本發明屬于脂肪移植和干細胞治療領域，尤其涉及一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法。
背景技術：
脂肪干細胞和基質血管片段細胞在干細胞治療領域的應用越發廣泛，尤其是基質血管片段細胞的應用已在眾多國家展開臨床試驗，其在提高脂肪移植后保存率以及創面修復方面優勢明顯：1、脂肪組織新鮮分離得到的脂肪干細胞中含有大量的、具有生物學活性的自體脂肪干細胞；2、來源于自身脂肪組織，無免疫排斥反應；3、人體內儲量豐富；4、無需體外培養，降低細菌污染的風險。
然而現有技術在獲取脂肪凝膠的過程較為復雜，成本較高，對于脂肪凝膠的提取不能達到很好的效果，尤其是不能夠去除成熟的脂肪細胞及油脂，因此，不能為脂肪移植提供更好的材料。
技術實現要素：
為了解決上述問題，本發明旨在提供一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法，包括以下步驟：
1）用帶螺紋注射器抽取移植用脂肪顆粒，在抽取的脂肪顆粒中添加肝素鈉，上、下顛倒帶螺紋注射器將其混勻；
2）將上述脂肪顆粒放入第一離心管中，以1200g/min速度離心3min，離心后，脂肪顆粒分為上、下兩層，去除下層膨脹液后，將上層的脂肪顆粒轉移至第一注射器中；
3）將裝有脂肪顆粒的帶螺紋注射器與第二注射器通過脂肪破碎器連接，推動含有脂肪顆粒的帶螺紋注射器的活塞，將脂肪顆粒通過脂肪破碎器推注至對側的第一注射器中，推注速度為5-10ml/s，如此反復推注50次，得到破碎脂肪；
4）將裝有破碎脂肪的第二注射器擰下，通過脂肪乳化器與第三注射器對接，推動含有破碎脂肪的第二注射器活塞，將破碎脂肪通過脂肪乳化器推注至第三注射器中，推注速度為5-10ml/s，乳化一次，得到乳糜狀脂肪；
5）將乳糜狀脂肪放入到第二離心管中，按照乳糜狀脂肪的體積，加入聚乙二醇進行脂肪萃取，將乳糜狀脂肪和聚乙二醇的混合物上下緩慢顛倒，可見黃色油脂匯集，并有絮狀物生成，完成油脂的抽提；
6）將油脂抽提后混合液裝入第四注射器以3000g/min的速度離心10min，離心后，混合液分為上、中、下三層，下層為萃取劑層，中層為脂肪凝膠層，上層為油脂層；
7）輕推第四注射器，去掉下層的萃取劑后，將第四注射器與第五注射器通
過三通對接，收取中層脂肪凝膠層進入第五注射器中，得到高度濃縮的脂肪凝膠。
進一步地，所述步驟1）中的肝素鈉濃度為10u/ml。
進一步地，所述步驟3）中的脂肪顆粒通過脂肪破碎器進行脂肪破碎。
進一步地，所述步驟4）中的破碎脂肪通過脂肪乳化器進行乳化和過濾，乳化器的孔徑大小為0.6mm，乳化器上孔的數量為9個。
進一步地，所述步驟5）中乳糜狀脂肪的體積與聚乙二醇的體積的比例為10:1，用于乳糜狀脂肪的絮凝沉淀，從而進行油脂的抽提。
進一步地，所述步驟7）中的中層為高度濃縮的脂肪來源于干細胞和細胞外基質的移植材料。
優選地，所述移植材料用于面部年輕化及軟組織損傷修復。
進一步地，所述第一注射器、第二注射器、第三注射器、第四注射器、第五注射器、第一離心管以及第二離心管，在使用前均經過殺菌消毒，并放置于密閉袋中備用。
進一步地，本發明的一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠脂肪填充材料，其制備方法為上述所述的方法。
