專利名稱：培養基的滅菌系統、利用該系統的滅菌方法以及蛹蟲草的培養方法
技術領域：
本發明涉及蛹蟲草的栽培技術領域，具體地，涉及一種培養基的滅菌系統，利用該滅菌系統對培養基進行滅菌的方法，以及蛹蟲草的培養方法。
背景技術：
蛹蟲草(Cordycepsmilitaris(L. Fr)Link),屬子囊菌門(Ascomycota)、核菌綱(Pyrenomycetes)、球殼目(Sphaeriales)、麥角菌科(Clavicipitaceae)、蟲草屬(Cordyceps (Fr. ) Link)真菌。蛹蟲草是蟲草屬真菌的模式種,在自然界多寄生在多種鱗翅日昆蟲的幼蟲和蛹上。近年來，研究表明，人工栽培的蛹蟲草化學成分及藥理作用與冬蟲夏草相似。因 此，蛹蟲草的開發應用具有極大的潛在市場，人工培養蛹蟲草是解決野生蟲草來源不足的良好途徑。目前的規模化蛹蟲草生產中均采用半人工合成培養基進行規模化栽培，主要的原因是原料(大米、小米、高粱、玉米、奶粉、黃豆等)的來源廣泛且容易保存不受季節的限制。無論大米、小米、小麥、高粱等培養基原料在高溫高壓滅菌過程中都會發生淀粉糊化的現象，培養基中的原料相互粘連，最終導致培養基原料中菌絲生長空間小或者菌絲無法生長的現象發生，最終導致培養基原料生物轉化率很低。通過降低水分的辦法雖然能在一定程度上增加培養基中的孔隙度，但由于培養基含水量低，會導致子實體提早停止發育，最終還是無法提高培養基的生物轉化率。

發明內容
為了解決現有技術中存在的問題，本發明的目的之一在于，提供一種培養基的滅囷系統。本發明的另一目的在于，提供一種利用所述滅菌系統對培養基進行滅菌的方法。本發明的又一目的在于，提供一種利用所述滅菌系統對蛹蟲草進行培養的方法。本發明提供的培養基的滅菌系統，包括用排氣管道連接的蒸汽發生器和滅菌柜，所述滅菌柜末端連接的排氣管道分為兩條支路，一條直排，另一條安裝依次連接的真空罐和水循環式真空泵。其中，所述水循環式真空泵還配有真空度表。本發明在另一條排氣管道上加裝水循環式真空泵，并配有真空度表，目的是 第一，負壓使培養基顆粒物之間間隙度加大；第二，負壓使培養基顆粒物之間的游離水分抽出，從而在接種階段液體菌種能均勻進入培養基的底部。其中，所述滅菌柜具有內膽和外膽的結構，內膽和外膽之間用排氣管道相連通。其中，所述真空罐的體積為滅菌柜內膽體積的f 10倍，優選5倍。進一步地，將真空罐浸泡在冷卻循環水槽內。目的是急速的降溫使蒸汽冷凝，同時也加速了滅菌柜的排空。進一步地，連通所述滅菌柜內膽和外膽的排氣管道上又引出一條排氣管道，安裝有空氣過濾器。更進一步地,空氣過濾器的粒徑為O. 2 μ m。其中，兩條支路，即直排管道和安裝有水循環式真空泵的管道上都裝有排氣開關。其中，所述空氣過濾器與滅菌柜連接的前端安裝有開關。加裝的空氣過濾器的作用是當保持一定的真空度強制排蒸汽結束后，打開空氣過濾器前的開關，從空氣過濾器中導入無菌空氣進入滅菌柜，平衡滅菌柜內外壓力，使滅菌柜可以打開，培養基出柜；當然也·可采用打開蒸汽直排管道開關的方式，導入外界空氣，使滅菌柜內外壓力平衡，但這種處理方式可能會向滅菌柜內弓I入外界污染。