專利名稱：鈉通道阻滯劑和選擇性5-羥色胺攝取抑制劑的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及具有增強的鈉通道阻滯作用的新的藥物組合。此外，本發明涉及該藥物組合在慢性疼痛、運動系統障礙、癲癇以及其他應用鈉通道阻滯劑是可接受的治療領域中的用途。
背景技術：
眾所周知電壓敏感性鈉通道在產生和傳導動作電位的過程中起著關鍵的作用，在調節神經元的興奮性方面起關鍵作用。鈉通道在神經細胞膜的表面形成小孔并且響應細胞膜的去極化通道將短時開放以便鈉離子流入細胞引起電位改變。在神經系統的某些疾病中，可以觀察到由于通道作用改變而通常導致神經元的興奮性異常提高。通過阻滯電壓依賴性鈉通道而對此類疾病產生有益作用的多種藥物正在上市或研發中。鈉通道阻滯劑如利多卡因，常規性地用于局部麻醉劑。某些結構相似的物質(例如美西律)用作抗心率失常的藥物。目前有一些更新的分子正處于研發階段，其中的crobenetine (克勞奈汀)被證實即使在很低的劑量下也有效(Carter, A.J.等，Potentblockade of sodium channels and protection of brain tissue from ischemia byBIII890CL，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA97:4944-4949 ；2000)o 后一種化合物看起來對神經性疼痛也有效。(Laird, J.M.A.等，Analgesic activity of a novel use-dependentsodium channel blocker,crobenetine, in mono—arthriticrats，Br.J.Pharmacol134:1742-1748 ;2001)。多種其他 的鈉通道阻滯劑對慢性疼痛有效(Hunter，J.C，Loughhead, D., Voltage-gated sodium channel blockers for the treatment ofchronic pain，Curr.0pin.CPNS.1nvest.Drugsl: 72-81; 1999)。用于治療神經退行性疾病的利魯唑具有相同的作用機理(Hurco，0.，Walsh, F.S.，Novel drug developmentfor amyotrophic lateral sclerosis。J.Neurol.Sc1.180:21-28;2000)。最近發現鈉通道阻滯劑能夠治療伴隨疼痛性肌肉痙攣阻礙病人正常活動的疾病(Kocsis，P.等，Mydeton:a centrally acting muscle relaxant drug of Gedeon Richter Ltd， ActaPharm Hung72:49-61; 2002)。此外可能的應用領域為腦缺血、遺傳性通道疾病、耳鳴、偏頭痛以及藥物濫用(Clare，J.J.等，Voltage-gated sodium channels as therapeutictargets, Drug Discov.Today5:506-520; 2000)。很多抗癲癇藥物(苯妥英、卡馬西平)已經應用了很長時間。鈉通道抑制活性被認為是它們的作用機理的主要組成部分(Willow，M.等，Voltage clamp analysis of the inhibitory actions of diphenylhydantoin andcarbamazepine on voltage-sensitive sodium channels in neuroblastoma cells，Molecular Pharmacology27:549-558，1985)。在此作用機理的啟發下開發了拉莫三嗪(Leach，M.J.等，Pharmacological studies on lamotrigine，a novel potentialantiepileptic drug:1I Neurochemical studies on the mechanism of action， Epilepsia27:490-497, 1986;Clare, J.J.等，Voltage-gated sodium channels as therapeutictargets, Drug Discov.Today5:506-520;2000)。leander的研究表明在小鼠的最大電休克驚厥試驗(MES)中氟西汀增強了卡馬西平、苯妥英和氨托利的抗驚厥作用。(leander，J.D.，Fluoxetine, a selectiveserotonin-uptake inhibitor enhances the anticonvulsant effects ofphenytoin, carbamazepine, and ameltolide(LY201116)，EpiIepsia33:573-576，1992)。作者總結到由于同時給予氟西汀可以提高抗癲癇藥物的作用，氟西汀也可以用于治療那些有癲癇問題的抑郁患者。然而作者沒有提到其可能的作用機理。與此相似，Raju等(Raju，