本發明的一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法的優點在于：
1.本發明在獲取脂肪顆粒后，采取了離心的方式，在簡單的操作流程下，致使脂肪顆粒先出現簡單的分層后，隨即去除脂肪顆粒中多余的膨脹液后，為后續的操作提供更為優質的脂肪顆粒。
2.本發明中的脂肪顆粒采用的是特殊結構的專用脂肪破碎器，將脂肪顆粒破碎的更徹底、更均勻。
3.本發明中破碎的脂肪可以通過脂肪乳化器進行乳化操作，而且本發明提供的脂肪乳化器不僅具有乳化破碎脂肪的功能，而且脂肪乳化器上設置有多個孔，孔所在的板相當于篩網，可用來對乳化后的脂肪進行過濾。
4.本發明采用乳糜狀脂肪與聚乙二醇的體積比為10:1的比例設置，可對乳糜狀脂肪進行油脂的抽提。
5.本發明中采用了3000g/min的離心速率對乳糜狀脂肪進行離心，使得乳糜狀脂肪達到最佳的分層效果。
6、本發明中采用的注射器在使用前均經過殺菌消毒，并放置于密閉袋中，保證了操作過程的嚴謹度。
7、本發明采用的脂肪凝膠制備方法不僅操作簡單，而且制得的脂肪凝膠比原有的脂肪體積濃縮了近10倍，為脂肪移植填充提供了良好的材料。
具體實施方式
以下將結合對比例和實施例，對本發明的富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法進行進一步地詳細說明。
本發明旨在提供一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法，包括以下步驟：
1）用帶螺紋注射器抽取移植用脂肪顆粒，在抽取的脂肪顆粒中添加肝素鈉，上、下顛倒帶螺紋注射器將其混勻；
2）將上述脂肪顆粒放入第一離心管中，以1200g/min速度離心3min，離心后，脂肪顆粒分為上、下兩層，去除下層膨脹液后，將上層的脂肪顆粒轉移至第一注射器中；
3）將裝有脂肪顆粒的帶螺紋注射器與第二注射器通過脂肪破碎器連接，推動含有脂肪顆粒的帶螺紋注射器的活塞，將脂肪顆粒通過脂肪破碎器推注至對側的第一注射器中，推注速度為5-10ml/s，如此反復推注50次，得到破碎脂肪；
4）將裝有破碎脂肪的第二注射器擰下，通過脂肪乳化器與第三注射器對接，推動含有破碎脂肪的第二注射器活塞，將破碎脂肪通過脂肪乳化器推注至第三注射器中，推注速度為5-10ml/s，乳化一次，得到乳糜狀脂肪；
5）將乳糜狀脂肪放入到第二離心管中，按照乳糜狀脂肪的體積，加入一定量的聚乙二醇進行脂肪萃取，將乳糜狀脂肪和聚乙二醇的混合物上下緩慢顛倒，可見黃色油脂匯集，并有絮狀物生成，完成油脂的抽提；
6）將油脂抽提后裝有混合液裝入第四注射器以3000g/min的速度離心10min，離心后，混合液分為上、中、下三層，下層為萃取劑層，中層為脂肪凝膠層，上層為油脂層；
7）輕推第四注射器，去掉下層的萃取劑后，將第四注射器與第五注射器通過三通對接，收取中層脂肪凝膠層進入第五注射器中，得到高度濃縮的脂肪凝膠。
所述步驟1）中的肝素鈉濃度為10u/ml。
所述步驟3）中的脂肪顆粒通過脂肪破碎器進行脂肪破碎。
所述步驟4）中的破碎脂肪通過脂肪乳化器進行乳化和過濾，乳化器的孔徑大小為0.6mm，乳化器上孔的數量為9個。
優選地，所述步驟5）中乳糜狀脂肪的體積與聚乙二醇的體積的比例為10:1，用于乳糜狀脂肪的絮凝沉淀，從而進行油脂的抽提。
所述步驟7）中的中層為高度濃縮的脂肪來源于干細胞和細胞外基質的移植材料。
