本發明屬于藥物制劑領域，具體地說，涉及一種黃精多糖顆粒劑及其制備方法。
背景技術：
：黃精為百合科植物滇黃精(PolygonatumkingianumColl.etHemsl.)、黃精(PolygonatumsibiricumRed.)或多花黃精(PolygonatumcyrtonemaHua)的干燥根莖。按形狀不同，習稱“大黃精”、“雞頭黃精”、“姜形黃精”。黃精是我國傳統中藥，屬于藥食同源性中草藥，味甘，性平，具有補氣養陰、健脾、潤肺、益腎的功效。多糖又稱多聚糖(Polysaccharide)是由單糖所合成的多聚物，是廣泛分布于自然界中，是一類重要的活性物質。黃精多糖是從黃精根莖中提取出來的具有多種生物活性且結構復雜的植物多糖。不同種類的黃精中多糖的組成存在著差異。通過對九華山多花黃精多糖的分級提取及化學結構的研究，發現黃精多糖為雜多糖，其相對分子質量為8912，組成為果糖：葡萄糖＝8.7:1。張曉紅(張曉紅,博·格日勒圖,昭日格圖,娜日蘇.高效液相色譜法對黃精多糖相對分子質量及組成的測定[J].色譜,2005,04:394-396.)等通過對內蒙古野生黃精根莖中黃精多糖的研究發現，黃精多糖的平均相對分子質量為7073，相對分子質量為7247，分散系數為1.025。黃精多糖由單一的果糖組成。而吳群絨(吳群絨,胡盛,楊光忠,梅之南.滇黃精多糖I的分離純化及結構研究[J].林產化學與工業,2005,02:80-82.)等首次從滇黃精中提取分離出一種新多糖。通過以上可知多花黃精、黃精、滇黃精3個品種所含的多糖的組成存在顯著差異。并且黃精多糖的組成也與其他多糖存在差異(徐兵兵,于勇杰,吳帆,倪穗.黃精多糖研究綜述[J].中國野生植物資源,2015,04:38-41+46.)。據報道，黃精含有多糖、皂苷、蒽醌類化合物、生物堿、強心苷、維生素等活性成分，能夠延緩衰老、增強免疫功能、降血糖、降血脂、抗炎、抗菌、抗病毒及抗腫瘤等。目前市場上黃精多以飲片入藥，有效濃度低，使用體積大，效果不理想；現有的黃精多糖制備而成的顆粒劑存在吸濕性強，流動性一般的問題。技術實現要素：有鑒于此，本發明針對上述的問題，提供了一種黃精多糖顆粒劑及其制備方法，制備得到的黃精多糖顆粒劑克服了吸濕性強，流動性一般的問題，具有增強黃雞機體免疫機能的作用。為了解決上述技術問題，本發明公開了一種黃精多糖顆粒劑，按照質量份包括以下組分：黃精多糖25份-35份、乳糖15份-25份、甘露醇5份-15份。進一步地，該黃精多糖顆粒劑作為添加劑加入雞只日糧飼料時的添加量為雞只日糧飼料質量總量的0.2％-0.40％。進一步地，黃精多糖通過以下方法制備得到：1.1)藥材預處理：將新鮮黃精清洗干凈，除去霉變部分，上鍋蒸10-30min，取出切片后置于55-65℃烘箱烘干至衡重，于密封袋中保存，備用；1.2)浸泡與煎煮：取干燥后的黃精，置于煎藥機中，按照料液比為1:30加入蒸餾水，浸泡時間為2-3h；煎煮2次，第一次煎煮1-2h，過濾收集濾液后，藥渣進行第二次煎煮，煎煮1.5-2.5h后過濾并收集提取液；1.3)將煎煮得到的濾液用紗布和藥用棉過濾后再用布氏漏斗抽濾后于旋轉蒸發儀濃縮，利用sveage法除蛋白，透析除去小分子雜質；將透析后的多糖溶液繼續使用旋轉蒸發儀濃縮至相對濃度6g/mL，加入無水乙醇，不斷攪拌，至乙醇濃度達到體積分數為75％，于4℃冰箱靜置20-28h，抽濾取濾渣，于35-45℃減壓干燥機干至恒重，研細過60目篩，于密封袋中保存，制備得到黃精多糖。