一種載藥納米微囊、制備方法和應用的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種載藥納米微囊、制備方法和應用，所述載藥納米微囊包括載體和負載在載體上的藥物，其中，所述藥物為脂溶性藥物，所述載體為聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物。聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物在水溶液中呈現納米囊結構，載藥納米囊粒徑在20～1000nm之間。本發明提供的載藥納米微囊可以用于制備抗腫瘤藥物。
【專利說明】—種載藥納米微囊、制備方法和應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種載藥納米微囊、制備方法和應用，具體涉及一種聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物載藥納米微囊、制備方法和應用。
【背景技術】
[0002]腫瘤是嚴重威脅人類健康的一類疾病，目前全球每年的惡性腫瘤新發病例約1000萬。世界衛生組織(WHO)報告預計2020年全世界每年新發病例將達2000萬以上，死亡1200萬。常規的癌癥治療方法有化學療法、放射療法、外科切除手術和生物治療等。抗腫瘤藥物通常對正常組織和細胞具有較強的毒副作用。因此，將藥物遞送到腫瘤部位并緩慢釋放出來，減少藥物在正常組織中的分布具有重要意義。設計構建藥物遞送系統已經成為近年來納米醫藥領域的研究熱點，是有希望改變藥物治療效果的途徑之一。
[0003]聚氧乙烯聚氧丙烯醚聚合物是由兩端為親水性聚氧乙烯PEO鏈段和中間疏水聚氧丙烯PPO鏈段 構成的一種兩親性三元嵌段共聚物。由于聚氧乙烯聚氧丙烯醚具有良好的生物相容性、生物可降解性以及無免疫原性等特點，目前已經被美國食品藥物管理局FDA和美國環境保護局EPA認證，可以用來作為食品添加劑和藥物輔料的一種人工合成的聚合物材料，因此，利用它作為藥物載體，在實現藥物的控釋緩釋等生物醫學領域的應用研究受到了學者們越來越多的關注。
[0004]聚氧乙烯聚氧丙烯醚是一種分子量很大的非離子性表面活性劑，因此，同其他小分子量的表面活性劑一樣:它具有一個臨界膠束濃度，當材料濃度大于其臨界膠束濃度后，能夠在溶液中自組裝形成外殼親水、內核疏水的納米膠束；而由納米膠束的疏水性內核構成的空腔結構則為小分子藥物的包埋提供了一個的良好空間微環境。藥物分子通常可以通過疏水相互作用力或者化學鍵的作用進入到納米膠束內核結構中，從而達到提高藥物溶解度的目的。同時，在聚氧乙烯聚氧丙烯醚聚合物構建的兩親性納米給藥系統中，由于納米藥物制劑表面具有的親水性外殼以及具有較小的粒徑，降低了納米材料被體內免疫細胞識別攝取的可能性，從而延長了制劑在體內的循環時間。
[0005]其次，聚氧乙烯聚氧丙烯醚作為藥物載體應用的另一個優勢在于:聚氧乙烯聚氧丙烯醚作為一種溫度敏感性的材料，它存在一個最低臨界臨界溫度LCST，在一定的溫度范圍內具有可逆的溶膠-凝膠相轉變性。當溫度低于最低臨界溶解溫度時，材料溶液能夠以自由流體形式存在，體系粘度小，而隨著溫度逐漸升高至LCST以后，溶液會迅速的發生相變化，從溶膠態轉變為半固態的凝膠形式。因此，利用材料的溶膠-凝膠相轉變性可以實現包埋藥物控制釋放以及局部給藥的效果。
[0006]但是由于聚氧乙烯聚氧丙烯醚的臨界膠束濃度CMC太大，使得它作為藥物載體用于體內應用研究時受到了一定的限制。主要是由于當聚氧乙烯聚氧丙烯醚藥物制劑作用于體內時，經過體液的不斷稀釋循環，聚氧乙烯聚氧丙烯醚納米載體結構就會變得極不穩定，很容易受到破壞而解聚成單體形態，這樣就會使得被包埋在膠束內核結構中的藥物在未達到腫瘤組織前就提前釋放出來，并經過腎被排出體外，使得藥物的生物利用度降低；同時提前釋放出來的抗癌藥還有可能會對人的正常組織細胞造成傷害，這就限制了其在臨床上的應用。因此，為了克服聚氧乙烯聚氧丙烯醚臨界膠束濃度大的這個缺點以提高其在溶液中的穩定性，通常采用的方法是對聚氧乙烯聚氧丙烯醚的端羥基活性基團進行化學改性，如殼交聯改性等。接枝改性后的聚氧乙烯聚氧丙烯醚，一方面不僅能夠提高材料在稀釋溶液環境中的穩定性，而且在引入了新的官能團后有可能會使得聚合物具有更優良的性能特征。
[0007]蟾毒靈(Bufalin)是一種從中藥蟾酥中提取出的單體，因其廣譜的抗腫瘤作用及來源于天然藥物的優勢受到相關研究者的廣泛關注。蟾毒靈可以通過誘導腫瘤細胞凋亡，抑制細胞增殖，抑制血管生成，誘導細胞分化等方面發揮抗腫瘤的作用。在胃癌細胞株MGC803及人白血病細胞株HL-60中，蟾毒靈升高Bcl-2/Bax比例，引起線粒體膜電位的改變，增加線粒體膜的通透性進而誘導細胞凋亡。蟾毒靈可以抑制肝癌細胞增殖并具有劑量依賴性，與HCC細胞中Na+-K+ -ATP酶的表達水平有關。蟾毒靈對人臍靜脈內皮細胞ECV304的生長有抑制作用，且呈濃度和時間依賴性。雞胚絨毛尿囊膜實驗表明蟾毒靈可顯著抑制血管生成的作用，并呈濃度依賴性。在白血病細胞株K562中，蟾毒靈誘導分化的初級階段WTl蛋白和mRNA表達下調。
[0008]研究發現大、中劑量的蟾毒靈對小鼠原位移植性肝癌有明顯的抗腫瘤效應。但因其毒性較大、難溶于水、代謝快、半衰期短等缺點，限制了其在腫瘤治療中的應用。納米制劑是目前靶向給藥系統中較具開發前景的劑型之一。研究表明，由于腫瘤細胞有較強的吞噬能力以及腫瘤等病變部位的血管內皮細胞縫隙遠大于正常內皮細胞間隙，因此納米粒更容易進入腫瘤內部；同時納米粒緩釋抗腫瘤藥物延長了藥物在腫瘤內的存留時間，因此延長了作用時間，提高了療效。新型的納米載體使用能夠極大地增加了腫瘤細胞內的藥物濃度并避免其對正常細胞的毒性，克服臨床上蟾毒靈的給藥問題。
