本發(fā)明涉及一種醋延胡索粉直接口服中藥飲片，屬于醫(yī)藥技術領域。

背景技術：

延胡索為罌粟科植物延胡索corydali5yanhusuow.t.wang的干燥塊莖。夏初莖葉枯萎時采挖，除去須根，洗凈，置沸水中煮至恰無白心時，取出，曬干。

延胡索是一種常見的中藥材，塊莖為著名的常用中藥，含20多種生物堿，用于行氣止痛、活血散瘀、跌打損傷等。

延胡索所含有的化學成分主要為生物堿，從塊莖中共提出生物堿10余種，其中經鑒定的有紫堇堿(corydaline)、dl-四氫掌葉防己堿(dl-tetra-hydropalmatine)、原阿片堿(protopine)、l-四氫黃連堿(l-tetrahy-drocoptisine，l-stylopin)、dl-四氫黃連堿、l-四氫非洲防己堿(l-tetrahy-drocolumbamine)、紫堇鱗莖堿(corybulbine)、β-高白屈菜堿(β-homoche-lidonine)、黃連堿(coptisine)、去氫紫堇堿(de-hydrocorydaline)，還有紫堇達明堿(corydalmine即紫堇鱗莖堿)、去氫紫堇達明堿。其藥理研究表明：1)鎮(zhèn)痛作用：延胡索乙素為鎮(zhèn)痛主要有效成分，其鎮(zhèn)痛作用較嗎啡弱但優(yōu)于復方阿司匹林，對鈍痛的作用優(yōu)于銳痛。與嗎啡等麻醉性鎮(zhèn)痛藥相比副作用少而安全，沒有成癮性。鎮(zhèn)痛時對呼吸沒有明顯抑制，也無便秘等副作用。2)鎮(zhèn)靜、催眠作用：延胡索、左旋四氫巴馬汀有鎮(zhèn)靜催眠作用。左旋四氫巴馬汀引起的睡眠淺而易醒，并具有一定的鎮(zhèn)吐和降低體溫作用，能對抗苯丙胺的中樞興奮作用和毒性作用。鎮(zhèn)靜催眠作用機制主要與阻滯腦內da受體的功能有關。3)抗心肌缺血：延胡索還能擴張外周血管，降低外周阻力。4)抑制胃酸分泌、抗?jié)冏饔?)其他藥理作用：抗心律失常、保護腦缺血再灌注損傷、平滑肌松弛作用。

《中國藥典》2015版一部延胡索【炮制】項下的飲片產品為醋延胡索(粉)，即取延胡索，凈制，醋炙，干燥，碾成細粉，其用法為吞服(直接口服)。細粉按《中國藥典》的標準為95％通過六號篩(150μm±6.6μm，即100篩目)。

醋延胡索(粉)質量標準中的“浸出物”及含量測定樣品的制備，往往都是使用醇或有機溶劑，因此，所測定的結果只能反映其本身的質量，不能說明指標成分或有效成分經口服后在體內能溶出或釋放“量”的真實情況，使醋延胡索(粉)作為直接口服飲片的最佳生產工藝的設計和選擇缺乏科學依據，由此，醋延胡索(粉)對心血管的恢復功能和臨床療效也受到很大影響或得不到保障。

中藥粉末的滅菌歷來是中藥制藥行業(yè)中一大難題。干熱、高溫高壓蒸汽等物理滅菌法，環(huán)氧乙烷等化學滅菌法，以及鈷-60等伽馬射線滅菌法均存在重大缺陷，其滅菌方式有的滅菌效果欠佳，有的對不同質地中藥中所含有的不同結構類型的有效成分產生破壞和部分化學性質改變，有的留有核物質殘留，有的則存在污染因素等等。

直接口服中藥飲片是近年來國家有關藥品法規(guī)剛剛定義的一類新型的現(xiàn)代中藥飲片，除了《中國藥典》2015版四部對直接口服飲片列有微生物限度標準外，至今仍然沒有國家統(tǒng)一的直接口服中藥飲片質量執(zhí)行標準，醋延胡索(粉)產品也不例外。此外，由于每味中藥所含有的不同類型結構的化學成分非常復雜，加之產地不同，品質不一樣，其含量質量要求往往是以其指標成分或有效成分的含量達到某一值以上(毒性成分除外)，加上有效成分大都儲存其細胞內，如此種種原因，醋延胡索(粉)作為藥品，至今仍未有數(shù)據性，科學性的“有效期”。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種醋延胡索粉直接口服中藥飲片。

