本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種綠蘿生根培養(yǎng)基及綠蘿生根培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
綠蘿(學(xué)名:Epipremnum aureum)，屬于天南星科麒麟葉屬植物，大型常綠藤本，性喜溫暖、潮濕環(huán)境，生長于熱帶地區(qū)，常攀援生長在雨林的巖石和樹干上，其纏繞性強，氣根發(fā)達，可以水培種植。
綠蘿是非常優(yōu)良的室內(nèi)裝飾植物之一，攀藤觀葉花卉。蘿莖細軟，葉片嬌秀。在家具的柜頂上高置套盆，任其蔓莖從容下垂，或在蔓莖垂吊過長后圈吊成圓環(huán)，宛如翠色浮雕。這樣既充分利用了空間，凈化了空氣，又為呆板的柜面增加了線條活潑、色彩明快的綠飾，極富生機，給居室平添融融情趣。形態(tài)特征：綠蘿藤長數(shù)米，節(jié)間有氣根，隨生長年齡的增加，莖增粗，葉片亦越來越大。葉互生，綠色，少數(shù)葉片也會略帶黃色斑駁，全緣，心形。它的花語“守望幸福”也增加了其可觀賞度。
環(huán)保學(xué)家發(fā)現(xiàn)，一盆綠蘿在8～10平方米的房間內(nèi)就相當(dāng)于一個空氣凈化器，能有效吸收空氣中甲醛、苯和三氯乙烯等有害氣體。綠蘿不但生命力頑強，而且在室內(nèi)擺放，其凈化空氣的能力不亞于常春藤和吊蘭。新鋪的地板非常容易產(chǎn)生有害物質(zhì)。由于綠蘿能同時凈化空氣中的苯、三氯乙烯和甲醛，因此非常適合擺放在新裝修好的居室中。
綠蘿還具有很好的藥用價值，具有活血散瘀的功效。可以治療跌打損傷。
目前，綠蘿主要通過扦插繁殖，插條用量大，占地面積廣，同時，綠蘿生長環(huán)境高溫高濕，扦插繁殖的后代極易感病菌，生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)大規(guī)模莖腐、根腐現(xiàn)象。
植物組織培養(yǎng)中要用到各種培養(yǎng)基。培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實際需要，添加一些自身無法合成的化合物，即生長因子。
但是目前，還沒有專門適合于綠蘿組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基，嚴(yán)重影響了對綠蘿這種經(jīng)典材料的研究。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明提供的一種綠蘿生根培養(yǎng)基及綠蘿生根培養(yǎng)方法，更好的克服了上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題和缺陷，一方面彌補現(xiàn)有技術(shù)中綠蘿組織培養(yǎng)研究的空白，另一方面提供一種綠蘿快速的育種方法，可以短時間內(nèi)繁殖出大量的綠蘿叢生芽苗根系，大大提高綠蘿的生根率。
一種綠蘿生根培養(yǎng)基，所述生根培養(yǎng)基包括MS基本培養(yǎng)基、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉。
進一步地，所述萘乙酸的濃度為0.05～0.10mg/L，吲哚-3-乙酸的濃度為0.01～0.05mg/L，土豆泥的濃度為30～50mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂粉7g/L。
進一步地，所述生根培養(yǎng)基的pH為5.8～6.0。
本發(fā)明還提供了一種綠蘿生根培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
(1)配制生根培養(yǎng)基：所述生根培養(yǎng)基包括MS基本培養(yǎng)基、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉；
(2)將綠蘿叢生芽切分成單株，并切掉基部組織和部分葉片，將其接種到步驟(1)中配制好的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
進一步地，所述萘乙酸的濃度為0.05～0.1mg/L，吲哚-3-乙酸的濃度為0.01～0.05mg/L，土豆泥的濃度為30～50mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂粉7g/L。
進一步地，所述步驟(1)中，將萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉溶解于MS基本培養(yǎng)基中，經(jīng)滅菌冷卻至室溫后待用。
進一步地，所述步驟(1)中的滅菌方法為高壓滅菌或高溫滅菌。
進一步地，所述步驟(2)中的培養(yǎng)條件為：光照強度為1500～20001x，光照時間為12h/d，溫度為25～28℃，濕度為50～65％。
