專利名稱：一種順鉑超分子膠束前藥的制備方法
技術領域：
本發明涉及納米醫藥技術領域，具體地說是一種順鉬超分子膠束前藥的制備方法。
背景技術：
順鉬(順式二氯二氨合鉬,⑶DP)是1965年由美國科學家Rosenborg等人發現的第一個具有抗癌活性的金屬配合物。它是一種廣譜的抗腫瘤化合物，可抑制癌細胞的DNA 復制過程，并損傷其細胞膜上結構，對卵巢癌、宮頸癌、睪丸癌、乳腺癌、食道癌、非小細胞肺癌和胃癌等，具有療效確切，抗癌活性高等特點。然而，順鉬低的水溶性，重度消化道反應、 骨髓抑制、聽神經毒性，尤其易對腎臟造成不可逆損傷等限制了其臨床療效的進一步提高。經過對現有技術的檢索可以得出，將順鉬通過化學鍵載于生物相容性良好的聚谷氨酸衍生物上，不但降低了順鉬的毒性，而且提高了抗癌活性(Biomaterials，27(2006), 5958-5965)。Kataoka等將順鉬與聚乙二醇-聚谷氨酸(PEG_b_Glu)兩嵌段共聚物組裝成納米膠束，順鉬的載藥量得到提高，可達30%左右，順鉬納米膠束藥物對裸鼠實體瘤模型的治療效果良好，顯示出較好的臨床應用前景(Cancer Research, 63 (2003) 8977-8983)。

發明內容
本發明的目的是提供一種順鉬超分子膠束前藥的制備方法，該方法利用P -環糊精與金剛烷之間的高絡合常數，分別將二者引入兩種高分子鏈段，組裝形成非共價鍵接超分子膠束，制得的膠束粒徑為50 150nm、粒徑分布窄、在血液中能長效循環。本發明的目的是這樣實現的
一種順鉬超分子膠束前藥的制備方法，包括以下具體步驟
a、制備金剛烷封端聚乙二醇單甲醚(mPEG-Ad)
先將端氨基聚乙二醇單甲醚(mPEG-NH2)溶解于干燥1，2_ 二氯乙烷中，Ig mPEG-NH2對應5 IOml 1，2-二氯乙烷，加入I-金剛烷甲酰氯、4-二甲氨基吡啶及吡唆，mPEG-NH2與 I-金剛烷甲酰氯、4-二甲氨基吡唆、吡啶的摩爾比為I : 5 : 5 : 5，氮氣保護下，加熱至 50 100 V，保溫8小時，濃縮，在無水乙醚中沉淀，過濾，真空干燥得白色粉末金剛烷封端聚乙二醇單甲醚(mPEG-Ad)；
b、制備6_位氛基化的P-環糊精(P -⑶-NH2)
將3 -環糊精與N-溴代丁二酰亞胺和三苯基膦溶解于干燥二甲基甲酰胺中，Ig ^ -環糊精對應5 IOml 二甲基甲酰胺，^ -環糊精與N-溴代丁二酰亞胺、三苯基膦的摩爾比為 I : 14 : 14，氮氣保護下，加熱至60 100 °C，保溫10小時，制得6位全溴代的￠-環糊精(^ -⑶-Br);用干燥二甲基甲酰胺溶解P -⑶-Br，Ig ^ -⑶-Br對應10 20ml 二甲基甲酰胺，加入疊氮化鈉，￠-⑶-Br與疊氮化鈉的摩爾比為I : 10，氮氣保護下，加熱至50 100 V，保溫24小時，得6位全疊氮化的P -環糊精(P -⑶-N3);將P -⑶-N3溶于干燥二甲基甲酰胺，IgP -⑶_乂對應10 20ml 二甲基甲酰胺，加入10 20個當量的三苯基膦還原制得6位全氨基化的P -環糊精(P -⑶-NH2)；
C、制備P -環糊精-谷氨酸聚合物(P -⑶-PGL5)
將@ -⑶-NH2與L-谷氨酸-芐酯環內酸酐溶解于干燥的二甲基甲酰胺中，IgP -OT-NH2 對應50 IOOml 二甲基甲酰胺，￠-⑶-見12與1-谷氨酸-芐酯環內酸酐的摩爾比為I : 35， 通氮氣保護，30 50°C保溫48小時，制得P -環糊精-谷氨酸芐酯聚合物(P -⑶-PBLG5); 用干燥二甲基甲酰胺溶解，Ig ^ -⑶-PBLG5對應20 50ml 二甲基甲酰胺，加2mol/L氫氧化鈉溶液，在室溫下攪拌48小時脫去芐酯制得P -環糊精-谷氨酸聚合物(P -⑶-PGL5)； 其中P -CD-PBLG5與NaOH摩爾比為I 100 ；
d、組裝順鉬超分子膠束前藥(mPEG-Ad/ ^ -CD-PGl5-CDDP)
將￠-⑶-PGL5溶解于干燥二甲基甲酰胺中，IgP-⑶-PGL5對應20 50ml 二甲基甲酰胺，加入順鉬，避光攪拌24小時，P -⑶-PGL5與順鉬的摩爾比為I : 15，然后直接加入 mPEG-Ad, ^ -CD-PGL5與mPEG-Ad的摩爾比I : 1，攪拌24小時，透析、凍干形成順鉬超分子膠束前藥(mPEG-Ad/ ^ -CD-PGl5-CDDP)。其中，合成P -環糊精-谷氨酸聚合物與順鉬形成絡合物的工藝路線如下