本發(fā)明的醋延胡索粉直接口服中藥飲片，其制備工藝特征如下：

1)將延胡索原藥材檢驗、凈制、醋炙、干燥后粉碎，得到中間體；

2)檢驗中間體，包裝后進行電子束輻照滅菌；

3)進行成品標準檢驗，包裝后得到成品；

所述的步驟1)中，粉碎條件如下：在d級潔凈區(qū)，應用吸塵式低溫粉碎技術，將延胡索原藥材粉碎成100目；

所述的步驟2)中，電子束輻照滅菌的照射劑量為3-10kgy。

優(yōu)選地，

所述的步驟2)中，電子束輻照滅菌的照射劑量為3kgy。

本項發(fā)明是引用現(xiàn)代天然藥物分析手段和方法，模擬人體體溫37℃，對醋延胡索(粉)進行水浸實驗(可較為真實地反映醋延胡索(粉)在體內溶出或釋放可供吸收的成分情況)，在相同的10、30、60、90和120分鐘的各時間段內，醋延胡索(粉)分別以滅菌前、滅菌后水浸出物的重量為指標，確定了『醋延胡索(粉)』的質量，以及利用快速、低溫、高效、無污染、無殘留和不會破壞有效成分的電子束輻照滅菌技術的最佳gmp生產工藝。同時，建立了符合現(xiàn)行國家相關藥品標準的『醋延胡索(粉)』直接口服中藥飲片的質量執(zhí)行標準。本發(fā)明可使醋延胡索(粉)滅菌后產品較滅菌前產品的水浸出物重量提高10～30％，微生物限度檢驗結果則能完全符合相關直接口服飲片的標準，同時，通過新藥加速考察實驗方法，以『醋延胡索(粉)』中的延胡索乙素含量為指標，初步考察了其產品的【有效期】。

附圖說明

圖1為醋延胡索粉(100目，3克)滅菌前后(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)比較；

圖2為醋延胡索粉(100目，3克)滅菌前后(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)比較；

圖3為醋延胡索粉(100目，3克)的加速穩(wěn)定性考察；

表1為醋延胡索粉(100目，3克)滅菌前(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)；

表2為醋延胡索粉(100目，3克)滅菌后(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)；

表3為醋延胡索粉(100目，3克)滅菌前(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)；

表4為醋延胡索粉(100目，3克)滅菌后(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)；

表5為電子束照射劑量對100目醋延胡索(粉)的滅菌效果；

表6為醋延胡索(粉)100目微生物限度穩(wěn)定性檢查。

具體實施方式

本發(fā)明中，醋延胡索(粉)cuyanhusuofen說明如下：

【來源】本品為罌粟科植物延胡索corydali5yanhusuow.t.wang的干燥塊莖。

【炮制】本品按延胡索【炮制】項下延胡索經凈制、切制、干燥(離地)、醋炙、過篩、粉碎、干燥、包裝制成的小包裝醋延胡索(粉)(直接口服中藥飲片)。

【成品性狀】本品為綠黃色粉末。微具醋香氣。

【裝量差異】±7％[參照《中國藥典》2015年版四部通則0115]。

【鑒別】(1)本品粉末綠黃色。糊化淀粉粒團塊淡黃色或近無色。下皮厚壁細胞綠黃色，細胞多角形、類方形或長條形，壁稍彎曲，木化，有的成連珠狀增厚，紋孔細密。螺紋導管直徑16～32μm。

(2)取本品粉末lg，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加濃氨試液調至堿性，用乙醚振搖提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。再取延胡索乙素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2015年版四部通則0502)試驗，吸取上述三種溶液各2～3μl，分別點于同一用1％氫氧化鈉溶液制備的硅膠g薄層板上，以甲苯-丙酮(9:2)為展開劑，展開，取出，晾干，置碘缸中約3分鐘后取出，揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