所述移植材料用于面部年輕化及軟組織損傷修復。
所述第一注射器、第二注射器、第三注射器、第四注射器、第五注射器、第一離心管以及第二離心管，在使用前均經過殺菌消毒，并放置于密閉袋中備用。
本發明所提供的過濾器可用做乳化器，通過過濾的方式從而達到乳化的效果。
本發明的一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠脂肪填充材料，其制備方法為上述所述的方法。
以下，將通過不同的對比例，說明乳糜狀脂肪的體積與聚乙二醇的體積的比例分別為8:1、10:1、12:1的三種情況下對油脂抽取的結果有何不同作出相應地對比。
為保證對比結果的唯一性、正確性，本發明操作過程中除了乳糜狀脂肪的體積與聚乙二醇的體積的體積比不同之外，其他的數據因素均相同。
對比例一
一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法，包括以下步驟：
1）用帶螺紋注射器抽取移植用脂肪顆粒，在抽取的脂肪顆粒中添加肝素鈉，所述肝素鈉濃度為10u/ml，上、下顛倒帶螺紋注射器將其混勻；
2）將上述脂肪顆粒放入第一離心管中，以1200g/min速度離心3min，離心后，脂肪顆粒分為上、下兩層，去除下層膨脹液后，將上層的脂肪顆粒轉移至第一注射器中；
3）將裝有脂肪顆粒的帶螺紋注射器與第二注射器通過脂肪破碎器連接，推動含有脂肪顆粒的帶螺紋注射器的活塞，將脂肪顆粒通過脂肪破碎器推注至對側的第一注射器中，推注速度為5-10ml/s，如此反復推注50次，得到破碎脂肪；
4）將裝有破碎脂肪的第二注射器擰下，通過脂肪乳化器與第三注射器對接，推動含有破碎脂肪的第二注射器活塞，將破碎脂肪通過脂肪乳化器推注至第三注射器中，推注速度為5-10ml/s，乳化一次，得到乳糜狀脂肪；
5）將乳糜狀脂肪放入到第二離心管中，按照乳糜狀脂肪的體積，加入聚乙二醇進行脂肪萃取，所述乳糜狀脂肪與聚乙二醇的體積比為8:1，將乳糜狀脂肪和聚乙二醇的混合物上下緩慢顛倒，可見黃色油脂匯集，并有絮狀物生成，完成油脂的抽提；
6）將油脂抽提后裝有混合液裝入第四注射器以3000g/min的速度離心10min，離心后，混合液分為上、中、下三層，下層為萃取劑層，中層為脂肪凝膠層，上層為油脂層；
7）輕推第四注射器，去掉下層的萃取劑后，將第四注射器與第五注射器通過三通對接，收取中層脂肪凝膠層進入第五注射器中，得到高度濃縮的脂肪凝膠。
本對比例中采用的乳糜狀脂肪體積與聚乙二醇體積的體積比為8:1，由上述描述過程中聚乙二醇與乳糜狀脂肪的結合，油脂抽提能力較強，通過聚乙二醇對乳糜狀脂肪的絮凝沉淀，從而排除乳糜狀脂肪中除脂肪外的有機物質，通過操作發現，乳糜狀脂肪后期被離心分層后，上層油脂層很清澈，并且明顯發現，下層的聚乙二醇層較厚，乳糜狀脂肪中的有機高分子物質被絮凝沉淀后，剩余了大量的聚乙二醇。
對比例二
一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法，包括以下步驟：
1）用帶螺紋注射器抽取移植用脂肪顆粒，在抽取的脂肪顆粒中添加肝素鈉，所述肝素鈉濃度為10u/ml，上、下顛倒帶螺紋注射器將其混勻；
2）將上述脂肪顆粒放入第一離心管中，以1200g/min速度離心3min，離心后，脂肪顆粒分為上、下兩層，去除下層膨脹液后，將上層的脂肪顆粒轉移至第一注射器中；