進一步地，利用sveage法除蛋白，透析除去小分子雜質具體為：按照氯仿—正丁醇以體積比4∶1配制而成sveage溶液，然后取濃縮后的濾液與sveage溶液按照4:1比例混合，置于分液漏斗中，充分振搖25-35min后，然后將水相與氯仿相分開；將水相再加入相當于其體積1/4的sveage溶液，重復上述過程，共計重復4次，最后得到除掉大部分蛋白的多糖溶液備用，然后以孔徑為3500Da的透析袋在流水中進行透析12h后除去小分子雜質。本發明還公開了一種黃精多糖顆粒劑的制備方法，包括以下步驟：1)制備黃精多糖；2)稱量：按照質量份稱量以下組分：黃精多糖25份-35份、乳糖15份-25份、甘露醇5份-15份；3)步驟3、制粒：將稱量好的黃精多糖、乳糖、甘露醇混合均勻，加入潤濕劑制軟材進行制粒，過12目篩；4)干燥：將制粒后的黃精多糖烘干，取10-60目篩的顆粒，即為黃精多糖顆粒劑。進一步地，步驟1)中的制備黃精多糖具體為：1.1)藥材預處理：將新鮮黃精清洗干凈，除去霉變部分，上鍋蒸10-30min，取出切片后置于55-65℃烘箱烘干至衡重，于密封袋中保存，備用；1.2)浸泡與煎煮：取干燥后的黃精，置于煎藥機中，按照料液比為1:30加入蒸餾水，浸泡時間為2-3h；煎煮2次，第一次煎煮1-2h，過濾收集濾液后，藥渣進行第二次煎煮，煎煮1.5-2.5h后過濾并收集提取液；1.3)將煎煮得到的濾液用紗布和藥用棉過濾后再用布氏漏斗抽濾后于旋轉蒸發儀濃縮，利用sveage法除蛋白，透析除去小分子雜質；將透析后的多糖溶液繼續使用旋轉蒸發儀濃縮至相對濃度6g/mL，加入無水乙醇，不斷攪拌，至乙醇濃度達到體積分數為75％，于4℃冰箱靜置20-28h，抽濾取濾渣，于35-45℃減壓干燥機干至恒重，研細過60目篩，于密封袋中保存，制備得到黃精多糖。進一步地，利用sveage法除蛋白，透析除去小分子雜質具體為：按照氯仿—正丁醇以體積比4∶1配制而成sveage溶液，然后取濃縮后的濾液與sveage溶液按照4:1比例混合，置于分液漏斗中，充分振搖25-35min后，然后將水相與氯仿相分開；將水相再加入相當于其體積1/4的sveage溶液，重復上述過程，共計重復4次，最后得到除掉大部分蛋白的多糖溶液備用，然后以孔徑為3500Da的透析袋在流水中進行透析12h后除去小分子雜質。進一步地，步驟3)中潤濕劑為體積分數為70％-80％的乙醇，潤濕劑的用量與黃精多糖、乳糖、甘露醇總質量體積質量比(mL/g)為45：100-55:100。進一步地，步驟4)中烘干溫度為55-65℃，黃精多糖顆粒劑的目數為10-60目。與現有技術相比，本發明可以獲得包括以下技術效果：1)由黃精多糖粉末考察可知，主藥黃精多糖吸濕性較大，而輔料蔗糖、糊精、可溶性淀粉、乳糖、甘露醇均不同程度降低了主要黃精多糖的吸濕性，其中乳糖、甘露醇效果最好，單用乳糖或甘露醇制粒，顆粒圓整度不好，故選用乳糖和甘露醇兩種輔料混合制粒，并以吸濕率和成型率作為考察指標。由于潤濕劑乙醇用量及乙醇濃度對顆粒的品質也有較大影響，根據篩選的最佳方案進行驗證性試驗，制備出三批顆粒并對其進行考察。結果制備的顆粒水分、粒度、溶化性等均符合2015版藥典顆粒劑項下相關規定。