本發(fā)明涉及藥物制備領(lǐng)域，尤其涉及bmp9在制備延緩肝纖維化藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

肝纖維化是多種原因引起的慢性肝損害所致的病理改變，表現(xiàn)為肝內(nèi)細(xì)胞外間質(zhì)成分過度異常地沉積，并影響肝臟的功能，是慢性肝病發(fā)展到肝硬化乃至肝癌必經(jīng)之階段。肝纖維化的治療，主要通過抑制炎癥或脂質(zhì)過氧化，或者抑制肝星狀細(xì)胞的增生活化，以及促進(jìn)膠原降解。但是現(xiàn)有技術(shù)中用于延緩肝纖維化的藥物種類稀少，研發(fā)此類藥物具有十分重要的臨床指導(dǎo)及科學(xué)意義。

因此，在現(xiàn)有的基礎(chǔ)上，研發(fā)一種新的延緩肝纖維化的藥物是十分具有實(shí)用價(jià)值的。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種bmp9在制備延緩肝纖維化藥物中的應(yīng)用，為制備新的延緩肝纖維化的藥物開拓了新的領(lǐng)域。

本發(fā)明提供的bmp9在制備延緩肝纖維化藥物中的應(yīng)用，所述的bmp9為腺病毒shbmp9或bmp9中和抗體。

較佳地，所述的腺病毒shbmp9的序列為：cccttctttgttgtcttctccaatg。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果如下：

bmp9是由肝臟分泌的一種蛋白因子，屬于tgf-β超家族，bmp9用于肝纖維化的治療從未見報(bào)道，本發(fā)明采用bmp9制備的藥物能在一定程度上延緩肝纖維化的進(jìn)程，bmp9作為有效成分應(yīng)用于開發(fā)治療和防治肝纖維化的藥物，十分具有實(shí)用價(jià)值，開拓了一個(gè)新的藥物研發(fā)的領(lǐng)域。

附圖說明：

圖1為本發(fā)明實(shí)施例一中小鼠肝纖維化造模示意圖。

圖2a為本發(fā)明實(shí)施例一中肝纖造模后，小鼠肝臟massion和siriusred染色的代表性圖。

圖2b為本發(fā)明實(shí)施例一中massion染色的統(tǒng)計(jì)結(jié)果圖。

圖2c為本發(fā)明實(shí)施例一中siriusred染色的統(tǒng)計(jì)結(jié)果圖。

圖2d為本發(fā)明實(shí)施例一中shbmp9腺病毒注射的小鼠肝臟中bmp9的蛋白表達(dá)量圖。

圖3為本發(fā)明實(shí)施例二中小鼠肝纖維化造模示意圖。

圖4a本發(fā)明實(shí)施例二中顯示出肝纖造模后進(jìn)行抗體中和實(shí)驗(yàn)，小鼠肝臟massion和siriusred染色的代表性圖。

圖4b為本發(fā)明實(shí)施例二中massion染色的統(tǒng)計(jì)結(jié)果圖。

圖4c為本發(fā)明實(shí)施例二中siriusred染色的統(tǒng)計(jì)結(jié)果圖。

圖4d為本發(fā)明實(shí)施例二中bmp9中和抗體注射的小鼠肝臟中bmp9的蛋白表達(dá)量圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步地說明，以更好地理解本發(fā)明。

實(shí)施例一：

腺病毒shbmp9可應(yīng)用于減弱ccl4誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化的藥物實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)材料：6-8周的c57小鼠24只，分為oli,ccl4+gfp，ccl4+shbmp9三處理組，每個(gè)處理組8只小鼠。四氯化碳(ccl4)、橄欖油、手術(shù)剪、注射器、縫線.shbmp9腺病毒、gfp腺病毒對(duì)照，shbmp9的序列為：cccttctttgttgtcttctccaatg.

oli組：給小鼠腹腔注射橄欖油50ul/次，每周3次，總共2個(gè)月.心臟采血。

ccl4+gfp組：給小鼠腹腔注射10％ccl4(橄欖油稀釋)50ul/次，每周3次，連續(xù)4周，從第5周開始，同時(shí)尾靜脈注射2*109pfu/次的gfp腺病毒，每周3次，連續(xù)共注射4周，第8周時(shí)處死小鼠，取血，分離小鼠肝臟。

