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種注射液及其制備方法，特別是涉及一種預(yù)防仔豬疾病的注射液及其制備方法。
背景技術(shù)：
目前，我國(guó)的生豬養(yǎng)殖生產(chǎn)正面臨著豬病多、難防治、死亡高、用藥大、高投入、低回報(bào)的困境，養(yǎng)殖單位隨時(shí)都會(huì)遭遇到因損失慘敗而告終，人們?yōu)榱祟A(yù)防仔豬的各種疾病， 例如陽(yáng)性細(xì)菌引發(fā)的胸膜性肺炎、鏈球菌病、金黃色葡萄球菌等，大量使用抗生素及各種飼料添加剤，這與當(dāng)前國(guó)民對(duì)肉食食品安全性的強(qiáng)烈要求和呼聲相違背，又由于豬病的病原微生物，因長(zhǎng)期同藥物相接觸，已經(jīng)從耐藥性向變異性方向過渡，導(dǎo)致現(xiàn)有的抗生素很難再達(dá)到有效的預(yù)防效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是為了解決上述技術(shù)的不足，提供一種預(yù)防仔豬疾病的注射液及其制備方法，本發(fā)明利用雞卵黏蛋白作為載體，緩釋和延長(zhǎng)了鹽酸林可霉素的排出時(shí)間，增強(qiáng)了鹽酸林可霉素的血藥濃度和作用時(shí)間。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明所提供的技術(shù)方案是一種預(yù)防仔豬疾病的注射液，它包括如下原料制成雞卵黏蛋白IOOmg - 120mg、抗生素20mg-50mg、緩沖液lml_2ml和注射用水 1. 5ml-3. 5ml。進(jìn)ー步的，所述緩沖液為PH7-7. 2的磷酸鹽緩沖液。進(jìn)ー步的，所述抗生素為鹽酸林可霉素。進(jìn)ー步的，所述抗生素為硫酸慶大霉素。一種預(yù)防仔豬疾病的注射液的制備方法，它包括如下步驟
(1)取適量注射用水將雞卵黏蛋白稀釋成雞卵黏蛋白溶液后，與緩沖液混合，緩慢攪拌 15-35分鐘；
(2)取適量注射用水將抗生素溶解后，與上述混合液混合，并緩慢攪拌3- 7分鐘，即得所述預(yù)防仔豬疾病的注射液。進(jìn)ー步的，所述緩沖液為lml。進(jìn)ー步的，在步驟(2)中制成的抗生素溶液的體積為1. 2mL·進(jìn)ー步的，所述預(yù)防仔豬疾病的注射液為細(xì)1。采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明的技術(shù)效果有
(1)本發(fā)明用雞卵黏蛋白作為載體，通過人工被動(dòng)免疫，刺激豬體發(fā)生體液免疫和細(xì)胞免疫，從而利用自身的免疫力來(lái)殺滅侵入體內(nèi)的靶細(xì)胞。(2)本發(fā)明利用雞卵黏蛋白可緩釋和延長(zhǎng)了鹽酸林可霉素的排出時(shí)間，增強(qiáng)了鹽酸林可霉素的血藥濃度和作用時(shí)間，實(shí)現(xiàn)小劑量發(fā)揮大療效的作用。
具體實(shí)施例方式雞卵黏蛋白在本發(fā)明中可利用自身的抗原性，刺激豬體，提高豬體自身的免疫抗體，增強(qiáng)自身抗御疾病的能力，且由于雞卵黏蛋白為ー種膠體物，可緩釋和延長(zhǎng)鹽酸林可霉素的排出時(shí)間，增強(qiáng)了鹽酸林可霉素的血藥濃度和作用時(shí)間，實(shí)現(xiàn)小劑量發(fā)揮大療效的作