2)黃精多糖具有多種藥理作用，例如增強免疫力，促進脾臟胸腺的發育；抗衰老，可用于動物保健；除此之外，還有抗骨質疏松的作用，對于老年動物保健意義重大。3)本顆粒劑的制備及篩選的新穎之處在于將具有多種功效的中藥材黃精提取后制成顆粒劑供寵物免疫力提升以及保健作用，為工業化生產提供依據及參考。當然，實施本發明的任一產品并不一定需要同時達到以上所述的所有技術效果。附圖說明此處所說明的附圖用來提供對本發明的進一步理解，構成本發明的一部分，本發明的示意性實施例及其說明用于解釋本發明，并不構成對本發明的不當限定。在附圖中：圖1是本發明黃精多糖顆粒劑的吸濕曲線。具體實施方式以下將配合實施例來詳細說明本發明的實施方式，藉此對本發明如何應用技術手段來解決技術問題并達成技術功效的實現過程能充分理解并據以實施。本發明公開了一種黃精多糖顆粒劑，按照質量份包括以下組分：黃精多糖25份-35份、乳糖15份-25份、甘露醇5份-15份。本發明還公開了一種黃精多糖顆粒劑的制備方法，包括以下步驟：步驟1、制備黃精多糖：步驟1.1、藥材預處理：將新鮮黃精清洗干凈，除去霉變部分，上鍋蒸10-30min，取出切片后置于55-65℃烘箱烘干至衡重，于密封袋中保存，備用；步驟1.2、浸泡與煎煮：取干燥后的黃精，置于煎藥機中，按照料液比為1:30加入蒸餾水，浸泡時間為2-3h；煎煮2次，第一次煎煮1-2h，過濾收集濾液后，藥渣進行第二次煎煮，煎煮1.5-2.5h后過濾并收集提取液；步驟1.3、將煎煮得到的濾液用紗布和藥用棉過濾后再用用布氏漏斗抽濾后于旋轉蒸發儀濃縮，利用sveage法除蛋白(按照氯仿—正丁醇以體積比4∶1配制而成sveage溶液)，然后取濃縮后的濾液與sveage溶液按照4:1比例混合，置于分液漏斗中，充分振搖25-35min后，然后將水相與氯仿相分開。將水相再加入相當于其體積1/4的sveage溶液，重復上述過程，共計重復4次，最后得到除掉大部分蛋白的多糖溶液備用，然后以孔徑為3500Da(道爾頓)的透析袋在流水中進行透析12h后除去小分子雜質；將透析后的多糖溶液繼續使用旋轉蒸發儀濃縮至相對濃度6g/mL(相當于1mL溶液中含有原藥材6g)，加入無水乙醇，不斷攪拌，至乙醇濃度達到75％(體積分數)，于4℃冰箱靜置24-28h，抽濾取濾渣，于35-45℃減壓干燥機干至恒重，研細過60目篩，于密封袋中保存；步驟2、稱量：按照質量份稱量以下組分：黃精多糖25份-35份、乳糖15份-25份、甘露醇5份-15份；步驟3、制粒：將稱量好的黃精多糖、乳糖、甘露醇混合均勻，加入體積分數為70％-80％的乙醇作為潤濕劑制軟材進行制粒，潤濕劑的用量與黃精多糖、乳糖、甘露醇總質量體積質量比(mL/g)為45：100-55:100，過12目篩；步驟4、干燥：55-65℃烘干，取10-60目篩的顆粒，即為黃精多糖顆粒劑。實施例1一種黃精多糖顆粒劑的制備方法，包括以下步驟：將新鮮黃精清洗干凈，除去霉變部分，上鍋蒸30min，取出切片后置于60℃烘箱烘干至衡重，于密封袋中保存，備用；取干燥后的黃精，置于煎藥機中，按照料液比為1:30加入蒸餾水，浸泡時間為2h；煎煮2次，第一次煎煮1.5h，過濾收集濾液后，藥渣進行第二次煎煮，煎煮2h后過濾并收集提取液；將煎煮得到的濾液用紗布和藥用棉過濾后再用用布氏漏斗抽濾后于旋轉蒸發儀濃縮，利用sveage法除蛋白(按照氯仿—正丁醇以體積比4∶1配制而成sveage溶液)，然后取濃縮后的濾液與sveage溶液按照4:1比例混合，置于分液漏斗中，充分振搖30min后，然后將水相與氯仿相分開。