【檢查】水分不得過15.0％。(《中國藥典》2015年版四部通則0832第二法)。

總灰分不得過4.0％(《中國藥典》2015年版四部通則2302)。

二氧化硫殘留量照二氧化硫殘留量測定法(《中國藥典》2015年版四部通則2331)測定，不得過150mg/kg。

【浸出物】照醇溶性浸出物測定法(《中國藥典》2015年版四部通則2201)項下的熱浸法測定，用稀乙醇作溶劑，不得少于13.0％。

【含量測定】照高效液相色譜法(《中國藥典》2015年版四部通則0512)測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.1％磷酸溶液(三乙胺調ph值至6.0)(55:45)為流動相；檢測波長為280nm。理論板數(shù)按延胡索乙素峰計算應不低于3000。

對照品溶液的制備取延胡索乙素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含46μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約0.5g，精密稱定，置平底燒瓶中，精密加入濃氨試液-甲醇(1:20)混合溶液50ml，稱定重量，冷浸1小時后加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用濃氨試液-甲醇(1:20)混合溶液補足減失的重量，搖勻，濾過。精密吸取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

測定法精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1，分別注入液相色譜儀，測定，即得。

本品按干燥品計算，含延胡索乙素(c21h25n04)不得少于0.040％。

微生物限度檢查需氧菌總數(shù)可接受的最大菌數(shù)為10³cfu；霉菌和酵母菌總數(shù)可接受的最大菌數(shù)為10²cfu；不得檢出沙門菌(10g)；耐膽鹽革蘭陰性菌應小于10⁴cfu(lg)。

【性味與歸經】辛、苦，溫。歸肝、脾經。

【功能與主治】活血，行氣，止痛。用于胸脅、脘腹疼痛，胸痹心痛，經閉痛經，產后瘀阻，跌撲腫痛。

【規(guī)格】每袋3克。

【用法與用量】3～10g；粉末吞服，一次1.5～3g。

【貯藏】置干燥處。防蛀。

【有效期】暫定三年。

編制依據：《中國藥典》2015年版一部延胡索項下標準；

裝量差異依據《中國藥典》2015年版四部通則0115散劑項下標準，本品規(guī)格為每袋3克，根據散劑項下標示裝量：1.5g以上至6g，裝量差異限度應為±7％。

微生物限度檢查依據《中國藥典》2015年版四部通則1107非無菌藥品微生物限度標準，非無菌藥品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)照“非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數(shù)法(通則1105)”檢査；非無菌藥品的控制菌照“非無菌產品微生物限度檢査：控制菌檢查法(通則1106)”檢查。

實施例1

延胡索原藥材120公斤，分3個實驗批次(每批次40.0公斤)，按藥品gmp規(guī)范，分別經凈制、醋炙、干燥、粉碎(d級潔凈區(qū)，應用吸塵式低溫粉碎技術，分別粉碎成100目)、中間體(檢驗)、定量包裝(3克/袋，d級潔凈區(qū))、電子束輻照滅菌(每批次剩下定量包裝的30％不進行滅菌工序)，所得到的產品(供試品)供本發(fā)明的醋延胡索(粉)最佳gmp生產工藝及其質量標準實驗研究用。

1﹑『醋延胡索(粉)』直接口服中藥飲片產品的生產工藝：

電子束輻照滅菌工藝

電子束輻照滅菌技術已非常成熟，用電子加速器產生的高能電子束照射可使一些物質產生物理、化學和生物學效應，并能有效地殺滅病菌、病毒和害蟲。這一技術已被廣泛應用于工業(yè)生產中的材料改性、新材料制作、環(huán)境保護、加工生產、醫(yī)療衛(wèi)生用品滅菌消毒和食品滅菌保鮮等。它同鈷源輻照一樣，具有常溫、無損傷、無殘毒、環(huán)保、低能耗、運行操作簡便、自動化程度高、適宜于大規(guī)模工業(yè)化生產等特點。與鈷源相比，其最大優(yōu)點是輻照束流集中定向，能源利用充分，輻照效率高，不產生放射性廢物。電子加速器輻照裝置具有明顯的價格和經濟優(yōu)勢。為指導和規(guī)范輻照技術在中藥滅菌中的正確應用，保證中藥藥品的安全、有效、質量穩(wěn)定，國家食品藥品監(jiān)督管理總局于2015年11月制定了《中藥輻照滅菌技術指導原則》，對中藥輻照滅菌應進行中藥個體的和針對性的輻照前后的對比研究，包括所含成分種類或含量的變化情況的對比研究等等。基于上述指導原則，本項發(fā)明對醋延胡索(粉)電子束輻照滅菌的照射劑量、滅菌效果、水浸出物重量、延胡索乙素含量的變化進行了詳細的考察研究。