3）將裝有脂肪顆粒的帶螺紋注射器與第二注射器通過脂肪破碎器連接，推動含有脂肪顆粒的帶螺紋注射器的活塞，將脂肪顆粒通過脂肪破碎器推注至對側的第一注射器中，推注速度為5-10ml/s，如此反復推注50次，得到破碎脂肪；
4）將裝有破碎脂肪的第二注射器擰下，通過脂肪乳化器與第三注射器對接，推動含有破碎脂肪的第二注射器活塞，將破碎脂肪通過脂肪乳化器推注至第三注射器中，推注速度為5-10ml/s，乳化一次，得到乳糜狀脂肪；
5）將乳糜狀脂肪放入到第二離心管中，按照乳糜狀脂肪的體積，加入聚乙二醇進行脂肪萃取，所述乳糜狀脂肪與聚乙二醇的體積比為10:1，將乳糜狀脂肪和聚乙二醇的混合物上下緩慢顛倒，可見黃色油脂匯集，并有絮狀物生成，完成油脂的抽提；
6）將油脂抽提后裝有混合液裝入第四注射器以3000g/min的速度離心10min，離心后，混合液分為上、中、下三層，下層為萃取劑層，中層為脂肪凝膠層，上層為油脂層；
7）輕推第四注射器，去掉下層的萃取劑后，將第四注射器與第五注射器通過三通對接，收取中層脂肪凝膠層進入第五注射器中，得到高度濃縮的脂肪凝膠。
本對比例中采用的乳糜狀脂肪體積與聚乙二醇體積的體積比為10:1，由上述描述過程中聚乙二醇與乳糜狀脂肪的結合，油脂抽提能力較強，通過聚乙二醇對乳糜狀脂肪的絮凝沉淀，從而排除乳糜狀脂肪中除脂肪外的有機物質，通過操作發現，乳糜狀脂肪后期被離心分層后，上層油脂層很清澈，并且明顯發現，下層的聚乙二醇層相比對比例一中的聚乙二醇層較薄，乳糜狀脂肪中的有機高分子物質被絮凝沉淀后，幾乎沒有聚乙二醇的剩余。
對比例三
一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法，包括以下步驟：
1）用帶螺紋注射器抽取移植用脂肪顆粒，在抽取的脂肪顆粒中添加肝素鈉，所述肝素鈉濃度為10u/ml，上、下顛倒帶螺紋注射器將其混勻；
2）將上述脂肪顆粒放入第一離心管中，以1200g/min速度離心3min，離心后，脂肪顆粒分為上、下兩層，去除下層膨脹液后，將上層的脂肪顆粒轉移至第一注射器中；
3）將裝有脂肪顆粒的帶螺紋注射器與第二注射器通過脂肪破碎器連接，推動含有脂肪顆粒的帶螺紋注射器的活塞，將脂肪顆粒通過脂肪破碎器推注至對側的第一注射器中，推注速度為5-10ml/s，如此反復推注50次，得到破碎脂肪；
4）將裝有破碎脂肪的第二注射器擰下，通過脂肪乳化器與第三注射器對接，推動含有破碎脂肪的第二注射器活塞，將破碎脂肪通過脂肪乳化器推注至第三注射器中，推注速度為5-10ml/s，乳化一次，得到乳糜狀脂肪；
5）將乳糜狀脂肪放入到第二離心管中，按照乳糜狀脂肪的體積，加入聚乙二醇進行脂肪萃取，所述乳糜狀脂肪與聚乙二醇的體積比為12:1，將乳糜狀脂肪和聚乙二醇的混合物上下緩慢顛倒，可見黃色油脂匯集，并有絮狀物生成，完成油脂的抽提；
6）將油脂抽提后裝有混合液裝入第四注射器以3000g/min的速度離心10min，離心后，混合液分為上、中、下三層，下層為萃取劑層，中層為脂肪凝膠層，上層為油脂層；
7）推第四注射器，去掉下層的萃取劑后，將第四注射器與第五注射器通過三通對接，收取中層脂肪凝膠層進入第五注射器中，得到高度濃縮的脂肪凝膠。