將水相再加入相當于其體積1/4的sveage溶液，重復上述過程，共計重復4次，最后得到除掉大部分蛋白的多糖溶液備用，然后以孔徑為3500Da(道爾頓)的透析袋在流水中進行透析12h后除去小分子雜質；將透析后的多糖溶液繼續使用旋轉蒸發儀濃縮至相對濃度6g/mL(相當于1mL溶液中含有原藥材6g)，加入無水乙醇，不斷攪拌，至乙醇濃度達到75％(體積分數)，于4℃冰箱靜置24h，抽濾取濾渣，于40℃減壓干燥機干至恒重，研細過60目篩，于密封袋中保存；按照質量份稱量以下組分：黃精多糖30份、乳糖20份、甘露醇10份；將稱量好的黃精多糖、乳糖、甘露醇混合均勻，加入體積分數為80％的乙醇作為潤濕劑制軟材進行制粒，潤濕劑的用量與黃精多糖、乳糖、甘露醇總質量體積質量比(mL/g)為55:100，過12目篩；60℃烘干，取35目篩的顆粒，即為黃精多糖顆粒劑。實施例2一種黃精多糖顆粒劑的制備方法，包括以下步驟：將新鮮黃精清洗干凈，除去霉變部分，上鍋蒸10min，取出切片后置于55℃烘箱烘干至衡重，于密封袋中保存，備用；取干燥后的黃精，置于煎藥機中，按照料液比為1:30加入蒸餾水，浸泡時間為2h；煎煮2次，第一次煎煮2h，過濾收集濾液后，藥渣進行第二次煎煮，煎煮1.5h后過濾并收集提取液；將煎煮得到的濾液用紗布和藥用棉過濾后再用用布氏漏斗抽濾后于旋轉蒸發儀濃縮，利用sveage法除蛋白(按照氯仿—正丁醇以體積比4∶1配制而成sveage溶液)，然后取濃縮后的濾液與sveage溶液按照4:1比例混合，置于分液漏斗中，充分振搖25min后，然后將水相與氯仿相分開。將水相再加入相當于其體積1/4的sveage溶液，重復上述過程，共計重復4次，最后得到除掉大部分蛋白的多糖溶液備用，然后以孔徑為3500Da(道爾頓)的透析袋在流水中進行透析12h后除去小分子雜質；將透析后的多糖溶液繼續使用旋轉蒸發儀濃縮至相對濃度6g/mL(相當于1mL溶液中含有原藥材6g)，加入無水乙醇，不斷攪拌，至乙醇濃度達到75％(體積分數)，于4℃冰箱靜置26h，抽濾取濾渣，于45℃減壓干燥機干至恒重，研細過60目篩，于密封袋中保存；按照質量份稱量以下組分：黃精多糖25份、乳糖15份、甘露醇15份；將稱量好的黃精多糖、乳糖、甘露醇混合均勻，加入體積分數為70％的乙醇作為潤濕劑制軟材進行制粒，潤濕劑的用量與黃精多糖、乳糖、甘露醇總質量體積質量比(mL/g)為45：100，過12目篩；55℃烘干，取10目篩的顆粒，即為黃精多糖顆粒劑。實施例3一種黃精多糖顆粒劑的制備方法，包括以下步驟：將新鮮黃精清洗干凈，除去霉變部分，上鍋蒸20min，取出切片后置于65℃烘箱烘干至衡重，于密封袋中保存，備用；取干燥后的黃精，置于煎藥機中，按照料液比為1:30加入蒸餾水，浸泡時間為3h；煎煮2次，第一次煎煮1h，過濾收集濾液后，藥渣進行第二次煎煮，煎煮2.5h后過濾并收集提取液；將煎煮得到的濾液用紗布和藥用棉過濾后再用用布氏漏斗抽濾后于旋轉蒸發儀濃縮，利用sveage法除蛋白(按照氯仿—正丁醇以體積比4∶1配制而成sveage溶液)，然后取濃縮后的濾液與sveage溶液按照4:1比例混合，置于分液漏斗中，充分振搖35min后，然后將水相與氯仿相分開。