S.S.等，Effect of fluoxetine on maximal electroshockseizures in mice:acutevs.chronic administration， Pharmacological Research39:451-454， 1999。)發現急性應用的氟西汀導致苯妥英抗驚厥作用的ED50值降低。另一方面，Dailey及其合作者在其試驗中發現單獨給予氟西汀顯示了抗驚厥活性(Dailey，J.W.等。Neurochemicalcorrelates of antiepileptic drugs in the genetically epilepsy-prone rat (GEPR).Life Sciences58:259-266,1996。)。更進一步的數據表明5_羥色胺的損耗降低了某些抗癲癇藥物(卡馬西平、抗癇靈)的有效性，但是對苯妥英的效力沒有影響。另一方面，其他的研究者強調關于抗驚厥作用去甲腎上腺素能系統是單胺能系統中最重要的部分(Fisher，W.，Miiller, M.，Pharmacological modulation of central monoaminergic systems andinfluence on the anticonvulsant effectiveness of standard antiepileptics inmaximal electroshock seizure, Biomedica Biochimica Acta47:631-645,1988。)。而擬交感作用導致某些抗癲癇藥物(苯妥英、卡馬西平)的有效性顯著提高，去甲腎上腺素能系統的作用減弱導致所研究的抗癲癇藥物的效力減弱。根據他們的結論調節5-羥色胺能系統對抗癲癇藥物的效力不產生主要影響。由于開放后很快失去活性，所以鈉通道的開放時間極短(1-2毫秒)。通過調節失活過程可以有效地影響神經元的興奮性。目前的研究結果表明某些神經遞質(例如乙酰膽堿、5-羥色胺、去甲腎上腺素)可以通過G-蛋白偶聯受體調節通道的作用(Carr，D.B.等，Transmitter modulation of slow, activity-dependent alterations in sodiumchannel availability endows neurons with a novel form of cellular plasticity.Neuron39:793-806;2003， 與 Li , P., Zhuo，M.，Cholinergic，noradrenergic,andserotonergic inhibition of fast synaptic transmission in spinal lumbardorsal horn of rat.Brain Res.Bull.54:639-947; 2001 )D 盡管有些作者報道 5-羥色胺受體激動劑可能通過激活5-羥色胺受體而間接抑制鈉通道的作用(Cair，D.B等，Serotonin receptor activation inhibits sodium current and dendriticexcitability in prefrontal cortex via a protein kinase C—dependent mechanism.J.Neurosc1.22:6846-6855; 2002)他們并沒有研究鈉通道阻滯劑和5-羥色胺能藥物之間可能的協同作用。另一方面，Rapeport報道了在5-羥色胺攝取抑制劑和鈉通道阻滯劑之間沒有發現協同作用(Rapeport，W.G.等，Absence of a sertraline-mediated effect onthe pharmacokinetics and pharmacodynamics of carbamazepine.Journal of ClinicalPsychiatry57(Suppl.1):20-23; 1996)。