本發(fā)明屬于物質(zhì)提取領(lǐng)域，特別涉及到番石榴活性物質(zhì)的提取。

背景技術(shù)：

番石榴是一種熱帶水果，現(xiàn)廣泛分布和種植于熱帶和亞熱帶地區(qū)，如我國(guó)的海南、廣東、廣西、臺(tái)灣、云南、貴州、四川等。番石榴營(yíng)養(yǎng)豐富，其中豐富的維生素C對(duì)治療糖尿病具有很好地藥效。此外，還可減少產(chǎn)生普通感冒病、牙齦發(fā)腫、高血壓癥、肥胖癥、糖尿病及癌癥的風(fēng)險(xiǎn)。番石榴既可做新鮮水果生吃也可煮食，煮過的番石榴可以制作成果醬、果凍、酸辣醬等各種醬料。在制作各種醬汁、水果沙拉、派、布丁、冰激凌、優(yōu)格以及某些飲品的時(shí)候加入番石榴也能增加風(fēng)味。

番石榴不僅在食用上具有很高的價(jià)值，而且在藥用方面價(jià)值也非常高。目前，對(duì)番石榴藥用成分的研究主要集中于番石榴的葉：用水提法提取番石榴葉揮發(fā)油的成分及葉芳香氣味的成分，有51種成分被檢測(cè)到，其中包括多種重要的芳香類二級(jí)代謝產(chǎn)物，如多酚化合物。許多研究報(bào)道番石榴葉有很強(qiáng)的抗氧化能力，能延緩生物體的過氧化進(jìn)程，預(yù)防癌癥、心臟病等慢性疾病。此外，番石榴種仁提取油中不飽和脂肪酸的含量較高，大約88%，其中80%是亞麻酸。還發(fā)現(xiàn)番石榴種子中含有10種酚及類黃酮化合物，其中包括一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的酞基黃酮醇配糖，并確定了其化學(xué)結(jié)構(gòu)。但是，由于提取工藝的限制，關(guān)于番石榴果皮的化學(xué)成分的研究比較少見。

本發(fā)明提供了一種番石榴活性物質(zhì)的提取工藝，該提取方法簡(jiǎn)便、快捷，適用于大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)，并能夠最大程度地保持番石榴果皮中化學(xué)成分的活性，具有突破性的進(jìn)展。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種簡(jiǎn)便，快捷的番石榴活性物質(zhì)的提取工藝。

本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

一種番石榴活性物質(zhì)的提取工藝，其包括以下步驟：

1）取番石榴果皮，加入提取液，充分混勻；

2）20～80℃超聲水浴處理，離心收集上清液；

3）上清液蒸干，即得番石榴活性物質(zhì)。

作為優(yōu)選的，所述超聲水浴溫度50～70℃。

作為優(yōu)選的：所述提取液含有水溶性有機(jī)溶劑。

進(jìn)一步優(yōu)選的：所述有機(jī)溶劑包括甲醇、乙醇、正丁醇中的至少一種。

作為優(yōu)選的：所述果皮與提取液的料液比為1:4～1:20（w/v）。

進(jìn)一步優(yōu)選的：所述果皮與提取液的料液比為1:4～1:10（w/v）。

作為優(yōu)選的，超聲處理的功率為100～800 W，處理時(shí)間為10～60 min。

進(jìn)一步優(yōu)選的，超聲處理的功率為100～600W，處理時(shí)間為20～30min。

作為優(yōu)選的，離心條件為：4000～4500g，離心15～30 min。

進(jìn)一步優(yōu)選的，離心條件為：4200g，離心20min。

進(jìn)一步優(yōu)選的：步驟1）番石榴果皮與提取液混勻后，置于4～-20℃下低溫處理12～48小時(shí)，恢復(fù)至室溫，再充分混勻。

進(jìn)一步優(yōu)選的：步驟1）番石榴果皮與提取液混勻后，置于4～-10℃下低溫處理12～24小時(shí)，恢復(fù)至室溫，再充分混勻。

以上所述的提取工藝提取得到的番石榴活性物質(zhì)在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

以上所述的提取工藝提取得到的番石榴活性物質(zhì)在制備抗氧化制劑中的應(yīng)用。

以上所述的提取工藝提取得到的番石榴活性物質(zhì)在制備抗菌制劑中的應(yīng)用。

本提取方法簡(jiǎn)便、快捷，適用于大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)，并能夠最大程度地保持番石榴果皮中化學(xué)成分的活性，具有突破性的進(jìn)展。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅰ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入2.00mL提取液，提取液為20%（v/v）乙醇水溶液。在50℃條件下超聲30min，超聲頻率為：380w。超聲后， 4200 g離心20 min，收集上清液。將上清液在4℃條件下蒸干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：34 mg。

實(shí)施例2、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅱ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入5.00mL提取液，提取液為70%（v/v）乙醇水溶液。在70℃條件下超聲20min，超聲頻率為：380w。超聲后， 4200 g離心20 min，收集上清液。將上清液用4℃條件下蒸干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：46 mg。

