專利名稱：一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸及其制備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，具體涉及一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸及其制備方法。
背景技術：
曲克蘆丁系蘆丁經羥乙基化制成的半合成黃酮化合物，具有抑制紅細胞和血小板凝聚作用，防止血栓形成，同時能增加血中氧的含量，改善微循環，促進新血管生成以增進側支循環。它對內皮細胞有保護作用，能對抗5-羥色胺和緩激肽引起的血管損傷，增加毛細血管的抵抗力，降低毛細血管的通透性，有防止因血管通透性升高而引起的水腫的作用， 并有抗放射性損傷、抗炎癥、抗過敏、抗潰瘍等作用；能抑制血小板的凝集，有防止血栓形成的作用.同時能對抗5-羥色胺、緩激肽引起的血管損傷，增加毛細血管抵抗力，降低毛細血管通透性，可防止血管通透性升高引起的水腫.對急性缺血性腦損傷有顯著的保護作用.曲克蘆丁適用于腦血栓形成和腦栓塞所致的偏癱、失語以及心肌梗塞前綜合征、 動脈硬化、中心性視網膜炎、血栓性靜脈炎、靜脈曲張、血管通透性升高引起的水腫等.曲克蘆丁適用于腦血栓形成所致的偏癱、失語、動脈硬化、梗死前綜合征、血栓性靜脈炎、靜脈曲張、慢性靜脈功能不全、中心性視網膜炎、糖尿病性視網膜炎及血管通透性升高引起的水腫等。本品經臨床應用表明，應用范圍廣，療效好，尤其對治療閉塞性腦血管病較好。曲克蘆丁口服吸收良好，口服本品300mg后，達峰時間為2 9h，與血漿蛋白結合率小于30%。主要由膽汁排出，尿中排泄量僅占3% 6%。目前臨床應用的劑型主要為片劑和注射劑.由于曲克蘆丁有胃腸道障礙及過敏反應，個別患者靜脈滴注本品可引起心血管系統及肝臟毒性反應、急性腦水腫和心律失常等，嚴重者可產生暫時性精神失常.腦水解類藥物是健康動物大腦經酶解純化等方法得到的含有氨基酸和小分子肽等的混合物，能透過血腦屏障，改善腦代謝，可用于治療各種原因所致的中樞神經系統疾病。腦蛋白水解物是上述藥物中的一種，是以健康豬的新鮮大腦經酶解純化得到的，含有多種氨基酸及磷脂類，能通過血腦屏障，提高耗氧量，增加腦活性，參與體內氧化作用；可改善腎上腺皮質機能，促進全身代謝；參與α -酮酸的氧化脫羧和葡萄糖代謝，提高腦氧及葡萄糖利用度，供給腦細胞修復再生所需的作為神經遞質本身或神經遞質和生物胺類的前體的各種氨基酸，調節腦神經活動，促進中樞遞質氨基丁酸、多巴胺和5-羥色胺等生物合成；與游離氨結合成無毒的谷氨酰胺，降低血氨；同時改善腎上腺皮質機能，促進全身代謝，是一種腦功能不全輔助治療藥物。腦蛋白水解物是以豬腦為原料經過酶解等步驟得到有效部位，因此，在研究新的制劑過程中，對其物質基礎也應該重新研究，中國專利94104516. I公開了腦蛋白水解物制備方法，采用制勻漿、脫脂、風干、酶解、超濾、離子交換等步驟，該方法中風干步驟會造成多肽等步驟的流失；中國專利申請號為01130523. 1,200510064567. 6,200710055421. 4等專利公開了腦蛋白水解物的新的制備方法，上述方法中都存在使得氨基酸大量流失的步驟， 因此，上述方法值得商榷；中國專利申請號為200610065169. O在制備過程腦蛋白水解物中，加入外源氨基酸，同樣目前臨床中使用的腦蛋白水解物制劑也是通過添加外源游離氨基酸制備的，說明現有技術的制備方法需要進一步改進。

發明內容
基于上述原因，本申請人通過科學的試驗研究，對腦蛋白水解物進行研究，改進了腦蛋白水解物制備方法，并對曲克蘆丁和腦蛋白水解物制劑進行了研究，將其制備成滴丸制劑，能較好的克服目前臨床應用的制劑的缺陷，并對滴丸基質進行研究，發現水溶性基質制備成滴丸，具有圓整率高、溶散時限好、丸重差異低等優點。申請人:對腦蛋白水解物制備方法進行研究，得到一種新的方法，該方法采用陽離子交換方法及超濾方法等步驟，能較好的保留腦蛋白水解物中的游離氨基酸，而且所得到的腦蛋白水解物中游離氨基酸種類和含量與國家標準要求的一致，無需添加外源氨基酸.本發明制備方法得到的腦蛋白水解物有效成份為小分子多肽和16種天然游離氨基酸，全部為天然水解物，含有小分子多肽與16種游離氨基酸。不添加氨基酸，多肽分子量為5000 10000道爾頓，游離氨基酸為L型氨基酸，pH值為6. O 8. 0，符合國標要求，也更加適合人體上消化道的吸收。本發明通過下述技術方案實現的.