本對比例中采用的乳糜狀脂肪體積與聚乙二醇體積的體積比為12:1，由上述描述過程中聚乙二醇與乳糜狀脂肪的結合，油脂抽提能力較弱，通過聚乙二醇對乳糜狀脂肪的絮凝沉淀，從而排除乳糜狀脂肪中除脂肪外的有機物質，通過操作發現，乳糜狀脂肪后期被離心分層后，上層油脂層較為渾濁，并且明顯發現，下層的聚乙二醇層較薄，乳糜狀脂肪中的部分有機高分子物質沒有被絮凝沉淀，部分脂肪碎片存在于油脂層中。
通過上述對比例一、對比例二、對比例三的描述以及結果對比后發現，當乳糜狀脂肪體積與聚乙二醇體積的體積比為8:1時，乳糜狀脂肪中的有機高分子物質被絮凝沉淀，乳糜狀脂肪后期被離心分層后，下層的在聚乙二醇層較厚，即剩余有大量的聚乙二醇，所以，從原料節省的角度來說，此體積比在本發明中不是最佳的體積比。
當乳糜狀脂肪體積與聚乙二醇體積的體積比為12:1時，乳糜狀脂肪中的有機高分子物質并沒有完全被絮凝沉淀，乳糜狀脂肪后期被離心分層后，上層的在聚乙二醇層較薄，即聚乙二醇的量不滿足實驗操作的要求，所以，此體積比在本發明中是不能解決發明操作過程中問題的體積比。
當乳糜狀脂肪體積與聚乙二醇體積的體積比為10:1時，乳糜狀脂肪中的有機高分子物質被絮凝沉淀，乳糜狀脂肪后期被離心分層后，下層的在聚乙二醇層較對比例一薄，即剩余較少的聚乙二醇，所以，從原料節省的角度來說，此體積比在本發明中是最佳的體積比。
當乳糜狀脂肪體積與聚乙二醇體積的體積比大于10:1時，乳糜狀脂肪體積較多，聚乙二醇體積較少，這樣的話，兩者混勻后，因為聚乙二醇體積少于乳糜狀脂肪體積，將導致油脂抽提的能力變弱，會有部分有機成份沒有抽提干凈。由此，離心后的上層油脂層不是很清澈，并有部分脂肪碎片存在于油脂層中。
當乳糜狀脂肪體積與聚乙二醇體積的體積比小于10:1時，聚乙二醇體積多于乳糜狀脂肪的體積，油脂抽提會徹底一些。由此，離心后的上層油脂層會更清澈。但是相應地會有大量的聚乙二醇體積剩余，則造成了原料的浪費。
由此，可知，本發明中乳糜狀脂肪體積與聚乙二醇體積的體積比為10:1，是本發明的最佳體積比。
以下，將通過不同的實施例，說明油脂抽提后的乳糜狀混合液以3000g/min、3500g/min、2500g/min的速度離心10min三種情況下，對離心分層后所得到的的結果的不同作出相應地對比。
為保證對比結果的唯一性、正確性，本發明操作過程中除了油脂抽提后的乳糜狀混合液分別以3000g/min、3500g/min、2500g/min的速度離心不同之外，其他的數據因素均相同。
實施例一
一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法，包括以下步驟：
1）用帶螺紋注射器抽取移植用脂肪顆粒，在抽取的脂肪顆粒中添加肝素鈉，所述肝素鈉濃度為10u/ml，上、下顛倒帶螺紋注射器將其混勻；
2）將上述脂肪顆粒放入第一離心管中，以1200g/min速度離心3min，離心后，脂肪顆粒分為上、下兩層，去除下層膨脹液后，將上層的脂肪顆粒轉移至第一注射器中；
3）將裝有脂肪顆粒的帶螺紋注射器與第二注射器通過脂肪破碎器連接，推動含有脂肪顆粒的帶螺紋注射器的活塞，將脂肪顆粒通過脂肪破碎器推注至對側的第一注射器中，推注速度為5-10ml/s，如此反復推注50次，得到破碎脂肪；
4）將裝有破碎脂肪的第二注射器擰下，通過脂肪乳化器與第三注射器對接，推動含有破碎脂肪的第二注射器活塞，將破碎脂肪通過脂肪乳化器推注至第三注射器中，推注速度為5-10ml/s，乳化一次，得到乳糜狀脂肪；