進一步地，所述步驟(2)中，綠蘿生根培養(yǎng)培養(yǎng)時長為30～60天。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的一種綠蘿生根培養(yǎng)基及綠蘿生根培養(yǎng)方法的有益效果是：
本發(fā)明的綠蘿生根培養(yǎng)基及綠蘿生根培養(yǎng)方法以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，通過結(jié)合特定濃度的萘乙酸和吲哚-3-乙酸植物生長調(diào)節(jié)劑，以及土豆泥、蔗糖及瓊脂粉，使所得生根培養(yǎng)基可有效促進綠蘿叢生芽苗生根。利用該生根培養(yǎng)基對綠蘿叢生芽苗進行生根培養(yǎng)，可使生根率達到96％以上，且根系發(fā)展良好，移栽成活率高，為實現(xiàn)綠蘿組織培養(yǎng)的產(chǎn)業(yè)化和推廣應(yīng)用提供了技術(shù)支撐。
為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點能更明顯易懂，下文特舉較佳實施例，作詳細說明如下。
具體實施方式
為了便于理解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例的方式對本發(fā)明的技術(shù)方案做詳細說明，在下面的描述中闡述了很多具體細節(jié)以便于充分理解本發(fā)明。
但是本發(fā)明能夠以很多不同于在此描述的其它方式來實施，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在不違背本發(fā)明內(nèi)涵的情況下做類似改進，因此本發(fā)明不受下面公開的具體實施的限制。
如本文所用，術(shù)語：
“一個”、“一種”和“所述”可交換使用并指一個或多個。
“和/或”用于表示所說明的情況的一者或兩者均可能發(fā)生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)；
另外，本文中由端點表述的范圍包括該范圍內(nèi)所包含的所有數(shù)值(例如，1至10包括1.4、1.9、2.33、5.75、9.98等)。
另外，本文中“至少一個”的表述包括一個及以上的所有數(shù)目(例如，至少2個、至少4個、至少6個、至少8個、至少10個、至少25個、至少50個、至少100個等)。
本發(fā)明提供了一種綠蘿生根培養(yǎng)基，所述生根培養(yǎng)基包括MS基本培養(yǎng)基、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉。
優(yōu)選地，所述萘乙酸的濃度為0.05～0.10mg/L，例如0.05mg/L、0.06mg/L、0.07mg/L、0.08mg/L、0.09mg/L或0.10mg/L；
所述吲哚-3-乙酸的濃度為0.01～0.05mg/L，例如0.01mg/L、0.02mg/L、0.03mg/L、0.04mg/L或0.05mg/L；
所述土豆泥的濃度為30～50g/L，例如30g/L、35g/L、40g/L、45g/L或50g/L；
所述蔗糖的濃度為30g/L；所述瓊脂粉的濃度為7g/L。
優(yōu)選地，所述萘乙酸的濃度為0.08mg/L，吲哚-3-乙酸的濃度為0.03mg/L，土豆泥的濃度為50g/L，蔗糖的濃度為30g/L，瓊脂的濃度為7g/L。
優(yōu)選地，所述生根培養(yǎng)基的pH為5.8～6.0，例如pH＝5.8，pH＝5.9或pH＝6.0。
上述，需要理解的是，MS培養(yǎng)基為組織的生長提供所需的碳源、氮源、水、無機物和生長因子。
所述MS培養(yǎng)基包括大量元素、微量元素和有機化合物，具體的配方如下：
大量元素的組分及其對應(yīng)的濃度為：硝酸鉀1900mg/L、硝酸銨1650mg/L、七水硫酸鎂370mg/L、磷酸二氫鉀170mg/L、二水氯化鈣440mg/L；
微量元素的組分及其對應(yīng)的濃度為：碘化鉀0.83mg/L、硼酸6.2mg/L、四水硫酸錳22.3mg/L、七水硫酸鋅8.6mg/L、二水鉬酸鈉0.25mg/L、五水硫酸銅0.025mg/L、六水氯化鈷0.025mg/L、七水硫酸亞鐵27.8mg/L、乙二胺四乙酸二鈉濃度為37.3mg/L。
有機化合物的組分及其對應(yīng)的濃度為：肌醇100mg/L、煙酸0.5mg/L、鹽酸吡哆醇0.5mg/L、鹽酸硫胺素0.1mg/L、甘氨酸2.0mg/L。
可以理解的是，萘乙酸(1-Naphthaleneacetic acid)，簡稱NAA。萘乙酸是促進植物根系生長的植物生長調(diào)節(jié)劑，也是萘乙酰胺的中間體。萘乙酸具有促進細胞分裂與擴大，誘導(dǎo)形成不定根，增加坐果，防止落果，改變雌、雄花比率等。萘乙酸可經(jīng)葉片、樹枝的嫩表皮、種子進入到植物體內(nèi)，隨同營養(yǎng)流輸導(dǎo)到作用部位。通常用于小麥、水稻、棉花、茶、桑、番茄、蘋果、瓜類、馬鈴薯、林木等，是一種良好的植物生長刺激素。