在培養基滅菌系統的改造中，在真空泵的前方添加了一個真空罐，其目的就是為了加強培養基的干燥程度加了真空罐后，在抽真空的過程中，滅菌柜內膽的蒸汽就能更好的擴散在真空罐中，而不加真空罐的方法，蒸汽沒有擴散的空間，因此干燥程度差，而加了真空罐的干燥程度好；進一步地，加了真空罐后，當抽真空過程結束后，若打開空氣過濾器向滅菌柜內膽進入無菌空氣時，由于真空罐的存在，能夠將滅菌柜內膽的蒸汽吸入真空罐中，也加強了培養基的干燥程度。本發明提供的利用所述滅菌系統對培養基進行滅菌的方法，包括以下步驟(I)將培養基放入滅菌柜，并由蒸汽發生器向滅菌柜供入蒸汽進行滅菌；(2)打開兩條支路的排氣管道排蒸汽，當蒸汽壓力下降到一半時，關閉直排管道，開啟水循環式真空泵強制排蒸汽；(3)當水循環式真空泵的壓力指示為-O. 05至-O. IMPa時，同時關閉裝有水循環式真空泵支路的排氣管道和水循環式真空泵，讓滅菌柜保持當前的壓力(-0. 05至-O. IMPa)5 IOmin ；(4)當滅菌柜內外壓力平衡后，滅菌過程結束。其中，可以打開所述空氣過濾器，向滅菌柜導入無菌空氣。這樣可以平衡滅菌柜內外的壓力，使滅菌柜可以打開，培養基出柜；這樣也可以使滅菌柜里導入的是經過過濾的無菌空氣，保證滅菌柜不被污染。當然也可采用打開蒸汽直排管道開關的方式，導入外界空氣，使滅菌柜內外壓力平衡，但這種處理方式可能會向滅菌柜內引入外界污染。其中，步驟(I)中，在溫度121 °C下進行滅菌，保持20分鐘。其中，步驟(I)中，蒸汽壓力為O. llMPa。進一步地，步驟(3)中，水循環式真空泵的壓力指示優選為-O. 05MPa。進一步地,步驟(3)中,保持滅菌柜的壓力優選8min。本發明提供的一種蛹蟲草的培養方法，包括以下步驟I)培養基制備將谷物原料用食用油浸潤后，與營養液進行復配，得到蛹蟲草子實體生長用的培養基；2)滅菌按上述利用所述滅菌系統對培養基進行滅菌的方法對步驟I)得到的培養基進行滅菌處理；3)接種將蛹蟲草菌種接種至步驟2)滅菌后的培養基上；4)對接種好的蛹蟲草菌種進行暗培養和光照培養；
5)采收蛹蟲草子實體。對蛹蟲草子實體生長用的培養基滅菌不但加速了培養基的冷卻(抽蒸汽和水，尤其是游離水，并帶出熱量)，更重要的是可以提高培養基上菌種的生物轉化率。并且，在滅菌系統的改造中，在真空泵的前方添加了一個真空罐，加強了培養基的干燥程度。其中，步驟I)中，所述谷物原料選自大米、小米、小麥和高粱等主要谷物原料中的一種或幾種，包含但不限于這幾種谷物原料。
其中，步驟I)中，將谷物原料用其重量O. f 5.0%的食用油進行浸潤，食用油優選谷物原料重量的2. 0%。其中，步驟I)中，所述食用油選自豆油、花生油和菜籽油等中的一種或幾種，包含但不限于這幾種食用油。浸潤之后，立即使用，不要長時間放置。其中，步驟I)中，谷物原料與營養液進行復配，兩者的質量體積比為1:1. 2^1. 8，優選1:1. 5。這里的質量體積比指的是g:mL (谷物原料營養液)。其中，步驟I)中，所述營養液的配方為黃豆2. 2%、葡萄糖I. 5%、奶粉4. 5%、磷酸二氫鉀O. 8%、硫酸鎂O. 06%和維生素B 115mg / IOOOmL,加水定容至IOOOmL ;調整pH為5. 6 7. 2。這里的百分號“％”指的是質量百分含量。