一種葡聚糖的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及到一類來(lái)源于海星的葡聚糖在制備帕金森病藥物的應(yīng)用。該葡聚糖主要為β（1→3）糖苷鍵連接，是從海洋海星等無(wú)脊椎類動(dòng)物中提取并經(jīng)過陰離子交換層析分離得到。該葡聚糖對(duì)神經(jīng)毒素?fù)p傷兩種細(xì)胞系具有明顯的修復(fù)作用，表明它可以用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病如帕金森病和老年性癡呆的治療藥物和保健品的制備。
【專利說(shuō)明】一種葡聚糖的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及葡聚糖在制備治療或預(yù)防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著人類平均壽命的逐年增加，世界正步入全球老齡化時(shí)代。與年齡有關(guān)的神經(jīng)退化性疾病也隨之增加，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)方面，主要表現(xiàn)為興奮與抑制過程減弱，大腦功能降低，記憶力減退和喪失，隨后出現(xiàn)識(shí)別功能的進(jìn)行性減退和情緒紊亂的加重等。老年性癡呆已成為心腦血管疾病和腫瘤之后的第四位疾病。目前，全世界65歲以上人群中老年性癡呆患病率約為5%。而老年性癡呆因其復(fù)雜的發(fā)病機(jī)理，近期在防治上不可能取得突破性進(jìn)展，故西方有專家預(yù)言，老年性癡呆將是21世紀(jì)人類第一殺手。帕金森病又稱震顫麻痹，是中老年人常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，帕金森病的主要病理特征是是因位于中腦部位"黑質(zhì)"中的細(xì)胞發(fā)生病理性改變后，多巴胺的合成減少，抑制乙酰膽堿的功能降低，則乙酰膽堿的興奮作用相對(duì)增強(qiáng)。兩者失衡的結(jié)果便出現(xiàn)了“震顫麻痹”。最新資料表明，中國(guó)有I 7 O萬(wàn)帕金森病患者，其中5 5歲以上的人群中每I O O人就有I個(gè)帕金森病人，估計(jì)每年新增帕金森病人約I Q萬(wàn)人。老年性癡呆和帕金森病對(duì)患者、家庭和社會(huì)都帶來(lái)巨大的壓力，使得全世界對(duì)其給予眾多的關(guān)注，老年癡呆和帕金森病等神經(jīng)退行性疾病的治療藥物研究成為老年醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一個(gè)重要課題。
[0003]海洋是地球上所占面積最大的區(qū)域，因此開發(fā)海洋藥物越來(lái)越受到重視，而海洋物質(zhì)提取在制備和開發(fā)抗帕金森藥物及在神經(jīng)保護(hù)方面有著不可估計(jì)的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。
[0004]海盤車，屬于棘皮動(dòng)物門，海星綱，生活在潮間帶和近岸的平靜海域，以吞食各種貝類、軟體動(dòng)物、海膽等為 食。海盤車作為中藥已有幾千年的歷史，具有鎮(zhèn)驚安神、和胃止痛、厚腸止瀉，清熱解毒等功效，主治胃酸過多、胃潰瘍、腹瀉、癲癇等癥。近年來(lái)，海盤車體內(nèi)的活性成分相繼被發(fā)現(xiàn)，如留類糖苷，留醇，蛋白酶，氨基酸，多肽，蛋白多糖，脂類，生物堿等。但是以往的研究?jī)A向于海盤車提取物中留類糖苷化合物的藥理學(xué)活性及其作用機(jī)理。而對(duì)海盤車多糖的研究卻不多。少量的文獻(xiàn)報(bào)道了海盤車酸性粘多糖具有抗凝血，抑制紅細(xì)胞凝聚及血栓形成等作用，但海盤車中其他多糖及生物活性卻鮮有報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為解決上述問題，本發(fā)明提供一種葡聚糖在制備治療或預(yù)防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中的應(yīng)用。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是:
一種葡聚糖的應(yīng)用，所述葡聚糖可在制備治療或預(yù)防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應(yīng)用。
[0007]進(jìn)一步的，所述的葡聚糖按照以下方法制備:采用熱水或稀酸提取海盤車中的水溶性多糖；然后所述水溶性多糖通過陰離子交換色譜進(jìn)行分級(jí)，最后采用水洗脫并將得到的組分經(jīng)過脫鹽、濃縮、干燥后即得。
[0008]進(jìn)一步的，所述的陰離子交換色譜用介質(zhì)包括二乙氨乙基型弱陰離子凝膠或強(qiáng)陰離子凝膠。
[0009]進(jìn)一步的，所述二乙氨乙基型弱陰離子凝膠為二乙氨乙基交聯(lián)葡聚糖(DEAE-Sephadex), 二乙氨乙基纖維素(DEAE-纖維素)、二乙氨乙基交聯(lián)瓊脂糖凝膠(DEAE-瓊脂糖)中一種。
[0010]進(jìn)一步的，所述強(qiáng)陰離子凝膠為Q-sepharose凝膠或Q-sephadex。
[0011]進(jìn)一步的，所述的葡聚糖從羅氏海盤車或多棘海盤車中提取。
[0012]進(jìn)一步的，所述的葡聚糖分子量為IKD~1000KD。
[0013]進(jìn)一步的，所述的葡聚糖具有如下結(jié)構(gòu)特征:
(1)組成糖為葡萄糖，所述葡萄糖包括β-葡萄糖和α-葡萄糖(以β-葡萄糖為主，并含有部分α-葡萄糖);
(2)葡萄糖以(1— 3)糖苷鍵連接。
