本發明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。

背景技術：

氧是人類及許多生物賴以生存的重要條件。低氧(Hypoxia)是指機體生命活動所需的氧不能得到充足的供給。氧和低氧是生命活動最重要的關鍵因素，是生命科學基本理論的重要課題。低氧的形成可分為三類：第一類是外界環境氧含量降低，使正常生理活動過程不能攝取足夠氧，如高原和航空缺氧；第二類是指因疾病等導致外界正常氧量不能充分到達機體內，造成心、腦和呼吸系統等的缺氧；第三類是機體活動所需氧消耗量，超過了生理動員能力，造成相對氧供給不足，常見于劇烈運動和超限量勞動。長期低氧是危害人體健康的重要隱患，嚴重者可危及生命。因此，低氧造成心、腦和呼吸系統等損傷已成為21世紀醫學界急待解決的主要問題之一。

從天然產物中尋找化合物或先導化合物并進行結構修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物最有重要價值。

本發明涉及的化合物I是一個2010年發表(Meng Shao et al.,2010.Psiguadials A and B,Two Novel Meroterpenoids with Unusual Skeletons from the Leaves of Psidium guajava.Organic Letters 12(2010)5040–5043)的化合物，我們對化合物I進行了結構修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合物并對該組合物的抗缺氧活性進行了評價，其具有抗缺氧活性。

技術實現要素：

本發明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物III和化合物IV的質量百分數分別為70％和30％。

本發明公開的化合物可以制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。

藥效學實驗表明，本發明的組合物具有較好的抗缺氧作用。本發明的藥學上可接受的鹽具有同樣的藥效。

以下通過實施例對本發明作進一步詳細的說明，但本發明的保護范圍不受具體實施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。

具體實施方式

實施例1 化合物Psiguadial A的制備

化合物Psiguadial A(I)的制備方法參照Meng Shao等人發表的文獻(Meng Shao et al.,2010.Psiguadials A and B,Two Novel Meroterpenoids with Unusual Skeletons from the Leaves of Psidium guajava.Organic Letters 12(2010)5040–5043)的方法。

實施例2 Psiguadial A的O-溴乙基衍生物(II)的合成

將化合物I(474mg，1.00mmol)溶于20mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨(TBAB)(0.16g)，1,2-二溴乙烷(7.520g，40.00mmol)和12mL的50％氫氧化鈉溶液。混合物在35攝氏度攪拌8h。8h之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機相溶液。然后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌3次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為：石油醚/丙酮＝100:0.5，v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(502mg，73％)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.44(s,2H),7.24(s,2H),7.20(d,J＝10.0Hz,3H),4.31(s,4H),3.89(s,1H),3.74(s,4H),2.30(s,1H),2.12(s,1H),2.02(s,1H),1.92(s,1H),1.79(s,1H),1.73(s,1H),1.51(d,J＝19.8Hz,3H),0.99(s,3H),0.95(d,J＝4.7Hz,7H),0.85(s,3H),0.53(s,1H),0.43(s,1H).

¹³C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ188.69(s),170.54(s),165.42(s),163.38(s),142.72(s),129.71(s),127.96(s),127.08(s),118.00(s),116.82(s),114.82(s),72.73(s),40.19(s),34.75(s),34.32(s),31.75(s),30.93(s),28.09(s),26.43(s),24.48(s),23.74(s),21.18(s),20.77(s),19.99(s),14.39(s).

HRMS(ESI)m/z[M+H]⁺calcd for C₃₄H₄₁Br₂O₅:689.1300；found 689.1303.

實施例3 Psiguadial A的O-(咪唑基)乙基衍生物(III)的合成

將化合物II(344mg，0.5mmol)溶于25mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀(690mg，5.0mmol)，碘化鉀(168mg，1.0mmol)和咪唑(3480mg，40mmol)，混合物加熱回流2h。反應結束后將反應液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機相。依次用水和飽和食鹽水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化(流動相為：石油醚/丙酮＝100:0.4，v/v)，收集黃色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的黃色粉末(235.0mg,71％)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.38(s,2H),7.80(s,2H),7.17(s,2H),7.11(d,J＝10.0Hz,3H),7.07(s,2H),6.66(s,2H),4.47(s,4H),4.37(s,4H),3.91(s,1H),2.03(s,1H),1.86–1.77(m,3H),1.64(s,1H),1.60(s,1H),1.35(d,J＝4.6Hz,3H),1.15(s,1H),0.89(s,3H),0.87–0.64(m,9H),0.43(s,1H),0.17(s,1H).

¹³C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ188.52(s),170.35(s),165.17(s),163.13(s),142.49(s),139.47(s),129.44(s),128.51(s),127.70(s),126.82(s),119.14(s),117.75(s),116.59(s),114.54(s),69.29(s),43.78(s),39.96(s),34.50(s),34.09(s),30.66(s),27.84(s),26.18(s),24.25(s),23.46(s),20.92(s),20.51(s),19.76(s),14.20(s).

