專利名稱：一種注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑及其制備方法和分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及一種注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑及其制備方法和分析方法。
背景技術(shù)：
維生素是維持人體正常功能的一類低分子有機(jī)化合物，它們既不是構(gòu)成機(jī)體組織的原料，也不是體內(nèi)供能的物質(zhì)，在體內(nèi)作為輔酶或參與構(gòu)成輔酶而起催化作用，促進(jìn)其它營養(yǎng)物質(zhì)的合成與降解，從而控制代謝，在調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝、促進(jìn)生長發(fā)育和維持生理功能等方面發(fā)揮著重要作用。人體對維生素需要量很小，但需要從外界攝取，不能合成或合成量不足。如果長期缺乏某種維生素，就會導(dǎo)致疾病。缺乏維生素C可患壞血酸病。缺乏維生素 B1可得腳氣病。缺乏維生素化(核黃素磷酸鈉)可患咽喉炎和口角炎、舌炎，唇炎(紅色剝脫唇)、面部脂溢性皮炎，軀干和四肢出現(xiàn)皮炎，隨后有貧血和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。有些病人有明顯的角膜血管增生和白內(nèi)障形成，陰囊炎、陰道炎等。維生素按其溶解性分為脂溶性和水溶性維生素兩大類。脂溶性維生素包括維生素A、D、E、K等；水溶性維生素包括維生素B族(Bp B2, B6)、維生素C、PP等。脂溶性維生素人體吸收后可儲存到脂肪等組織，完全代謝完畢可達(dá)數(shù)月之久，因而不易缺乏。水溶性維生素一般容易排泄，不易蓄積，且無毒性，如維生素B1、維生素B2、維生素C等，過量服用后很快被排泄出體外，所以維生素缺乏首先是以水溶性維生素缺乏為主。水溶性維生素在人體內(nèi)合成極少，又無一定儲存，卻擔(dān)負(fù)著維持組織和細(xì)胞的正常代謝過程，因此該類物質(zhì)在營養(yǎng)素中占有重要地位。多種疾病可伴隨有水溶性維生素的缺乏或需要量增加，如胃腸道功能紊亂，慢性酒精中毒、發(fā)燒、慢性或消耗性疾病、甲狀腺功能亢進(jìn)、糖尿病等；生長期和妊娠期及哺乳期間水溶性維生素需要量增大，因此，孕婦和兒童必需補充水溶性維生素；另外，老人、肥胖病人、嚴(yán)重?zé)齻∪恕⑼饪剖中g(shù)恢復(fù)病人、透析治療病人都需要補充維生素。臨床研究發(fā)現(xiàn)，所有的水溶性維生素缺乏癥患者并非只缺乏某一種維生素，而是伴有多種水溶性維生素的缺乏。所以，補充水溶性維生素，不應(yīng)單一補充一種，而應(yīng)補充常見幾種水溶性維生素，包括VitC、VitB1, VitB20對于復(fù)合維生素類藥物的補充，靜脈給藥劑型比口服劑型有許多優(yōu)越之處。維生素的藥理作用跟血漿濃度有很大的關(guān)系，例如維生素C在血藥濃度10-15mg/dl時才具有抗病毒作用，而這一濃度口服給藥無法達(dá)到。靜注后能迅速達(dá)到口服給藥無法比擬的高血藥濃度，靜脈注射1. 25g維生素C，血藥峰濃度可達(dá)1000 μ mol/L ；靜脈注射5_10g維生素C， 血藥峰濃度可達(dá)5000μπιΟ1/1。而口服維生素C血藥峰濃度最大僅能達(dá)100 μ mol/L (每日口服劑量Ig或以上)。口服給藥胃腸吸收比例低，還容易受胃腸各種因素的影響。所以，靜脈注射起效更快、療效更顯著。復(fù)方維生素注射液(Plevita S Injection)是由日本扶桑藥品工業(yè)株式會社研究開發(fā)的復(fù)合維生素水針制劑，于1985年8月在日本上市銷售，該注射液由維生素B1、維生素B2和維生素C三種維生素組成，適用于缺乏維生素化、維生素C及維生素B1的人群(如消耗性疾病、孕婦和哺乳期婦女等)。經(jīng)過二十多年的臨床應(yīng)用證明其安全有效。但是，Plevita S Injection作為水針制劑有它的局限性。首先，維生素C、維生素 B1、維生素化在水溶液中均不穩(wěn)定，尤其是在注射液的常規(guī)終端滅菌下，這些藥物往往含量下降明顯，有關(guān)物質(zhì)增加顯著，成品在運輸、儲存過程中穩(wěn)定性差。其次，為了提高制劑的穩(wěn)定性，常常需要額外地添加增溶劑、抗氧劑、螯合劑等，如丙二醇、枸櫞酸、依地酸二鈉等，而這些輔料又往往會增加用藥安全隱患，如各種濃度丙二醇會使紅細(xì)胞全溶血，依地酸二鈉進(jìn)入人體內(nèi)可以螯合體內(nèi)的鈣離子，造成人體內(nèi)血鈣濃度降低等。因此注射劑添加輔料的原則是盡量避免添加輔料，可不添加的品種不添加，將影響產(chǎn)品安全性的因素降到最低。 第三，水針制劑在運輸和貯藏條件上存在一定局限。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的在于針對以上不足之處提供一種注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑，該凍干粉針劑制備方法簡單，穩(wěn)定性好，安全性高，便于儲存和運輸。本發(fā)明的另一目的在于提供上述注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑的制備方法， 該制備方法簡單，重現(xiàn)性好，可操作性強，且制得的注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑穩(wěn)定性好，安全性高。