一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其特征在于滴丸中含曲克蘆丁和腦蛋白水解物的制劑活性成分與基質的重量比為I : 3-5，制劑活性成分中曲克蘆丁與腦蛋白水解物的重量比為1-5 I ；其中基質為聚乙二醇1000、聚乙二醇1500、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、硬脂酸聚烴氧(40)酯、硬脂酸鈉和泊洛沙姆中的一種或幾種配合的混合基質；其中腦蛋白水解物是通過以下方法制備的將健康豬腦組織加入純水，搗碎，勻漿，在65-90 0C保溫15-45分鐘，冷卻至 30-50°C，加入草酸溶液調pH值為2. 0-4.0 ;攪拌下加入豬腦重量I. 5 % -3. O %的胃蛋白酶，攪拌，30-50°C保溫2-6小時，收集上清液，沉淀離心，合并上清液；上清液減壓濃縮到豬腦重量的1/2-1/5，用堿溶液調pH值5. 0-8. 0,100°C _120°C滅活3_6小時，加水至豬腦重量，用氫氧化鈣溶液調PH值6. 5-7. 5，過濾，活性炭吸附，脫碳，得清液；加入豬腦重量1-3% 的胰蛋白酶，35-45°C保溫1-4小時，煮沸15-30分鐘，冷卻，靜置，過濾，得水解液；水解液上離子交換柱，用純水洗脫，洗脫液棄去，再用濃度為5% -15%的氨水洗脫，收集洗脫液， 濃縮，用堿溶液調PH值6. 9-7. 5，減壓濃縮，去除氨至盡，濃縮液靜置，過濾，去除沉淀，得原液；原液在-20°C以下凍結保存，解凍，過濾，去除沉淀，得清液；稀釋清液至每毫升含氮 5. 4-6. 8mg，含游離氨基酸25-50mg，并加入稀釋液重量的O. 03% -O. I %亞硫酸氫鈉，得到調配液；調配液用6000-10000分子量超濾膜超濾，收集濾液，O. 2 μ m膜除菌過濾，冷凍干燥，得到腦蛋白水解物。其中腦蛋白水解物制備中酸溶液為鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、草酸溶液中的一種。其中腦蛋白水解物制備中堿溶液為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣溶液中的一種。
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其中腦蛋白水解物制備中離子交換柱是強酸型陽離子交換柱。一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸的制備方法為按配比將曲克蘆丁和腦蛋白水解物充分混合均勻，得到制劑活性成分；調整滴丸機的溫度控制系統，使滴丸機的滴頭溫度加熱并保持在50°C -70°C，冷凝劑的溫度冷卻并保持在0°c至10°C ;待滴丸機滴頭和冷凝柱內冷凝劑的溫度分別達到所述溫度狀態時，將制劑活性成分加入到熔融的基質中，攪拌，保溫，將熔融液置于滴丸機的滴頭罐內，通過滴頭滴入冷凝劑中收縮成形即得。一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸制備方法中的冷凝劑是甲基硅油、液體石蠟、植物油中的一種或幾種。一、制劑組方篩選試驗將健康豬腦組織加入純水，搗碎，勻衆，在75°C保溫30分鐘，冷卻至40°C，加入草酸溶液調PH值為3. O ;攪拌下加入豬腦重量2%的胃蛋白酶，攪拌，40°C保溫4小時，收集上清液，沉淀離心，合并上清液；上清液減壓濃縮到豬腦重量的1/3，用氫氧化鈉溶液調pH值 5. 0-8. 0,110°C滅活4. 5小時，加水至豬腦重量，用氫氧化鈣溶液調pH值7. 0，過濾，活性炭吸附，脫碳，得清液；加入豬腦重量2%的胰蛋白酶，40°C保溫3小時，煮沸25分鐘，冷卻，靜置，過濾，得水解液；水解液上強酸型陽離子交換柱，用純水洗脫，洗脫液棄去，再用濃度為 10 %的氨水洗脫，收集洗脫液，濃縮，用氫氧化鈉溶液調pH值7. 0，減壓濃縮，去除氨至盡， 濃縮液靜置，過濾，去除沉淀，得原液；原液在-20°C以下凍結保存，解凍，過濾，去除沉淀， 得清液；稀釋清液至每毫升含氮6. Omg,含游離氨基酸40mg，并加入稀釋液重量的O. 06 %亞硫酸氫鈉，得到調配液；調配液用8000-10000分子量超濾膜超濾，收集濾液，O. 2 μ m膜除菌過濾，冷凍干燥，得到腦蛋白水解物。按重量比=2 I的比例將曲克蘆丁和腦蛋白水解物充分混合均勻，得到制劑活性成分；將制劑活性成分分別與熔融的PEG1500、PEG4000、PEG6000、硬脂酸聚烴氧(40) 酯、硬脂酸鈉、泊洛沙姆、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纖維素、蟲蠟、單硬脂酸甘油酯、倍他環糊精、聚乙二醇4000 :聚乙二醇6000 = 3 I、聚乙二醇4000 :聚乙二醇6000 = 2 I、聚乙二醇4000 :聚乙二醇6000 = I I、聚乙二醇6000 :硬脂酸鈉=I I混合，65°C下攪拌，保溫；制劑活性成分與基質的重量比為I : 4;使滴丸機的滴頭溫度加熱并保持65°C， 冷凝劑的溫度冷卻并保持在2-5°C ;待滴丸機滴頭和冷凝柱內冷凝劑的溫度分別達到所述溫度狀態時，將含熔融液置于滴丸機的滴頭罐內，通過滴頭滴入冷凝劑中收縮成形即得。試驗結果見表I。表I試驗結果
