本發(fā)明涉及一種護膚品技術(shù)領域，具體涉及一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水及其制備方法。
背景技術(shù)：
超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，ec1.15.1.1，簡稱sod)，是廣泛存在生物體內(nèi)的酸性金屬酶，能夠催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫，有效地防御自由基對有機體的傷害，是生物體內(nèi)最佳的自由基清除劑，具有抗炎癥、抗病毒、抗輻射、抗衰老等作用，被廣泛應用在醫(yī)藥、化妝品、食品等領域。
海洋微生物為了適應極端的海洋環(huán)境，具有低溫、耐壓、嗜鹽等特性，其分泌的sod也進化出許多有價值的酶學特性，如對溫度具有更高的抗性，在耐受理化方面也表現(xiàn)出較高的穩(wěn)定性等。海洋低溫酶具有低溫下高活力及高催化效率，可大大縮短處理時間并省卻昂貴的加熱/冷卻系統(tǒng)，因而在節(jié)能方面有相當大的進步；經(jīng)過溫和的熱處理即可使低溫酶的活力喪失，而低溫或適溫處理不會影響產(chǎn)品的品質(zhì)等特性。鑒于低溫sod在自然和生理溫度下的應用優(yōu)勢，海洋低溫sod在醫(yī)療保健、食品、化妝品等方面具有廣泛的應用前景和開發(fā)潛力。
爽膚水也稱緊膚水、化妝水等，它的作用就在于再次清潔以恢復肌膚表面的酸堿值，并調(diào)理角質(zhì)層，使肌膚更好地吸收，并為使用保養(yǎng)品做準備。所以洗完臉之后，使用爽膚水可以迅速補充水分。市面上爽膚水的種類很多，不同成分制成的爽膚水其功效不一樣。本發(fā)明添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水較其他爽膚水抗皺保濕效果更好，綠色天然無危害。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是為了彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種抗皺保濕效果更好、性質(zhì)更溫和的保濕爽膚水及其制備方法。
本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水，其配方按重量份包括如下組分：
玫瑰純露：90-100，橄欖液：7-9，薰衣草精油：3-5，泛醇：2-4，低溫超氧化物歧化酶：3-5，防腐劑：1-2。
進一步地，所述的一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水，包括下述重量份的原料，玫瑰純露：95，橄欖液：8，薰衣草精油：4，泛醇：3，低溫超氧化物歧化酶：4，防腐劑：1.5。
上述的一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水，所述低溫超氧化物歧化酶的制備方法為：
(1)粗酶液的制備：無菌操作，將活化好的海黏假交替單胞菌接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，于20℃，160r/min發(fā)酵48h，發(fā)酵菌液于4℃，6000r/min離心30min，得到濕菌體，4℃，6000r/min離心30min，濕菌體用磷酸緩沖液溶解。于480w超聲波冰浴下破碎30min(破碎5s，間隔5s)，破碎后，4℃，12000r/min離心15min，上清即為粗酶液，上述液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方百分比為：葡萄糖2.0，酵母膏0.5，陳海水配制，ph自然；
(2)硫酸銨沉淀：制備6份25ml粗酶液，分別向其中加入固體冷硫酸銨，使其飽和溶液濃度分別20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％，4℃鹽析16h，ph7.8磷酸緩沖液溶解沉淀蛋白，確定低溫超氧化物歧化酶活性最高硫酸銨鹽析條件；
(3)超濾濃縮：將鹽析完成樣品轉(zhuǎn)入經(jīng)過預處理的(截留分子量10kda)超濾管，4℃，6000r/min，超濾30min，去除so42-和部分小分子蛋白，移液槍小心取出濃縮液，4℃，保藏備用。部分溶于磷酸緩沖液，測定低溫超氧化物歧化酶酶活力，計算蛋白回收率；
(4)sephadexg-100柱層析：用ph7.8磷酸緩沖液平衡sephadexg-100凝膠柱，待基線平衡后，取2ml超濾后酶液加入ph7.8磷酸緩沖液平衡過的sephadexg-100凝膠柱(ф1.6cm×60cm)，調(diào)節(jié)設置自動收集器，每管收集2ml左右，根據(jù)顯示器上的洗脫峰，確定含低溫超氧化物歧化酶各管，收集并測定其酶活力，合并含酶活力各管，4℃，保藏備用；