5）將乳糜狀脂肪放入到第二離心管中，按照乳糜狀脂肪的體積，加入聚乙二醇進行脂肪萃取，所述乳糜狀脂肪與聚乙二醇的體積比為10:1，將乳糜狀脂肪和聚乙二醇的混合物上下緩慢顛倒，可見黃色油脂匯集，并有絮狀物生成，完成油脂的抽提；
6）將油脂抽提后裝有混合液裝入第四注射器以3000g/min的速度離心10min，離心后，混合液分為上、中、下三層，下層為萃取劑層，中層為脂肪凝膠層，上層為油脂層；
7）推第四注射器，去掉下層的萃取劑后，將第四注射器與第五注射器通過三通對接，收取中層脂肪凝膠層進入第五注射器中，得到高度濃縮的脂肪凝膠。
本實施例中采用的離心速度為3000g/min，通過操作發現，所得到的中層脂肪凝膠層，收取中層脂肪凝膠層后所得到的的高度濃縮的脂肪凝膠是原有脂肪體積的十分之一，并且上層油脂層較為清澈。
實施例二
一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法，包括以下步驟：
1）用帶螺紋注射器抽取移植用脂肪顆粒，在抽取的脂肪顆粒中添加肝素鈉，所述肝素鈉濃度為10u/ml，上、下顛倒帶螺紋注射器將其混勻；
2）將上述脂肪顆粒放入第一離心管中，以1200g/min速度離心3min，離心后，脂肪顆粒分為上、下兩層，去除下層膨脹液后，將上層的脂肪顆粒轉移至第一注射器中；
3）將裝有脂肪顆粒的帶螺紋注射器與第二注射器通過脂肪破碎器連接，推動含有脂肪顆粒的帶螺紋注射器的活塞，將脂肪顆粒通過脂肪破碎器推注至對側的第一注射器中，推注速度為5-10ml/s，如此反復推注50次，得到破碎脂肪；
4）將裝有破碎脂肪的第二注射器擰下，通過脂肪乳化器與第三注射器對接，推動含有破碎脂肪的第二注射器活塞，將破碎脂肪通過脂肪乳化器推注至第三注射器中，推注速度為5-10ml/s，乳化一次，得到乳糜狀脂肪；
5）將乳糜狀脂肪放入到第二離心管中，按照乳糜狀脂肪的體積，加入聚乙二醇進行脂肪萃取，所述乳糜狀脂肪與聚乙二醇的體積比為10:1，將乳糜狀脂肪和聚乙二醇的混合物上下緩慢顛倒，可見黃色油脂匯集，并有絮狀物生成，完成油脂的抽提；
6）將油脂抽提后裝有混合液裝入第四注射器以3500g/min的速度離心10min，離心后，混合液分為上、中、下三層，下層為萃取劑層，中層為脂肪凝膠層，上層為油脂層；
7）推第四注射器，去掉下層的萃取劑后，將第四注射器與第五注射器通過三通對接，收取中層脂肪凝膠層進入第五注射器中，得到高度濃縮的脂肪凝膠。
本實施例中采用的離心速度為3500g/min，加大了相應地離心速度，相應地對離心裝置的性能要求更高，通過操作發現，所得到的中層脂肪凝膠層，收取中層脂肪凝膠層后所得到的的高度濃縮的脂肪凝膠仍然是原有脂肪體積的十分之一，并且上層油脂層較為清澈,但從操作過程中節省能量的角度，此離心速度并不是最佳的離心速度。
實施例三
一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法，包括以下步驟：
1）用帶螺紋注射器抽取移植用脂肪顆粒，在抽取的脂肪顆粒中添加肝素鈉，所述肝素鈉濃度為10u/ml，上、下顛倒帶螺紋注射器將其混勻；
2）將上述脂肪顆粒放入第一離心管中，以1200g/min速度離心3min，離心后，脂肪顆粒分為上、下兩層，去除下層膨脹液后，將上層的脂肪顆粒轉移至第一注射器中；
