本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種用于預防或治療纖維化疾病的藥物組合物及其應用。
背景技術：
尼達尼布，即3-z-[1-(4-(n-((4-甲基-哌嗪-1-基)-甲基羰基)-n-甲基-氨基)-苯胺基)-1-苯基-亞甲基]-6-甲氧基羰基-2-二氫吲哚酮，分子式c31h33n5o4，化合物結構如下：
尼達尼布是一種新型的血管生成抑制劑，可同時作用于血管生成過程中涉及的3種關鍵受體家族：血管內皮生長因子受體(vegfr)、血小板源性生長因子受體(pdgfr)以及成纖維細胞生長因子受體(fgfr)。尼達尼布已被fda和ema批準上市，用于治療特發性肺纖維化(ipf)，也被ema批準聯合多西他賽在一線化療之后應用于組織學診斷為腺癌的、局部晚期或轉移性或局部復發性非小細胞肺癌(nsclc)成年患者。
纖維化的特征通常在于成纖維細胞和成肌纖維細胞增殖的異常增加，以及膠原和其他細胞外基質(ecm)成分的過量沉積。纖維化(fibrosis)可發生于多種器官，主要病理改變為器官組織內纖維結締組織增多，實質細胞減少，持續進展可致器官結構破壞和功能減退，乃至衰竭，嚴重威脅人類健康和生命。
任何原因只要能引起組織細胞損傷，均可導致組織細胞發生變性、壞死和炎癥反應，如果損傷很小，損傷細胞周邊正常實質細胞將發生增生修復，這種修復可完全恢復正常的結構和功能。然而如果損傷較大或反復損傷超出了損傷周圍實質細胞的再生能力時，間質纖維結締組織將大量增生對缺損組織進行修復，即發生纖維化的病理改變。因此本質上纖維化是組織遭受損傷后的修復反應，以保護組織器官的相對完整性。增生的纖維結締組織雖然修復了缺損，但卻不具備原來器官實質細胞的結構和功能。如果這種修復反應過度、過強和失控時，就會引起器官的纖維化和導致器官的功能下降。
由此可見，纖維化是指由于炎癥導致器官實質細胞發生壞死，組織內細胞外基質異常增多和過度沉積的病理過程。輕者成為纖維化，重者引起組織結構破壞而發生器官硬化。
在全世界范圍內，組織纖維化是許多疾病致殘、致死的主要原因，組織纖維化在人體各主要器官疾病的發生和發展過程中均起著重要作用。據美國有關統計資料證明，該國因各種疾病而致死的病人中，接近45％可以歸于組織纖維增生疾病。
技術實現要素：
本發明的目的是針對上述缺陷，提供一種用于預防或治療纖維化疾病的藥物組合物及其應用，該藥物組合物包括活性成分和輔料，所述活性成分包括選自尼達尼布及其鹽和溶劑合物中的一種或多種。
為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：
根據本發明的第一方面，提供一種尼達尼布或其鹽、其溶劑合物在制備用于預防或治療纖維化疾病的藥物中的用途，纖維化疾病為毒素和藥物引起的肝纖維化，血吸蟲性肝纖維化，代謝性肝纖維化，營養不良性肝纖維化，心源性肝纖維化，脂肪性肝纖維化，酒精性肝纖維化，肝淤血性纖維化，膽汁淤積性肝纖維化，膽管囊腫導致的肝纖維化，慢性腎盂腎炎、阻塞性腎病、遺傳性腎病、糖尿病腎病、乙肝或艾滋病病毒及腎移植引起的腎纖維化，藥物中毒引起的腎纖維化，糖尿病引起的腎纖維化，心內膜心肌纖維化，胰腺囊腫纖維化，神原型系統纖維化，縱膈纖維化，骨髓纖維化，骨髓增生異常綜合癥，子宮肥大，前列腺增生，乳腺纖維瘤，脾纖維化，吸煙、重癥肺結核、肺移植和胸廓運動障礙造成的肺纖維化疾病，晶狀體前囊膜纖維化，增生性玻璃體視網膜病變中的一種或幾種。
根據本發明的第二方面，提供一種用于預防或治療纖維化疾病的藥物組合物，該藥物組合物包括活性成分和輔料，該活性成分為選自尼達尼布、其鹽、其溶劑合物中的一種或多種。