【發明內容】
[0009]本發明的目的在于提供一種載藥納米微囊及其制備方法和應用。本發明的載藥納米微囊包括載體和負載在載體上的藥物，其特征在于，所述藥物為脂溶性藥物，所述載體是由羧基化的聚氧乙烯聚氧丙烯醚和聚乙烯亞胺聚氧乙烯聚氧丙烯醚和聚乙烯亞胺聚合物縮合而成的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物；所述載藥納米微囊的粒徑為20~lOOOnm。
[0010]所述的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物的分子量范圍為20000-500000 ；優選地,分子量范圍為50000-300000 ;更優選地，分子量范圍為100000-250000
[0011]所述的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物具有式(I)所示結構的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物:
[0012]
【權利要求】
1.一種載藥納米微囊，其包括載體和負載在載體上的藥物，其特征在于，所述藥物為脂溶性藥物，所述載體是由羧基化的聚氧乙烯聚氧丙烯醚和聚乙烯亞胺聚氧乙烯聚氧丙烯醚和聚乙烯亞胺聚合物縮合而成的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物；所述載藥納米微囊的粒徑為20~lOOOnm。
2.如權利要求1所述的藥納米微囊，其特征是所述的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物分子量范圍為20000-500000。
3.如權利要求1所述的藥納米微囊，其特征是所述的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物具有式(I)所示結構的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物:
4.根據權利要求1所述的載藥納米微囊，其特征在于，所述的脂溶性藥物為蟾毒靈。
5.根據權利要求1所述的載藥納米微囊，其特征在于，所述載藥納米微囊的粒徑為30 ~lOOnm。
6.一種制備如權利要求1所述的載藥納米微囊的方法，其特征在于，通過以下步驟(I)~(4)，或者(4)分別獲得: (I)將已經羧基化的聚氧乙烯聚氧丙烯醚溶于有機溶劑和縮合劑混合形成有機相；所述的羧基化的聚氧乙烯聚氧丙烯醚和縮合劑的摩爾比為100:1-1:100 “2)將步驟(1)的有機相倒入溶解含有0.01M-20M聚乙烯亞胺的pH值為3-10的水相中，室溫和50-600W條件下超聲乳化1-20分鐘形成乳液；其中，所述的羧基化的聚氧乙烯聚氧丙烯醚和聚乙烯亞胺的摩爾比為1:0.001~500 ;所述的聚乙烯亞胺分子量為200-30000 ； (3)將步驟(2)的乳液在密封條件和0-40°C溫度范圍下攪拌反應0.5-72小時后，蒸除有機溶劑，透析袋中透析除去縮合劑，凍干得到聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物； 所述的縮合劑是1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽、1-羥基苯并三唑、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N’，N’ -四甲基脲六氟磷酸酯、N，N’ -羰基二咪唑、二環己基碳化二亞胺、4- 二甲氨基吡啶、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷或N-羥基琥珀酰亞胺； (4)將聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物或者步驟(3)獲得的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物和脂溶性藥物加入有機溶劑溶解均勻，再蒸除有機溶劑形成一層藥膜骨架薄膜；加入1_90°C的水，振蕩I~30分鐘，100-5000rpm低速離心0.01-6小時除去未包載進聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物納米微囊內核的游離藥物，收集上清液；所述的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物和脂溶性藥物的重量比為500~。0.001:1 ;所述的聚氧乙烯聚氧丙烯醚-聚乙烯亞胺聚合物與水的質量比為1:1~3000。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述有機溶劑選自二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇、乙醇、乙腈或丙酮。
8.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述脂溶性藥物為蟾毒靈。
9.如權利要求6 所述的方法，其特征在于，所述水相pH值為4.5-7。
10.如權利要求6所述的方法，其特征在于，步驟(3)中所述透析袋的分子量范圍為。1000-10000。
11.如權利要求1所述的載藥納米微囊用于制備抗腫瘤藥物。
【文檔編號】A61K9/50GK104027812SQ201410238276
【公開日】2014年9月10日 申請日期:2014年5月30日 優先權日:2014年5月30日
【發明者】胡強, 孫穎, 段友容 申請人:上海市徐匯區大華醫院, 上海市腫瘤研究所