HRMS(ESI):m/z[M+H]⁺calcd for C₄₀H₄₇N₄O₅:663.3546；found:663.3541。

實施例4 Psiguadial A的O-(二羥乙胺)乙基衍生物(IV)的合成

將化合物II(344mg，0.5mmol)溶于18mL乙腈，加入無水碳酸鉀(0.345g，2.5mmol)，碘化鉀(0.084g，0.5mmol)和二乙醇胺(2.103g，20mmol)，混合物加熱回流2h。反應結束后將反應液倒入冷水中，用二氯甲烷萃取2次，合并有機相，依次用水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑。產物用硅膠柱層析純化(石油醚/丙酮100:0.7，v/v)，得到化合物IV的淡棕色固體(0.254g,69％)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,2H),7.27(t,J＝15.0Hz,2H),7.21(t,J＝15.0Hz,2H),7.21(s,1H),4.04(s,4H),3.97(s,1H),3.39(s,8H),2.68(s,4H),2.54(s,8H),2.16(s,1H),2.01(s,1H),1.98–1.90(m,3H),1.68(s,1H),1.62(s,1H),1.45(s,2H),1.40(s,1H),1.12(s,4H),1.00(s,3H),0.93(s,6H),0.89(s,3H),0.52(s,1H),0.27(s,1H).

¹³C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ188.43(s),170.26(s),165.08(s),163.04(s),142.40(s),129.34(s),127.61(s),126.73(s),117.67(s),116.49(s),114.46(s),69.16(s),58.86(s),56.40(s),53.85(s),39.84(s),34.42(s),33.99(s),30.58(s),27.74(s),26.10(s),24.15(s),23.38(s),20.82(s),20.43(s),19.66(s),14.02(s).

HRMS(ESI):m/z[M+H]⁺calcd for C₄₂H₆₁N₂O₉:737.4377；found:737.4374。

實施例5 小鼠特異性心肌缺氧實驗

1、方法：

組合物的制備：將研磨之后過200目網的70mg化合物III的粉末和研磨之后過200目網的30mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組合物，使用時用水溶解這100mg的組合物即得到組合物的溶液。

50只昆明小鼠，體重(20±2)g。隨機分為5組，灌胃給藥。前2組給予0.3％羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液，后3組分貝給予化合物III、化合物IV和組合物，50min后，除第1組外，均腹腔注射異丙腎上腺素(ISO)15mg·Kg^-1，15min后，將小鼠放入常壓缺氧裝置中，記錄小鼠死亡時間及耗氧量。

結果：

異丙腎上腺素可通過興奮心臟β受體，使心肌耗氧量增加。本實驗顯示，與溶媒對照組相比，組合物0.010g·Kg^-1能顯著對抗異丙腎上腺素(ISO)導致的心肌耗氧量增加(P<0.01)，同時延長小鼠缺氧密閉狀態下的存活時間(P<0.01)，結果見表1。而化合物III和化合物IV均不具備此作用。

表1待試物對異丙腎上腺素致特異性缺氧小鼠的影響(x，n＝10)

注：¹⁾P<0.01，與對照組比較，²⁾P<0.01，與異丙腎上腺素組比較。

實施例6 小鼠常壓窒息性缺氧實驗

1、方法：

40只昆明小鼠，體重(20±2)g。隨機分為4組，灌胃給藥。第1組給予0.3％羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液，后3組分別給予含組合物、化合物III和化合物IV的CMC-Na溶液，濃度為0.010g·Kg^-1。給藥50min后，置于廣口瓶中并蓋緊瓶塞(瓶內放置5g鈉石灰)。以呼吸停止為標志，記錄小鼠存活時間。

2、結果：

與溶媒對照組相比，組合物的0.010g·Kg^-1使小鼠在常壓密閉條件下的存活時間延長了44.29％，差異具有顯著性(P<0.01)，而化合物III和化合物IV均未能使小鼠在常壓密閉條件下的存活時間顯著延長。

實施例7 小鼠減壓缺氧實驗

1、方法：

40只昆明小鼠，體重(20±2)g。隨機分為4組，灌胃給藥。給藥組分別給予組合物、化合物III和化合物IV，濃度為0.010g·Kg^-1，對照組給予0.3％CMC-Na溶液，灌胃體積均為2ml·Kg^-1。50min后，各給藥組和對照組各取5只，放入減壓裝置中，在26.7Kpa(相當于海拔約10000m)時停止減壓，保持此壓力不變，待對照組動物死亡80％時，立即停止減壓，緩緩放入空氣，取出動物，記錄各組死亡及存活數目，重復操作至實驗完成。

2、結果：

組合物0.010g·Kg^-1使小鼠在減壓缺氧條件下的存活率由對照組的20％提高至50％，差異具有顯著性(P<0.05)；而化合物III和化合物IV對小鼠在減壓缺氧條件下的存活率為20％，均未有提高。

結論：組合物可顯著提高異丙腎上腺素致特異性缺氧的存活時間，窒息性缺氧和急性減壓缺氧小鼠的存活率，提供了組合物在制備抗缺氧藥物中的用途。而化合物III和化合物IV均不具有上述活性。

實施例8 本發明所涉及組合物片劑的制備

取2克組合物，加入制備片劑的常規輔料18克，混勻，常規壓片機制成100片。

實施例9 本發明所涉及組合物膠囊的制備

取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。