(5)噴霧干燥：噴霧干燥的參數(shù)設置為進口溫度110℃、出口溫度為60℃、壓力位2kgf/cm2、液體流速為5ml/min，噴霧干燥中的保護劑中海藻糖、蔗糖、海藻酸鈉的用量為2％-5％，可溶性淀粉的用量為6％-8％，保護劑的總用量控制在10％以內(nèi)，即得到低溫超氧化物歧化酶。
上述的一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水，所述防腐劑為尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、咪唑烷基脲的一種或幾種。
所述低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水，其制備方法包括以下步驟：
(1)在一個干凈的容器中稱量薰衣草精油，加入橄欖液，充分攪拌均勻；
(2)在上述溶液中加入玫瑰純露、泛醇、低溫超氧化物歧化酶、防腐劑，再輕輕攪拌均勻；
(3)上述溶液在超凈臺經(jīng)過濾除菌后，無菌分裝，檢驗合格后包裝入庫。
進一步地，步驟(3)中所述過濾除菌為使用濾菌器進行過濾除菌。常用過濾器有薄膜濾菌器、陶瓷濾菌器、石棉濾菌器等；過濾除菌使用物理阻留的方法將液體或空氣的細菌除去，以達到無菌目的。
超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，ecl.15.1.1，sod)是一種源于生命體的活性物質(zhì)，能夠清除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基。本發(fā)明所使用的低溫超氧化物歧化酶為微生物中所提取，經(jīng)發(fā)酵獲得低溫超氧化物歧化酶粗酶液。sod只有在具有生物活性狀態(tài)下，才具有酶的功能。即“一清、五抗、一提高”，一清：即清除過量的超氧陰離子自由基；五抗即：抗氧化、抗輻射、抗衰老、抗疲勞、抗炎；一提高：即提高機體免疫力。
玫瑰含有豐富的維他命成份及天然植物精華供給肌膚所必需的酸素，延緩皮膚老化，從而使皮膚變的更加潔凈、滑嫩；玫瑰具有溫和清潔肌膚，有效清除面部多余的油脂及污物，消炎，鎮(zhèn)靜肌膚的作用。
薰衣草具有極強殺菌消炎功效，迅速進入毛囊清除痘痘細菌，消滅表皮青春痘、粉刺、痤瘡等，修復受損細胞，促進細胞再生；舒緩修護過敏性膚質(zhì)，緩解因壓力、精神緊張和情緒低落引起的皮膚天然抵抗能力減弱，恢復皮膚自我修護機能，強化肌膚對外界的抵抗力。肌膚過干過油，都是由于表層水油不平衡所引起，薰衣草深層調(diào)節(jié)皮膚ph值，控制表皮肌膚油脂分泌，恢復肌膚水油平衡的最佳狀態(tài)。
泛醇(99％)是維生素b5的前體，故又稱維生素原b5，它含有不少于99％含量的泛醇，它是一種無色至微黃色透明粘稠的液體，具輕微的特殊氣味。廣泛用于醫(yī)藥、食品、化妝品及液體制劑中。泛醇進入人體內(nèi)能轉(zhuǎn)化為泛酸，進而合成輔酶a，促進人體蛋白質(zhì)、脂肪、糖類的代謝，保護皮膚和粘膜，改善毛發(fā)光澤，防止疾病的發(fā)生。泛醇可防治小皺紋、炎癥、日曬、糜爛，防止脫發(fā)，促進生發(fā)，保持頭發(fā)濕潤，減少頭發(fā)分叉，防止干脆及斷裂，對頭發(fā)起保護、修復、護理作用。
有益效果：本發(fā)明所述的保濕爽膚水，性質(zhì)溫和，能長時間維持肌膚的水潤感，并且抗皺效果更好；而且能減輕敏感肌膚的瘙癢癥狀，尤其適合敏感肌人群在悶熱的夏季使用，給肌膚帶來涼爽舒適的感覺。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明：
實施例1：
一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水，其配方按重量份包括如下組分：玫瑰純露90份，橄欖液7份，薰衣草精油5份，泛醇2份，低溫超氧化物歧化酶5份，防腐劑1份。
在一個干凈的容器中稱量薰衣草精油，加入橄欖液，充分攪拌均勻，加入玫瑰純露、泛醇、低溫超氧化物歧化酶、防腐劑，再輕輕攪拌均勻，上述溶液在超凈臺經(jīng)過濾濾膜除菌后，無菌分裝，檢驗合格后包裝入庫。
所述低溫超氧化物歧化酶的制備方法為：
(1)粗酶液的制備：無菌操作，將活化好的海黏假交替單胞菌接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，于20℃，160r/min發(fā)酵48h，發(fā)酵菌液于4℃，6000r/min離心30min，得到濕菌體，4℃，6000r/min離心30min，濕菌體用磷酸緩沖液溶解。于480w超聲波冰浴下破碎30min(破碎5s，間隔5s)，破碎后，4℃，12000r/min離心15min，上清即為粗酶液，上述液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方百分比為：葡萄糖2.0，酵母膏0.5，陳海水配制，ph自然；