3）將裝有脂肪顆粒的帶螺紋注射器與第二注射器通過脂肪破碎器連接，推動含有脂肪顆粒的帶螺紋注射器的活塞，將脂肪顆粒通過脂肪破碎器推注至對側的第一注射器中，推注速度為5-10ml/s，如此反復推注50次，得到破碎脂肪；
4）將裝有破碎脂肪的第二注射器擰下，通過脂肪乳化器與第三注射器對接，推動含有破碎脂肪的第二注射器活塞，將破碎脂肪通過脂肪乳化器推注至第三注射器中，推注速度為5-10ml/s，乳化一次，得到乳糜狀脂肪；
5）將乳糜狀脂肪放入到第二離心管中，按照乳糜狀脂肪的體積，加入聚乙二醇進行脂肪萃取，所述乳糜狀脂肪與聚乙二醇的體積比為10:1，將乳糜狀脂肪和聚乙二醇的混合物上下緩慢顛倒，可見黃色油脂匯集，并有絮狀物生成，完成油脂的抽提；
6）將油脂抽提后裝有混合液裝入第四注射器以2500g/min的速度離心10min，離心后，混合液分為上、中、下三層，下層為萃取劑層，中層為脂肪凝膠層，上層為油脂層；
7）推第四注射器，去掉下層的萃取劑后，將第四注射器與第五注射器通過三通對接，收取中層脂肪凝膠層進入第五注射器中，得到高度濃縮的脂肪凝膠。
本實施例中采用的離心速度為2500g/min，相比于實施例一、二，此離心速速對裝置的性能要求最低，但是，通過操作發現，所得到的中層脂肪凝膠層，收取中層脂肪凝膠層后所得到的的高度濃縮的脂肪凝膠是原有脂肪體積的八分之一，并沒有達到最好的濃縮效果,并且上層油脂層較為渾濁。
通過離心的方式，使絮狀脂肪碎片形成沉淀，離心轉速越高，上層油脂層越清澈，中層脂肪凝膠層體積越小。而轉速過低時，上層油脂層會渾濁，脂肪凝膠層體積較大。但是離心轉速不宜太高，否則將造成離心裝置的過度磨損，大大地減短離心裝置的使用壽命。
因此，通過實施例一、實施例二、實施例三的結果對比后，發現當離心速度為3000g/min時，能夠達到最好的濃縮效果，而且對離心裝置的性能要求也不是很高。
因此，離心速度為3000g/min是最佳的離心速度。
本發明公開了一種富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠制備方法，通過物理切割方法將移植脂肪材料中的成熟脂肪細胞及細胞外基質進行破碎，使用脂肪乳化器進行過濾乳化，去除脂肪中未破碎成分，得乳糜狀脂肪，采用絮凝沉淀技術，使用聚乙二醇將乳糜狀脂肪中的油脂匯集并去除，得富含脂肪干細胞和細胞外基質的脂肪凝膠，本方法獲取的脂肪凝膠因為去除成熟的脂肪細胞及油脂，使原有脂肪體積濃縮了近十倍，脂肪干細胞及細胞外基質含量遠高于普通脂肪，為脂肪移植填充提供了良好的材料。
在本說明書的描述中，參考術語“一個實施例”、“一些實施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結合該實施例或示例描述的具體特征、結構、材料或者特點包含于本發明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術語的示意性表述不必針對的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結構、材料或者特點可以在任一個或多個實施例或示例中以合適的方式結合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領域的技術人員可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特征進行結合和組合。