本發明所述蛹蟲草的培養方法，在步驟3)將蛹蟲草液體菌種接種至步驟2)經過滅菌處理的培養基前，先將蛹蟲草菌株保存在固體PDA培養基斜面上；然后在液體種子培養基上接入保存在PDA培養基斜面上的蛹蟲草菌株，成為蛹蟲草液體菌種；之后再將所述蛹蟲草液體菌種接入步驟2)經過滅菌處理的培養基上進行后續的培養。其中，所述蛹蟲草菌株為編號為HX-64的蛹蟲草菌株。其中，所述液體種子培養基的配方為土豆250克、葡萄糖8克、蛋白胨2. 5克、磷酸二氫鉀O. 6克、硫酸鎂I. 2克，加水1000毫升。進一步地，所述固體PDA培養基和液體種子培養基可以采用本領域的常規方式進行滅菌，也可以采用本發明所述的滅菌方法進行滅菌；利用本發明的滅菌方法，可以加速培養基的冷卻。其中，步驟4)中，暗培養階段將接種后的蛹蟲草液體菌種保持溫度18 22°C進行避光培養，4飛天后菌絲覆蓋整個表面，暗培養結束。其中，步驟4)中，光照培養階段在溫度2(T23°C下光照培養8 12小時/天，培養35 41天直至子實體成熟。其中，步驟4)中，光照培養的光照強度為5(Γ100勒克斯。本發明具有的有益效果如下I、滅菌系統和方法中，主要利用真空泵強制快速排蒸汽，形成負壓，使培養基顆粒物之間間隙度加大，并且使培養基顆粒物之間的游離水分抽出，從而在接種階段液體菌種能均勻進入培養基的底部。2、滅菌系統和方法中抽真空的過程加速了培養基的冷卻，便于下一步的接種操作。3、滅菌系統和方法中使用真空罐，可以加強培養基的干燥程度。4、滅菌系統和方法中的還加裝有空氣過濾器，可以向滅菌柜導入無菌空氣，平衡滅菌柜內外的壓力，使滅菌柜可以打開；也可以使滅菌柜里導入的是經過過濾的無菌空氣，保證滅菌柜不被污染。5、對子實體生長的培養基中所用主要原料進行預處理，避免在滅菌過程中淀粉的糊化造成的谷物等顆粒原料之間的粘連，而使培養基原料中菌絲生長空間小或者菌絲無法生長的現象發生。6、栽培試驗證明子實體原基出現早，子實體條形整齊，收獲期提前31天。總之，本發明的技術增加了培養基空隙度，擴大菌絲生長空間，培養基冷卻速度快、干燥程度高，最終達到提高生物轉化率(提高了 15 25%)的目的。并且降低了生產成本，有利于相應技術的推廣和應用，具有很高的實用價值和應用價值。


圖I為完全沒有經過改造的傳統培養基滅菌系統；圖2為加裝空氣過濾器和真空泵的培養基滅菌系統；圖3為本發明加裝空氣過濾器、真空罐(將真空罐浸泡在冷卻循環水槽內)和真空泵的培養基滅菌系統；圖中1為蒸汽發生器，2整體為滅菌柜(其中2a為滅菌柜內膽，2b為滅菌柜外膽)，3為真空泵，4為空氣過濾器，5為真空罐。
具體實施例方式以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。本發明的水循環式真空泵為佛山東山真空科技公司生產的2BV-2071水環真空泵；空氣過濾器的供應商為德國賽多利斯Sartorius發酵罐專用空氣過濾器。本發明的技術若涉及其他操作，均為所屬技術領域的常規選擇。實施例I :培養基的滅菌系統本發明培養基的滅菌系統，包括用排氣管道連接的蒸汽發生器I和滅菌柜2 (有內膽2a和外膽2b，內膽和外膽之間用排氣管道相連通)，滅菌柜2末端連接的排氣管道分為兩條支路，一條直排管道(如圖3右下角，安裝有排氣開關)，另一條排氣管道(安裝有排氣開關)加裝依次連接的真空罐5 (其體積為滅菌柜內膽2a體積的5倍，且將真空罐浸泡在冷卻循環水槽內)和水循環式真空泵3 (配有真空度表)，連通滅菌柜內膽2a和外膽2b的排氣管道上又弓I出一條管道，加裝空氣過濾器4 (粒徑為O. 2 μ m，空氣過濾器4與滅菌柜2連接的前端加裝有開關)。