需要說明的是，溶劑合物為其中溶劑分子形成固態的化學計量復合物且包括但不限于乙醇和甲醇的化合物或其鹽。溶劑合物包括水合物，水合物為特定形式的溶劑合物，其中溶劑分子為水。本發明的化合物或其鹽的水合物為該化合物或其鹽與水的化學計量組合物，諸如半水合物、單水合物或二水合物。
該鹽優選為根據本發明的化合物的藥學上可接受的鹽。合適的藥學上可接受的鹽包括無機酸和有機酸的鹽，包括鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸、甲烷磺酸、三氟甲烷磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、1-萘磺酸、2-萘磺酸、乙酸、三氟乙酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、乳酸、乙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、苯甲酸、水楊酸、苯基乙酸和扁桃酸。另外，藥學上可接受的鹽包括無機堿的鹽，諸如含有堿陽離子(例如li+、na+或k+)、堿土陽離子(例如mg2+、ca2+或ba2+)、銨陽離子的鹽；以及有機堿的酸式鹽，包括脂肪族和芳香族被取代銨和季銨陽離子，諸如來自三乙胺、n,n-二乙胺、n,n-二環己胺、賴氨酸、吡啶、n,n-二甲基氨基吡啶(dmap)、1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(dabco)、1,5-二氮雜雙環[4,3,0]壬-5-烯(dbn)和1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)的質子化或全烷基化的鹽。
優選地，該藥物組合物為口服制劑、靜脈注射劑、皮下注射劑、肌內注射劑、肌肉注射劑、膏劑、栓劑或氣霧化劑。
具體地，該藥物組合物可以采用包括口服、靜脈注射、皮下注射、肌內注射、肌肉注射、局部給藥、直腸栓劑給藥、氣霧化給藥、關節內給藥的方式給藥。
優選采用口服方式給藥，口服制劑可以是：片劑、散記、顆粒劑、膠囊劑、糖漿劑、口服液、含片劑、吸入劑等。
優選地，口服制劑的輔料為選自分散劑、增稠劑、潤濕劑、賦形劑、粘合劑、助流劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、矯味矯嗅劑、乳化劑、表面活性劑、助溶劑、混懸劑、等滲劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、穩定劑、吸收促進劑中的任一種或幾種。
優選的分散劑是：中鏈甘油三酯、聚乙二醇或植物油等。
優選的增稠劑是：混合脂肪酸甘油酯等。
優選的潤濕劑是：大豆卵磷脂、吐溫80、吐溫60、司盤80或司盤60等。
優選的賦形劑是：乳糖、蔗糖、葡萄糖、玉米淀粉、甘露醇、山梨糖醇、淀粉、α淀粉、糊精、微晶纖維素、輕質硅酸酐、硅酸鋁、硅酸鈣、硅酸鋁酸鎂、磷酸氫鈣等。
優選的粘合劑是：聚乙烯醇、甲基纖維素、乙基纖維素、阿拉伯膠、黃耆膠、明膠、蟲膠、羥丙基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇等。
優選的助流劑是：膠態二氧化硅。
優選的潤滑劑是：硬脂酸鎂、聚乙二醇、硬脂酸鈣、富馬酸十八酯鈉、滑石粉、聚乙二醇。
優選的崩解劑是：微晶纖維素、瓊脂、明膠、碳酸鈣、碳酸氫鈉、檸檬酸鈣、糊精、果膠、低取代羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉、羧甲基淀粉鈉等。
