本發明屬于藥品或保健品領域，具體涉及nadph在制備抗焦慮藥物中的應用。

背景技術：

焦慮癥是一種以急性焦慮反復發作為特征的神經官能癥，包括廣泛性焦慮及發作性驚恐狀態等6種臨床表現形式，常伴有頭暈、胸悶、心悸、呼吸困難、口干、尿頻、尿急、出汗、震顫和運動性不安以及睡眠障礙等，并伴有植物神經功能紊亂。焦慮癥不僅直接影響人們的生活質量和身心健康,而且還可引起其他性質的疾病，如恐懼癥、疑病癥、神經衰弱等精神性疾病。隨著現代社會的發展，人們的生活節奏普遍加快，人們將面臨來自于社會、生活和工作等方面的壓力，因此患焦慮癥的人數呈增多趨勢。無論是焦慮癥或焦慮狀態，臨床上多用抗焦慮藥物治療，以苯并二氮卓類、丁螺環酮及其類似物為主。

還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(triphosphopyridinenucleotide，nadph)由葡萄糖經過磷酸戊糖途徑(ppp)代謝產生，作為細胞內最為重要的電子供體和生物合成的還原劑，可為還原性生物合成提供氫離子。nadph是谷胱甘肽(gsh)的還原酶的輔酶，可使氧化型谷胱甘肽(gssg)生成還原型gsh，維持還原型的gsh的正常含量。gsh是細胞內重要的抗氧化劑，可保護一些含巰基的蛋白質、脂肪和蛋白酶類免受氧化劑的破壞，特別在維持紅細胞膜的完整性方面起著重要作用。nadph除了參與膽固醇、脂肪酸、單加氧酶系、類固醇激素等的生物合成，還參與體內羥化反應和藥物、毒物及某些激素的生物轉化。例如，nadph可利用解毒細胞的電子供體，通過體內代謝減少生物體氧化型化合物，維持其氧化還原的平衡，在氧化防御系統發揮重要作用。nadph也可以借助于異檸檬酸穿梭作用進入呼吸鏈產生atp：由于線粒體內膜對物質的通透性很低，線粒體外產生的nadph不能直接進入呼吸鏈被氧化。nadph上的h可以在異檸檬酸脫氫酶的作用下被交給nad+，然后由nad+進入呼吸鏈產生能量。細胞能量代謝的維持和減少ros(活性氧簇)對細胞生存，特別對缺血缺氧的組織至關重要，普遍認為能量代謝障礙和氧化應激是心腦缺血疾病的重要機制，研究表明增加細胞能量代謝能力，降低細胞ros產生可減輕缺血缺氧引起的細胞損傷。

目前，尚無nadph用于焦慮癥治療的報道。

技術實現要素：

為此，本發明提供nadph在制備抗焦慮藥物中的應用。

為解決上述技術問題，本發明是通過以下技術方案來實現的：

本發明提供nadph在制備抗焦慮藥物中的應用。

本發明提供nadph在預防或治療焦慮中的應用。

優選地，本發明上述應用，所述焦慮為廣泛性焦慮障礙。

進一步優選地，本發明上述應用，所述藥物包括藥學上有效量的nadph和藥學上可接受的載體。

進一步優選地，本發明上述應用，所述載體選自常用的藥用輔料、或者生理鹽水、或者蒸餾水。

進一步優選地，本發明上述應用，所述藥物為nadph按照常規工藝，加入常規輔料制成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑。

所述藥學上可接受的輔料為：填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質等。填充劑包括：淀粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括：淀粉、預膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯羧甲基纖維素納等；潤滑劑包括：硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括：糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括：甜味劑及各種香精；防腐劑包括：尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質包括：peg6000、peg4000、蟲蠟等。

進一步優選地，本發明上述應用，所述藥物的給藥方式選自口服給藥、注射給藥、舌下給藥、直腸給藥、經皮給藥、噴霧吸入中的至少一種。

本發明的技術方案具有如下優點：

本發明通過研究發現，nadph可以顯著提高探索興趣，顯著降低大鼠的焦慮水平，逆轉對慢性應激造成的焦慮樣表現。這表明，nadph具有抗焦慮的作用，可以作為潛在的預防或治療廣泛性焦慮障礙的藥物。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明具體實施方式或現有技術中的技術方案，下面將對具體實施方式或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹：