高壓蒸汽從蒸汽發生器I經排氣管道進入滅菌柜外膽2b，再從滅菌柜外膽2b經排氣管道進入滅菌柜內膽2a，最后從滅菌柜內膽2a經由如圖3右下角的直排管道或者安裝有真空罐5和水循環式真空泵3的排氣管道排出。實施例2 :利用實施例I的滅菌系統對培養基進行滅菌具體方法本實施例方法既能對蛹蟲草培養過程中的培養基進行滅菌，也可以對其他固體培養基，尤其是顆粒物料培養基進行滅菌，不但能去除游離水分、加強干燥程度，還能加速物料的冷卻。(I)將培養基放入滅菌柜，并由蒸汽發生器向滅菌柜供入壓力為O. IlMPa的蒸汽，在溫度121°C進行滅菌，保持20分鐘；
(2)打開兩條支路上的排氣開關排蒸汽，當蒸汽壓力下降到一半(O. 055MPa)時，關閉直排管道上的排氣開關，開啟水循環式真空泵強制排蒸汽；(3)當水循環式真空泵的壓力指示為-O. 05MPa時，同時關閉裝有水循環式真空泵管道上的排氣開關和水循環式真空泵，讓滅菌柜保持當前的壓力(-0. 05MPa) Smin ；(4)打開空氣過濾器，向滅菌柜導入經過過濾的無菌空氣，平衡滅菌柜內外的壓力；當滅菌柜內外壓力平衡后，打開滅菌柜，拿出培養基，滅菌過程結束。自然排空出爐時，滅菌爐內膽溫度度表一般顯示為95 100°C，而抽真空的操作，力口速了蒸汽的排出，形成的相對真空有強制導入了外界的冷空氣，在出爐時，滅菌爐內膽溫度度表一般顯示為6(T80°C。本發明加了抽真空過程，在排氣的過程加了抽真空強制排氣和強制導入無菌冷空氣兩個過程。排空時間的縮短，意味著滅菌周期的縮短，從而提高了工作效率。并且，抽真空強制排氣，加速了滅菌柜內膽蒸汽的排出，隨著抽真空時間的延伸， 培養基空隙內的蒸汽也被強制抽出，這一過程最終的效果是使培養基較為干燥，干燥的結果就導致了培養基中原料(如米粒)之間空隙度的加大。這個結果表現為滅菌后的培養基進行接種時，相同的接種量，抽真空處理的菌液很容易滲入到培養基中，而未經抽真空處理的，相同的菌液會很難滲入到培養基中。那么相同的培養基，測定浸沒過培養基原料(如米餅)表面所需要的水量，抽真空處理的用水量大，而未進過抽真空處理的用水量小，就表示經本發明滅菌處理的培養基干燥程度高。實施例3 :本發明蛹蟲草經過改進的培養方法一、實驗時間2012年4月二、實驗材料(I)菌種采用菌株編號為HX-64的蛹蟲草菌株(來自北京市農林科學院生物中心);(2)菌種固體培養基固體PDA斜面，成分為馬鈴薯300克，葡萄糖20克，瓊脂20克，加水1000毫升，自然pH。(3)液體搖瓶用種子培養基去皮土豆250克(煮汁)、葡萄糖8克、蛋白胨2. 5克、磷酸二氫鉀O. 6克、硫酸鎂I. 2克、加水1000毫升，pH自然。(4)子實體生產營養液黃豆2. 2%、葡萄糖I. 5%、奶粉4. 5%、磷酸二氫鉀O. 8%、硫酸鎂O. 06%、維生素B 115mg/1000ml的比例，加水定容至IOOOmL配成營養液，調整pH為6. 4。