本發(fā)明的另一目的在于提供上述注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑的分析方法， 特別是針對不穩(wěn)定主藥的有關(guān)物質(zhì)的分析方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的。一種注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑，其包括維生素Bj 15重量份、核黃素磷酸鈉3 8重量份(扣除結(jié)晶水計)、維生素C 150 250重量份和甘氨酸350 500重量份，且制備過程中用作溶劑并最終除去的注射用水1000 5000重量份。上述的注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑，其優(yōu)選包括維生素B1IO重量份、核黃素磷酸鈉6. 355重量份(扣除結(jié)晶水計)、維生素C 200重量份和甘氨酸400重量份，且制備過程中用作溶劑并最終除去的注射用水3000重量份。上述的注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑，其優(yōu)選包括維生素B1IO重量份、核黃素磷酸鈉6. 355重量份(扣除結(jié)晶水計)、維生素C 200重量份和甘氨酸450重量份，且制備過程中用作溶劑并最終除去的注射用水4000重量份。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑成品中并不含在制備過程中用作溶劑的注射用水，或者僅存在少量殘留水分，因為大部分(或全部)注射用水都已在冷凍干燥的過程中被除去。但在本發(fā)明的注射用復(fù)方維生素(3) 凍干粉針劑的制備過程中，必須使用注射用水作為溶劑，并且其用量與最終成品的質(zhì)量相關(guān)。因此，在描述本發(fā)明的注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑時對注射用水進(jìn)行限定是必要的。上述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑，其進(jìn)一步包括pH調(diào)節(jié)劑，所述pH調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、磷酸、檸檬酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀和磷酸氫鈉中的至少一種。上述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑，其中所述pH調(diào)節(jié)劑的加入量使所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑在冷凍干燥前的溶液pH值為3.0 4. 5，優(yōu)選為3. 5 4. 5。本發(fā)明還提供了一種注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑的制備方法，所述制備方法包括以下步驟(1)稱取甘氨酸，加注射用水配制成10% 35%的甘氨酸溶液，再分別稱取維生素B1、核黃素磷酸鈉、維生素C，依次加入甘氨酸溶液中攪拌溶解，加注射用水至約80% 90%總配液量，攪拌均勻；(2)將步驟(1)所得的溶液用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH值至規(guī)定范圍，加針用活性炭吸附 15分鐘，除炭過濾；(3)將步驟( 所得的濾液補加注射用水至配液全量，經(jīng)0.22 μ m濾器過濾，將濾液無菌灌裝；(4)將步驟(3)所得的灌裝的藥液冷凍干燥，軋蓋，即得。上述的注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑的制備方法，其中步驟O)中所述的針用活性炭的加入量為步驟(1)所得溶液的0.03% (g/ml)，并且在吸附過程中充氮攪拌。上述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑的制備方法，其中步驟⑷中所述的冷凍干燥程序為擱板溫度降至-45 °C，制品溫度降至-36°C以下時，將擱板回溫至-35 -10°C左右，再將擱板制冷至_45°C以下保持1 6小時，啟動真空泵，制品開始升華，擱板按1 8°C /小時升溫至25°C，制品接近擱板溫度時保持3-8小時。上述的注射用復(fù)方維生素( 凍干粉針劑的制備方法，其中步驟中所述的冷凍干燥程序優(yōu)選為擱板溫度降至-45°C，制品溫度降至-36°C以下時，將擱板回溫至-30 _15°C左右，再將擱板制冷至_45°C以下保持1 3小時，啟動真空泵，制品開始升華，擱板按2 5°C /小時升溫至25°C，制品接近擱板溫度時保持6小時。本發(fā)明的注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑與現(xiàn)有技術(shù)相比，其制備過程全程采用無菌操作，低溫干燥，避免了由高溫滅菌造成的降解，提高了維生素類主藥在生產(chǎn)過程中的穩(wěn)定性，避免因含量下降導(dǎo)致的療效降低以及由有關(guān)物質(zhì)導(dǎo)致的毒副作用產(chǎn)生；處方組成中除了凍干粉針劑必要的賦形劑(甘氨酸)外未添加其它增溶劑、穩(wěn)定劑等輔料，充分保障了產(chǎn)品的安全性；儲存穩(wěn)定性好；粉針劑在運輸、貯藏方面較水針和輸液具有一定優(yōu)勢。為了更有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量及保證臨床用藥的安全性，本發(fā)明還提供了一種注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑的分析方法。