ccl4+shbmp9組：給小鼠腹腔注射10％ccl4(橄欖油稀釋)50ul/次，每周3次，連續(xù)4周，從第5周開始，同時(shí)尾靜脈注射2*10pfu/次的shbmp9腺病毒，每周3次，連續(xù)共注射4周，第8周時(shí)處死小鼠，取血，分離小鼠肝臟，結(jié)果如圖1所示，圖1顯示出小鼠肝纖造模和shbmp9腺病毒尾靜脈注射的過程。

massion染色和siriusred染色顯示小鼠肝臟中的膠原含量，并進(jìn)行面積統(tǒng)計(jì)，westernblot檢測(cè)a-sma和bmp9的表達(dá)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明shbmp9能夠顯著減弱肝纖維化的程度。結(jié)果如圖2所示，圖2a顯示出肝纖造模后，小鼠肝臟massion和siriusred染色的代表性圖片，圖2b為massion染色的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，shbmp9能夠顯著降低小鼠肝臟中的膠原含量，圖2c顯示出siriusred染色的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，shbmp9顯著降低了肝臟中膠原沉積.圖2d顯示shbmp9腺病毒注射的小鼠肝臟中，bmp9的蛋白表達(dá)量顯著降低，同時(shí)肌動(dòng)蛋白a-sma表達(dá)下調(diào)，說明小鼠肝纖得到了緩解。

實(shí)施例二：

bmp9中和抗體能夠作為有效成分應(yīng)用于降低ccl4誘導(dǎo)的肝纖維化的藥物中。

實(shí)驗(yàn)材料：6-8周的c57小鼠24只，分為oli,ccl4+igg，ccl4+bmp9ab處理組，每個(gè)處理組8只小鼠。

四氯化碳(ccl4)、橄欖油、手術(shù)剪、縫線.，bmp9中和抗體購(gòu)自r&dsystem(catlog：mab3209-500)

實(shí)驗(yàn)材料：6-8周的c57小鼠24只，分為oli,ccl4+igg，ccl4+bmp9ab三處理組，每個(gè)處理組8只小鼠。四氯化碳(ccl4)、橄欖油、手術(shù)剪、注射器、縫線.

oli組：給小鼠腹腔注射橄欖油50ul/次，每周3次，總共2個(gè)月.心臟采血。

ccl4+igg組：給小鼠腹腔注射10％ccl4(橄欖油稀釋)50ul/次，每周3次，連續(xù)6周，從第7周開始，同時(shí)腹腔注射50ug/次的igg，每周3次，連續(xù)共注射2周，第8周時(shí)處死小鼠，取血，分離小鼠肝臟。

ccl4+bmp9ab組：給小鼠腹腔注射10％ccl4(橄欖油稀釋)50ul/次，每周3次，連續(xù)6周，從第7周開始，同時(shí)腹腔注射50ug/次的bmp9ab，每周3次，連續(xù)共注射2周，第8周時(shí)處死小鼠，取血，分離小鼠肝臟，造模圖如圖3所示。

massion染色和siriusred染色顯示小鼠肝臟中的膠原含量，并進(jìn)行面積統(tǒng)計(jì)，westernblot檢測(cè)a-sma和bmp9的表達(dá)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明bmp9中和抗體能夠作為有效成分于顯著減弱肝纖維化的程度，可應(yīng)用于結(jié)果如圖4所示，圖4a顯示出肝纖造模后進(jìn)行抗體中和實(shí)驗(yàn)，小鼠肝臟massion和siriusred染色的代表性圖片，圖4b為massion染色的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，bmp9中和抗體能夠顯著降低小鼠肝臟中的膠原含量，圖4c顯示出siriusred染色的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，bmp9中和抗體顯著降低了肝臟中膠原沉積.圖4d顯示bmp9中和抗體注射的小鼠肝臟中，bmp9的蛋白表達(dá)量顯著降低，同時(shí)肌動(dòng)蛋白a-sma表達(dá)下調(diào)，說明小鼠肝纖得到了緩解。

降低肝纖維化的藥物中，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果如下：

bmp9是由肝臟分泌的一種蛋白因子，屬于tgf-β超家族，bmp9用于肝纖維化的治療從未見報(bào)道，本發(fā)明采用bmp9制備的藥物能在一定程度上延緩肝纖維化的進(jìn)程，bmp9作為有效成分應(yīng)用于開發(fā)治療和防治肝纖維化的藥物，十分具有實(shí)用價(jià)值，開拓了一個(gè)新的藥物研發(fā)的領(lǐng)域。

以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)描述，但其只是作為范例，本發(fā)明并不限制于以上描述的具體實(shí)施例。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，任何對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的等同修改和替代也都在本發(fā)明的范疇之中。因此，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍下所作的均等變換和修改，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。