可以理解的是，吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid)，簡稱IAA。吲哚-3-乙酸是促進植物根系生長的植物生長素，能夠改變植物體內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)分配，促進果實的發(fā)育和扦插的枝條生根。
可以理解的是，土豆泥富含蛋白質(zhì)及豐富的賴氨酸和色氨酸，還富含鉀、鋅和鐵元素，為植物根系的生長提供豐富的營養(yǎng)元素，促進細胞分裂和擴大。
可以理解的是，蔗糖為細胞的分裂、擴大、增至提供必要的能量。
可以理解的是，瓊脂粉是從植物里提取出來的藻膠。瓊脂因為有特殊的膠凝性質(zhì)，尤其有顯著的穩(wěn)固性、滯度和滯后性，并且易吸收水分，有特殊的穩(wěn)定效應(yīng)；具有增量劑、增稠劑、乳化劑、膠凝劑、穩(wěn)定劑、賦形劑、助懸劑、水分保持劑等功效。
本發(fā)明還提供了一種綠蘿生根培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
(1)配制生根培養(yǎng)基：所述生根培養(yǎng)基包括MS基本培養(yǎng)基、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉；
(2)將綠蘿叢生芽切分成單株，并切掉基部組織和部分葉片，將其接種到步驟(1)中配制好的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
優(yōu)選地，所述萘乙酸的濃度為0.05～0.1mg/L，吲哚-3-乙酸的濃度為0.01～0.05mg/L，土豆泥的濃度為30～50mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂粉7g/L。
優(yōu)選地，所述步驟(1)中，將萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉溶解于MS基本培養(yǎng)基中，經(jīng)滅菌冷卻至室溫后待用。
優(yōu)選地，所述步驟(1)中的滅菌方法為高壓滅菌或高溫滅菌。
優(yōu)選地，所述步驟(2)中的培養(yǎng)條件為：光照強度為1500～20001x；光照時間為12h/d；溫度為25～28℃；濕度為50～65％。
優(yōu)選地，所述步驟(2)中，綠蘿生根培養(yǎng)培養(yǎng)時長為30～60天，例如30天、35天、40天、45天、50天、55天或60天。
為了便于理解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例來進一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案。申請人聲明，本發(fā)明通過上述實施例來說明本發(fā)明的詳細工藝設(shè)備和工藝流程，但本發(fā)明并不局限于上述詳細工藝設(shè)備和工藝流程，即不意味著本發(fā)明應(yīng)依賴上述詳細工藝設(shè)備和工藝流程才能實施。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對本發(fā)明的任何改進，對本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護范圍和公開范圍之內(nèi)。
實施例1
一種綠蘿生根培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
(1)配制生根培養(yǎng)基：將萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉溶解于MS基本培養(yǎng)基中，經(jīng)高壓滅菌冷卻至室溫后待用；其中各組分用量為MS基本培養(yǎng)基1L、萘乙酸0.05mg、吲哚-3-乙酸0.01mg、土豆泥30g、蔗糖30g、瓊脂粉7g。
(2)接種：在超凈工作臺上及無菌條件下，將綠蘿叢生芽切分成單株，并切掉基部組織和部分葉片，將其接種到步驟(1)中配制好的生根培養(yǎng)基中。
(3)生根培養(yǎng)：將接種好的綠蘿叢生芽苗在無菌、光照強度為1500～20001x、光照時間為12h/d、溫度為25～28℃、濕度為50～65％的培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)60天后記錄綠蘿生根情況。
實施例2
一種綠蘿生根培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
(1)配制生根培養(yǎng)基：將萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉溶解于MS基本培養(yǎng)基中，經(jīng)高壓滅菌冷卻至室溫后待用；其中各組分用量為MS基本培養(yǎng)基1L、萘乙酸0.06mg、吲哚-3-乙酸0.02mg、土豆泥45g、蔗糖30g、瓊脂粉7g。