實(shí)施例3、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅲ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入5.00mL提取液，提取液為55%（v/v）乙醇水溶液。在70℃條件下超聲20min，超聲頻率為： 380w。超聲后，4200 g離心20 min，收集上清液。將上清液在4℃條件下蒸干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：38 mg。

實(shí)施例4、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅳ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入2.50mL提取液，提取液為55%（v/v）乙醇水溶液。在70℃條件下超聲20min，超聲頻率為：380w。超聲后，4200 g離心20 min，收集上清液。將上清液在4℃條件下蒸干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：36 mg。

實(shí)施例5、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅴ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入2.50mL提取液，提取液為55%（v/v）乙醇水溶液。在70℃條件下超聲20min，超聲頻率為： 380w。 超聲后， 4℃低溫處理12h，4200 g離心20 min，收集上清液。將上清液在4℃條件下蒸干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：44 mg。

實(shí)施例6、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅵ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入2.50mL提取液，提取液為55%（v/v）乙醇水溶液。在70℃條件下超聲20min，超聲頻率為： 380w。 超聲后，0℃低溫處理12h，4200 g離心20 min，收集上清液。將上清液在4℃條件下蒸干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：55 mg。

實(shí)施例7、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅶ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入5.00mL提取液，提取液為60%（v/v）甲醇水溶液。在70℃條件下超聲30min，超聲頻率為：100w。 超聲后，0℃低溫處理24h，4200 g離心20 min，收集上清液。將上清液在4℃條件下蒸干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：50 mg。

實(shí)施例8、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅷ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入5.00mL提取液，提取液為60%（v/v）甲醇水溶液。在50℃條件下超聲30min，超聲頻率為： 600w。 超聲后，-10℃低溫處理24h，4200 g離心20 min，收集上清液。將上清液在4℃條件下蒸干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：45 mg。

實(shí)施例9、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅸ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入4.00mL提取液，提取液為55%（v/v）乙醇:55%甲醇=1:1的水溶液。在60℃條件下超聲30min，超聲頻率為：400w。超聲后，0℃低溫處理12h，4200 g離心20 min，收集上清液。將上清液在4℃條件下蒸干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：60mg。

實(shí)施例10、番石榴活性物質(zhì)的提取Ⅹ

準(zhǔn)確稱量0.5g番石榴果皮，加入5.00mL提取液，提取液為70%（v/v）乙醇:70%甲醇=1:1的水溶液。在70℃條件下超聲20min，超聲頻率為：420w。超聲后，0℃低溫處理12h，4200 g離心20min，收集上清液。將上清液在4℃條件下烘干，稱量得到的活性物質(zhì)的質(zhì)量為：62mg。

實(shí)施例11、番石榴活性物質(zhì)的抗菌效果

各取實(shí)施例1～10中制備得到的番石榴活性物質(zhì)10mg，分別檢測(cè)番石榴活性物質(zhì)對(duì)大腸桿菌、乙型副傷寒沙門氏菌、蠟樣芽胞桿菌、金黃色葡萄球菌等四種細(xì)菌的抗菌效果。具體檢測(cè)方法如下：根據(jù)微肉湯稀釋法，在96微孔板中加入事先制備好的菌懸液、MH肉湯、樣品，使得每個(gè)孔內(nèi)的菌液濃度相同，生長(zhǎng)對(duì)照由去離子水、MH肉湯和菌懸液組成。之后，將96微孔板放在混勻器上混勻。放入酶標(biāo)儀，在630nm條件下讀取培養(yǎng)前吸光度。然后，將其放入37℃恒溫箱中培養(yǎng)21個(gè)小時(shí)。最后，讀取培養(yǎng)后的吸光度（630nm）。通過吸光度改變值計(jì)算抑菌率。到結(jié)果如表1所示：

表1 番石榴活性物質(zhì)的抗菌效果（%）

實(shí)施例12、番石榴活性物質(zhì)的抗癌效果

各取實(shí)施例1~10中制備得到的番石榴活性物質(zhì)10mg，采用MTT法分別檢測(cè)番石榴活性物質(zhì)對(duì)A549肺癌細(xì)胞、HepG2肝癌細(xì)胞、MCF-7乳腺癌細(xì)胞和HT-29大腸癌細(xì)胞等四種癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。所到結(jié)果如表2所示：

表2 番石榴活性物質(zhì)的抗癌效果（*100%）

實(shí)施例13、番石榴活性物質(zhì)的抗氧化效果

各取實(shí)施例1~10中制備得到的番石榴活性物質(zhì)10 mg，采用ABTS自由基清除能力測(cè)定法測(cè)定提取的番石榴活性物質(zhì)的抗氧化效果，得到結(jié)果如表3所示：

表3 番石榴活性物質(zhì)的抗氧化效果（μmol Trolox/g）

以上實(shí)施例僅為介紹本發(fā)明的優(yōu)選案例，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，在不背離本發(fā)明精神的范圍內(nèi)所進(jìn)行的任何顯而易見的變化和改進(jìn)，都應(yīng)被視為本發(fā)明的一部分。