ο鹽酸林可霉素作為窄譜抗生素，對(duì)革蘭陽(yáng)性球菌有較好作用，特別對(duì)厭氣菌、金葡菌及肺炎球菌有高效，其作用機(jī)制和紅霉素相似，屬抑菌劑，主要用于敏感菌引起的各種感染，如肺炎、腦膜炎、心內(nèi)膜炎、蜂窩織炎、扁桃體炎、丹毒、癤及泌尿系統(tǒng)感染等。硫酸慶大霉素作為氨基糖甙類廣譜抗生素，對(duì)多種革蘭陰性菌及陽(yáng)性菌都具有抑菌和殺菌作用。對(duì)綠膿桿菌、產(chǎn)氣桿菌、肺炎桿菌、沙門氏菌屬、大腸桿菌及變形桿菌等革蘭陰性菌和金葡菌等作用較強(qiáng)。緩沖液在本發(fā)明中可平衡酸堿度，避免注射本發(fā)明的豬仔出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)。注射用水在本發(fā)明中作為ー種溶劑，調(diào)節(jié)各組份的濃度，有利于豬仔吸收。以下為本發(fā)明所提供的實(shí)施例，僅是進(jìn)ー步說(shuō)明本發(fā)明的應(yīng)用，而不是限定。實(shí)施例1
一種預(yù)防仔豬疾病的注射液，它包括如下原料制成
雞卵黏蛋白120mg;
鹽酸林可霉素；
緩沖液Iml ；
注射用水3ml ；
其中，緩沖液為PH7. 2的磷酸鹽緩沖液。一種預(yù)防仔豬疾病的注射液的制備方法，它包括如下步驟
(1)取1.2ml注射用水將120mg雞卵黏蛋白稀釋成雞卵黏蛋白溶液后，與Iml緩沖液混合，緩慢攪拌30分鐘，防止攪拌時(shí)混合液產(chǎn)生氣泡；
(2)取1.2ml注射用水將鹽酸林可霉素溶解后，與上述混合液混合，并緩慢攪拌5 分鐘，再用0. 6ml注射用水進(jìn)行稀釋，即得所述預(yù)防仔豬疾病的注射液。實(shí)施例2
一種預(yù)防仔豬疾病的注射液，它包括如下原料制成 雞卵黏蛋白120mg; 硫酸慶大霉素48mg ； 緩沖液Iml ； 注射用水3ml ；
其中，緩沖液為PH7. 2的磷酸鹽緩沖液。一種預(yù)防仔豬疾病的注射液的制備方法，它包括如下步驟
(1)取1.2ml注射用水將120mg雞卵黏蛋白稀釋成雞卵黏蛋白溶液后，與Iml緩沖液混合，緩慢攪拌30分鐘；
(2)取1.2ml注射用水將48mg硫酸慶大霉素溶解后，與上述混合液混合，并緩慢攪拌5 分鐘，再用0. 6ml注射用水進(jìn)行稀釋，即得所述預(yù)防仔豬疾病的注射液。實(shí)施例3一種預(yù)防仔豬疾病的注射液，它包括如下原料制成
雞卵黏蛋白IOOmg;
鹽酸林可霉素20mg ；
緩沖液2ml ；
注射用水1. 5ml ；
其中，緩沖液為Ph7的磷酸鹽緩沖液。一種預(yù)防仔豬疾病的注射液的制備方法，它包括如下步驟
(1)取0.8ml注射用水將IOOmg雞卵黏蛋白稀釋成雞卵黏蛋白溶液后，與2ml緩沖液混合，緩慢攪拌15分鐘； (2)取0.7ml注射用水將20mg鹽酸林可霉素溶解后，與上述混合液混合，并緩慢攪拌3 分鐘，即得所述預(yù)防仔豬疾病的注射液。實(shí)施例4
一種預(yù)防仔豬疾病的注射液，它包括如下原料制成 雞卵黏蛋白130mg; 硫酸慶大霉素40mg ； 緩沖液2ml ； 注射用水3. 5ml ；
其中，緩沖液為Ph7的磷酸鹽緩沖液。—種預(yù)防仔豬疾病的注射液的制備方法，它包括如下步驟
(1)取1.5ml注射用水將130mg雞卵黏蛋白稀釋成雞卵黏蛋白溶液后，與2ml緩沖液混合，緩慢攪拌35分鐘；
(2)取2ml注射用水將40mg硫酸慶大霉素溶解后，與上述混合液混合，并緩慢攪拌7分鐘，即得所述預(yù)防仔豬疾病的注射液。以下為本發(fā)明中雞卵黏蛋白的氨基酸序列 GACATACAGCTAGAAAGCTGTATTGCCTTTAGCACTCAAGCTCAAAAGACAACTCAGAGTTCACCATGGGCTC
CATCGGCGCAGCAAGCATGGAATTTTGTTTTGATGTATTCAAGGAGCTCAAAGTCCACCATGCCAAT