圖1為本發明實驗例1中曠場實驗的實驗結果，其中：與空白對照組相比，^*p＜0.05，p＜0.01；與模型對照組相比，^#p＜0.05，^##p＜0.01；

圖2為本發明實驗例1中新奇抑制攝食實驗的實驗結果，其中：與空白對照組相比，^*p＜0.05；與模型對照組相比，^#p＜0.05。

具體實施方式

實施例1nadph膠囊劑的制備

本實施例nadph膠囊劑的組成為：nadph20g，助懸劑微晶纖維素60g，防腐劑叔丁基-4-羥基苯甲醚0.04g，潤滑劑硬脂酸鎂2g，填充劑乳糖加至200g。

其制備方法包括以下步驟：分別稱取上述處方量的nadph和各藥用輔料，混合均勻，60目篩過篩3次，裝入膠囊殼，即得。

實驗例1nadph對應激焦慮模型大鼠的抗焦慮作用研究

1、實驗目的

研究nadph的抗焦慮作用。

2、實驗方法

2.1實驗試劑與動物

nadph，購自碧云天，純度≥97％；nadph用0.9％的生理鹽水溶解，置于4℃冰箱避光保存，現配現用；

健康雄性3月齡spraguedawley(sd)大鼠40只，體重250±15g，由蘇州大學實驗動物中心提供。

動物首先在光照時間8:00am-8:00pm，室溫22±2.5℃，相對濕度45％-55％的環境下適應性飼養1周，自由進食進水，為減少非實驗因素對結果的影響，每日撫摸動物數次，以使其適應實驗人員的操作。

2.2實驗分組和給藥方法

2.2.1實驗分組

所有動物進行為期一周的糖水實驗篩選，剔除對糖水偏愛測試極不敏感的大鼠，采用曠場試驗測試5min內的大鼠的活動情況，將過于興奮或安靜的的大鼠篩除，再將篩選過后的大鼠按體重隨機分為4組，分別為空白對照組、模型對照組、實驗組1組、實驗組2組，每組10只。

空白對照組每3-4只為一籠喂養，其他3組動物每只單籠喂養，所有的給藥和行為學測試時間在上午8點至12點間進行。

2.2.2給藥方法

實驗組1組和實驗組2組分別在每天上午9點給予nadph4mg/kg、8mg/kg腹腔注射給藥，腹腔注射體積為0.01ml/g體重，連續給藥8周。

空白對照組和模型對照組均給予等體積的生理鹽水。

2.3建模方法

慢性不可預料應激模型是目前最能結合表面效度、結構效度、預測效度復制做出的焦慮癥模型，是觀察焦慮發病機理、評價抗焦慮化學試劑的有效性的常用方法。

除空白對照組外，其他各組均建模。

參照文獻，空白對照組動物除特定行為學實驗需要與模型組動物飼養在同一個房間之外，其余時間均飼養在單獨的房間里，由實驗人員每隔兩天撫摸五分鐘，一方面減少焦慮模型組動物對對照動物潛在的干擾，一方面減少由實驗人員操作對動物產生的影響；模型對照組動物每天遭受一種模擬人類社會環境中會出現的應激，刺激方式包括束縛、噪音、強光、頻閃燈、食物剝奪、水分剝奪、傾斜鼠籠、足底電擊、高溫刺激、冷水刺激、顛倒日夜周期、夾尾等，這些應激是慢性且不可預料的，且同種刺激兩天之內不重復出現。

各種刺激的具體操作如下：

束縛：大鼠被強制塞進一個與之體積差不多大的白色pvc圓柱體瓶子中(19cm高×9cm底面直徑)束縛1h，然后被放回原來的籠子里；

白噪音：使用刺激分貝為110db的噪聲錄音刺激2h，揚聲器距離動物30cm；

頻閃燈：使用頻閃燈照射3h(每秒1次)；

食物剝奪：撤去大鼠飼料，禁食時間為前一天上午8點至次日上午8點；

水分剝奪：23小時分水剝奪后，空瓶放置1h，共計24h；

傾斜鼠籠：鼠籠傾斜45°，持續3h；

強光照射：冷光燈持續照射2h；

足底電擊：將大鼠限制于特制的箱子中，給箱底通電，電壓為25v，每隔1min刺激1次，每次持續刺激15s，共30次；

高溫擁擠：將大鼠(7-9只1籠，除去水瓶)放于40°培養箱中，持續1h；

冷水刺激：將大鼠放于裝有4°冷水的水箱中游泳10min，水深以大鼠既可以腳觸地又可以游起來為宜；

顛倒日夜周期：前一天上午8點至當日上午8點白天將大鼠置于黑暗無光的環境中，在當日上午8點至次日上午8點將大鼠置于光照充足的環境中；

夾尾：用帶彈簧的塑料夾子夾于動物尾巴末端1cm處持續夾尾1min(注意力度不能過大以夾破鼠尾)；

震蕩擁擠環境：將5只大鼠放置在一個小盒子中在搖床上以240hz的速度水平搖晃1小時。

2.4行為學實驗

2.4.1曠場實驗

曠場實驗(openfieldtest，oft)是用來觀察實驗動物神經精神變化、評價動物進入開闊環境后的各種活動、探索行為與緊張度的一種方法。

嚙齒類實驗動物的焦慮情緒主要基于其探索本性與外界環境的矛盾沖突，可分為狀態焦慮和特質焦慮2類，其中oft是評價嚙齒類實驗動狀態焦慮行為的經典方法。通常，抗焦慮藥物可明顯增加oft中央區(ctime％，ccross％)探索活性比例。