優選的著色劑是：三氧化二鐵、黃色三氧化二鐵、胭脂紅、焦糖、β-胡蘿卜素、氧化鈦、滑石粉、磷酸核黃素鈉等。
優選的矯味劑是：可可粉、薄荷醇、薄荷油、冰片、桂皮粉等。
優選的乳化劑或表面活性劑是：十八烷基三乙醇胺、十二烷基硫酸鈉、十二烷基硫酸鈉、十二烷基硫酸鈉氨基丙酸、卵磷脂、甘油單硬脂酸、蔗糖脂肪酸酯、甘油脂肪、酸酯等。
優選的助溶劑是：聚乙二醇、丙二醇、安息香酸芐酯、乙醇、膽固醇、三乙醇胺、碳酸鈉、檸檬酸鈉、吐溫80、煙酰胺等。
優選的混懸劑是：聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素等親水性高分子。
優選的等滲劑是：葡萄糖、氯化鈉、甘露醇、山梨糖醇等。
優選的緩沖劑是：磷酸鹽、醋酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽等緩沖液。
優選的防腐劑是：對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、氯丁醇、芐醇、苯乙醇、脫氫乙酸、山梨酸等。
優選的抗氧化劑是：亞硫酸鹽、抗壞血酸、α-生育酚等。
優選地，該活性成分為乙磺酸尼達尼布，該藥物組合物為尼達尼布乙磺酸鹽的組合物。
優選地，按重量份計，該口服藥物的配方組成包括：
進一步優選地，該口服藥物為膠囊劑。
進一步優選地，該口服藥物的制備方法為：將分散劑、增稠劑和潤濕劑加熱至40-50℃使融化，加入已過0.8mm篩的活性成分，混合均勻，高壓均質機(轉速20000r/min)中均制3-5次，每次2分鐘，直至內容物為完全均一狀態，得囊液，采用壓制或滴制法填充入囊殼，制備成軟膠囊，即得。
進一步優選地，該口服藥物包括一個或多個單位的單位制劑，該單位制劑以尼達尼布計，每個單位制劑含有的活性成分的重量為活性成分的有效治療劑量的n倍，其中，n為0.1～10之間的數。
優選地，n為0.1～1之間的數。
優選地，活性成分的有效治療劑量是10～150毫克/人/次。
進一步優選地，活性成分的有效治療劑量是10～100毫克/人/次。
更優選地，活性成分的有效治療劑量是50～100毫克/人/次。
進一步優選地，該膠囊劑，按重量份計，其配方組成為：
優選地，所述的纖維化疾病為毒素和藥物引起的肝纖維化，血吸蟲性肝纖維化，代謝性肝纖維化，營養不良性肝纖維化，心源性肝纖維化，脂肪性肝纖維化，酒精性肝纖維化，肝淤血性纖維化，膽汁淤積性肝纖維化，膽管囊腫導致的肝纖維化；慢性腎盂腎炎，阻塞性腎病，遺傳性腎病如alport綜合征，糖尿病腎病，乙肝或艾滋病病毒及腎移植等引起的腎纖維化，藥物中毒引起的腎纖維化，糖尿病引起的腎纖維化；心內膜心肌纖維化，胰腺囊腫纖維化，神原型系統纖維化，縱膈纖維化，骨髓纖維化，骨髓增生異常綜合癥，子宮肥大，前列腺增生，乳腺纖維瘤，脾纖維化，吸煙、重癥肺結核、肺移植和胸廓運動障礙造成的肺纖維化疾病，晶狀體前囊膜纖維化，增生性玻璃體視網膜病變等中的一種或幾種。
本發明的藥物組合物使用量依據癥狀、年齡、給藥方式進行選擇，通常成人每日給藥不超過3次，優選2次，每次10～150mg(以尼達尼布計)，優選每次10mg～100mg，更優選為每次20mg～90mg，進一步優選為每次30mg～80mg，更進一步優選為每次40～70mg。
本發明的有益效果在于：本發明所述尼達尼布制劑能夠針對vegf、pdgf、fgf三種血管生成受體進行纖維化疾病的預防或治療，而且每天口服次數不超過3次，優選2次，并且能夠提供有效的藥物濃度，進而達到較好的防治效果。
由于以上技術方案的實施，本發明與現有技術相比具有如下優點：