(2)接種：在超凈工作臺上及無菌條件下，將綠蘿叢生芽切分成單株，并切掉基部組織和部分葉片，將其接種到步驟(1)中配制好的生根培養(yǎng)基中。
(3)生根培養(yǎng)：將接種好的綠蘿叢生芽苗在無菌、光照強度為1500～20001x、光照時間為12h/d、溫度為25～28℃、濕度為50～65％的培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)60天后記錄綠蘿生根情況。
實施例3
一種綠蘿生根培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
(1)配制生根培養(yǎng)基：將萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉溶解于MS基本培養(yǎng)基中，經(jīng)高壓滅菌冷卻至室溫后待用；其中各組分用量為MS基本培養(yǎng)基1L、萘乙酸0.08mg、吲哚-3-乙酸0.03mg、土豆泥50g、蔗糖30g、瓊脂粉7g。
(2)接種：在超凈工作臺上及無菌條件下，將綠蘿叢生芽切分成單株，并切掉基部組織和部分葉片，將其接種到步驟(1)中配制好的生根培養(yǎng)基中。
(3)生根培養(yǎng)：將接種好的綠蘿叢生芽苗在無菌、光照強度為1500～20001x、光照時間為12h/d、溫度為25～28℃、濕度為50～65％的培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)60天后記錄綠蘿生根情況。
實施例4
一種綠蘿生根培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
(1)配制生根培養(yǎng)基：將萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉溶解于MS基本培養(yǎng)基中，經(jīng)高壓滅菌冷卻至室溫后待用；其中各組分用量為MS基本培養(yǎng)基1L、萘乙酸0.09mg、吲哚-3-乙酸0.04mg、土豆泥35g、蔗糖30g、瓊脂粉7g。
(2)接種：在超凈工作臺上及無菌條件下，將綠蘿叢生芽切分成單株，并切掉基部組織和部分葉片，將其接種到步驟(1)中配制好的生根培養(yǎng)基中。
(3)生根培養(yǎng)：將接種好的綠蘿叢生芽苗在無菌、光照強度為1500～20001x、光照時間為12h/d、溫度為25～28℃、濕度為50～65％的培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)60天后記錄綠蘿生根情況。
實施例5
一種綠蘿生根培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
(1)配制生根培養(yǎng)基：將萘乙酸、吲哚-3-乙酸、土豆泥、蔗糖及瓊脂粉溶解于MS基本培養(yǎng)基中，經(jīng)高壓滅菌冷卻至室溫后待用；其中各組分用量為MS基本培養(yǎng)基1L、萘乙酸0.1mg、吲哚-3-乙酸0.05mg、土豆泥40g、蔗糖30g、瓊脂粉7g。
(2)接種：在超凈工作臺上及無菌條件下，將綠蘿叢生芽切分成單株，并切掉基部組織和部分葉片，將其接種到步驟(1)中配制好的生根培養(yǎng)基中。
(3)生根培養(yǎng)：將接種好的綠蘿叢生芽苗在無菌、光照強度為1500～20001x、光照時間為12h/d、溫度為25～28℃、濕度為50～65％的培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)60天后記錄綠蘿生根情況。
上述實施例1～5的綠蘿生根培養(yǎng)實驗結(jié)果如下表所示：
上述，生根率＝生根株數(shù)/接種株數(shù)×100％(根突破表皮即計為生根)；平均根長＝所有根的總長/總根數(shù)。
由表中結(jié)果分析出如下結(jié)論：在相同的培養(yǎng)條件下，實施例1中綠蘿生根率為96.0％，平均根長為3.1cm；實施例2中綠蘿生根率為98.5％，平均根長為3.5cm；實施例3中綠蘿生根率為99.2％，平均根長為3.5cm；實施例4中綠蘿生根率為97.8％，平均根長為3.2cm；實施例5中綠蘿生根率為96.6％，平均根長為3.0cm。因此，實施例3中得到的綠蘿叢生芽苗的根系最發(fā)達。
綜合以上分析，得出最適合綠蘿叢生芽苗生根的培養(yǎng)基為：
MS基本培養(yǎng)基1L、萘乙酸0.03mg、活性炭3000mg、蔗糖30g、瓊脂粉7g。
最后說明的是，以上優(yōu)選實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過上述優(yōu)選實施例已經(jīng)對本發(fā)明進行了詳細的描述，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以在形式上和細節(jié)上對其作出各種各樣的改變，而不偏離本發(fā)明權(quán)利要求書所限定的范圍。