本發明屬于生物醫藥領域，涉及瑞普特羅及其衍生物的新用途，具體涉及瑞普特羅及其衍生物在制備預防和/或治療脂肪肝產品中的應用。

背景技術：

瑞普特羅為選擇性激動支氣管平滑肌β2受體激動劑，目前臨床用于支氣管哮喘，喘息型支氣管炎的治療。其擴張支氣管作用強于間羥異丙腎上腺素，耐受性佳，口服后30min起效，維持時間4-6h，對心率、心排血量和血壓影響較小，而瑞普特羅在脂肪肝疾病中的治療作用目前尚無任何報道。

脂肪肝是指由于各種原因引起的肝細胞內脂肪堆積過多的病變。當脂肪含量超過肝濕重5％時(正常為1～2％)，或組織學上脂肪變性超過30％肝實質時稱為脂肪肝。脂肪肝的主要病理生理學特征為肝細胞內脂滴聚集，肝細胞氣球樣變以及腫脹的線粒體。胰島素抵抗、內臟脂質沉積、炎癥和線粒體功能障礙為脂肪肝發展過程中重要的病理過程。我國目前脂肪肝的發病率已超過18％，脂肪肝已經成為各種慢性肝臟疾病的主要病因，也是隱源性肝硬化的首因，而其發病趨年輕化趨勢。

目前臨床并無有效的治療脂肪肝的藥物。在臨床治療中，仍以去除病因、積極治療原發病和堅持合理飲食制度為主，而藥物僅起輔助作用。常用藥物主要針對降血脂、肝細胞保護等方面，缺乏直接作用于肝臟脂質沉積的有效治療手段。

技術實現要素：

本發明的目的之一是提供一種瑞普特羅及其衍生物的新用途。

本發明所提供的瑞普特羅及其衍生物的新用途是其在制備預防和/或治療脂肪肝產品中的應用。

本發明所述的瑞普特羅及其衍生物的結構如通式i所示:

通式i中，q1和q2各自獨立地選自氫、羥基、鹵素、直鏈或支鏈烷基、環烷基、三鹵烷基、烷氧基、芳基、雜芳基、-(co)r1和-s(o2)r2；其中r1和r2各自獨立地選自c1-c4直鏈或支鏈烷基、氨基；

具體地，當q1和q2均為羥基時，通式i所示化合物為瑞普特羅(reproterol)。

進一步，所述瑞普特羅及其衍生物在制備如下任一產品中的應用也屬于本發明的保護范圍：

(i)降低患病機體肝臟組織中甘油三脂含量的產品；

(ii)減輕患病機體肝臟組織中脂肪變性的產品；

(iii)緩解患病機體肝臟組織中肝臟脂滴蓄積的產品；

(iv)降低患病機體肝臟組織中膽固醇含量的產品。

以上所述患病機體可為具有脂肪肝臨床癥狀的機體，如確診為脂肪肝的患者。

以上所述產品具體可為藥物或保健品。

本發明的再一個目的是提供一種預防和/或治療脂肪肝，降低患病機體肝臟組織中甘油三脂含量、減輕患病機體肝臟組織中脂肪變性、緩解患病機體肝臟組織中肝臟脂滴蓄積或降低患病機體肝臟組織中膽固醇含量的產品。

所述產品包含瑞普特羅或其衍生物。

以上所述患病機體可為具有脂肪肝臨床癥狀的機體，如確診為脂肪肝的患者。

以上所述產品具體可為藥物或保健品。

實驗證明，使用瑞普特羅處理脂肪肝模型大鼠，可以顯著減輕肝臟脂肪變性、減輕肝臟脂滴蓄積以及減輕肝臟甘油三酯含量。因此，瑞普特羅及其衍生物對于預防和/或治療脂肪肝具有重要意義。

附圖說明

圖1為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的體重變化對比圖。

圖2為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂肪變性外觀對比圖。

圖3為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂肪變性對比圖。cd+vehicle:普通飲食組，hfd+vehicle：高脂飲食給予安慰劑組，hfd+aims-r：高脂飲食給予瑞普特羅藥物組。

圖4為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂滴蓄積對比圖。cd+vehicle:普通飲食組，hfd+vehicle：高脂飲食給予安慰劑組，hfd+aims-r：高脂飲食給予瑞普特羅藥物組。

圖5為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂肝臟甘油三酯含量對比圖。

圖6為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂肝臟膽固醇含量對比圖。

圖7為以不同濃度的瑞普特羅處理hepg2細胞對油酸誘導的脂滴蓄積的作用圖。圖7柱狀圖中依次為給予dmso，給予100umoa(油酸),100umoa+12.5um瑞普特羅,100umoa+25um瑞普特羅,100umoa+50um瑞普特羅,100umoa+100um瑞普特羅。