美國專利公開申請US2002/0147196A1 公開了兒茶酚胺攝取抑制劑與鈉通道阻滯劑組合治療神經性疼痛的有益效果。總之，已發表的有關5-羥色胺攝取抑制劑可能加強鈉通道阻滯劑作用的試驗數據相互矛盾。盡管偶爾發現有些組合有加強作用的情況，其他的結果又提出了相反的傾向。然而，鈉通道阻滯劑具有多種副作用，其中有些是鈉通道阻滯作用本身造成的后果:例如對心血管(例如心搏徐緩、張力減退)或中樞神經系統(CNS)(例如共濟失調、鎮靜作用)等的副作用。其他的副作用與鈉通道無關而與其化學結構有關，例如較大劑量的拉莫三嗪可能引起腸胃失調、肝臟損害或皮膚病等。如果設法降低藥物的有效劑量就能夠減少這些副作用。顯然，與能加強鈉通道阻滯作用的藥物結合是達到此目的合適途徑。

發明內容

在試驗中，我們驚奇地發現同時給予5-羥色胺攝取抑制劑化合物可顯著增強鈉通道的阻滯活性。而至于副作用，5-羥色胺能在此方面的活性增強作用沒有那么明顯。因此，本發明的藥物組合物比單用鈉通道阻滯劑具有更多有利的治療指數。正如旋轉運動測試中所顯示的那樣，5-羥色胺攝取抑制劑更少或甚至可能不表現增強作用，因此，給予藥物組合與單獨給予鈉通道阻滯劑相比治療指數就相當高了。例如拉莫三嗪的治療指數(旋轉運動測試ED5(I/MES ID5tl)為7.6，其在10mg/kg氟西汀的存在下治療指數增加約3倍。應用本發明的組合可能帶來癲癇治療的副作用上的進步。因此本發明的目的是新的藥物組合，該組合在作為鈉通道阻滯劑的治療靶標的疾病(例如慢性疼痛，某些運動系統障礙、癲癇、毒癮或酒癮、大小便失禁、炎癥、搔癢、顱內水腫、缺血和/或由再灌注引起的繼發性損害、或作為青光眼并發癥的視網膜病變)的治療中顯示了較高的活性，并且比單用鈉通道阻滯劑具有更加有利的副作用特性(side effectprofile)。本發明的藥物組合物，能夠分別降低鈉通道阻滯劑的有效治療劑量和提高其臨床效果。上述的藥物組合物包含作為活性成分的鈉通道阻滯劑結合5-羥色胺攝取抑制劑。用于本發明的藥物組合物中的鈉通道阻滯劑是已知具有該作用機理的物質。這些物質的例子為拉莫三嗪、克勞奈汀、卡馬西平、苯妥英、托哌酮、乙哌立松、奧卡西平、磷苯妥英，優選拉莫三嗪、奧卡西平、磷苯妥英或克勞奈汀。用于進行本發明而任選的這些物質的混合物也在本發明的范圍之內。能夠應用的5-羥色胺攝取抑制劑為已知具有該作用機理的物質。優選應用的選擇性5-羥色胺攝取抑制劑為氟西汀、帕羅西汀、度洛西汀、舍曲林、西酞普蘭、依地普侖。最優選氟西汀、舍曲林或西酞普蘭。用于進行本發明而任選的這些物質的混合物也在本發明的范圍之內。所述的鈉通道阻滯劑的鹽、溶劑化物、結晶變體或立體異構體及其混合物的應用也在本發明的范圍之內。本發明的藥物組合物能夠有效治療和/或預防慢性疼痛(例如神經性疼痛、炎癥或風濕引起的疼痛、三叉神經痛、頭痛、纖維肌痛)和腸易激綜合癥(IBS)，治療和預防運動系統障礙(例如痙攣性疾病、特發性震顫、肌張力障礙、耳鳴、錐體束外障礙、抽動)和神經退行性疾病(例如ALS、HIV引發的癡呆、帕金森綜合癥、阿爾茨海默病、亨廷頓舞蹈病、多發性硬化、朊病毒疾病、中風、大腦和脊髓損傷、腦缺血)，也能夠治療和預防毒癮或酒癮、大小便失禁、炎癥、搔癢、顱內水腫、缺血和/或由再灌注引起的繼發性損害、或作為青光眼并發癥的視網膜病變，進一步治療和預防不同類型的癲癇，例如部分性發作如簡單部分性發作(運動癥狀表現、體感覺中樞-感覺中樞癥狀表現、自主神經癥狀表現、精神癥狀表現)，復雜部分性發作(局部發作和/或意識喪失)或伴隨繼發性全身發作的部分性發作(全身性強直或陣攣性發作)、全身性發作如精神不集中(典型或非典型)、肌陣攣、陣攣、強直-陣攣(癲癇大發作)發作、肌緊張消失(起立不能發作)，還有無法歸類的其他形式的發作(癲癇發作的國際分類，Epilepsia, 22，489-501，1981)。上述疾病能夠得到成功的治療不僅需要通過將鈉通道阻滯劑和5-羥色胺攝取抑制劑(在此情況下所述的物質以兩種獨立的組合物或以單一組合物如組合的形式存在)同時給藥，而且需要連續給藥，此時可以優先給予任一活性成分。活性藥物或其藥學上可接受的衍生物可以不需配制成分進行應用或優選以適合于藥物應用的形式應用，尤其是對人體施治。