敞箱裝置為無蓋的立方體(100cm×100cm×42cm)，由不透明材料制成，底面的正方形被等分成4×4個等邊方格，底面中央區域的正上方固定有攝像機，曠場實驗視頻分析系統與之相連接，可自動記錄大鼠的活動軌跡和位置。實驗在安靜的環境下進行，由固定的實驗員將每只大鼠放入箱內底面中心的方格內，與此同時由另一名實驗員操作軟件進行攝像和計時，觀察大鼠5分鐘內在中央格停留的時間(thetimeinthecentralsquare)、穿越的格子數(thenumberofcrossingsquares，四爪均進入的方格方可計數，為水平運動得分)、兩前爪騰空或攀附墻壁使后肢直立的次數(thetimesofrearing，為垂直運動得分)、理毛次數(thetimesofgrooming)和糞便粒數。

實驗后，實驗員將大鼠取出，清理干凈箱底和四壁，并用75％的酒精擦拭以除去前一只大鼠的氣味，更換大鼠，繼續實驗。

2.4.2新奇抑制攝食實驗

新奇抑制攝食實驗(novelty-suppressedfeedingtest，nsft)是觀察動物禁食后在饑餓狀態下想要攝食的欲望和進入中央明亮區域的恐懼相矛盾沖突的行為，是觀察給予抗焦慮藥物后對動物的焦慮樣行為和神經發生相關的行為影響的有效方法，以攝食潛伏期作為判定藥物的抗焦慮的指標。該模型目前被廣泛應用于抗焦慮藥物的長期效應評價。

實驗方法參照文獻，具體如下所示：大鼠禁食24h(不禁水)之后，由固定的實驗員將大鼠放入木制的頂部開放的曠場實驗箱(敞箱大小為：76.5cm×76.5cm×40cm)，底部中央擺放一小部分食物，敞箱正上方架有一臺攝像機，放入動物的同時開始攝像，記錄大鼠8min內開始攝食的潛伏期(攝食的判定標準是動物開始咀嚼食物，而不是僅僅嗅聞或擺弄食物)，若8min仍未攝食的大鼠，攝食潛伏期記為8min。

實驗測試環境為不同于飼養環境的全新環境，測試環境的光線強度大于飼養環境，測試時應盡量保持安靜，每次放鼠的位和方向保持一致，每做完一只鼠清理糞便并以75％的酒精擦拭以減少動物留下的氣味，實驗員將動物放回原來的鼠籠子里，大鼠在籠子里1小時的食物攝入量也做為一個參考。

2.5數據統計處理

所有的結果均以平均值±標準差表示，各組件的數據比較用one-wayanova，p＜0.05被認為差異具有統計學意義。

3、實驗結果

3.1曠場實驗的實驗結果

曠場實驗的實驗結果如圖1所示。

由圖1可知，(1)與空白對照組相比，模型對照組大鼠的水平得分、垂直得分、穿越中央格次數、中央格停留時間顯著減少(p＜0.05、p＜0.05、p＜0.05、p＜0.05)，糞便粒數顯著增多(p＜0.05)；

(2)與模型對照組相比，實驗組2組大鼠的水平得分(p＜0.05)和垂直得分(p＜0.01)顯著增加，穿越中央格的次數(p＜0.01)顯著增加，在中央各停留的時間(p＜0.05)顯著延長，這表明實驗組2組大鼠的探索興趣顯著提高；

(3)與空白對照組相比，實驗組1組和實驗組2組大鼠的糞便粒數明顯減少(p＜0.05、p＜0.05)，這表明實驗組1組和實驗組2組大鼠的焦慮水平顯著降低。

3.2新奇抑制攝食實驗的實驗結果

新奇抑制攝食實驗的實驗結果如圖2所示。

由圖2可知，(1)在陌生環境中，與空白對照組相比，模型對照組大鼠的攝食潛伏期顯著延長(p＜0.05)，顯示出應激組大鼠焦慮樣表現，對陌生環境表現為矛盾沖突樣恐懼，探究行為明顯減弱；

(2)與模型對照組相比，實驗組2組大鼠的攝食潛伏期顯著縮短(p＜0.05)，這表明實驗組2組大鼠的慢性應激造成的焦慮樣表現有所逆轉。

4、實驗結論

nadph具有抗焦慮的作用，可以作為潛在的預防或治療廣泛性焦慮障礙的藥物。

顯然，上述實施例僅僅是為清楚地說明所作的舉例，而并非對實施方式的限定。對于所屬領域的普通技術人員來說，在上述說明的基礎上還可以做出其它不同形式的變化或變動。這里無需也無法對所有的實施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見的變化或變動仍處于本發明創造的保護范圍之中。