在本發(fā)明的注射用復(fù)方維生素C3)凍干粉針劑中，3種主藥均不穩(wěn)定，其中以維生素C含量最高(分別為維生素B1、核黃素磷酸鈉的20倍和40倍)，且較另外兩個主藥更不穩(wěn)定，因此我們重點考察了維生素C中的降解物質(zhì)，并對另外2個主藥維生素B1和化的雜質(zhì)進(jìn)行了研究。經(jīng)過大量的方法篩選實驗，在驗證所用有關(guān)物質(zhì)分析方法可靠的基礎(chǔ)上，與上市主導(dǎo)的維生素C注射液、維生素B1注射液和核黃素磷酸鈉注射液對比，再結(jié)合中試生產(chǎn)樣品及穩(wěn)定性試驗樣品的測定結(jié)果，最終確定了檢測項目和分析方法，制定了合理限度，并訂入標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明所提供的分析方法采用高相液相色譜法對所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑中的不穩(wěn)定主藥的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測，具體分析項目、分析條件及步驟如下(1)草酸照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄VD)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用強酸性陽離子交換樹脂(H+型)為填充劑；磷酸溶液(0. 5 — 1000)為流動相；檢測波長為210nm ；理論板數(shù)按草酸計算應(yīng)不低于2500 ；
測定法精密稱取本品適量(約相當(dāng)于維生素C IOOmg)，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20μ 1注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取草酸對照品適量，精密稱定，加水溶解稀釋制成每Irnl中約含草酸10 μ g的溶液，即得；同法測定；按外標(biāo)法以峰面積計算，不得過維生素C標(biāo)示量的0.2% ；(2)核黃素磷酸鈉有關(guān)物質(zhì)照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄V D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.054mol/L磷酸二氫鉀溶液(15 85)為流動相；檢測波長為；取核黃素磷酸鈉對照品10mg，置50ml量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為系統(tǒng)適用性試驗溶液；量取20 μ 1注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)流速，使核黃素磷酸鈉峰的保留時間約為40分鐘，各色譜峰出峰順序如下，核黃素磷酸鈉峰與4’ -核黃素磷酸鈉峰的分離度應(yīng)大于2. O ；
權(quán)利要求
1.一種注射用復(fù)方維生素(3 )凍干粉針劑，其特征在于，所述注射用復(fù)方維生素(3 )凍干粉針劑包括維生素B1 5 15重量份、核黃素磷酸鈉；Γ8重量份(扣除結(jié)晶水計)、維生素C 150^250重量份和甘氨酸35(Γ500重量份，且制備過程中用作溶劑并最終除去的注射用水 1000^5000 重量份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑，其特征在于，所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑包括維生素B1 10重量份、核黃素磷酸鈉6. 355重量份(扣除結(jié)晶水計)、維生素C 200重量份和甘氨酸400重量份，且制備過程中用作溶劑并最終除去的注射用水3000重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑，其特征在于，所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑包括維生素B1 10重量份、核黃素磷酸鈉6. 355重量份(扣除結(jié)晶水計)、維生素C 200重量份和甘氨酸450重量份，且制備過程中用作溶劑并最終除去的注射用水4000重量份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑，其特征在于，所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑還包括ρΗ調(diào)節(jié)劑，所述ρΗ調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、磷酸、檸檬酸、氫氧化鈉、氫氧化鉀和磷酸氫鈉中的至少一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑，其特征在于，所述ρΗ 調(diào)節(jié)劑的加入量使所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑在冷凍干燥前的溶液ρΗ值為 3. 0 4· 5。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑，其特征在于，所述ρΗ 調(diào)節(jié)劑的加入量使所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑在冷凍干燥前的溶液ρΗ值為 3· 5 4· 5 ο