圖8為以不同濃度的瑞普特羅處理hepg2細胞對油酸誘導的細胞內甘油三酯蓄積的作用圖。

具體實施方式

下面通過具體實施例對本發明進行說明，但本發明并不局限于此。

下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法；下述實施例中所用的試劑、生物材料等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。

下述實施例中所采用的瑞普特羅購自美國torontoresearchchemicalsinc公司，貨號為r144650，商品名為reproterol(瑞普特羅)。(文中涉及到的藥物或者圖上標記r均指瑞普特羅)

實施例瑞普特羅的藥效實驗

22只雄性sd大鼠(6周齡)購自spf試驗動物中心，適應性喂養1周后，開始試驗，將大鼠按體重進行蛇形分組，分為3組。其中，正常飲食對照組給予10％脂肪含量飼料，高脂飲食組及用藥組均給予45％脂肪含量飼料。8周時，高脂飲食組已經出現顯著的體重增加(圖1)，正常飲食對照組及高脂飲食組均開始應用dmso灌胃處理，用藥組開始應用瑞普特羅3.6mg/kg/day。(大鼠飼料購自江蘇美迪森生物醫藥有限公司，瑞普特羅購自torontoresearchchemicalsinc)。12周時稱重，其結果如圖1所示。

圖1為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的體重變化對比圖。

由圖1可知：較高脂飲食組相比，給藥組體重有減輕趨勢。

大鼠稱重后，應用1％戊巴比妥鈉，腹腔注射麻醉大鼠，打開腹腔，給大鼠肝臟照相。

圖2為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂肪變性外觀對比圖。

由圖2可知：較高脂飲食組，給藥組肝臟脂肪變性顯著減輕。

打開腹腔后，應用預冷的pbs，全身灌流，之后取一小塊肝臟組織，投入4％多聚甲醛中固定48h后，蔗糖脫水，石蠟包埋，切片，常規he染色。

圖3為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂肪變性對比圖。

由圖3可知：較高脂飲食組，給藥組肝臟臟脂肪變性顯著減輕。

經過固定及脫水的肝臟組織，應用oct包埋，液氮速凍，-80℃保存。染色時，切片先平衡至室溫，4％多聚甲醛室溫固定10min，蒸餾水3min洗3次，60％的異丙醇同化3-5min，將切片浸到油紅o工作液中，37℃，避光染色30min-2h。之后切片迅速依次經過60％的異丙醇和70％的酒精，蒸餾水洗1次，蘇木素復染(染細胞核30s-30min)，自來水洗去浮色，封片。

圖4為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂滴蓄積對比圖。

由圖4可知：較高脂飲食組，給藥組肝臟脂滴蓄積有所緩解。

取約50mg左右肝臟組織，按照北京普利萊基因有限公司組織細胞甘油三酯酶法測定試劑盒e1013操作說明書進行操作。

圖5為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂肝臟甘油三酯含量對比圖。

由圖5可知：較高脂飲食組，給藥組肝臟內甘油三酯含量明顯減少。

取約50mg左右肝臟組織，按照北京普利萊基因有限公司組織細胞總膽固醇酶法測定試劑盒e1015操作說明書進行操作。

圖6為正常飲食對照組、高脂飲食組、高脂飲食及瑞普特羅給藥組sd大鼠的肝臟脂肝臟膽固醇含量對比圖。

由圖6可知：較高脂飲食組，給藥組肝臟內膽固醇含量明顯減少。

細胞實驗：hepg2細胞用含10％胎牛血清的dmem培養液，于37℃，5％co2條件下培養，細胞長至90％融合時，以1：3傳代，以相同密度種植到六孔板中，融合度達50％時進行無血清培養12h，應用油酸100um誘導脂滴生成，同時再分別給予dmso或瑞普特羅處理48h。

圖7為以不同濃度的瑞普特羅處理hepg2細胞對油酸誘導的脂滴蓄積的作用圖。

由圖7可知：在hepg2上給予瑞普特羅處理細胞48h，能顯著緩解油酸誘導的脂滴蓄積。

圖8為瑞普特羅10um處理hepg2細胞對油酸誘導的細胞內甘油三酯蓄積的作用圖。

由圖8可知：在hepg2上給予瑞普特羅10um處理細胞48h，能顯著逆轉油酸誘導的細胞內甘油三酯蓄積。