MGS
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TCAGTGTGGCACATCTGTAAACGTTCACTCTTCACTTAGAGACATCCTCAACCAAATCACCAAACCAAATGAT GTTTATTCGTTCAGCCTTGCCAGTAGACTTTATGCTGAAGAGAGATACCCAATCCTGCCAGAATACT
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GCTCTTCCTGACTTCCTAAAGATGCATTATAAAAATCTTATAATTCACATTTCTCCCTAAACTTTGACTCAAT CATGGTATGTTGGCAAATATGGTATATTACTATTCAAATTGTTTTCCTTGTACCCATATGTAATGGG TCTTGTGAATGTGCTCTTTTGTTCCTTTAATCATAATAAAAACATGTTTAAGC 以下舉例說(shuō)明本發(fā)明中的雞卵黏蛋白的制備方法
1、采用方法有機(jī)溶劑沉淀法，經(jīng)DEAE——纖維素柱層析純化，獲得合格產(chǎn)品。
2、試劑及器材
(1)丙醇(分析純);
(2)0.5mol/L三氯乙酸溶液；
(3)0.02mol/LPH6. 5磷酸鹽緩沖液；
(4)0. 3mol/L NaCL-O. 02mol/LPH6. 5 磷酸鹽緩沖液；
(5)0.5mol/L NaCL-O. 02mol/LPH6. 5 磷酸鹽緩沖液；(6)DEAE——纖維素(DE-32 或 52)；
(7)層析柱2.8X30cm; 3、操作
(1)制備過程
用進(jìn)行禽流感抗原檢測(cè)為陰性的雞蛋，在無(wú)菌環(huán)境下收取其蛋清300g，置于燒杯中，將燒杯放入30°C水浴中，在不斷攪拌下加入等體積的三氯乙酸——丙醇溶液(40ml0. 5mol/L 三氯乙酸與80ml丙醇混合而成，即1:2V/V)。再繼續(xù)攪拌30min，然后放在4°C的條件下靜置10-1 后，過濾取其淺黃色清亮過濾液。取Iml濾液于試管中放入水浴中，在80°C緩慢攪拌下，加入4°C預(yù)冷的丙醇500ml，出現(xiàn)沉淀后，在4°C的條件下靜置池，抽濾，獲得卵類黏蛋白濾餅。(2)卵類黏蛋白的純化
將制得的卵類黏蛋白濾餅溶于蒸餾水中，調(diào)PH值為4. 5，裝入透析袋，用蒸餾水透析， 除去三氯乙酸，再用0. 02mol/LPH6. 5磷酸鹽緩沖液透析平衡(在4°C的條件下);再將已處理好的DEAE——纖維素離子交換劑用0. 02mol/LPH6. 5磷酸鹽緩沖液浸泡1_5分鐘，換洗3_6 次后，裝入層析柱(2. 8X30cm)，以0. 02mol/LPH6. 5磷酸鹽緩沖液繼續(xù)流經(jīng)層析柱，直到流出液的PH與進(jìn)入的緩沖液PH6. 5相同。然后將透析好的卵類黏蛋白上層吸柱，先用0. 02mol/LPH6. 5磷酸鹽緩沖液洗脫， 在檢測(cè)儀上出現(xiàn)第一峰，此為雜蛋白，
而后改用5mol/LNaCL-0. 02mol/LPH6. 5磷酸鹽緩沖液浸泡洗脫，此時(shí)出現(xiàn)第二峰，即為卵類黏蛋白，最后用0. 5mol/L NaCL-O. 02mol/LPH6. 5磷酸鹽緩沖液，進(jìn)行洗脫至無(wú)蛋白出現(xiàn)。合并卵類黏蛋白收集液，加入硫酸銨粉末，使飽和達(dá)到0. 8，鹽析10-1 后，離心取得沉淀物，即為雞卵黏蛋白。