將水相再加入相當于其體積1/4的sveage溶液，重復上述過程，共計重復4次，最后得到除掉大部分蛋白的多糖溶液備用，然后以孔徑為3500Da(道爾頓)的透析袋在流水中進行透析12h后除去小分子雜質；將透析后的多糖溶液繼續使用旋轉蒸發儀濃縮至相對濃度6g/mL(相當于1mL溶液中含有原藥材6g)，加入無水乙醇，不斷攪拌，至乙醇濃度達到75％(體積分數)，于4℃冰箱靜置28h，抽濾取濾渣，于35℃減壓干燥機干至恒重，研細過60目篩，于密封袋中保存；按照質量份稱量以下組分：黃精多糖35份、乳糖25份、甘露醇5份；將稱量好的黃精多糖、乳糖、甘露醇混合均勻，加入體積分數為75％的乙醇作為潤濕劑制軟材進行制粒，潤濕劑的用量與黃精多糖、乳糖、甘露醇總質量體積質量比(mL/g)為50:100，過12目篩；65℃烘干，取60目篩的顆粒，即為黃精多糖顆粒劑。下面結合具體的效果實驗進行進一步說明：一)黃精多糖的鑒別及含量測定、性狀考察：采用實施例1制備黃精多糖顆粒劑。1黃精多糖的鑒別及含量測定1.1多糖粉末的鑒別精密稱定黃精多糖粉末0.6g，加蒸餾水適量溶解，制得樣品溶液。(1)取樣品液1ml于試管中，加入α-萘酚試液數滴，搖勻，沿試管壁滴加濃硫酸，兩液的交界面顯紫紅色。(2)取樣品液1ml于試管中，加入5％鹽酸溶液0.5ml，沸水浴中加熱10min，用10％氫氧化鈉溶液中和至中性，再加入新配制的斐林試劑3滴，另取同量樣品，不加酸水解，直接加斐林試劑3滴。兩管同時置沸水浴中煮沸10min，取兩管對照，水解者產生紅色沉淀，呈正反應，不水解者為負反應。以上試驗結果表明，樣品確實為多糖成分。1.2黃精多糖含量測定利用苯酚-硫酸法測定黃精總糖含量，DNS法測定還原糖的含量，樣品測定試驗平行重復三次，計算平均值，得出純化后黃精多糖含量為：78.63％。2黃精多糖粉末性狀考察2.1吸濕率的測定精密稱定多糖粉末0.2g三份置于恒重敞口稱量瓶中，干燥至恒重后精密稱取重量，置氯化鈉飽和溶液(RH＝75％)密閉干燥器中，室溫放置24h后取出精密稱重，計算吸濕率分別為9.64％、9.63％、9.67％，平均吸濕率為9.64％。說明黃精多糖粉末的吸濕性較強，在制作顆粒時應選擇吸濕性小的輔料。吸濕率(％)＝(吸濕后重量－吸濕前重量)/吸濕前重量×100％2.2溶解性稱取黃精多糖粉末5g置于燒杯中，加入70℃蒸餾水200mL，攪拌5min，粉末完全溶解，符合相關規定。2.3休止角采用固定漏斗法測定3次多糖粉末休止角，測定結果平均休止角為tanθ＝0.70，角度大于30度，說明多糖粉末流動性一般。二)黃精多糖顆粒劑的制備及質量評價1黃精多糖顆粒劑的制備1.1輔料種類的篩選選用蔗糖、乳糖、甘露醇、可溶性淀粉、糊精五種輔料進行篩選。取各類別輔料以原料：輔料＝1：1、1:1.5、1:2混勻，加入70％的乙醇作為潤濕劑制軟材，過12目篩，60℃烘干，取能通過10目篩，不能通過60目篩的顆粒進行觀察，得出以下結果：表1：不同輔料以不同配比所制顆粒外觀觀察優：有較完整均一的顆粒，粉末＜10％；良：基本能成型，粉末在40～60％之間；差：不能成型，粉末＞80％。由表1可見，最佳原輔料配比為1:1，取1:1項下五種輔料制成的顆粒進行吸濕率測定。