權利要求
1.一種順鉬超分子膠束前藥的制備方法，其特征在于該方法包括以下具體步驟a、制備金剛烷封端聚乙二醇單甲醚mPEG-Ad先將端氨基聚乙二醇單甲醚溶解于干燥I，2- 二氯乙烷中，Ig端氨基聚乙二醇單甲醚對應5 IOml 1，2_ 二氯乙烷，加入I-金剛烷甲酰氯、4-二甲氨基吡啶及吡唆，端氨基聚乙二醇單甲醚與I-金剛烷甲酰氯、4-二甲氨基吡唆、吡啶的摩爾比為I : 5 : 5 : 5，氮氣保護下，加熱至50 100 °C，保溫8小時，濃縮，在無水乙醚中沉淀，過濾，真空干燥得白色粉末金剛烷封端聚乙二醇單甲醚mPEG-Ad ；b、制備6_位氛基化的β_環糊精β-CT-NH2將β -環糊精與N-溴代丁二酰亞胺和三苯基膦溶解于干燥二甲基甲酰胺中，Ig β -環糊精對應5 IOml 二甲基甲酰胺，β -環糊精與N-溴代丁二酰亞胺、三苯基膦的摩爾比為 I : 14 : 14，氮氣保護下，加熱至60 100 °C，保溫10小時，制得6位全溴代的β-環糊精；用干燥二甲基甲酰胺溶解6位全溴代的β-環糊精，Ig 6位全溴代的β-環糊精對應 10 20ml 二甲基甲酰胺，加入疊氮化鈉，6位全溴代的β -環糊精與疊氮化鈉的摩爾比為I 10，氮氣保護下，加熱至50 100 °C，保溫24小時，得6位全疊氮化的β-環糊精；將6 位全疊氮化的環糊精溶于干燥二甲基甲酰胺，Ig 6位全疊氮化的β-環糊精對應10 20ml 二甲基甲酰胺，加入10 20個當量的三苯基膦還原制得6位全氨基化的β -環糊精 β -CD-NH2 ；C、制備β -環糊精-谷氨酸聚合物β -⑶-PGL5將6位全氨基化的β -環糊精與L-谷氨酸-芐酯環內酸酐溶解于干燥的二甲基甲酰胺中，Ig 6位全氨基化的β-環糊精對應50 IOOml 二甲基甲酰胺，6位全氨基化的β-環糊精與L-谷氨酸-芐酯環內酸酐的摩爾比為I : 35，通氮氣保護，30 50°C保溫48小時， 制得β -環糊精-谷氨酸芐酯聚合物；用干燥二甲基甲酰胺溶解，Ig β -環糊精-谷氨酸芐酯聚合物對應20 50ml 二甲基甲酰胺,加2mol/L氫氧化鈉溶液,在室溫下攪拌48小時脫去芐酯制得β -環糊精-谷氨酸聚合物β -⑶-PGL5 ;其中β -環糊精-谷氨酸芐酯聚合物與NaOH摩爾比為I 100 ；d、組裝順鉬超分子膠束前藥mPEG-Ad/ β -CD-PGL5-CDDP將β-環糊精-谷氨酸聚合物溶解于干燥二甲基甲酰胺中，Ig β-環糊精-谷氨酸聚合物對應20 50ml 二甲基甲酰胺，加入順鉬，避光攪拌24小時，β -環糊精-谷氨酸聚合物與順鉬的摩爾比為I : 15，然后直接加入金剛烷封端聚乙二醇單甲醚，β-環糊精-谷氨酸聚合物與金剛烷封端聚乙二醇單甲醚的摩爾比I : 1，攪拌24小時，透析、凍干形成順鉬超分子膠束前藥 mPEG-Ad/ β -CD-PGL5-CDDP。
2.根據權利要求I所述的制備方法，其特征在于所述透析、凍干是指選擇截留分子量為1000 3500的透析袋將過濾后的反應液置于去離子水中透析60 80 h后冷凍干燥。
3.根據權利要求I所述的制備方法，其特征在于所得順鉬超分子膠束前藥的膠束粒徑為50-150nm，載藥量在5% 25%之間。
全文摘要
本發明公開了一種順鉑超分子膠束前藥的制備方法，該方法是分別合成了金剛烷封端聚乙二醇單甲醚和β-環糊精-谷氨酸聚合物，然后在二甲基甲酰胺溶液中β-環糊精-谷氨酸聚合物與順鉑絡合后，直接加入金剛烷封端聚乙二醇單甲醚，經透析得到順鉑超分子膠束。本發明利用環糊精與金剛烷之間的包結絡合力自誘導聚合物組裝形成膠束，分別合成親水性和疏水性的高分子鏈段，降低了合成的難度；其親水性和疏水性的高分子鏈段是通過非共價鍵連接，在水中能夠自發形成超分子膠束。
文檔編號A61K47/48GK102580113SQ20121005274
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月2日 優先權日2012年3月2日
發明者余家會, 雍大衛 申請人:華東師范大學