(5)常規栽培培養容器高12cm，直徑8cm。三、具體方法I)原材料的預處理及培養基制備將大米30g，用與其重量2. 0%的食用花生油浸潤后(浸潤后立即使用，不要長時間放置)，與上述子實體生產營養液45mL進行復配，得到蛹蟲草子實體生長所用培養基；2)培養基的滅菌利用實施例2的滅菌方法對本實施例步驟I)得到的培養基、上述實驗材料中固體PDA培養基和液體搖瓶用種子培養基均進行滅菌處理；3)接種工藝先將上述蛹蟲草菌株(HX-64)保存在上述固體PDA培養基斜面上，然后在上述液體搖瓶用種子培養基上接入保存在PDA培養基斜面上的蛹蟲草菌株，成為蛹蟲草液體菌種；之后再將接種頭做成蓮蓬狀對該蛹蟲草液體菌種進行噴淋式接種，接入到本實施例步驟2)經過滅菌處理的蛹蟲草子實體生長所用培養基上；4)對上步接種好的蛹蟲草菌種培養基容器直接放入暗培養室進行培養即可，保持溫度20°C進行避光培養，4飛天后菌絲覆蓋整個表面，暗培養結束；之后將培養室溫度調整為21. 5°C，光照強度為80勒克斯下光照培養10小時/天；在子實體培養后期，逐漸加大培養室內的空氣流通和交換，培養室培養階段若發現污染應立即清除；5)待蛹蟲草的子實體總的培養時間為40天時，及時進行采收，采收后的蛹蟲草子實體條形非常整齊，平均干重達到2. 85克/瓶，生物轉化率為9. 5%。采用食用油處理，防止了大米顆粒之間的粘連；抽真空處理增加了培養的空隙度。這兩個過程導致了培養基米餅內部蛹蟲草菌絲體的無性生長空間大，生長速度快，物質積累迅速，從而導致了原基發育出現的早。培養基物質轉化空間大，供給子實體的養分充足，也加速了子實體的成熟，所以采收期提前。
實施例4其他條件同實施例3，所不同的是二、實驗材料(4)子實體生產營養液調整pH值為5. 6。三、具體方法I)原材料的預處理及培養基制備將小麥30g,用與其重量O. 1%的豆油浸潤后(浸潤后立即使用，不要長時間放置)，與上述子實體生產營養液54mL (1:1. 8-g:mL)進行復配，得到蛹蟲草子實體生長所用培養基；2)培養基的滅菌利用實施例2的滅菌方法對本實施例步驟I)得到的培養基、上述實驗材料中固體PDA培養基和液體搖瓶用種子培養基均進行滅菌處理；3)接種工藝先將上述蛹蟲草菌株保存在上述固體PDA培養基斜面上，然后在上述液體搖瓶用種子培養基上接入保存在PDA培養基斜面上的蛹蟲草菌株，成為蛹蟲草液體菌種；之后再將接種頭做成蓮蓬狀對該蛹蟲草液體菌種進行噴淋式接種，接入到本實施例步驟2)經過滅菌處理的蛹蟲草子實體生長所用培養基上；4)對上步接種好的蛹蟲草菌種培養基容器直接放入暗培養室進行培養即可，保持溫度22°C進行避光培養，4飛天后菌絲覆蓋整個表面，暗培養結束；之后將培養室溫度調整為20°C，光照強度為100勒克斯下光照培養8小時/天；在子實體培養后期，逐漸加大培養室內的空氣流通和交換，培養室培養階段若發現污染應立即清除；5)待蛹蟲草的子實體總的培養時間為42天時，及時進行采收，采收后的蛹蟲草子實體條形較為整齊，平均干重達到2. 73克/瓶，生物轉化率為9. 1%。實施例5其他條件同實施例3，所不同的是二、實驗材料(4)子實體生產營養液調整pH值為-J.2。三、具體方法I)原材料的預處理及培養基制備將高粱30g，用與其重量5. 0%的菜籽油浸潤后(浸潤后立即使用，不要長時間放置)，與上述子實體生產營養液36mL (1:1. 2-g:mL)進行復配，得到蛹蟲草子實體生長所用培養基；