將五種顆粒精密稱定0.4g置于飽和氯化鈉(RH＝75％)的干燥器中于24h后稱定重量，結果見表2。表2：原輔料比＝1:1所制顆粒吸濕率考察吸濕率(％)＝(吸濕后重量一吸濕前重量)/吸濕前重量×100％由表1表2數據可知，應以原輔料比＝1:1，選用輔料乳糖、甘露醇進行輔料配比的考察。1.2原輔料配比的選擇觀察乳糖組和甘露醇組的顆?？芍詥我惠o料制得得顆粒圓整度不好，考慮以乳糖甘露醇混合輔料制粒。甘露醇的比例不宜多大，所以考慮以乳糖：甘露醇＝1:1、2:1、3:1三個比例制粒，同時以成型率與吸濕率作為評價指標，選出最優配比組合。結果見表3：表3：不同輔料配比顆粒成型率及吸濕率的考察吸濕率(％)＝(吸濕后重量一吸濕前重量)/吸濕前重量×100％成型率(％)＝(能過通過10目篩不能通過60目篩的顆粒質量/顆?？傎|量)×100％結合表3綜合考慮選用原料：乳糖：甘露醇＝1:2/3:1/3制粒。1.3乙醇濃度的選擇按上述優選的最優輔料和配比稱取4份，混合均勻，噴入不同濃度的乙醇制粒，干燥后分別測定成型率并考察使用乙醇用量，結果見表4：表4：不同乙醇濃度所制顆粒成型率考察有上述數據可得，在原輔料配比＝1:2/3:1/3時選用80％乙醇制粒為最優。1.4乙醇用量比的選擇以80％乙醇為潤濕劑，分別加入不同體積量的乙醇制粒，考察成型率，方法同一)中2.3項，結果見表5：表5：不同乙醇用量所制顆粒成型性考察從上表可得知乙醇用量比在55％時成型率高，即以體積濃度80％的乙醇，加入55％的量時制出的顆粒成型率最高。1.5驗證性實驗按優選處方及成型工藝制粒，重復三次實驗，成型率分別為96.21％、96.58％、96.15％，成型穩定，均符合《中國藥典》(2015版)附錄顆粒劑項下相關規定。因此確定最佳制備工藝為原料：乳糖：甘露醇＝1:2/3:1/3，加入80％乙醇，用量為原輔料總重的55％。2黃精多糖顆粒劑的質量評價2.1粒度、水分、溶化性、休止角的考察2.1.1粒度取制備的顆粒20g，至于1號篩中，下層放置5號篩，保持水平狀態過篩，左右往返，邊篩動邊拍打3分鐘。取不能通過1號篩和能通過5號篩的顆粒及粉末，稱定重量，計算其所占比例(％)為7％，符合不能超過15％的規定。2.1.2水分取黃精多糖顆粒適量，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過2mm，精密稱定，開啟瓶蓋在烘箱中干燥5h，蓋好蓋子，移至干燥器中，放冷30min，再按上述步驟干燥1h，放冷，稱重，至連續兩次稱重差異不超過5mg為止。根據減失的重量，計算供試品中含水量(％)。根據上述步驟得出，黃精多糖顆粒的含水量為1.59％。含水量＝減失重量/供試品初始重量×100％2.1.3溶化性取供試品5g，加70℃左右熱水100mL，攪拌5min，立即觀察，可溶性顆粒全部溶化，符合藥典規定。2.1.4休止角方法同一)中2.3項，數據見表6，測得黃精多糖顆粒的平均休止角為37.26°。