①電子束輻照滅菌的照射劑量及滅菌效果:

分別使用3、5、10kgy的照射劑量對100目的醋延胡索(粉)(3克/袋)進行照射，并進行照射前后滅菌效果考察(見表5)。

結果表明，本項發(fā)明引用不同輻照劑量即3、5、10kgy的電子束照射劑量完全能達到《中國藥典》2015版四部對直接口服飲片的微生物限度標準。為減少輻照對醋延胡索(粉)所含成分種類及含量變化可能造成的影響，根據本項發(fā)明滅菌數(shù)據表明并確定醋延胡索(粉)的電子束輻照滅菌的最佳制備工藝輻照劑量為3kgy。

②電子束輻照滅菌對醋延胡索(粉)水浸出物量及延胡索乙素含量的影響：

高能電子束輻照可使一些生物細胞體產生物理、化學和生物學效應，尤其是能使細胞壁產生留痕或破碎，促進細胞內容物溶出。

按《中國藥典》2015年版一部延胡索項下含量測定方法，測定100目的醋延胡索(粉)(3克)電子束輻照滅菌前后水浸出物量(毫克)及水浸出物中延胡索乙素的溶出量(毫克)，本發(fā)明考察了電子束輻照滅菌對醋延胡索(粉)水浸出物量及延胡索乙素溶出量的影響(見表1-4，圖1-2)。結果顯示，應用本發(fā)明的電子束輻照(3kgy照射劑量)滅菌工藝，可顯著提高相應的醋延胡索(粉)的水浸出物量及延胡索乙素溶出量。

③電子束輻照滅菌對醋延胡索(粉)有效期的影響：

為考察電子束輻照滅菌對醋延胡索(粉)所含成分種類或含量的變化、質量的長期穩(wěn)定性等與產品的有效期有關因素的影響，本發(fā)明應用新藥的加速穩(wěn)定性的研究方法，在40±2℃溫度及65％相對濕度的環(huán)境中存放9個月，每個月按質量標準中的含量測定方法，測定延胡索中的延胡索乙素的含量，同時，選擇不同月份，依直接口服飲片微生物限度檢查方法對醋延胡索(粉)微生物限度進行檢驗，測定結果說明(見表6)，電子束輻照滅菌工藝對『醋延胡索(粉)』產品的長期穩(wěn)定性沒有影響，應用本發(fā)明gmp生產工藝的生產的『醋延胡索(粉)』直接口服飲片產品的有效期可達10年。

2﹑『醋延胡索(粉)』直接口服中藥飲片質量標準：

本發(fā)明旨在建立高于《中國藥典》2015版一部延胡索項下、《中國藥典》2015版四部相關直接口服中藥飲片標準、有效期的『醋延胡索(粉)』直接口服中藥飲片質量執(zhí)行標準，以確保『醋延胡索(粉)』直接口服中藥飲片質量。

在《中國藥典》2015版一部延胡索項下的質量執(zhí)行標準為普通飲片標準，依照該項下標準、《中國藥典》2015版四部直接口服飲片微生物限度檢查標準以及相關標準，制定了完全符合現(xiàn)行國家有關直接口服飲片藥品標準的『醋延胡索(粉)』直接口服中藥飲片的質量執(zhí)行標準。

按『醋延胡索(粉)』直接口服中藥飲片質量標準各項下要求，檢驗連續(xù)生產的三個批次的『醋延胡索(粉)』產品，均應符合規(guī)定。

表1、醋延胡索(粉)(100目，3克)滅菌前(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)

表2、醋延胡索(粉)(100目，3克)滅菌后(37±1℃)水浸出物的重量(毫克)

表3、醋延胡索(粉)(100目，3克)滅菌前(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)

表4、醋延胡索(粉)(100目，3克)滅菌后(37±1℃)水提延胡索乙素含量(毫克)

表5、電子束照射劑量對100目的醋延胡索(粉)的滅菌效果

表6、醋延胡索(粉)100目微生物限度穩(wěn)定性檢查