附圖說明
圖1為he染色的假手術組動物腎臟組織病理圖；
圖2為siruisred染色的假手術組動物腎臟組織病理圖；
圖3為he染色的模型對照組動物腎臟組織病理圖；
圖4為siruisred染色的模型對照組動物腎臟組織病理圖；
圖5為he染色的供試品低劑量組動物腎臟組織病理圖；
圖6為siruisred染色的供試品低劑量組動物腎臟組織病理圖。
具體實施方式
以下將通過具體實施例進一步闡述本發明，但并不用于限制本發明的保護范圍。本領域技術人員可在權利要求范圍內對制備方法和使用儀器做出改進，這些改進也應視為本發明的保護范圍。因此，本發明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。
實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件或按照制造廠商所建議的條件。
實施例1：尼達尼布膠囊劑的制備
按如下方法和表1中物料配比制備尼達尼布膠囊劑：
表1：尼達尼布膠囊劑物料配比
將處方量的中鏈甘油三酯、混合脂肪酸甘油酯、大豆卵磷脂加熱至40-50℃使融化，加入已過0.8mm篩的處方量的乙磺酸尼達尼布，混合均勻，高壓均質機(轉速20000r/min)中均制3-5次，每次2分鐘，直至內容物為完全均一狀態，得囊液，采用壓制或滴制法填充入囊殼，制備成軟膠囊，即得。
實施例2：尼達尼布膠囊劑的理化性質
按照實施例1的兩種處方組成分別制備軟膠囊200粒，觀察軟膠囊外觀、檢查裝量差異(裝量差異不得超過7.5％)、測定溶出度(槳法(中國藥典2015年版二部附錄xc第二法))、測定含量(分別測定0天及加速1月40℃、rh75％含量)。
液相檢測方法：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.1％三氟乙酸為流動相a，乙腈為流動相b，按表2進行梯度洗脫，流速為每分鐘1.0ml；檢測波長為387nm，柱溫35℃。
表2：液相洗脫液梯度配比組成
含量測定方法：取本品20粒，傾出內容物，精密稱定，精密稱取適量(約相當于尼達尼布12.5mg)，置50ml量瓶中，加初始流動相適量，超聲使溶解，放冷，稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液1ml，置25ml量瓶中，加初始流動相稀釋至刻度，作為供試品溶液，精密量取10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取乙磺酸尼達尼布對照品適量，精密稱定，加初始流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含10μg尼達尼布的溶液，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。
計算公式為：
式(1)中，f為校正因子；c對照為對照品溶液的濃度(mg/ml)；a對照為對照品溶液主峰峰面積。
式(2)中：f平均為校正因子的平均值；c供試品為供試品溶液的濃度(mg/ml)；a供試品為供試品溶液主峰峰面積；w平均——平均裝量(mg)；規格為150mg或100mg。
溶出度測定方法：取本品6粒，以槳法(中國藥典2015年版二部附錄xc第二法)測定，以0.01mol/l鹽酸溶液(1000ml水中加入1.17ml鹽酸)900ml為溶出介質，轉速為每分鐘75轉，依法操作，經30分鐘時，取溶液10ml，濾過(棄去初濾液5ml)，取續濾液作為供試品溶液。另取乙磺酸尼達尼布對照品適量，精密稱定，加初始流動相溶解并稀釋制成每1ml分別中約含150μg和100μg尼達尼布的溶液，精密量取對照品溶液各10μl注入液相色譜儀(每份進3針)，精密量取供試品溶液10μl注入液相色譜儀(每份進1針)，記錄色譜圖；按外標法以峰面積計算，計算每粒的溶出量，應符合規定。