表6：黃精多糖顆粒休止角測定(n＝3)tanθ＝2h/d2.1.5吸濕率及臨界相對濕度考察平行稱定3份干燥至恒定質量的顆粒0.2g，精密稱量后分別放于敞口的稱量瓶中，置于一系列相對濕度不同的干燥器中，48h后稱定質量，求出各吸濕率平均值及各點標準差，以相對濕度為橫坐標，顆粒劑吸濕率平均值(％)為縱坐標，得出吸濕曲線如下圖，并對曲線兩端的切點做切線，相交處對應的橫坐標即為臨界相對濕度，計算后結果為，見表7：表7：黃精多糖顆粒在不同RH中的吸濕率(n＝3)吸濕率(％)＝(吸濕后重量一吸濕前重量)/吸濕前重量×100％以相對濕度/％為橫坐標，顆粒劑吸濕率平均值/％為縱坐標，得出吸濕曲線如下圖，并對曲線兩端的切點做切線，相交處對應的橫坐標即為臨界相對濕度，計算后結果為76％，見圖1。三)黃精多糖顆粒劑對彭縣黃雞生產性能、孵化率、免疫抗體效價的影響1材料與方法1.1試驗動物與分組試驗雞由彭州彭縣黃雞保種基地提供，選用320羽30周齡的彭縣黃雞母雞，隨機分為4組，每組4個重復，每個重復20只雞。分別添加不同水平黃精多糖顆粒，第Ⅰ組設為對照組，喂以基礎日糧；第Ⅱ組添加黃精多糖顆粒水平為0.1％；第Ⅲ組添加0.20％的黃精多糖顆粒；第Ⅳ組添加0.4％的黃精多糖顆粒，一共飼喂5周?；A日糧配方與營養成分見表8。表8營養成分1.2飼養管理雞舍為全封閉式飼養管理，每天定量飼喂(120g)，自由飲水，其他方面按照常規標準飼養管理。每天分組記錄產蛋數、蛋重、耗料量和死淘雞數，其他情況隨時發現隨時記錄。1.3測定指標、樣品采集與方法1.3.1生產性能相關指標：以重復為單位每天記錄產蛋數、蛋重，用以計算產蛋率、平均蛋重指標。試驗的第5周開始收集種蛋，連續收集5d，進行孵化試驗，期間記錄種蛋入孵數、受精蛋數、死胚胎數、健苗數，用以計算受精率、受精蛋孵化率和入孵蛋孵化率。1.3.2免疫功能相關指標：在試驗的1周結束時進行新城疫活苗的飲水和滅活苗H9型流感的注射免疫，試驗的第5周分別從每組隨機抽取16只雞(每重復4只)采血進行新城疫、H9型禽流感抗體滴度的檢測，采用血凝抑制法。1.4數據統計與分析試驗數據采用SPSS19.0軟件中的ANOVA過程進行單因素方差分析，結果以平均數加減方差表示，以P<0.05作為差異顯著判斷標準，結果以平均值±標準差表示。2結果2.1不同水平黃精多糖顆粒對彭縣黃雞生產性能的影響由表9可見，各組產蛋率比較，試驗Ⅲ、Ⅳ組顯著高于第Ⅰ組(P<0.05)，而對蛋重影響不大(P>0.05)。表9不同水平黃精多糖顆粒對彭縣黃雞生產性能的影響組別產蛋率蛋重第Ⅰ組65.45±3.5553.25±1.02第II組66.25±1.3252.65±1.65第III組68.14±2.02*53.01±1.25第Ⅳ組68.09±1.77*52.77±1.21注：*表示與對照組相比，差異顯著(P<0.05)；**表示與對照組相比，差異極顯著(P<0.01)，下表同。2.2不同水平黃精多糖顆粒對彭縣黃雞孵化率的影響從表10看出，種蛋的受精率、孵化率比較，試驗Ⅲ、Ⅳ組顯著高于第Ⅰ組(P<0.05)；而健苗率比較，試驗各組均高于對照組第Ⅰ組(P<0.05)。表10不同水平黃精多糖顆粒對彭縣黃雞孵化率的影響％組別受精率孵化率健苗率第Ⅰ組91.54±2.1284.36±2.5481.25±2.33第II組92.35±1.5686.45±2.1184.56±1.32*第III組95.23±1.65*88.85±1.24*86.89±3.25*第Ⅳ組95.31±1.44*89.02±1.33*87.02±2.14*2.3不同水平黃精多糖顆粒對彭縣黃雞免疫抗體效價的影響從表11可以看出試驗Ⅱ、Ⅲ組顯著高于第Ⅰ組(P<0.05)，而高劑量第Ⅳ組與第Ⅰ組差異反而不顯著(P>0.05)。