權利要求
1.一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其特征在于滴丸中含曲克蘆丁和腦蛋白水解物的制劑活性成分與基質的重量比為I : 3-5，制劑活性成分中曲克蘆丁與腦蛋白水解物的重量比為1-5:1;其中基質為聚乙二醇1000、聚乙二醇1500、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、硬脂酸聚烴氧(40)酯、硬脂酸鈉和泊洛沙姆中的一種或幾種配合的混合基質；其中腦蛋白水解物是通過以下方法制備的將健康豬腦組織加入適量純水，搗碎，勻漿，在65-90°C保溫15-45分鐘，冷卻至 30-50°C，加入草酸溶液調pH值為2. 0-4.0 ;攪拌下加入豬腦重量1.5% -3.0%的胃蛋白酶，攪拌，30-50°C保溫2-6小時，收集上清液，沉淀離心，合并上清液；上清液減壓濃縮到豬腦重量的1/2-1/5，用堿溶液調pH值5. 0-8. 0,100°C _120°C滅活3_6小時，加水至豬腦重量，用氫氧化鈣溶液調PH值6. 5-7. 5，過濾，活性炭吸附，脫碳，得清液；加入豬腦重量1-3% 的胰蛋白酶，35-45°C保溫1-4小時，煮沸15-30分鐘，冷卻，靜置，過濾，得水解液；水解液上離子交換柱，用純水洗脫，洗脫液棄去，再用濃度為5% -15%的氨水洗脫，收集洗脫液， 濃縮，用堿溶液調PH值6. 9-7. 5，減壓濃縮，去除氨至盡，濃縮液靜置，過濾，去除沉淀，得原液；原液在-20°C以下凍結保存，解凍，過濾，去除沉淀，得清液；稀釋清液至每毫升含氮5.4-6. 8mg，含游離氨基酸25-50mg，并加入稀釋液重量的O. 03% -O. I %亞硫酸氫鈉，得到調配液；調配液用6000-10000分子量超濾膜超濾，收集濾液，O. 2 μ m膜除菌過濾，冷凍干燥，得到腦蛋白水解物。
2.根據權利要求I所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其中制備方法中酸溶液為鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、草酸溶液中的一種。
3.根據權利要求I所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其中制備方法中堿溶液為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣溶液中的一種。
4.根據權利要求I所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其中制備方法中離子交換柱是強酸型陽離子交換柱。
5.根據權利要求I所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其中滴丸的制備方法為按配比將曲克蘆丁和腦蛋白水解物充分混合均勻，得到制劑活性成分；調整滴丸機的溫度控制系統，使滴丸機的滴頭溫度加熱并保持在50°C _70°C，冷凝劑的溫度冷卻并保持在0°C至10°C ;待滴丸機滴頭和冷凝柱內冷凝劑的溫度分別達到所述溫度狀態時，將制劑活性成分加入到熔融的基質中，攪拌，保溫，將熔融液置于滴丸機的滴頭罐內，通過滴頭滴入冷凝劑中收縮成形即得。
6.根據權利要求5所述的一種曲克蘆丁腦蛋白水解物滴丸，其制備方法中的冷凝劑是甲基硅油、液體石蠟、植物油中的一種或幾種。
全文摘要
本發明屬于醫藥技術領域，本發明公開了一種原料為曲克蘆丁和腦蛋白水解物的滴丸及其制備方法，其中滴丸包括曲克蘆丁、腦蛋白水解物和基質。本發明滴丸制劑處方是通過科學的篩選試驗確定的。藥理試驗表明，本發明滴丸比市售曲克蘆丁腦蛋白水解物為原料的制劑具有更好的藥理作用。
文檔編號A61K47/12GK102580055SQ20121006166
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月9日 優先權日2012年3月9日
發明者張睿 申請人:張睿