除了將活性藥物制成合適的形式以外，組合物也可以包含一種或多種藥學可接受的輔料。藥物組合物可以口服形式、腸胃外給藥形式，包括靜脈內、皮下、皮內、肌內、直腸、局部、口頰、皮膚或舌下的形式應用，也可以適合吸入的方式應用。適合口服給藥的制劑可以是單位劑量的形式，例如膠囊、片劑(例如用于兒科的咀嚼片)、可以是粉末或顆粒的形式、水溶液或非水溶液的形式或懸浮液和油包水或水包油的乳劑形式。片劑可經任選使用一種或多或種輔料制備成壓縮片或塑制片。壓縮片由合適的壓片機制備而成，其中粉末狀或粒狀的活性成分任選與已知的輔料如粘合劑、填充劑、潤滑齊U、崩解劑、濕潤劑和調味劑混合。粘合劑的例子為糖漿、阿拉伯樹膠、明膠、山梨醇和聚乙烯吡咯烷酮。填充劑的例子為不同的羥甲基纖維素填充劑、乳糖、蔗糖、微晶纖維素、玉米淀粉、磷酸鈣或羥甲基纖維素。潤滑劑的例子為硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或硅膠。崩解劑的例子為土豆淀粉或羥基乙酸鈉。塑制片可以通過將粉末狀活性藥物與惰性液體溶劑的混合物置于合適的成型機中制備而成。任選將片劑按照制藥工業中已知的方法進行包衣。也可以制備緩釋或控釋片劑。口服給藥用組合物也可以是液體形式，例如水懸浮液或油懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酊劑。該組合物也可以制備成干燥形式，在剛好治療前能夠通過合適的方法將其轉化成液體形式。所述的液體制劑可以包含已知的添加劑例如懸浮劑(山梨醇、糖漿、甲基纖維素、葡萄糖、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁膠或食用氫化脂肪)、乳化劑(卵磷月旨、單油酸失水山梨醇酯、阿拉伯樹膠)、非水物質(甜杏仁油、分餾椰子油、酯、丙二醇、乙醇)、防腐劑(對羥基苯甲酸的甲基酯或丙基酯、山梨醇)或調味添加劑。栓劑形式的組合物可以含有常規的賦形劑，例如可可油、固體脂肪、聚乙二醇或甘油及其衍生物。腸胃外給藥用組合物是注射用水性或非水性溶液且可以含有抗氧化劑、緩沖劑、殺菌劑和溶于等滲溶液的物質。然后將組合物裝于如安瓿(一個或多個單位劑量)中或以凍干形式保存。適合于局部用藥的組合物的例子為霜劑(cream)、凝膠劑、膏劑(ointment)或透皮貼膏劑形式。鼻內給藥的組合物的例子為噴射劑、粉末劑(dust)或滴劑。適用于治療的組合物可以是氣霧噴射劑，它含有除活性成分以外的推進劑，例如二氧化碳、1，I, 1- 二氟乙燒、I, I, I, 2, 3, 3, 3-七氟丙燒等。生物學數據脊髓反射抑制我們的試驗按照Otsuka和Konishi所描述的方法(Otsuka, M., Konishi S.,Electrophysiology of mammalian spinal cord in vitro, Nature252, 733-734;1974))來進行，并稍作改進(Kocsis, P.等，Participation of AMPA-and NMDA-type excitatoryamino acid receptors in the spinal reflex transmission, in rat, Brain ResearchBulletin60:81-91; 2003)。使用超大的電脈沖刺激分離后的脊髓半橫斷標本的L5背根并記錄L5前根的反射電位。根據刺激后的反應時間和持續時間，得到的反射電位的不同構成是可以完全區分開來的。鈉通道阻滯劑通常是且尤其是在結構和活性上密切相關的托哌酮和乙哌立松，它們在體外的脊髓半橫斷標本中顯示了相當的脊髓反射抑制作用。這是研究兩種物質之間的藥效學相互作用的理想標本，因為代謝作用的因素沒有參與其中。


圖1表示不同的5-羥色胺攝取抑制劑增加鈉通道阻滯劑克勞奈汀的反射抑制活性的效果。Cont (對照組)=單用克勞奈汀的效果；還表示了有氟西汀(Fluo ;1 PM)、舍曲林(Sert ;0.5iiM)、帕羅西汀(Paro ;10nM)和西酞普蘭(Cital ;5nM)存在時的效果。圖2表示不同的5-羥色胺攝取抑制劑增加鈉通道阻滯劑拉莫三嗪的反射抑制活性的效果。Cont (對照組)=單用拉莫三嗪的效果；還表示了有氟西汀(Fluo ;1 PM)、舍曲林(Sert ;0.5iiM)、帕羅西汀(Paro ;10nM)和西酞普蘭(Cital ;5nM)存在的效果。圖3表示5-羥色胺攝取抑制劑(IuM氟西汀)增加不同鈉通道阻滯劑的反射抑制活性的效果。從中可以看出拉莫三嗪(Lamo)、克勞奈汀(Cro)、托哌酮(Tolp)、乙哌立松(Eper)和卡馬西平(Carba)不加和加上IyM氟西汀的反射抑制效果。圖4中表示單用鈉通道阻滯劑拉莫三嗪和克勞奈汀的作用和在5-羥色胺攝取抑制劑以單用沒有顯著效果的劑量存在時鈉通道阻滯劑增加的效力。即，將震顫試驗中得到的單用拉莫三嗪和克勞奈汀(Cont)及與10mg/kg氟西汀(Fluo)或10mg/kg舍曲林(Sert)合用的ID50值繪圖；所有的物質都經腹膜內給藥。圖5顯示在5-羥色胺攝取抑制劑存 在時鈉通道阻滯劑拉莫三嗪的止痛效力增強，其中將扭體試驗中獲得的單用拉莫三嗪(Cont)與合用10mg/kg的氟西汀(Fluo)的ID50值分別繪于圖中。