表11不同水平黃精多糖顆粒對彭縣黃雞免疫抗體效價的影響log2組別新城疫抗體H9型流感抗體第Ⅰ組8.54±0.728.36±0.54第II組9.05±0.56*8.75±0.11*第III組9.23±0.65*8.95±0.14*第Ⅳ組8.71±0.448.52±0.233分析與討論3.1不同水平黃精多糖顆粒對彭縣黃雞生產性能的影響植物多糖是從天然植物中分離出的高效活性物質,它不僅是植物體的功能和結構物質,而且還參與了生命現象中的各種活動,在提高機體免疫力、抗氧化等方面起到了十分重要的作用。在彭縣黃雞日糧中添加不同水平的黃精多糖顆粒，對彭縣黃雞的產蛋率和孵化率有明顯提高作用，添加水平在0.2％-0.40％時對彭縣黃雞產蛋率、種蛋受精率和入孵蛋孵化率都具有顯著效果，當添加水平為0.20％時試驗效果最好；但是不能提高種蛋的重量。試驗結果表明，在日糧中添加適量水平的黃精多糖顆粒，可以顯著提高彭縣黃雞產蛋率、受精率和孵化率，健苗率，能夠提高彭縣黃雞的生產性能，這與前人報道在日糧中添加植物多糖可提高蛋雞生產性能的研究結果一致。3.2不同水平黃精多糖顆粒對彭縣黃雞免疫功能的影響近年來的研究表明，黃精多糖具有免疫調節、抑菌及抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、抗炎、抗病毒、改善學習記憶能力等多種藥理作用。1.3.1免疫調節作用SaifudingAbula等使用水煎法提取了黃精飲片中的總多糖，并使用不同濃度的乙醇沉淀得到不同的活性部位SRPSt、SRPS30、SRPS50、SRPS70和SRPS80，體外試驗結果表明，SRPS50和SRPS70對外周淋巴細胞的增殖能力促進作用較強；體內試驗結果表明，SRPS50能顯著提高各階段雞的淋巴細胞增殖能力和新城疫抗體滴度，因此SRPS50免疫作用最強，為免疫增強作用活性部位。傅圣斌等研究了黃精多糖對環磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫調節作用，發現黃精多糖能顯著提高免疫抑制小鼠的脾臟、胸腺指數，顯著促進溶血素的形成，顯著提高腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的吞噬率和吞噬指數。試驗中日糧中添加黃精多糖顆粒對于彭縣黃雞免疫抗體效價的影響也呈顯著作用，對于新城疫弱毒苗產生的抗體效價還是乳劑滅活苗H9型禽流感抗體效價而言，各試驗組相關免疫抗體效價明顯高于對照組，但是高劑量組未達到顯著狀態，說明黃精多糖顆粒具有增強機體免疫機能的作用，同時，劑量增大不利于抗體產生，體現的是雙向調節作用。4結論試驗結果表明，從應用的實際情況和成本考慮，彭縣黃雞日糧中黃精多糖顆粒最適宜添加量為0.20％。上述說明示出并描述了發明的若干優選實施例，但如前所述，應當理解發明并非局限于本文所披露的形式，不應看作是對其他實施例的排除，而可用于各種其他組合、修改和環境，并能夠在本文所述發明構想范圍內，通過上述教導或相關領域的技術或知識進行改動。而本領域人員所進行的改動和變化不脫離發明的精神和范圍，則都應在發明所附權利要求的保護范圍內。當前第1頁1 2 3