[0014]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于:首次發(fā)現(xiàn)海盤車來(lái)源的葡聚糖具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用，對(duì)帕金森病和老年性癡呆具有神經(jīng)保護(hù)作用，可以用于制備治療帕金森病的藥物。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0015]圖1海盤車葡聚糖的紅外光譜圖；
圖2海盤車葡聚糖的1H-NMR譜圖；
圖3海盤車葡聚糖的DEPT-Q譜圖；
圖4海盤車葡聚糖的HMBC譜圖；
圖5海盤車葡聚糖的HSQC譜圖；
圖6海盤車葡聚糖的1H, 1H-COSY譜圖；
圖7海盤車葡聚糖的TOCSY譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附后權(quán)利要求書限定的范圍。
[0017]本發(fā)明指出一種葡聚糖，可在制備治療或預(yù)防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應(yīng)用。所述葡聚糖的制備方法如下:
實(shí)施例1，
羅氏海盤車中葡聚糖的制備:
(I)將100g干羅氏海盤車，分別用3倍體積的異丙醇和乙醇浸泡脫脂處理，棄去有機(jī)溶劑，將海盤車干燥，得率為80%。
[0018](2)將脫脂的海盤車80g，用15倍體積的蒸餾水100°C提取3小時(shí)，過濾，提取液用用截留分子量為3000 Da超濾膜超濾脫鹽，超濾截留液減壓濃縮，凍干得海盤車多糖7.2g。
[0019](3)取上述凍干得到的海盤車多糖溶于水，配成質(zhì)量濃度為2.5% (質(zhì)量濃度)的水溶液，上樣到以DEAE-Sepharose-Fast Flow為載體的柱層析,依次用水和0.75 mol/L NaCl洗脫，收集各洗脫液，將水洗脫液和NaCl洗脫液分別用截留分子量為3000 Da的超濾膜超濾脫鹽，將超濾截留液凍干，其中水洗多糖組分為2.4g。
[0020]對(duì)水洗多糖組分進(jìn)行單糖組成分析，結(jié)果如表1所示。結(jié)果表明水洗多糖組分全部由葡萄糖組成，不含硫酸基，表明其為葡聚糖。
[0021]
實(shí)施例2，
多棘海盤車中葡聚糖的制備:
(I)取100g干的多棘海盤車，分別用3倍體積的異丙醇和乙醇浸泡處理，棄去有機(jī)溶劑，將海盤車干燥，得率為82%。
[0022](2)將脫脂的海盤車82g，用3倍體積的0.01 M HCl提取3小時(shí)，過濾，提取液用堿中和至PH 6，用截留分子量為3500Da透析袋透析2天，濃縮透析袋內(nèi)透析截留液，凍干得海盤車多糖8.lg。
[0023](3)取上述凍干得到的海盤車多糖溶于水，配成質(zhì)量濃度為2.5% (質(zhì)量濃度)的水溶液，上樣到以DEAE-Sepharose-Fast Flow為載體的柱層析,依次用水和0.75 mol/L NaCl洗脫，收集各洗脫液，將水洗脫液和NaCl洗脫液分別裝入截留分子量為3500 Da的透析袋以自來(lái)水流水透析2天，蒸餾水透析I天、分別凍干，其中水洗多糖組分為2.4g。
[0024]對(duì)水洗多糖組分進(jìn)行單糖組成分析，結(jié)果如表1所示。結(jié)果表明水洗多糖組分全部由葡萄糖組成，不含硫酸基，表明其為葡聚糖。
[0025]表1海盤車中葡聚糖的化學(xué)分析
【權(quán)利要求】
1.一種葡聚糖的應(yīng)用，其特征在于，所述葡聚糖可在制備治療或預(yù)防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葡聚糖的應(yīng)用，其特征在于，所述的葡聚糖按照以下方法制備:采用熱水或稀酸提取海盤車中的水溶性多糖；然后所述水溶性多糖通過陰離子交換色譜進(jìn)行分級(jí)，最后采用水洗脫并將得到的組分經(jīng)過脫鹽、濃縮、干燥后即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的葡聚糖的應(yīng)用，其特征在于，所述的陰離子交換色譜用介質(zhì)包括二乙氨乙基型弱陰離子凝膠或強(qiáng)陰離子凝膠。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的葡聚糖的應(yīng)用，其特征在于，所述二乙氨乙基型弱陰離子凝膠為二乙氨乙基交聯(lián)葡聚糖(DEAE-S印hadex)、二乙氨乙基纖維素(DEAE-纖維素)、二乙氨乙基交聯(lián)瓊脂糖凝膠(DEAE-瓊脂糖)中一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的葡聚糖的應(yīng)用，其特征在于，所述強(qiáng)陰離子凝膠為Q-sepharose 凝膠或 Q-sephadex。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的葡聚糖的應(yīng)用，其特征在于，所述的葡聚糖從羅氏海盤車或多棘海盤車中提取。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的葡聚糖的應(yīng)用，其特征在于，所述的葡聚糖分子量為IKD~1000KDo
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的葡聚糖的應(yīng)用，其特征在于，所述的葡聚糖具有如下結(jié)構(gòu)特征: (1)組成糖為葡萄糖，所述葡萄糖包括葡萄糖和α-葡萄糖； (2)葡萄糖以(1— 3)糖苷鍵連接。
【文檔編號(hào)】A61K31/716GK103919800SQ201310010388
【公開日】2014年7月16日 申請(qǐng)日期:2013年1月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月11日
【發(fā)明者】張全斌, 張文靜, 金維華, 王晶 申請(qǐng)人:南通中國(guó)科學(xué)院海洋研究所海洋科學(xué)與技術(shù)研究發(fā)展中心, 中國(guó)科學(xué)院海洋研究所