具體實施例方式在各種情況下，加入5-羥色胺攝取抑制劑都導致鈉通道阻滯劑的活性顯著增加。在體內也測量了 5-羥色胺的用量(tone)增加后鈉通道阻滯劑效力的變化，即在GYKI20039誘導的震顫試驗中測試了其震顫抑制作用。震顫試驗對小鼠中由藥物誘導的震顫的抑制作用是化合物對人體弛緩作用的很好的表征。可以通過給予GYKI20039 (3_(2，6-二氯苯基)_2_亞氨基噻唑烷)誘導震顫。該方法公開于 Kocsis P., Tarnawa 1., Kovacs Gy., Szombathelyi Zs., Farkas S., 2002; ActaPharmaceut.Hung., 72:49-61; US53408231994, US5198446、JP1992270293、EP0468825、1990HU4647。我們的試驗顯示將GYKI20039以10mg/kg的劑量對小鼠腹膜內給藥引起小鼠強烈的震顫，其持續30-60分鐘并在第4至8分鐘達到頂峰。其作用方式還不完全清楚，但其與引發震顫(tremorogen)的化合物L0N-954的結構類似,表明牽涉減弱多巴胺能和5-輕色胺能系統(Mohanakumar, K.P., Ganguly, D.K., 1989;Brain Res.Bull.22:191-5)。GYKI20039誘導的震顫能夠被肌松藥以不同的作用方式劑量依賴性抑制，因此其為用于比較藥物肌松效力的合適方法。該模型通過臨床實踐中應用的多種不同的肌松藥得到了證實。其中所有的藥物都產生劑量依賴性抑制作用，這與肌松藥的臨床抗痙攣效力有關。 我們的研究證明了鈉通道阻滯劑具有震顫抑制作用，也證實了 5-羥色胺水平提高時鈉通道阻滯劑效力發生變化。試驗在雄性NMRI小鼠(19-21g)中進行，同時腹膜內給予活性物質。還將包含固定比例活性成分的組合進行了試驗。在這種情況下，也發現了作用增強的現象。下述表I表示通過加入固定比例的5-羥色胺攝取抑制劑(氟西汀)，鈉通道阻滯齊IJ(拉莫三嗪)的作用增強了。表I
組合物比例ID50 (腹膜內)
___(以組合中鈉通道阻滯劑計)
拉莫三嗪___39.79mg/kg_
拉莫三嗪:氟西汀丨0:1__22.9mg/kg_
拉莫三嗪:氟西汀 I 10: 2 I_15.3mg/kg_抑制最大電休克驚厥抑制最大電休克驚M (MES ；Swinyard, E.A., Brown, ff.C., Goodman L.S.,Comparative assay of antiepileptic drugs in mice and rats.Journal ofPharmacology and Experimental Therapeuticsl06，319-330; 1952)試驗顯不了化合物的抗癲癇效力。這項試驗在雄性NMRI小鼠(19-21g)中進行。使用SSRI化合物對動物進行預處理后引起鈉通道阻滯劑的作用顯著增強。而在本試驗中單獨給予相同劑量的SSRI化合物幾乎無效。下表2表示在自身單用無明顯作用的5-羥色胺攝取抑制劑存在的情況下鈉通道阻滯劑的效力增強。5-羥色胺攝取抑制劑在電休克前45分鐘腹膜內給藥而鈉通道阻滯劑在30分鐘前給藥。表權利要求
1.藥物組合物，其包含選擇性5-羥色胺攝取抑制劑氟西汀和鈉通道阻滯劑拉莫三嗪。
2.選擇性5-羥色胺攝取抑制劑氟西汀和鈉通道阻滯劑拉莫三嗪在制備適合治療和/或預防哺乳動物的疾病的藥物組合物中的應用，所述疾病包括慢性疼痛或癲癇，或由運動系統障礙和/ 或損傷引起的癥狀或疾病。
全文摘要
本發明涉及鈉通道阻滯劑和選擇性5-羥色胺攝取抑制劑的藥物組合物，其具有改善的鈉通道阻滯作用，另外，本發明涉及所述藥物組合在慢性疼痛、運動系統障礙、癲癇以及其它其中鈉通道阻滯劑的使用是可接收的治療領域中的應用。
文檔編號A61K45/06GK103202845SQ20131007316
公開日2013年7月17日 申請日期2004年12月18日 優先權日2003年12月19日
發明者帕爾·科奇什, 伊什特萬·塔納瓦, 瑪爾塔·坦, 卡羅伊·蒂豪尼, 捷爾吉·內梅特 申請人:帕爾·科奇什, 伊什特萬·塔納瓦, 瑪爾塔·坦, 卡羅伊·蒂豪尼