一種抗腫瘤藥物、制備方法及其用途
【專利摘要】本發明提出了一種抗腫瘤藥物、制備方法及其用途，所述抗腫瘤藥物由如下重量比的各成分組成，阿魏:蟾蜍：馬寶：白花蛇舌草=30：30：50：150。將各成分粉碎、過篩、混勻即可制備得到。可用于抗腫瘤，比如肝癌、胃癌或食道癌。抗癌效果好，對腫瘤細胞可達90%左右的抑制。遠遠好于目前市面上藥物的抗癌效果。
【專利說明】—種抗腫瘤藥物、制備方法及其用途
【技術領域】
[0001]本發明涉及中藥領域，尤其涉及一種抗腫瘤藥物、制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002]癌癥是嚴重威脅人類健康和社會發展的重大疾病之一，也是目前威脅我國居民健康的重大疾病。最近統計數據顯示，我國癌癥發病率呈逐年上升趨勢，其中消化系統癌癥如胃癌、結腸癌等癌癥占全部癌癥構成的10%以上，均為危害較大的常見腫瘤。目前臨床上常用的放化療方法治療腫瘤，在殺傷腫瘤細胞的同時，也造成機體骨髓抑制和免疫功能低下，毒副作用大。因此從天然的動物、植物及礦物中尋找高效低毒的抗腫瘤藥物或活性成分是近年來國內外學者研究的熱點。中醫藥是我國特有的傳統醫藥寶庫，在我國用于防病治病已有2000多年的歷史，為抗癌藥物的研發提供了十分豐富的資源。
[0003]目前國內同類藥物檢測過的最高癌細胞抑制率僅有50%左右，而人盡皆知的名貴抗癌藥材紅豆杉的抑癌率也僅有30%左右。
[0004]因此，急需開發更有效的抗腫瘤藥物。
【發明內容】

[0005]本發明的目的在于提供一種更有效的抗腫瘤中藥藥物。
[0006]為實現上述目的，本發明提供一種抗腫瘤藥物，其特征在于，由如下重量比的各成分組成，為阿魏:蟾蜍:馬寶:白花蛇舌草=30:30:50:150。
[0007]所述抗腫瘤藥物的制備方法，其特征在于，稱取各成分、將各成分粉碎、過篩、混勻即可。所述過篩所得抗腫瘤藥物各成分的直徑為300-800目。所述各具體步驟按照常規方法即可。
[0008]本發明還保護所述抗腫瘤藥物用于抗腫瘤的用途。包括將所述抗腫瘤藥物用水或者黃酒送服的步驟。
[0009]所述腫瘤為肝癌、胃癌、食道癌。
[0010]本發明的抗腫瘤藥物也即“李氏膈食散”是根據祖輩行醫經驗并吸取歷代各家治療食管癌的理論精髓，形成的具有獨特療效的經驗方。“李氏膈食散”由阿魏、蟾蜍、馬寶、白花蛇舌草等中藥根據中醫理論配伍而成，臨床應用已數十年，經觀察對食道癌、胃癌等消化道癌癥有顯著療效，能有效消除癌癥腫塊、減輕病人痛苦，并能促進食欲，延長癌癥病人壽命。
[0011]“李氏膈食散”復方主要由阿魏、蟾蜍、白花蛇舌草等傳統中藥配伍而成。阿魏是一味常用中藥，早在《新修本草》中就有記載。阿魏有特殊的臭氣，味苦而辛，有理氣消腫、活血消疲、祛痰和興奮神經的功效。趙貝等通過整體、細胞、分子三個水平初步證明阿魏藥酒有一定的抗腫瘤作用，主要是通過阻止腫瘤的浸潤和轉移，提高機體免疫能力。蟾蜍首載于《名醫別錄》，早在《神農本草經》就載有“蝦蟆”的性味與主治。古今驗方廣泛應用蟾蜍、蟾酥拔毒消腫、定痛殺蟲、強心利尿。現已有蟾酥鎮痛膏、蟾酥注射液、華蟾素注射注和復方蟾皮膠囊等制劑應用于臨床抗腫瘤、鎮痛、利水消腫等。白花蛇舌草味甘、淡，性涼，歸胃、大腸、小腸經，具清熱解毒、消腫鎮痛的功效，主治闌尾炎、氣管炎、尿道感染、毒蛇咬傷、腫瘤、腸風下血等。體外實驗證明白花蛇舌草乙醇提取物對人低分化胃腺癌細胞(BGC)、人類口腔表皮樣癌細胞(KB)、人肝癌細胞(SMMC)、人宮頸癌細胞(HELA)、人肺癌細胞(A549)有一定的抑制作用。體內證明白花蛇舌草乙醇提取物對小鼠移植性S180實體瘤有一定抑制作用。以白花蛇舌草為君藥的醫院制劑中肝合劑，在治療中晚期原發性肝癌的臨床療效顯示能顯著提高III期原發性肝癌患者的生活質量，延長生存時間。“李氏膈食散”的主要藥味無論臨床試用還是實驗研究均具有良好的抗腫瘤效果，表明“李氏膈食散”復方配伍具有理論和和實踐應用的基礎。