計算公式：
式(3)中，f為校正因子；c對照為對照品溶液的濃度(mg/ml)；a對照為對照品溶液主峰峰面積。
式(4)中，f平均為校正因子的平均值；c供試品為供試品溶液的濃度(mg/ml)；a供試品為供試品溶液主峰峰面積。
各理化性質測試結果見表3，含量以尼達尼布(c31h33n5o4)計(n＝20)，溶出度以尼達尼布(c31h33n5o4)計(n＝6)。
表3：尼達尼布膠囊劑理化性質
實施例3：乙磺酸尼達尼布對大鼠腎纖維化的抑制作用
50只雄性sd大鼠以體重相近原則隨機分為5組，每組10只，分別為假手術組、模型對照組、供試品低劑量組、供試品中劑量組和供試品高劑量組。試驗動物零天(d0)麻醉后正中開腹，分離左側腎臟。于左腎下極處分離輸尿管，行單側輸尿管結扎術(uuo)。假手術組僅進行開腹和分離左腎步驟。
術后次日(d1)開始給藥，假手術組(組1)動物不作處理，模型對照組(組2)動物給予溶媒，供試品低劑量組給予供試品劑量為10mg/kg/次、供試品中劑量組給予供試品劑量為50mg/kg/次、供試品高劑量組給予供試品劑量為200mg/kg/次，試驗動物灌胃給藥，每日上午和下午各給藥1次，連續給藥14天。
所有試驗動物藥前、藥后每周稱重1次。第15天收集24h尿液，測定尿量、肌酐(crea)、尿素氮(bun)、總蛋白(tp)、微量白蛋白(malb)。第15天取血分離血清測定肌酐(crea)、尿素氮(bun)、總蛋白(tp)、白蛋白(alb)。第15天動物安樂死并進行大體解剖觀察，取結扎側腎臟進行he染色和siriusred染色。
實驗結果：1)一般臨床觀察：供試品高劑量組一動物于第6天被發現死亡。同組的另兩只動物于第15天解剖前被發現死亡。同組多只動物于實驗后期發現有弓背、四肢和雙耳蒼白、肛周污穢等癥狀。
2)體重：供試品能劑量依賴性地抑制sd大鼠的體重增長。其中中劑量組和高劑量組的抑制作用均具有統計學差異(p<0.001)。第11天時供試品低、中、高劑量組的體重分別為311±22g、283±27g和249±21g，而模型對照組為325±19g，各組體重變化參見表4(g，mean±sd)。注：***：p<0.001vs陰性對照組。
表4：大鼠體重
3)血生化指標：相比假手術組，模型對照組血清肌酐水平顯著上升，且具有統計學差異(68±12vs44±8，p<0.01)。供試品各組中，低劑量組改善趨勢最為明顯(58±18)，但不具有統計學差異。
模型對照組血清bun水平相比假手術組顯著上升(10.2±1.0vs5.3±0.4，p<0.05)，供試品各組未見改善趨勢。供試品高劑量組血清bun相比模型對照組顯著上升(18.9±6.2vs10.2±1.0，p<0.001)。
模型對照組相比假手術組血清tp和alb未見明顯變化。給予供試品能劑量依賴性地降低血清tp和alb，且均具有統計學差異(p<0.05～0.001)。
各組的血生化指標參見表5，肌酐(μm，mean±sd)；尿素氮(mm，mean±sd)；總蛋白(g/l，mean±sd)；微量白蛋白(g/l，mean±sd)，注：++：p<0.01vs假手術組；*、**、***：p<0.05、0.01、0.001vs陰性對照組。
表5：大鼠血生化指標