2)培養基的滅菌利用實施例2的滅菌方法對本實施例步驟I)得到的培養基、上述實驗材料中固體PDA培養基和液體搖瓶用種子培養基均進行滅菌處理；3)接種工藝先將上述蛹蟲草菌株保存在上述固體PDA培養基斜面上，然后在上述液體搖瓶用種子培養基上接入保存在PDA培養基斜面上的蛹蟲草菌株，成為蛹蟲草液體菌種；之后再將接種頭做成蓮蓬狀對該蛹蟲草液體菌種進行噴淋式接種，接入到本實施例步驟2)經過滅菌處理的蛹蟲 草子實體生長所用培養基上；4)對上步接種好的蛹蟲草菌種培養基容器直接放入暗培養室進行培養即可，保持溫度18°C進行避光培養，4飛天后菌絲覆蓋整個表面，暗培養結束；之后將培養室溫度調整為23°C，光照強度為50勒克斯下光照培養12小時/天；在子實體培養后期，逐漸加大培養室內的空氣流通和交換，培養室培養階段若發現污染應立即清除；5)待蛹蟲草的子實體總的培養時間為45天時，及時進行采收，采收后的蛹蟲草子實體條形較為整齊，平均干重達到2. 64克/瓶，生物轉化率為8. 8%。對比例蛹蟲草傳統的培養方法其他條件同實施例3，所不同的是A.沒有對原材料進行預處理，即沒有將大米與其重量2. 0%的食用花生油進行浸潤；B.采用傳統方法對培養基進行滅菌，即直接利用圖I所示滅菌系統(高壓蒸汽從蒸汽發生器I經排氣管道進入滅菌柜外膽2b，再從滅菌柜外膽2b經排氣管道進入滅菌柜內膽2a，最后從滅菌柜內膽2a經由如圖I右下角的直排管道排出)對所用到的所有培養基在121°C下滅菌，保持20分鐘。采收后傳統方法子實體條形不是非常整齊，平均干重達到2. 28克/瓶，生物轉化率為7. 6%。且采收期比本申請實施例3的晚了 8天。結論采后本發明方法的生物轉化率為8. 8^9. 5%，而常規栽培的生物轉化率只有7. 6%，本發明增產15 25%，采收期提前3 8天。總之，本發明降低了生產成本，而且提高了培養基的生物轉化率。雖然，上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發明作了詳盡的描述，但在本發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發明要求保護的范圍。
權利要求
1.一種培養基的滅菌系統，包括用排氣管道連接的蒸汽發生器和滅菌柜，所述滅菌柜末端連接的排氣管道分為兩條支路，一條直排，其特征在于，另一條安裝依次連接的真空罐和水循環式真空泵。
2.根據權利要求I所述的滅菌系統，其特征在于，所述滅菌柜具有內膽和外膽的結構，內膽和外膽之間用排氣管道相連通；所述真空罐的體積為滅菌柜內膽體積的f 10倍，優選5倍。
3.根據權利要求I或2所述的滅菌系統，其特征在于，將所述真空罐浸泡在冷卻循環水槽內。
4.根據權利要求2所述的滅菌系統，其特征在于，連通所述滅菌柜內膽和外膽的排氣管道上引出一條排氣管道，安裝有空氣過濾器。
5.利用權利要求Γ4任意一項所述滅菌系統對培養基進行滅菌的方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)將培養基放入滅菌柜，并由蒸汽發生器向滅菌柜供入蒸汽進行滅菌； (2)打開兩條支路的排氣管道排蒸汽，當蒸汽壓力下降到一半時，關閉直排管道，開啟水循環式真空泵強制排蒸汽； (3)當水循環式真空泵的壓力指示為-O.05至-O. IMPa，優選-O. 05MPa時，同時關閉裝有水循環式真空泵支路的排氣管道和水循環式真空泵，讓滅菌柜保持當前的壓力5 10min，優選8min ； (4)當滅菌柜內外壓力平衡后，滅菌過程結束。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，打開空氣過濾器，向滅菌柜導入無菌空氣。