[0012]“李氏膈食散”復方既有動物藥又有植物藥，各味藥的主要活性成分各不相同，蟾蜍抗腫瘤主要活性成分為蟾毒內酯類成分，屬強心苷類物質，包括蟾毒靈(bufalin)、脂蟾蜍配基(resibufogenin)、華蟾酥毒基(又稱華蟾毒精cinobufagin)等；阿魏主要活性成分為揮發油、香豆素和苯丙素等，白花蛇舌草的主要活性成分有黃酮、三萜、有機酸及多糖等多種成分，馬寶可解毒去惡瘡，這些不同活性成分從腫瘤不同靶點發揮作用，充分體現中藥的多成分、多靶點作用特點，從整體調節機體功能達到去除疾病的目的。
[0013]“李氏膈食散”臨床試用時使用的是散劑，即將藥材粉碎，過篩，混勻，即用于胃癌、食道癌等消化道腫瘤病人的治療，病人服用方法通常采用黃酒送服。由于體外細胞實驗時藥材粉末是不能進入細胞的，必須對藥材進行提取。本發明對“李氏膈食散”進行水提取和醇提取兩種方法，并對兩種提取物均進行了體外抗腫瘤活性研究。實驗結果表明兩種提取物對肝癌細胞(HpeG-2)、胃癌細胞(MKN-45)、食道癌細胞(EC-10)三種消化系統腫瘤細胞株均有體外抗腫瘤效果，以乙醇提取物效果更好。乙醇提取物對三種腫瘤細胞株最大抑制率在90%左右。本發明的研究結果初步表明“李氏膈食散”脂溶性成分可能具有更好的抗腫瘤活性，也間接證明臨床試用中采用黃酒服用是有一定的科學依據。
[0014]本發明的抗腫瘤藥物，經過體外抗腫瘤試驗研究報告，檢測數據顯示:“李氏膈食散”水提取物和乙醇提取物對肝癌細胞(HpeG-2)、胃癌細胞(MKN-45)、食道癌細胞(EC-109)三種消化系統細胞株有明顯的體外抗腫瘤效果。乙醇提取物效果更好，對三種細胞株的最大抑制率接近或超過90%。對肝癌細胞最大抑制率達88.40%，對食道癌細胞最大抑制率達91.88%，對胃癌細胞最`大抑制率達93.98%。國內同類藥物檢測過的最高癌細胞抑制率僅有50%左右，而人盡皆知的名貴抗癌藥材紅豆杉的抑癌率也僅有30%左右。而本發明的癌細胞最大抑制率遠遠高于此。
[0015]由于中醫里面十分講究藥的劑量的精準度、君臣佐使配伍理論等，因而當一味藥的劑量發生變化時，會對整個處方的效果產生相應的影響。實施例2的效果驗證中可以看出，當配方中的任一成分發生變化時，效果也受到很大的影響，抗癌效果將大打折扣。因此更加證明本發明的配方是經過 申請人:多年經驗和創造性勞動才得出的。具有非常好的抗癌效果。
【具體實施方式】
[0016]下面詳細描述本發明的實施例，所述實施例的示例旨在用于解釋本發明，而不能理解為對本發明的限制。實施例中未注明具體技術或條件者，按照本領域內的文獻所描述的技術或條件或者按照產品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市購獲得的常規產品。
[0017]實施例所用材料商購來源:
[0018]細胞:人肝癌細胞(HepG-2)、胃癌細胞(MKN-45)、食道癌細胞(EC-109)，均購自中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞資源中心。
[0019]試劑:95%乙醇(分析純，北京化工廠)，DMSO (分析純，北京化工廠)RPMI 1640培養基(Solarbio公司，中國),胰蛋白酶(Solarbio公司，中國),胎牛血清(Gibco公司，美國)，磷酸鹽緩沖液(Thermo公司，德國)，MTT試劑(Gibco公司，美國)；