4)尿生化指標：術后第15天模型對照組的24h尿量相比假手術組有少量降低，但不具統計學差異(26.0±12.2vs29.1±11.0，p>0.05)。供試品能劑量依賴性地減少動物的24h尿量，其中供試品高劑量組具有統計學意義(5.4±4.3vs26.0±12.2，p<0.001)。
術后第15天模型對照組的24h尿crea排泄量相比假手術組未見差異。供試品能劑量依賴性地減少動物的24h尿crea排泄量，其中供試品高劑量組具有統計學意義(27.5±11.9vs84.7±11.7，p<0.001)。
術后第15天模型對照組的24h尿bun排泄量相比假手術組有少量降低，但不具統計學差異(1.14±1.90vs1.51±1.15，p>0.05)。供試品能劑量依賴性地減少動物的24h尿bun排泄量，其中供試品高劑量的24h尿bun排泄量僅為0.02±0.04，但因標準差較大，未見統計學意義。
術后第15天模型對照組的24h尿tp排泄量相比假手術組未見差異。供試品能降低動物的24h尿tp排泄量，其中供試品高劑量組具有統計學意義(5.6±4.7vs14.6±6.8，p<0.05)。
術后第15天模型對照組的24h尿malb排泄量相比假手術組有少量升高，但不具統計學差異(0.27±0.63vs0.01±0.01，p>0.05)。供試品低、高劑量具有減少動物的24h尿malb排泄量的趨勢，但未見統計學差異。供試品中劑量具有升高動物的24h尿malb排泄量的趨勢，同樣未見統計學差異。
各組的尿生化指標參見表6，尿量(ml/24h，mean±sd)；肌酐(μmol/24h，mean±sd)；尿素(mmol/24h，mean±sd)；總蛋白(mg/24h，mean±sd)；微量白蛋白(mg/24h，mean±sd)，注：*、***：p<0.05、0.001vs陰性對照組。
表6：大鼠尿生化指標
5)病理：顯微鏡下腎臟可見間質纖維化，與模型對照組比較，在給予供試品后各組的腎臟纖維化發病率略有降低，但未見統計學差異。
其中，供試品連續給予輸尿管結扎的sd大鼠14天，第15天安樂死，假手術組物腎臟組織未見明顯異常改變，采用he染色，進行100倍放大，見圖1。
供試品連續給予輸尿管結扎的sd大鼠14天，第15天安樂死，假手術組動物腎臟組織未見明顯異常改變，采用siruisred染色，進行100倍放大，見圖2。
供試品連續給予輸尿管結扎的sd大鼠14天，第15天安樂死，模型對照組動物腎臟腎小管擴張，間質纖維化，采用he染色，進行100倍放大，見圖3。
供試品連續給予輸尿管結扎的sd大鼠14天，第15天安樂死，模型對照組動物腎臟腎小管間的間質纖維化，病變程度輕微，采用siruisred染色，進行100倍放大，見圖4。
供試品連續給予輸尿管結扎的sd大鼠14天，第15天安樂死，供試品低劑量組動物腎臟腎小管擴張，間質纖維化，采用he染色，進行100倍放大，見圖5。
供試品連續給予輸尿管結扎的sd大鼠14天，第15天安樂死，供試品低劑量組動物腎臟腎小管間的間質纖維化，病變程度輕微，采用siruisred染色，進行100倍放大，見圖6。
本實驗條件下，單側輸尿管結扎能導致sd大鼠輕度的腎間質纖維化和輕度的腎功能障礙。給予供試品每日兩次，每次10mg/kg體重具有改善腎間質纖維化的傾向。供試品的無毒性劑量為小于每日兩次，每次10mg/kg體重。致死劑量為小于每日兩次，每次200mg/kg體重。供試品的毒性靶器官需要進一步的研究。
上述實施例只為說明本發明的技術構思及特點，其目的在于讓熟悉此項技術的人士能夠了解本發明的內容并據以實施，并不能以此限制本發明的保護范圍。凡根據本發明精神實質所作的等效變化或修飾，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。