7.權(quán)利要求1-6任一項所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟(1)稱取甘氨酸，加注射用水配制成109Γ35%的甘氨酸溶液，再分別稱取維生素B1、核黃素磷酸鈉、維生素C，依次加入甘氨酸溶液中攪拌溶解，加注射用水至約809Γ90%總配液量， 攪拌均勻；(2)將步驟(1)所得的溶液用ρΗ調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)ρΗ值至規(guī)定范圍，加針用活性炭吸附15 分鐘，除炭過濾；(3)將步驟(2)所得的濾液補加注射用水至配液全量，經(jīng)0.22 μ m濾器過濾，將濾液無菌灌裝；(4)將步驟(3)所得的灌裝的藥液冷凍干燥，軋蓋，即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑的制備方法，其特征在于， 步驟(2)中，針用活性炭的加入量為步驟(1)所得溶液的0.03% (g/ml)，并且在吸附過程中充氮攪拌。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑的制備方法，其特征在于， 步驟(4)中所述的冷凍干燥程序為擱板溫度降至_45°C，制品溫度降至_36°C以下時，將擱板回溫至-35 -10°C左右，再將擱板制冷至_45°C以下保持1 6小時，啟動真空泵，制品開始升華，擱板按1 8°C /小時升溫至25°C，制品接近擱板溫度時保持3-8小時。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述的冷凍干燥程序為擱板溫度降至_45°C，制品溫度降至_36°C以下時， 將擱板回溫至-30 _15°C左右，再將擱板制冷至_45°C以下保持1 3小時，啟動真空泵， 制品開始升華，擱板按2 5°C /小時升溫至25°C，制品接近擱板溫度時保持6小時。
11.權(quán)利要求1-6任一項所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑的分析方法，其特征在于，采用高相液相色譜法對所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑中的不穩(wěn)定主藥的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測，具體分析項目、分析條件及步驟如下(1)草酸照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄VD)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用強酸性陽離子交換樹脂(H+型)為填充劑；磷酸溶液 (0. 5 — 1000)為流動相；檢測波長為210nm ；理論板數(shù)按草酸計算應(yīng)不低于2500 ；測定法精密稱取本品適量(約相當(dāng)于維生素C lOOmg)，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密吸取20μ1注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取草酸對照品適量，精密稱定，加水溶解稀釋制成每Iml中約含草酸10 μ g的溶液，即得；同法測定；按外標(biāo)法以峰面積計算，不得過維生素C標(biāo)示量的0. 2% ；(2)核黃素磷酸鈉有關(guān)物質(zhì)照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄VD)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0. 054!1101/1磷酸二氫鉀溶液(15:85)為流動相；檢測波長為；取核黃素磷酸鈉對照品10mg，置50ml量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為系統(tǒng)適用性試驗溶液； 量取20 μ 1注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)流速，使核黃素磷酸鈉峰的保留時間約為40分鐘，各色譜峰出峰順序如下，核黃素磷酸鈉峰與4’ -核黃素磷酸鈉峰的分離度應(yīng)大于2. 0 ；
全文摘要
本發(fā)明提供了一種注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑，所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑包括維生素B15~15重量份、核黃素磷酸鈉3~8重量份(扣除結(jié)晶水計)、維生素C150~250重量份和甘氨酸350~500重量份，且制備過程中用作溶劑并最終除去的注射用水1000~5000重量份。所述的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑穩(wěn)定性好，安全性高，并且方便儲存和運輸。本發(fā)明還提供了所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑的制備方法，制得的注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑穩(wěn)定性好，安全性高。本發(fā)明還提供了所述注射用復(fù)方維生素(3)凍干粉針劑的的分析方法，特別是針對不穩(wěn)定主藥的有關(guān)物質(zhì)的分析方法。
文檔編號A61K31/375GK102552294SQ201210006019
公開日2012年7月11日 申請日期2012年1月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月10日
發(fā)明者鄭偉 申請人:遼寧海思科制藥有限公司