本發(fā)明預(yù)防仔豬疾病的注射液主要用于5日和22日齡的仔豬注射，臨床試驗(yàn)證明，硫酸慶大霉素與雞卵黏蛋白混合制成的注射液用于5日齡的仔豬，可以有效的預(yù)防陽(yáng)性細(xì)菌引發(fā)的綠膿桿菌、產(chǎn)氣桿菌、肺炎桿菌、沙門氏菌屬、大腸桿菌及變形桿菌等疾病；鹽酸林可霉素與雞卵黏蛋白混合制成的注射液用于22日齡的仔豬，可以有效的預(yù)防陰性細(xì)菌引發(fā)的肺炎、腦膜炎、心內(nèi)膜炎、蜂窩織炎、扁桃體炎、丹毒、癤及泌尿系統(tǒng)感染等；可以使仔豬的發(fā)病率下降到平時(shí)的50%，確實(shí)體現(xiàn)出仔豬活潑健康，無(wú)病無(wú)恙。用法豬仔5日齡時(shí)注射1支硫酸慶大霉素與雞卵黏蛋白混合制成的注射液，在豬仔22日齡時(shí)注射1支鹽酸林可霉素與雞卵黏蛋白混合制成的注射液。下表為本發(fā)明對(duì)注射本發(fā)明的仔豬肌肉注射療效實(shí)驗(yàn)
權(quán)利要求
1.一種預(yù)防仔豬疾病的注射液，其特征在于它包括如下原料制成雞卵黏蛋白 IOOmg - 120mg、抗生素 20mg_50mg、緩沖液 lml_2ml 和注射用水 1. 5ml_3. 5ml。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的預(yù)防仔豬疾病的注射液，其特征在于所述緩沖液為PH7-7.2 的磷酸鹽緩沖液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的預(yù)防仔豬疾病的注射液，其特征在于所述抗生素為鹽酸林可霉素。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的預(yù)防仔豬疾病的注射液，其特征在于所述抗生素為硫酸慶大毒糸ο
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的預(yù)防仔豬疾病的注射液的制備方法，其特征在于它包括如下步驟(1)取適量注射用水將雞卵黏蛋白稀釋成雞卵黏蛋白溶液后，與緩沖液混合，緩慢攪拌 15-35分鐘；(2)取適量注射用水將抗生素溶解后，與上述混合液混合，并緩慢攪拌3- 7分鐘，即得所述預(yù)防仔豬疾病的注射液。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的預(yù)防仔豬疾病的注射液的制備方法，其特征在于所述緩沖液為1ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的預(yù)防仔豬疾病的注射液的制備方法，其特征在于在步驟(2)中制成的抗生素溶液的體積為1. 2mL·
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的預(yù)防仔豬疾病的注射液的制備方法，其特征在于所述預(yù)防仔豬疾病的注射液為4ml。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種預(yù)防仔豬疾病的注射液，它包括如下原料制成雞卵黏蛋白100mg–120mg、抗生素20mg-50mg、緩沖液1ml-2ml和注射用水1.5ml-3.5ml；本發(fā)明利用雞卵黏蛋白可緩釋和延長(zhǎng)了鹽酸林可霉素的排出時(shí)間，增強(qiáng)了鹽酸林可霉素的血藥濃度和作用時(shí)間，實(shí)現(xiàn)小劑量發(fā)揮大療效的作用。
文檔編號(hào)A61K9/08GK102580093SQ201110458220
公開日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者胡海玉 申請(qǐng)人:胡海玉