[0020]儀器:純水儀(Millipore公司，美國),96孔細胞培養板(Thermo公司，德國),倒置顯微鏡(OLYMPUS公司，日本)，二氧化碳培養箱(Thermo公司，德國)，連續波長酶標儀(B10-TEK，美國)。
[0021]實施例1:本發明抗腫瘤藥物(李氏膈食散)的制備方法
[0022]成分:阿魏30g蟾蜍30g馬寶50g白花蛇舌草150g。
[0023]步驟:稱取藥材，粉碎、過篩得到300-800目的粉末、混勻即可。
[0024]I)李氏膈食散水提物的制備方法
[0025]李氏膈食散生藥粉末IOgJP 100ml水回流提取三次，每次30min，過濾，濾液合并，真空干燥，得到李氏膈食散水提物，得率為16.8%。
[0026]2)李氏膈食散醇提物的制備方法
[0027]稱取李氏膈食散生藥粉末`IOgJP 100ml95%乙醇溶液回流提取三次，每次30min，過濾，濾液合并，真空干燥，得到李氏膈食散乙醇提取物，得率為10.5%。
[0028]實施例2:抗腫瘤效果實驗
[0029]取對數生長期的肝癌細胞株(HepG-2)、胃癌細胞株(MKN-45)以及食道癌細胞株(EC-109),消化計數后分別接種于96孔培養板中，每孔約8000-10000個細胞，恒溫37度培養12小時，棄去培養液，加入不同濃度的含藥培養基(用RPMI1640培養基配置)100 ii L繼續恒溫37度培養24小時，吸出培養液，每孔加入150 u L磷酸鹽緩沖溶液和100 u L0.5g ? L—1的MTT溶液，繼續恒溫37度培養4小時后棄去MTT溶液和磷酸鹽緩沖溶液，每孔加入150 y LDMSO溶解，平板震蕩儀震蕩15min，在酶標儀上用波長570nm，參比波長為450nm的條件測定各孔吸光度值(OD)，計算抑制率:[抑制率(％)=( I 一實驗組OD值/對照組OD組)X 100%]，并求出各濃度半數抑制濃度(IC5tl)實驗結果以x±s表示，經SPSS17.0統計軟件處理并進行t檢驗和單因素方差分析，以P < 0.05為有統計學意義。
[0030]其中實驗組的配方為實施例1中的配方，
[0031]對照I的配方為阿魏20g蟾蜍25g馬寶40g白花蛇舌草140g ；
[0032]對照2的配方為阿魏40g蟾蜍35g馬寶60g白花蛇舌草160g ；
[0033]提取方法參照實施例1。
[0034]空白對照就只加培養基即可。
[0035]李氏膈食散水提物(實施例1的配方)的實驗結果見表1、2和3.[0036]表1“李氏膈食散”(實施例1的配方)水提物對肝癌細胞IfepG-2的抑制作用(X土S，n=3)
【權利要求】
1.一種抗腫瘤藥物，其特征在于，由如下重量比的各成分組成，為阿魏:蟾蜍:馬寶:白花蛇舌草=30:30:50:150。
2.權利要求1的抗腫瘤藥物的制備方法，其特征在于，稱取權利要求1中的各成分、將各成分粉碎、過篩、混勻即可。
3.權利要求2所述抗腫瘤藥物的制備方法，其特征在于，所述過篩所得抗腫瘤藥物各成分的直徑為300-800目。
4.權利要求1所述抗腫瘤藥物用于抗腫瘤的用途。
5.權利要求4所述抗腫瘤藥物用于抗腫瘤的用途，其特征在于，所述腫瘤為肝癌、胃癌、食道癌。
6.權利要求4所述抗腫瘤藥物用于抗腫瘤的用途，其特征在于，包括將所述抗腫瘤藥物用水或者黃酒送服的步驟`。
【文檔編號】A61K36/748GK103655822SQ201310711596
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年12月20日 優先權日:2013年12月20日
【發明者】李徐欽 申請人:李徐欽, 馬丹霞