7.一種蛹蟲草的培養方法，其特征在于，包括以下步驟 1)培養基制備將谷物原料用食用油浸潤后，與營養液進行復配，得到蛹蟲草子實體生長用的培養基； 2)滅菌按權利要求5或6所述方法對步驟I)得到的培養基進行滅菌處理； 3)接種將蛹蟲草菌種接種至步驟2)滅菌后的培養基上； 4)對接種好的蛹蟲草菌種進行暗培養和光照培養； 5)采收蛹蟲草子實體。
8.根據權利要求7所述蛹蟲草的培養方法，其特征在于，步驟I)中，所述谷物原料選自大米、小米、小麥和高粱中的一種或幾種；所述食用油選自豆油、花生油和菜籽油中的一種或幾種；將谷物原料用其重量O. Γ5. 0%的食用油進行浸潤，食用油優選谷物原料重量的 2. 0%。
9.根據權利要求7或8所述蛹蟲草的培養方法，其特征在于，步驟I)中，谷物原料與營養液的質量體積比為1:1. 2 I. 8，優選1:1.5。
10.根據權利要求7、任意一項所述蛹蟲草的培養方法，其特征在于，步驟I)中，所述營養液的配方為黃豆2. 2%、葡萄糖I. 5%、奶粉4. 5%、磷酸二氫鉀O. 8%、硫酸鎂O. 06%和維生素 B115mg/1000mL，加水定容至 IOOOmL ;pH 為 5. 6 7. 2。
11.根據權利要求7 10任意一項所述蛹蟲草的培養方法，其特征在于，在步驟3)之前，先將蛹蟲草菌株保存在固體PDA培養基斜面上；然后在液體種子培養基上接入保存在PDA培養基斜面上的蛹蟲草菌株，成為蛹蟲草液體菌種；之后再將所述蛹蟲草液體菌種接入步驟2)經過滅菌處理的培養基上進行后續的培養； 所述液體種子培養基的配方為土豆250克、葡萄糖8克、蛋白胨2. 5克、磷酸二氫鉀O.6克、硫酸鎂I. 2克，加水1000毫升； 步驟4)中，暗培養階段將接種后的蛹蟲草液體菌種保持溫度18 22°C進行避光培養4飛天；光照培養階段在溫度2(T23°C、光照強度5(Γ100勒克斯的條件下光照培養8 12小時/天，培養35 41天。
12.根據權利要求11所述蛹蟲草的培養方法，其特征在于，所述固體PDA培養基和液體種子培養基均采用權利要求5或6所述方法進行滅菌。
全文摘要
本發明涉及一種培養基的滅菌系統，利用該滅菌系統對培養基進行滅菌的方法，以及蛹蟲草的培養方法。所述培養基的滅菌系統，包括用排氣管道連接的蒸汽發生器和滅菌柜，所述滅菌柜末端連接的排氣管道分為兩條支路，一條直排，另一條安裝依次連接的真空罐和水循環式真空泵。本發明的技術增加了培養基空隙度，擴大菌絲生長空間，培養基冷卻速度快、干燥程度高，最終達到提高生物轉化率的目的；并且降低了生產成本，有利于相應技術的推廣和應用，具有很高的實用價值和應用價值。
文檔編號A61L2/07GK102895685SQ20121033587
公開日2013年1月30日 申請日期2012年9月11日 優先權日2012年9月11日
發明者胡健 申請人:北京中怡遠大機電設備有限公司