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一種顯著提高免疫能力的肺癌干細(xì)胞疫苗的制備方法與流程

文檔序號:11873627閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種顯著提高免疫能力的肺癌干細(xì)胞疫苗的制備方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:

將復(fù)蘇后的肺癌干細(xì)胞于DMEM全培養(yǎng)基中培養(yǎng),DMEM全培養(yǎng)基中含8%的FBS,培養(yǎng)溫度為37 ℃,濕度為85 %,CO2的濃度為0.5 %,培養(yǎng)3-4天,之后對所培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行1:3的分盤,再用同樣的培養(yǎng)基在同樣的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)3天,細(xì)胞呈現(xiàn)紡錘體或近似紡錘體;

對步驟(1)所得物利用60Co進(jìn)行輻照處理,劑量為3-4Gy;

選取CD133陽性干細(xì)胞,培養(yǎng)后進(jìn)行滅活處理,利用生理鹽水重懸干細(xì)胞,使得細(xì)胞濃度為1×105-1×106個/ml;

按照體積比4:1.5:2的比例,將步驟(3)所得物、殼聚糖生理鹽水溶液和昆布多糖生理鹽水溶液混合,混合后,殼聚糖濃度為2 %,昆布多糖的濃度為2.5 %。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(2)中,輻照劑量為3Gy。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(3)中,細(xì)胞濃度為5×105個/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,步驟(3)中,所述的滅活為:對干細(xì)胞進(jìn)行多次凍融處理。

5.由權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述方法制備得到的疫苗。

6.權(quán)利要求5所述疫苗在制備治療肺癌藥物方面的用途。

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