(2)硫酸銨沉淀：制備6份25ml粗酶液，分別向其中加入固體冷硫酸銨，使其飽和溶液濃度分別20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％，4℃鹽析16h，ph7.8磷酸緩沖液溶解沉淀蛋白，確定低溫超氧化物歧化酶活性最高硫酸銨鹽析條件；
(3)超濾濃縮：將鹽析完成樣品轉(zhuǎn)入經(jīng)過預處理的(截留分子量10kda)超濾管，4℃，6000r/min，超濾30min，去除so42-和部分小分子蛋白，移液槍小心取出濃縮液，4℃，保藏備用。部分溶于磷酸緩沖液，測定低溫超氧化物歧化酶酶活力，計算蛋白回收率；
(4)sephadexg-100柱層析：用ph7.8磷酸緩沖液平衡sephadexg-100凝膠柱，待基線平衡后，取2ml超濾后酶液加入ph7.8磷酸緩沖液平衡過的sephadexg-100凝膠柱(ф1.6cm×60cm)，調(diào)節(jié)設置自動收集器，每管收集2ml左右，根據(jù)顯示器上的洗脫峰，確定含低溫超氧化物歧化酶酶各管，收集并測定其酶活力，合并含酶活力各管，4℃，保藏備用；
(5)噴霧干燥：噴霧干燥的參數(shù)設置為進口溫度110℃、出口溫度為60℃、壓力位2kgf/cm2、液體流速為5ml/min，噴霧干燥中的保護劑中海藻糖、蔗糖、海藻酸鈉的用量為2％-5％，可溶性淀粉的用量為6％-8％，保護劑的總用量控制在10％以內(nèi)，即得到低溫超氧化物歧化酶。
所述防腐劑為尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、咪唑烷基脲的一種或幾種。
實施例2：
一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水，其配方按重量份包括如下組分：玫瑰純露95份，橄欖液8份，薰衣草精油4份，泛醇3份，低溫超氧化物歧化酶4份，防腐劑1.5份。
在一個干凈的容器中稱量薰衣草精油，加入橄欖液，充分攪拌均勻，加入玫瑰純露、泛醇、低溫超氧化物歧化酶、防腐劑，再輕輕攪拌均勻，上述溶液在超凈臺經(jīng)過濾濾膜除菌后，無菌分裝，檢驗合格后包裝入庫。
所述低溫超氧化物歧化酶的制備方法同實施例1。
所述防腐劑為尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、咪唑烷基脲的一種或幾種。
實施例3：
一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水，其配方按重量份包括如下組分：玫瑰純露100份，橄欖液9份，薰衣草精油3份，泛醇4份，低溫超氧化物歧化酶3份，防腐劑2份。
在一個干凈的容器中稱量薰衣草精油，加入橄欖液，充分攪拌均勻，加入玫瑰純露、泛醇、低溫超氧化物歧化酶、防腐劑，再輕輕攪拌均勻，上述溶液在超凈臺經(jīng)過濾濾膜除菌后，無菌分裝，檢驗合格后包裝入庫。
所述低溫超氧化物歧化酶的制備方法同實施例1。
所述防腐劑為尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、咪唑烷基脲的一種或幾種。
試驗例1本發(fā)明的一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水的曬后修復作用
實驗材料：本發(fā)明的一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水
實驗方法：面部外用
劑量設置：0.5ml/天
試驗群體：22歲-40歲女性
實驗結(jié)果：夏季太陽下暴曬后，面部皮膚出現(xiàn)紅色曬斑。噴用添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水1-2次后紅斑即可消失。
試驗例2本發(fā)明的一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水的嫩膚作用
實驗材料：本發(fā)明的一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水
實驗方法：面部外用
劑量設置：1ml/天
試驗群體：23歲-50歲女性居多
實驗結(jié)果：使用兩周，皮膚變得水嫩、彈性增加
試驗例3本發(fā)明的一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水的抗粉刺作用
實驗材料：本發(fā)明的一種添加低溫超氧化物歧化酶的保濕爽膚水
實驗方法：面部外用
劑量設置：0.2ml/天
試驗群體：22歲-40歲女性居多
實驗結(jié)果：使用一周，粉刺減輕或脫落。
以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實施方式對本發(fā)明所作的進一步詳細說明，不能認定本發(fā)明的具體實施只局限于這些說明。對于本發(fā)明所屬技術(shù)領域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應當視為屬于本發(fā)明的保護范圍。